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Enterisches virenpanel Echtzeit-PCR Kit - Diagenode Diagnostics

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DIAGENODE <strong>Enterisches</strong> Virenpanel <strong>Echtzeit</strong>-<strong>PCR</strong> GEBRAUCHSANWEISUNG<br />

2.1 Verwendungszweck<br />

Das <strong>Diagenode</strong> <strong>Enterisches</strong> Virenpanel <strong>Echtzeit</strong>-<strong>PCR</strong> <strong>Kit</strong> wie es im BD MAX System implementiert ist,<br />

ist ein automatisiertes in-vitro Diagnostikprodukt für die qualitative Erkennung der Norovirus<br />

(Genogruppen I und II) und Rotavirus Spezies in Stuhlproben von Patienten mit Anzeichen und<br />

Symptomen von Gastroenteritis. Die Erkennung von Noroviren- und Rotaviren-Nukleinsäure von<br />

symptomatischen Patienten hilft bei der Diagnose von vermuteten Margen-Darm-Infektionen. Dieser<br />

Test ist nicht zur Unterscheidung von Genogruppen von Noroviren bestimmt.<br />

2.2 Informationen zum Krankheitserreger<br />

Rotaviren sind die häufigste Ursache für schwere Durchfallerkrankungen bei Neugeborenen und jungen<br />

Kindern (1), und zählt zu jenen Viren, die oft als „Magengrippe” bezeichnete Infektionen, die allerdings<br />

nichts mit der Influenza-Grippe zu tun haben, auslösen können. Es ist eine Gattung von<br />

doppelsträngigem RNA-Virus und zählt zur Familie der Reoviridae. Mit einem Alter von 5 Jahren war<br />

weltweit bereits fast jedes Kind zumindest einmal mit einem Rotavirus infiziert. (2). Allerdings entwickelt<br />

sich mit jeder Infektion eine Immunität wodurch folgende Infektionen weniger stark ausfallen (3), und<br />

Erwachsene kaum mehr betroffen sind (4). Es gibt 5 Spezies dieses Virus welche mit A,B,C,D und E<br />

bezeichnet werden. Rotavirus A, welcher am häufigsten auftritt, verursacht mehr als 90% aller<br />

Infektionen an Menschen.<br />

Norovirus ist ein RNA Virus welcher in etwa 90% aller epidemischen nicht-bakteriellen Ausbrüche von<br />

Gastroenteritis weltweit verursacht (5), und außerdem für vermutlich 50% aller lebensmittelbedingten<br />

Ausbrüche von Gastroenteritis in den USA verantwortlich ist. (6). Norovirus I und II sind die beiden<br />

wichtigsten Genogruppen beim Menschen und betreffen Leute aller Altersschichten. Die Viren werden<br />

über mit Fäkalien verseuchtes Wasser oder Nahrung, von Mensch zu Mensch oder durch Aerosolbildung<br />

des Virus und daraus folgende Kontamination von Gebieten, übertragen.<br />

2.3 Inhalt des <strong>Kit</strong>s<br />

Das <strong>Kit</strong> wird mit dem BD MAX TM System verwendet.<br />

<strong>Diagenode</strong> <strong>Enterisches</strong> Virenpanel <strong>Echtzeit</strong>-<strong>PCR</strong> <strong>Kit</strong> für 96 <strong>PCR</strong> Reaktionen (12,5 µL <strong>PCR</strong> Volumen),<br />

eine Box :<br />

I. Enteric Viral Panel and internal control RNA double-dye probe & primers (4 Röhrchen):<br />

<strong>Enterisches</strong> Virenpanel mit doppelgefärbten Sonden & Primern mit Noro I (FAM, 520 nm),<br />

Noro II (YD, 549 nm), Rota (TR, 603 nm), und RNA Extraktions- und Inhibitionskontrolle mit<br />

doppelt gefärbte Sonden & Primer (Cy5, 662 nm): 65 µL je rotem Röhrchen.<br />

II. Enteric Viral Panel positive control (positivkontrolle): 120 µL, grünes Röhrchen.<br />

III. Enteric Viral Panel negative control (H2O <strong>PCR</strong> grade)(Negativkontrolle): 120 µL, himmelblaues<br />

Röhrchen.<br />

IV. H2O (<strong>PCR</strong> grade): 500 µL, himmelblaues Röhrchen.<br />

V. Optima PLUS Master Mix: 720 µL, weißes Röhrchen<br />

VI. RNA virus culture inactivated (interne Kontrolle): 1000 µL, gelbes Röhrchen

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