Vaskulitis: Von der Diagnose zur Prognose - (GFID) eV

Vaskulitis: 

Von der Diagnose zur Prognose 

Kai Prager 

Wendelsheim

Definition 

• Vaskulitis = Angiitis 

Arteriitis (Arterien) / Phlebitis (Venen) 

• Endzündungserkrankung der Blutgefäße mit sehr 

unterschiedlicher Progression und teilweise 

tödlichem Ausgang. 

• Sowohl Arterien als auch Venen in verschiedenen 

Größen können betroffen sein. 

• Primäre Vaskulitis: 

Initiale Erkrankung – direkter Grund für die Endzündungsreaktion. 

• Sekundäre Vaskulitis: 

Andere Erkrankungen können sekundär eine Endzündungsreaktion hervorrufen: 

Infektionen (Hepatitis B Kryoglobulinämie; Hepatitis C Polyarteriitis nodosa), 

medikamentös induziert

Klassifizierung 

1992: Chapel Hill Consensus Conference 

Klassifizierung der Vaskulitiden nach Größe und Typ der 

betroffenen Gefäße. 

Vaskulitis 

Krankheit 

V. großer Gefäße 

Riesenzellarteriitis 

Takayasu-Arteriitis 

V. mittlerer Gefäße 

Polyarteriitis nodosa 

Kawasaki-Syndrom 

V. kleiner Gefäße 

Wegener-Granulomatose 

Churg-Strauss-Syndrom 

Mikroskopische Polyarteriitis 

Idiopathsche 

Glomerulonephritis 

Assoziiert 

mit ANCA

Epidemiologie 

• Vaskulitiden sind allgemein hin seltene Erkrankungen. 

• Anstieg der Häufigkeit seit den 80er Jahren ist wahrscheinlich durch erhöhte 

Sensibilisierung der diagnostizierenden Ärzte und die Entwicklung robuster 

Testsysteme zu erklären. 

• Häufigkeit (Fälle/100,000/Jahr): 

Riesenzellarteriitis: 20 

Polyarteriitis nodosa: 5 – 77 

Wegener-Granulomatose: 0,4 – 1,5 

Mikroskopische Polyarteriitis: 0,2 – 7

Wegener-Granulomatose 

• Mittlere und kleine Gefäße sind betroffen 

• Erste Symptome in den Atmungswegen, weitere Organe 

(hauptsächlich die Lunge und Nieren) kommen hinzu bis 

schließlich ein systemisches Bild entsteht 

• Detektion von cANCA: charakteristische Antikörper mit 

einer Rolle in der Pathogenese der Entzündung

Wegener-Granulomatose – Proteinase 3 (cANCA) 

• > 95% Spezifität und bis zu 90% Sensitivität von PR3 Antikörper für die Krankheit 

• Niedrigere Sensitivität in Patienten ohne Nierenbeeinträchtigung während der 

Remission 

• In frühen Krankheitsstadien sind nahezu 2/3 der Patienten positiv für PR3 

Antikörper 

• Dieses steigt auf bis zu 95% in Patienten mit systemischen Ausprägungen der 

Krankheit 

• Der Antikörpertiter könnte mit der Aktivität der Krankheit korrelieren: 

Anstieg in akuten Phasen und Abfall unter Therapie 

• Die Diagnose von Antikörpern könnte demnach nicht nur für die inititale Diagnose, 

sondern auch für den Verlauf der Krankheit wichtig sein 

• Aus diesem Grunde ist eine quantitative Detektion wünschenswert. 

Specks,U. (2000). What you should know about PR3-ANCA. Conformational requirements of 

proteinase 3 (PR3) for enzymatic activity and recognition by PR3-ANCA. Arthritis Res. 2, 263-267.

Myeloperoxidase (pANCA) 

Anti-MPO Antikörper sind vorhanden in 

• bis zu 70% der Patienten mit mikroskopischer Polyarteriitis 

• bis zu 50% der Patienten mit Churg-Strauss-Syndrom 

Da die Unterscheidung von mikroskopischer Polyarteriitis von anderen 

Autoimmunerkrankungen mit Lungen- und Nierenbeteiligung (Goodpasture- 

Syndrom, SLE, Wegener) schwierig ist, sind anti-MPO Antikörper von besonderer 

Wichtigkeit bei der Diagnose.

