View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

Dabei wurden schon unterschiedliche Möglichkeiten eingesetzt. Neben komplettem murinem
Knochenmarkstroma, das in den oben genannten Studien verwendet wurde, sind zahlreiche
Zelltypen und Zelllinien hinsichtlich ihrer Fähigkeit zur Unterstützung der HSC-Expansion
untersucht worden. Zelllinien weisen hierbei den Vorteil auf, dass aufgrund der einfachen
und schnellen Vermehrung der Zellen in kurzer Zeit große Zellzahlen zur Verfügung stehen.
Außerdem bleiben die Eigenschaften der Zellen auch über lange Kulturzeiträume konstant,
die Ergebnisse sind damit reproduzierbar und unabhängig von Spendervariabilitäten.
Viele murine Zelllinien wurden in in vitro-Experimenten zur Kokultur mit HSC bereits
verwendet, darunter auch die in den im Rahmen der vorliegenden Arbeit durchgeführten
Versuchen verwendete Zelllinie Sl/Sl mod (Sutherland H. J. et al., 1993). Diese Zelllinie hat
hohes Potenzial zur Unterstützung der Expansion von HSC aus Nabelschnurblut (Kokerbeck
D., 2002). Die klinische Anwendung der so etablierten Kokultursysteme erscheint jedoch
schwierig. Da die als Feederzellen verwendeten Zelllinien muriner Herkunft sind, sind sie bei
der Transplantation in den Menschen als xenogen zu betrachten. Davon geht nicht nur eine
erhöhte Abstoßungsgefahr, sondern auch das Risiko der Übertragung von
Krankheitserregern wie endogener Retroviren aus (Dorling A., 2002). Selbst wenn nach einer
Kokultur dieser Zelllinien mit HSC anschließend die Feederzellen abgetrennt würden, oder
beide Zelltypen während der Kultur durch eine Membran getrennt waren, könnte die
Infektionsübertragung auf die humanen Zellen bereits stattgefunden haben. Daher ist die
Kokultur von HSC mit murinen Zelllinien zwar gut geeignet, um neue Reaktorsysteme zu
entwickeln und zu testen. Die klinische Anwendbarkeit ist jedoch kritisch zu sehen.
Auch humane Zelllinien wurden bereits für die Kokultur mit HSC konstruiert. So beschreiben
Cicuttini F. M. et al., 1992, die Etablierung von SV40-immortalisierten Zelllinien aus
Knochenmarkstroma, die unterschiedliche Zytokinexpressionsmuster und Unterstützung der
Expansion von CFC aus HSC aufwiesen. Trotz ihrer Immortalisierung zeigten die Zelllinien
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