Untersuchungen zu familiären und rassespezifischen ...

Familiärer hypophysärer Hyperadrenokrtizismus beim Rauhaardackel 54
sich auch einzelne degenerierte Zellen im Kortexbereich. Zusätzlich fand sich in
Großhirn, Kleinhirn und Medulla oblongata eine mittelgradige Vakuolisierung des
Neuropils und eine Mikrogliose und Alzheimer Typ 2-Zellen.
Expressionsanalyse
Bei der ∆∆CT-Auswertung der Expressionshöhe des caninen MDR1 zeigte sich beim
untersuchten Hund B eine deutlich höhere Expression als bei den Referenztieren.
Aus den Werten der beiden klinisch unauffälligen Elos wurde der Durchschnittswert
der zum caninen Haushaltsgen GAPDH relativen Expression des MDR1 ermittelt und
als Referenzwert auf 1,0 gesetzt. Verglichen mit diesem relativen Referenzwert
zeigte Hund B eine um den Faktor 2,9 erhöhte relative Expression des MDR1-Gens.
Sequenzanalyse
Bei der Sequenzierung der cDNA konnten, mit Ausnahme der Randbereiche des 5’-
bzw. 3’ UTR und zweier kleiner Lücken zwischen PCR-Produkten, alle 28 Exons von
MDR1 dargestellt werden. Diese hier nicht sequenzierbaren Lücken in der insgesamt
4317 bp langen Sequenz erstrecken sich von Base 1 bis 48, 1088 bis 1215, 3190 bis
3255 und 4257 bis 4317. Im Vergleich zur experimentellen mRNA-Referenzsequenz
des Collies wurden zahlreiche Änderungen in der Sequenz des MDR1-Gens von
Hund B gefunden (Tab. 3). Allerdings zeigte die cDNA des Rauhaardackels bis auf
einen Einzelbasenaustausch im untranslatierten Bereich vollständige
Übereinstimmung mit der DNA-Referenzsequenz des Boxers. Es gibt also keine
Hinweise auf Mutationen in der cDNA des MDR1-Gens dieses Rauhaardackels.
Auch der vom Hyperadrenokortizismus betroffene Rauhaardackel wies nicht die 4
bp-Deletion im MDR1-Gen auf, wie sie bei Hunden mit dem MDR1-Defekt der Rasse
Collie und verwandten Rassen gefunden wird. Der untersuchte Rauhaardackel und
die beiden nicht vom Hyperadrenokortizismus betroffenen Elos stimmten in ihren
DNA- und Aminosäuresequenzen für MDR1 mit der Referenzsequenz des Boxers
überein.
Analyse der Pedigrees