PDF 1.516kB - TOBIAS-lib - Universität Tübingen

Material und Methodik
Mariya Gosheva
ist für jeden Schritt der Messung auf die notwendige Menge der Reagenzien
vorprogrammiert.
Am Anfang wurden 300µl 0,9% NaCl zusammen mit 300µl Vollblut in einer
Multiplate®-Messzelle pipettiert. Nach der drei-minutigen Inkubation bei 37°C
wurde 20µl des Thrombozytenaktivators (ADP für ADP-Test) zugegeben.
Danach erfolgte eine sechs-minutigen Messung der Impedanz. Während der
gesamten Messung wurden die Reagenzien mit Hilfe des magnetischen
Polytetrafluorethylen-beschichteten Rührstabs mit 800 Umdrehungen pro
Minute vermischt. Nach Beendigung der Messung wurden zwei
Aggregationskurven auf dem Bildschirm angezeigt. Zusätzlich zu der „Area
under the curve“-Angabe wurde auch der Unterschied zwischen den beiden
Einzelmessungen angegeben. Bei zu großer Abweichung erfolgte eine
Fehlermeldung und die Messung wurde wiederholt. Zur Weiterverarbeitung der
Ergebnisse wurde jede korrekte Messung ausgedruckt.
Das Multiplate®-System zeichnet die Aggregationskurve kontinuierlich auf. Die
Zunahme der Impedanz an der Sensoreinheiten wird in die frei gewählten
„Aggregation Units“ umgerechnet und gegen die Zeit aufgezeichnet. Die Fläche
unter der Aggregationskurve („Area under the curve“ - AUC) wird berechnet. Sie
ist von der Geschwindigkeit der Aggregation, sowie von der maximal erreichten
Aggregation abhängig. Zusätzlich wird die Aggregation (maximale Höhe der
Kurve) und die Velocity (maximale Steigung der Kurve) berechnet. Diese
beiden Parameter sind nur für Forschungszwecke bestimmt, deshalb werden
sie mit dem Zusatz RUO („Research Use Only“) ausgegeben. (Abb. 10)
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