HPLC-vejledning parabener

More Magazines

Recommendations

Info

Kosmetikbekendtgørelsen og af EU i ”Cosmetics Directive” 76/768/EEC 3 . Indholdet af methyl-, ethyl-, propyl- og butylparabenerne må ikke overstige 0,4 masseprocent for den enkelte paraben og 0,8 masseprocent for en blanding af parabener 4 . Masserne af de enkelte parabener som omregnes til ækvivalent masseprocent af 4-hydroxybenzoesyre, da grænseværdierne er angive som 4-hydroxybenzoesyre. ANALYSEPRINCIP Parabenerne ekstraheres fra det kosmetiske produkt med en sur ethanol/vand-opløsning. Blandingen opvarmes forsigtigt for at smelte fedtfasen og sikre, at alle parabenerne ekstraheres. Ekstrakterne og en række standardopløsninger af parabener analyseres herefter på HPLC-systemet. De enkelte parabener identificeres ved hjælp af retentionstiden i de fremkomne kromatogrammer og ekstrakternes indhold af parabener beregnes afslutningsvis ved behandling af datamaterialet. APPARATUR OG KEMIKALIER HPLC HPLC system, bestående af eluentflaske, pumpe, injektionsventil, evt. forkolonne, kolonne, UV-detektor, PC med program samt 1 ml plastinjektionssprøjte med HPLC kanyle. Kørselsparametre Eluent: 9:1 methanol (hplc grade) : destilleret vand (v/v %) Pumpe: flow 1,0 mL/min Loop: 20 L Kolonne: C-18 kolonne Detektor: UV bølgelængde 254 nm Gradient: 0 min –> 1 min: 60 % B 1 min –> 6 min: 60% B –> 100 % B 6 min –> 8 min: 100 % B 8 min –> 9,5 min: 100 % B –> 60 % B Alle prøver analyseres med denne indstilling. Med denne gradient vil parabenerne eluere indenfor ca 8 minutter. Øvrigt apparatur Vandbad (60 C) 3 http://ec.europa.eu/enterprise/cosmetics/cosing/ 4 Grænserne kan finde både i Kosmetikbekendtgørelsen og i CosIng-databasen
100 mL reagensglas med skruelåg Fuldpipetter, 1 mL og 40 mL med sugebold 50 mL målekolbe 5 mL plastiksprøjte Nylonfiltre, 0,45 μm Pimpsten Kemikalier 9:1 blanding af ethanol/vand, (9 dele 99,9 % ethanol og 1 del vand) 2 M svovlsyre Der udleveres følgende rene standarder som alle er opløst i en blanding af methanol og vand i forholdet 9:1. De præcise koncentrationer af parabenerne vil stå på flaskerne. methyl-4-hydroxybenzoat (MHB) ca. 25 ppm (= mg/L) ethyl-4-hydroxybenzoat (EHB) ca. 25 ppm propyl-4-hydroxybenzoat (PHB) ca. 25 ppm butyl-4-hydroxybenzoat (BHB) ca. 25 ppm Desuden udleveres opløsninger til fremstilling af en standardkurve. Der er fire forskellige opløsninger. Hver opløsning indeholder alle fire parabener, og hver opløsning indeholder samme koncentration af hver af parabenerne. Opløsning 1 indeholder methyl-, ethyl-, propyl- og butylparaben - hver med en koncentration på 10 ppm. Opløsning 2: 20 ppm af hver paraben Opløsning 3: 30 ppm af hver paraben Opløsning 4: 50 ppm af hver paraben PRØVEFORBEREDELSE 1. Afvej (med 3 decimaler) ca 1 g af det kosmetiske produkt i et 100 mL reagensglas (med skruelåg). 2. Afpipetter 1,0 mL 2 M svovlsyre og overfør dette til reagensglasset. 3. Afpipetter 40,0 mL af ethanol/vand-blandingen og overfør også dette til reagensglasset. 4. Tilsæt ca 1 g pimpsten. 5. Luk reagensglasset, og ryst kraftigt i mindst 1 minut, indtil der er en homogen blanding. 6. Sæt reagensglasset i et 60 C vandbad, hvorved parabenerne ekstraheres over i ethanol/vand-fasen. 7. Afkøl straks reagensglasset under den kolde vandhane, og sæt det i køleskabet i 1 time.
Page 1: ANALYSE AF PARABENER I KOSMETISKE P
Page 5: 7. Antag at stofmængderne beregnet

HPLC-vejledning parabener

Transform your PDFs into Flipbooks and boost your revenue!

Delete template?

Save as template ?