ANCA: anti-neutrophil cytoplasmic antibodies 

Charakteristische Antikörper in Vaskulitis: 

Erstmals beschrieben in 1982 

Detektion primär durch indirekte Immunofluoreszenz Assay (IFA) in neutrophilen 

Granulozyten 

Antigene: 

Zielantigene sind in den sekretorischen Vesikeln ruhender Neutrophilen lokalisiert. 

Sie bestehen hauptsächlich aus cytoplasmatischen Proteinen 

Man finden sie auch in: 

Andere rheumatische Erkrankungen 

Chronisch-entzündliche Darmerkrankungen 

Autoimmune Hepatitis

Detektion von ANCA: Fluoreszenz Muster 

Man kann drei verschiedene Muster in Ethanol-fixierten Granulozyten finden: 

„cytoplasmic“ oder „classical“ Muster (cANCA) 

Zentrales cytoplasmatisches Muster 

Typisch für Wegener-Granulomatose 

Hauptsächlich Detektion von Proteinase 3: 

Lysosomales Enzym




„perinuclear“ Muster (pANCA) 

Perinukleäres Muster 

Als Hauptantigen gilt die Myeloperoxidase (MPO)




„perinuclear“ Muster (pANCA) 

„atypical” ANCA (xANCA or aANCA) 

Untypisches cytoplasmatisches Muster 

Antigene sind nicht klar

ANCA 

• Die Begriffe cANCA und pANCA beziehen sich auf spezifische 

Immunofluoreszenzmuster und nicht auf separate Antigen 

• Verschiedene Proteine können die gleichen cANCA oder pANCA Muster ergeben.

ANCA 



• Verschiedene Proteine können die gleichen cANCA oder pANCA Muster ergeben. 

PR3 

BPI

ANCA 



• Verschiedene Proteine können die gleichen cANCA oder pANCA Muster ergeben. 

Lactoferrin 

PR3 

Lysozyme 

MPO 

Elastase 

Cathepsin G 

BPI

pANCA 

Neben MPO, sind noch eine Reihe von zusätzlichen Antigenen für eine Reihe an rheumatischen und 

gastrointestinalen Erkrankungen beschrieben. 

Zielantigene sind ebenfalls lysosomale Proteine: 

MPO, Lactoferrin, Lysozyme, Cathepsin G, Elastase 

pANCA positive und anti-MPO negative Sera sollten daher auf diese zusätzlichen Antigene getestet werden. 

Erkrankungen, die mit pANCA assoziiert sind: 

MPO 

microscopic polyangiitis 

Lactoferrin rheumatoid vasculitis, ulcerative colitis, primary sclerosing cholangitis (PSC) 

Lysozym rheumatoid vasculitis, ulcerative colitis 

Cathepsin G SLE, Sjögren´s syndrome 

Elastase rheumatoid arthritis, vasculitis

cANCA 

Neben PR3 (90-95% aller cANCA) wurde noch ein zusätzliches Antigen identifiziert: 

Bactericidal permeability increasing protein (BPI) 

PR3, BPI 

Trotzdem ist das Muster in der Fluoreszenz nicht so charakteristisch wie für PR3 und wird aus diesem Grunde 

oft auch als xANCA angesehen. 

In selten Fällen können anti-PR3/BPI Antikörper auch einen pANCA Muster erzeugen. 

Erkrankungen, die mit cANCA assoziiert sind: 

PR3 Wegener´s granulomatosis 

BPI eher chronisch-entzündliche Darmerkrankungen (IBD) assoziert: 

Crohn´s disease & ulcerative colitis 

Cystic fibrosis

ANCA Testung 

International Consensus Statement on Testing and Reporting of ANCA 

Minimale Anforderungen an ANCA Testung: 

1. Untersuchung mit indirekter Immunofluoreszenz Assay (IFA) 

2. Bestätigung positiver Seren durch ELISA für PR3 / MPO 

Savige J, Gillis D, Benson et al. International consensus statement on testing and reporting of antineutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA). 

Am J Clin Pathol 1999; 111:507–13.

ANCA Testung 

Fluoreszenzmuster können zweideutig sein: 

• pANCA Fluoreszenzmuster durch non-Vaskulitis assoziierte Antikörper 

• Die Anwesenheit von anti-nukleären Antikörpern (ANA) im Serum können zu 

Interferenzen führen. 

