Antibiotika-haltige Knochenzemente: In vitro Untersuchungen der ...

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Antibiotika-haltige Knochenzemente: In vitro Untersuchungen der ...

Inhaltsverzeichnis 5

3.3.1 Material ............................................................................................................ 29

3.3.2 Keime ............................................................................................................... 30

3.3.3 Methode............................................................................................................ 30

3.4 Wachstumskinetik im Grasso-Modell...................................................................... 31

3.4.1 Versuchsansatz................................................................................................. 31

3.4.2 Keim................................................................................................................. 31

3.4.3 Probenentnahme............................................................................................... 31

3.4.4 Reihenverdünnung und Ausplattierung............................................................ 31

3.4.5 Auszählung....................................................................................................... 32

3.5 Infektionsversuche (Teil 1) ...................................................................................... 32

3.5.1 Material ............................................................................................................ 32

3.5.2 Zemente............................................................................................................ 32

3.5.3 Keim................................................................................................................. 33

3.5.4 Versuchsansatz................................................................................................. 33

3.5.5 Infektionsdosis ................................................................................................. 33

3.5.6 Probenentnahme............................................................................................... 33

3.5.6.1 Testzylinder.................................................................................................. 33

3.5.6.2 Eluat ............................................................................................................. 34

3.5.7 Reihenverdünnungstest und Ausplattierung..................................................... 34

3.5.8 Auszählung....................................................................................................... 34

3.6 Infektionsversuche (Teil 2) ...................................................................................... 35

3.6.1 Material ............................................................................................................ 35

3.6.2 Zemente............................................................................................................ 35

3.6.3 Keim................................................................................................................. 35

3.6.4 Versuchsansatz................................................................................................. 35

3.6.5 Infektionsdosis und -zeitschema ...................................................................... 36

3.6.6 Probenentnahme............................................................................................... 37

3.6.6.1 Testzylinder.................................................................................................. 37

3.6.6.2 Eluat ............................................................................................................. 37

3.6.7 Reihenverdünnungstest und Ausplattierung..................................................... 37

3.6.8 Auszählung....................................................................................................... 38

3.7 Fluoreszenz-Mikroskopie (live/dead-Farbstoff) ...................................................... 38

3.7.1 Zemente............................................................................................................ 38

3.7.2 Keim................................................................................................................. 38

3.7.3 Versuchsansatz................................................................................................. 38

3.7.4 Infektionsdosis ................................................................................................. 39

3.7.5 Ansatz des Farbstoffs ....................................................................................... 39

3.7.6 Methode............................................................................................................ 39

3.8 Rasterelektronenmikroskopie des Biofilms auf den Testzylindern.......................... 39

3.8.1 Zemente............................................................................................................ 39

3.8.2 Material ............................................................................................................ 40

3.8.3 Herstellung der Ausgangslösungen.................................................................. 40

3.8.4 Herstellung der Fixierlösungen ........................................................................ 40

3.8.5 Methode............................................................................................................ 41

4 Ergebnisse ....................................................................................................................... 43

4.1 Kontinuierliche Elution............................................................................................ 43

4.1.1 Refobacin Palacos R......................................................................................... 44

4.1.2 VersaBond AB ................................................................................................. 45

4.1.3 VersaBond mit 2g Gentamicin......................................................................... 46

4.1.4 VersaBond mit 1g Clindamycin....................................................................... 47

4.1.5 VersaBond mit 2g Clindamycin....................................................................... 48

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