Qualitative und quantitative Analyse von Nährstoffen

Qualitative und quantitative Analyse von Nährstoffen
Farbreaktionen: Sie beruhen auf Komplexbildung, Redoxreaktion, Säure-Base-Reaktion…
Anleitung: Die Nachweise erfolgen in stark verdünnten Lösungen. Man löst eine Spatelspitze
Probensubstanz in wenig Wasser (einige mL) Das Reagenz liegt schon gelöst vor. Man gibt das
Reagenz, wenn nicht anders beschrieben immer tropfenweise zu.
Kohlenhydrate:
Nachweis der Formylgruppe/Aldehydgruppe (CHO) in reduzierenden Zuckern (Glucose,
Maltose, Lactose...) – Die Fehling-Probe:
Man gibt zu einigen Millilitern der Zuckerlösung einige Milliliter von einer Mischung zu gleichen
Teilen von Fehling I und Fehling II und erwärmt im Wasserbad. Die blaue Lösung wird rotbraun.
Achtung: Es ist leider kein selektiver Nachweis, da auch andere Substanzen (z.B. auch Fructose, da sie
sich während des Nachweises in Glucose=Aldose umwandelt) durch diesen Test nachweisbar sind!
Nachweis der Carbonylgruppe/Ketogruppe (CO) in Fructose – Die Seliwanoff-Probe:
Die bereitgestellte alkoholische Resorcinlösung wurde bereits mit Salzsäure versetzt. Ca 1mL von
dieser Lösung gibt man dann zu ca. 2mL der Fructoselösung. Dann wird die Probe (farblos) in einem
siedenden Wasserbad erhitzt. Es entsteht eine eindeutige Rotfärbung der Probe.
Achtung: Bei zu langem Erhitzen, färben sich aber auch Aldosen rot. Damit ist kein eindeutiger
Nachweis auf Ketosen gegeben!
Nachweis der Stärke – Die Lugol-Probe (Iod-Kaliumiodidlösung):
Eine kleine Spatelspitze Stärkepulver wird mit ein paar Tropfen Wasser angerührt und unter Rühren in
ein Becherglas mit ca. 10 mL siedendem Wasser gegossen. Die entstehende kolloidale Lösung wird
mit einigen Tropfen verdünnter Iod-Kaliumiodidlösung versetzt. Blau-, Violett- bis
Schwarzfärbung.
Proteine:
Nachweis der Peptidgruppe (NHCO) in Proteinen – Die Biuretreaktion:
Einige mL der Eiweißlösung werden mit dem gleichen Volumen einer ca. 10%igen Natronlauge
versetzt. Man schüttelt, dann gibt man einige Tropfen einer verdünnten Kupfersulfatlösung zu und
erwärmt leicht. Violettfärbung!
Nachweis der Proteine / Aminosäuren – Die Ninhydrinreaktion:
Einige mL der Eiweiß- / Aminosäurelösung werden mit einigen Tropfen einer Ninhydrinlösung
versetzt und im Wasserbad leicht erwärmt. Violettfärbung! Bei geringen Mengen kann man die
Reaktion auch auf einem Filterpapier machen und Ninhydrin aus der Sprühflasche aufsprühen.
Triglyceride (Fette):
Nachweis von Fett – Die Fettfleckprobe:
Fett oder fetthältiges Lebensmittel (fein zerteilt) mit wenig Aceton / Petrolether versetzen und gut
schütteln. Lösung auf ein Stück Filterpapier auftragen und Lösungsmittel unter dem Abzug verdunsten
lassen.
Nachweis der Kohlenstoff-Doppelbindung (...en) in ungesättigten Fettsäuren, Fetten mit
ungesättigten Fettsäuren... – Die Baeyer-Probe:
Bei der Baeyer-Probe wird z.B. 1cm hoch Ölsäure (Octadecensäure) in ein Reagenzglas gefüllt. Es
werden einige mL von den bereitgestellten Lösungen von Natriumcarbonat (farblos) und
Kaliumpermanganat (violett) im Verhältnis 10 : 1 gemischt. Dann setzt man langsam tropfenweise
A. Schrafl & E. Klemm, 2008 1

dieses Reagens der Probe zu. Man erkennt eine deutliche Farbveränderung von violett zu braun bis
farblos.
Achtung: Farbänderung am Anfang schwer zu sehen! Beschleunigt wird die Reaktion durch Erhitzen.
Vitamine:
Nachweis von Vitamin C - Tillmann’s Reagenz (2,6-Dichlorphenolindophenol / DCPIP):
Eine Ascorbinsäurelösung wird langsam tropfenweise mit einer verdünnten blauen DCPIP-Lösung
versetzt, bis keine Entfärbung der Lösung mehr eintritt. Wenn der pH-Wert der Lösung unter 4 liegt,
dann färbt sich die Lösung rosa! (Indikatorwirkung!)
Nachweis von Provitamin A (Carotin) mit Schwefelsäure:
Einige Tropfen einer Carotinlösung werden mit einigen Tropfen konz. Schwefelsäure versetzt. Es
entsteht eine zuerst eine grünblaue Färbung (Komplexbildung), dann verkohlt das Produkt und es wird
schwarz.
Mineral- & Spurenstoffe:
Zweiwertiges Calcium und Magnesium - Komplexometrische Titration:
In 100 mL Probe-Lösung wird unter Rühren eine Indikatorpuffertablette aufgelöst und ca. 2 mL
Ammoniaklösung zugegeben. Man titriert (Digitalbürette) mit 0,1 molarer Titriplexlösung von ROT
nach GRAUGRÜN.
Auswertung: Man erhält die Summe der Calcium- und Magnesiumionen! 1mol Titriplex (EDTA)
entspricht 1mol Calcium oder Magnesium!
Dreiwertiges Eisen:
a) Gelbes Blutlaugensalz K 4 [Fe(CN) 6 ] fällt tiefblaues Berlinerblau Fe 4 [Fe(CN) 6 ] 3
b) Thiocyanat (KSCN) gibt in schwach HCl saurer Lösung eine intensive Rotfärbung.
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