• Auch die Nachtestung mit Formalin fixierten Neutrophilen zur Bestätigung und zur 

Differenzierung von ANA-pANCAs scheint weniger spezifisch und weniger sensitiv 

zu sein als ELISA 

• ANCA Resultate: 

Bis zu 5% der ANCA - positiven Seren sind nur im ELISA positiv 

• Empfehlung: beides IFA und ELISA Testung der Seren sollte optimale Sensitivität 

und Spezifität erzielen. 

Pollock, W., et al., Testing on formalin-fixed neutrophils is less sensitive and specific for small 

vessel vasculitis, and less sensitive for MPO-ANCA, than most ELISAs, J. Immunol. Methods 

2008; doi:10.1016/j.jim.2008.09.002

AESKULISA 

• Direkter ELISA (MPO, BPI etc.) 

Natives Antigen von human Granulozyten werden 

direkt auf die Platte beschichtet. 

Ag

AESKULISA 

• Direkter ELISA (MPO, BPI etc.) 

Natives Antigen von human Granulozyten werden 

direkt auf die Platte beschichtet. 

Ag 

• „capture“ Test 

Hier wird das Antigen (z.B. PR3) von einem 

Antikörper gebunden und es sollte eine erhöhte 

Menge an Epitopen zugänglich sein. 

PR3

AESKULISA PR3 sensitive 

• PR3 sensitive 

Da Fängerantikörper relativ groß sind können als 

alternative kleine „spacer“ - Moleküle verwendet 

werden. 

• PR3, oder andere Antigene, können somit besser 

erkant werden und eine erhöhte Sensitivität und 

Spezifität erzielt werden. 

PR3

AESKULISA PR3 sensitive 

• PR3 sensitive 

Da Fängerantikörper relativ groß sind können als 

alternative kleine „spacer“ - Moleküle verwendet 

werden. 

• PR3, oder andere Antigene, können somit besser 

erkant werden und eine erhöhte Sensitivität und 

Spezifität erzielt werden. 

PR3

Studien 

• 2008: AESKULISA PR3 / MPO zusammen mit 11 weiteren Test 

AESKULISA – PR3 

Patienten mit WG 

AESKULISA – MPO 

Patienten mit MPA 

Aktiv 

(20 Patienten) 

Behandelt 


Aktiv 


Behandelt 


Sensitivität 90% (IFA: 90%) 

85-95% 

71% (IFA: 71%) 

66-82% 

85% (IFA: 85%) 

81-85% 

71% (IFA: 96%) 

46-92% 

Mittelwert 90% 




Spezifität 

95% (IFA: n.d.%) 

range 88-96% 

mean 94% 

98% (IFA: n.d.%) 

range 86-99% 

mean 97% 

Sensitivitäten und Spezifitäten sind allgemein sehr gut 

ähnliches Abschneiden aller Kits 

ELISA haben vergleichbare Sensitivitäten zu IFA 

Erkennung von behandelten eher variabel zwischen den Tests 

• Trevisin,M., Pollock,W., Dimech,W., Melny,J., Paspaliaris,B., Gillis,D., Wong,R., and 

Savige,J. (2008). Antigen-specific ANCA ELISAs have different sensitivities for active and 

treated vasculitis and for nonvasculitic disease. Am. J. Clin. Pathol. 129, 42-53.

Standardisierung: 

Warum ein Standard? 

• Vergleichbarkeit der Assays 

• Klinische Studien 

Schwierigkeiten 

• es gibt wenig Seren um einen Standard herzustellen 

• Sera z.T. nicht gut charakterisiert

Standardisierung: 

Centre of Disease Control 

• Nach einer internationalen Studie under (koordiniert A. Wiik) gibt es jetzt 

zwei Standards: 

• PR3: PR3-ANCA human reference serum #18 

• MPO: MPO-ANCA human reference serum #15

Was bleibt zu tun: 

• Abgleich der zwei CDCs mit den Assays 

• Verbesserung der Ergebisse an „low titre“ – Seren 

• Bessere Assays in der Zukunft um auch Patienten in der 

Behandlungsphase besser untersuchen zu können.

Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!

Vaskulitis: Von der Diagnose zur Prognose - (GFID) eV

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