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Untersuchung immortalisierter Endothelzellen auf charakteristische ...

Untersuchung immortalisierter Endothelzellen auf charakteristische ...

Diese Arbeit wurde

Diese Arbeit wurde angefertigt unter der Aufsicht von: Dr. Stefanie Sudhop Fakultät für Angewandte Naturwissenschaften und Mechatronik Hochschule München München, Deutschland Prof. Dr. rer. nat. Karlheinz Trebesius Fakultät für Angewandte Naturwissenschaften und Mechatronik Hochschule München München, Deutschland und Dr. Roman Zantl und Dr. Julia Riedl ibidi GmbH Martinsried, Deutschland 2

Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis Abstract 5 Abkürzungsverzeichnis 6 1 Einleitung 7 2 Material 9 2.1 Reagenzien . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 2.2 Geräte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 2.3 Software . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 2.4 Materialien . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 2.5 Antikörper . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 2.6 Hergestellte Lösungen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 3 Methoden 13 3.1 Allgemeine Zellkulturstandards . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 3.2 Kultivierung und Passagieren der primären HUVEC . . . . . . . . . . . . . . 13 3.3 Kultivierung und Passagieren der immortalisierten HUVEC . . . . . . . . . . 13 3.4 Zellen auftauen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 3.5 Chemotaxis-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 3.5.1 2D-Chemotaxis-Assay - Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 3.5.2 3D-Chemotaxis-Assay - Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 3.5.3 Aufnahme am Mikroskop . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 3.5.4 Programmunterstützte Verfolgung der Zellen und Berechnung der Kennzahlen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19 3.5.5 Statistische Auswertung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 3.6 Angiogenese-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 3.6.1 Einfüllen des Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 3.6.2 Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 3.6.3 Aufnahme am Mikroskop . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 3.6.4 Bildauswertung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24 3.6.5 Statistische Auswertung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 3.7 Flow-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 3.7.1 ibidi Pump System . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 3.7.2 Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 3.7.3 Anschluss der µ-Slides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 3.7.4 Software . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 3.7.5 Immunfluoreszenzfärbung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 3.7.6 Aufnahme am Mikroskop . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 3.7.7 Bildbearbeitung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 4 Ergebnisse 31 4.1 Chemotaxis-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31 4.1.1 Rohdaten: Forward Migration Index und Ergebnisse des Rayleigh-Tests 31 4.1.2 Vergleich: Forward Migration Index . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35 4.1.3 Rohdaten: Geschwindigkeiten . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36 4.1.4 Vergleich: Geschwindigkeit . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 4.2 Angiogenese-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39 3

Charakteristisches Profil.
Untersuchungen zur Modulation der prädiabetischen - Gießener ...
Untersuchungen zur Transkription von Wachstumsfaktoren und ...
Untersuchungen zur abiotischen Resistenz ... - FastWOOD
Untersuchung der Wächterlymphknoten - Knappschaftskrankenhaus ...
Schallschutztechnische Untersuchung zum Baugebiet ... - Kißlegg
Thermografische Untersuchungen - Jufo Hermannsburg
Magnetresonanztomographische Untersuchung - Gießener ...
Der Sadduzäismus; eine kritische Untersuchung zur ... - Index of
Untersuchungen zu Plastizität und Funktion des KSPV Core-Proteins
Paracelsus-Forschungen; eine historischkritische Untersuchung
Untersuchungen zur Formengeschichte religiöser Rede
Fischökologische Untersuchungen - ezb
Die systemische Untersuchung nach Empfehlung des Umweltbundesamtes ...
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Jona, eine Untersuchung zur vergleichen- den Religionsgeschichte
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Untersuchungen zur Entwicklung und Erprobung eines neuen ...
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Die sonographische Untersuchung und Vermessung des - Gießener ...
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