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Untersuchung immortalisierter Endothelzellen auf charakteristische ...

Untersuchung immortalisierter Endothelzellen auf charakteristische ...

Diese Arbeit wurde

Diese Arbeit wurde angefertigt unter der Aufsicht von: Dr. Stefanie Sudhop Fakultät für Angewandte Naturwissenschaften und Mechatronik Hochschule München München, Deutschland Prof. Dr. rer. nat. Karlheinz Trebesius Fakultät für Angewandte Naturwissenschaften und Mechatronik Hochschule München München, Deutschland und Dr. Roman Zantl und Dr. Julia Riedl ibidi GmbH Martinsried, Deutschland 2

Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis Abstract 5 Abkürzungsverzeichnis 6 1 Einleitung 7 2 Material 9 2.1 Reagenzien . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 2.2 Geräte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 2.3 Software . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 2.4 Materialien . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 2.5 Antikörper . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 2.6 Hergestellte Lösungen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 3 Methoden 13 3.1 Allgemeine Zellkulturstandards . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 3.2 Kultivierung und Passagieren der primären HUVEC . . . . . . . . . . . . . . 13 3.3 Kultivierung und Passagieren der immortalisierten HUVEC . . . . . . . . . . 13 3.4 Zellen auftauen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 3.5 Chemotaxis-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 3.5.1 2D-Chemotaxis-Assay - Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 3.5.2 3D-Chemotaxis-Assay - Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 3.5.3 Aufnahme am Mikroskop . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 3.5.4 Programmunterstützte Verfolgung der Zellen und Berechnung der Kennzahlen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19 3.5.5 Statistische Auswertung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 3.6 Angiogenese-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 3.6.1 Einfüllen des Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 3.6.2 Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 3.6.3 Aufnahme am Mikroskop . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 3.6.4 Bildauswertung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24 3.6.5 Statistische Auswertung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 3.7 Flow-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 3.7.1 ibidi Pump System . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 3.7.2 Zellaussaat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 3.7.3 Anschluss der µ-Slides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 3.7.4 Software . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 3.7.5 Immunfluoreszenzfärbung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 3.7.6 Aufnahme am Mikroskop . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 3.7.7 Bildbearbeitung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 4 Ergebnisse 31 4.1 Chemotaxis-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31 4.1.1 Rohdaten: Forward Migration Index und Ergebnisse des Rayleigh-Tests 31 4.1.2 Vergleich: Forward Migration Index . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35 4.1.3 Rohdaten: Geschwindigkeiten . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36 4.1.4 Vergleich: Geschwindigkeit . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 4.2 Angiogenese-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39 3

Charakteristisches Profil.
Untersuchungen zur abiotischen Resistenz ... - FastWOOD
Untersuchungen zur Modulation der prädiabetischen - Gießener ...
Vergleichende Untersuchungen über Translation und Transkription ...
Vergleichende morphologische Untersuchungen - Zur Giessener ...
Untersuchungen zur Transkription von Wachstumsfaktoren und ...
Untersuchungen zur zellulären Immunantwort sowie - Zur Giessener ...
Untersuchung der Wächterlymphknoten - Knappschaftskrankenhaus ...
Schallschutztechnische Untersuchung zum Baugebiet ... - Kißlegg
M. Zoth Untersuchung zur abgestuften Ausdünnungswirkung ... - DGG
Die Untersuchung - Schein
Thermografische Untersuchungen - Jufo Hermannsburg
Untersuchungen zu Plastizität und Funktion des KSPV Core-Proteins
Schalltechnische Untersuchung
Magnetresonanztomographische Untersuchung - Gießener ...
Der Sadduzäismus; eine kritische Untersuchung zur ... - Index of
Hypothesentestende Untersuchungen
LSV-Information Arbeitsmedizinische Untersuchungen
Untersuchungen zur Formengeschichte religiöser Rede
Paracelsus-Forschungen; eine historischkritische Untersuchung
Die Ergebnisse der neueren Untersuchungen über die Geographie ...
Jona, eine Untersuchung zur vergleichen- den Religionsgeschichte