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Untersuchung immortalisierter Endothelzellen auf charakteristische ...

Untersuchung immortalisierter Endothelzellen auf charakteristische ...

Inhaltsverzeichnis 4.3

Inhaltsverzeichnis 4.3 Flow-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41 5 Diskussion 47 5.1 Chemotaxis-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47 5.2 Angiogenese-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48 5.3 Flow-Assay . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49 6 Zusammenfassung 50 Danksagung 51 Abbildungsverzeichnis 54 Tabellenverzeichnis 55 Literatur 58 4

Abstract Abstract Primäre Endothelzellen werden für eine Vielzahl an Forschungsexperimenten verwendet. Beispiele hierfür sind Forschungen, welche die Gefäßneubildung und die Migration untersuchen. Um den Erfolg dieser Experimente nicht von der Heterogenität der primären Zellen abhängig zu machen, geht man dazu über immortalisierte Endothelzellen zu entwickeln. Diese müssen für eine Vergleichbarkeit die selben Eigenschaften wie die primären Zellen aufweisen. Die gentechnisch veränderten Zellen müssen daher auf mögliche Unterschiede untersucht werden. Mögliche charakteristische Eigenschaften können hierbei die chemotaktische Migration, die Fähigkeit zur Tube formation, das Verhalten unter Fluss sowie physiologische Merkmale, wie den von Willebrand-Faktor und die Ausbildung von Zell-Zell-Kontakten und Aktinfilamentbündeln, sein. Dafür wurden vier Experimente herangezogen und zusätzlich eine Testversion einer softwarebasierten Analyse des Verhaltens unter Fluss entwickelt. Primary endothelial cells may be used for a variety of research experiments such as angiogenesis and migration. To ensure that the success of these experiments is not depending on the heterogeneity of the primary cells, one proceed to develop immortalized endothelial cells. These must have the same characteristics for a comparability such as the primary cells. The genetically modified cells have to be analyzed for possible differences. Possible characteristics can here be the chemotactic migration, the ability to tube formation, the behavior under flow and physiological characteristics, such as the von Willebrand factor and the formation of cell-cell contacts and stress fibers. Therefore, four experiments were used and additionally a trial version of a software-based analysis of the behavior under flow was developed. 5

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