Untersuchungen zur Struktur und biologischen Aktivität von ...

ERGEBNISSE
______________________________________________________________________
Die Ausbeuten betrugen 0,06% (SmT) bzw. 0,14% (SmO) der Bakterienfeuchtmasse
(siehe Tabelle 1).
Abbildung 17: SDS-Polyacrylamid-Gel nach Perjodsäure-Schiff- (PAS) und anschließender
Coomassie-Färbung zum Kohlenhydrat- und Proteinnachweis in Fraktionen aus M. avium SmT
und SmO.
Es wurde ein 12%iges Gel von 12 cm x 0,75 mm gegossen. (1): 200 µg Phenol-Extrakt (II, Abbildung
15); (2): 150 µg Wasser-Phase nach Triton-Extraktion (III, Abbildung 15); (3): 150 µg Triton-Phase nach
Triton-Extraktion (IV, Abbildung 15); (4): 100 µg Sediment nach Proteinpräzipitation (VI, Abbildung
15); (5): 100 µg Überstand nach Proteinpräzipitation (V, Abbildung 15). Die Proben wurden jeweils mit
einem Volumen von 20 µl aufgetragen. (α 1 ): α 1 -saures Glycoprotein (4 µg); (M): Low Molecular Weight
Standard (1:20; 10 µl); Die Elektrophorese-Dauer betrug 5 h bei konstanter Spannung von 150 V.
Zunächst wurde das Gel PAS- und anschließend mit Coomassie gefärbt.
Abbildung 17 zeigt ein SDS-Gel (siehe 3.3.2) der aufgetrennten Phenol-Extrakte (siehe
4.2), Wasser- und Triton-Phasen (siehe 3.2.3), sowie Sedimente und Überstände nach
der Proteinpräzipitation (siehe 3.2.4) aus einem Vorversuch zur Optimierung der Aufreinigung
von Kapselpolysacchariden aus SmT und SmO. Zur Detektion von Kohlen-
82