Interaktion von Masernviren mit Dendritischen Zellen - OPUS ...

Ergebnisse 101
4.1.7 Experimente zur T-Zellchemotaxis
Nachdem in den vorangegangenen Experimenten Unterschiede in der
Chemokininduktion zwischen MV-infizierten DC-Kulturen und LPS-behandelten
DC-Kulturen festgestellt wurden, sollte nachfolgend untersucht werden, ob
Zellkulturüberstände unterschiedlich behandelter bzw. infizierter DC-Kulturen
unterschiedliche Wirkungen auf das chemotaktische Verhalten von T-Zellen
haben. Dazu wurden Zellkulturüberstände infizierter DC-Kulturen (WTF und ED)
sowie LPS-ausgereifter oder mit einer Mockpräparation behandelter DC-
Kulturen eingesetzt. Die Überstände wurden mit Zellkulturmedium verdünnt in
einen Napf einer 24-Napf-Zellkulturplatte vorgelegt. Die verwendeten, allogenen
T-Zellen wurden in Polycarbonatfilter gegeben und diese in die Näpfe der
Zellkulturplatten mit den verschiedenen Zellkulturüberständen gestellt. Nach
einer Inkubationszeit von drei Stunden wurde anschließend die Zahl der T-
Zellen im unteren Teil des Filtersystems mittels quantitativer Durchfluss-
zytometrie bestimmt. Abbildung 4—14 zeigt das Ergebnis eines solchen
Experiments.
Die Anzahl der migrierten T-Zellen lag in den Ansätzen, in denen
Zellkulturüberstände aus infizierten DC-Kulturen (WTF und ED) in den unteren
Teil des Filtersystems eingesetzt wurden, bei ca. 30 % (WTF 8 h p.i. 36 %, 24 h
p.i. 34 %; ED 8 h p.i. 30 %, 24 h p.i. 33 %). Dagegen wurden deutlich mehr T-
Zellen in den unteren Kompartimenten detektiert, in denen Zellkultur-
überstände aus LPS ausgereiften DC-Kulturen eingesetzt wurden. Im Ansatz
der für acht Stunden mit LPS behandelten DC-Kulturen wurden nach der
dreistündigen Inkubationszeit ungefähr 45 % der eingesetzten T-Zellen gezählt,
diese Zahl erhöhte sich auf etwa 70 % in dem Ansatz der Überstand aus DC-
Kulturen enthielt, die zuvor für 24 Stunden mit LPS ausgereift wurden. Die
gemessenen Zellzahlen in den Ansätzen der Mockkontrolle lagen bei 47 % (8h-
Behandlung mit einer Mockpräparation) und 37 % (24h-Behandlung mit einer
Mockpräparation). In der Mediumkontrolle wurden 25 Prozent der eingesetzten
T-Zellen detektiert. Zur Kontrolle der Infektion der eingesetzten DC wurde eine