Name des Nährmedium: - DocCheck Campus
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Äsculin-Galle-Agar:<br />
Selektivagar zum vorläufigen Nachweis von:<br />
• Enterokokken<br />
• Staphylococcus aureus<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Fleischextrakt<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Ochsengalle<br />
• Äsculin<br />
• Eisen(III)-citrat<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Die Gallentoleranz und die Äsculinhydrolyse werden als zuverlässige und<br />
konstante Merkmale von Enterokokken angesehen. Alle anderen Stämme, außer<br />
Staphylococcus aureus werden durch die Gallensalze im Wachstum gehemmt.<br />
Enterokokken hydrolysieren außerdem das Glucosid Äsculin in Glucose und<br />
Äskuletin. Letzteres bildet mit Eisen(III)-Ionen einen oliv-grünen bis schwarzen<br />
Komplex.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: bis zu 3 Tage bei 37 °C.<br />
Bei Anwesenheit von Enterokokken ist bereits in den ersten 24 Stunden eine<br />
dunkle Verfärbung <strong>des</strong> Nährbodens um die gewachsenen Kolonien eingetreten.<br />
Mikroorganismus Erscheinungsbild<br />
Enterococcus faecalis ATCC 11700 Gutes Wachstum, Schwärzung <strong>des</strong><br />
Mediums<br />
Enterococcus faecium ATCC 6057 Gutes Wachstum, Schwärzung <strong>des</strong> Mediums<br />
Streptococcus bovis ATCC 20065 Kein/schwaches Wachstum, keine<br />
Schwärzung<br />
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Gutes Wachstum, Schwärzung <strong>des</strong> Mediums<br />
Escherichia coli ATCC 25922 Gutes Wachstum, keine Schwärzung
Azid-Glucose-Bouillon:<br />
Zum Vortest und selektiven Anreicherung von:<br />
• Enterokokken<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Fleischextrakt<br />
• Pepton aus Casein<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Natriumchlorid<br />
• Natriumazid<br />
Wirkungsweise:<br />
Durch den Natriumazid wird die gramnegative Begleitflora weitgehend<br />
gehemmt, die Enterokokken wachsen ungehemmt.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütrung: 24 bis 48 Stunden bei 37 °C.<br />
Wachstumstrübung in der Kultur legt den Verdacht auf Anwesenheit von<br />
Enterokokken nahe. In diesem Fall weitere Bestätigungstests notwendig. Tritt<br />
keine Trübung auf, so ist die Anwesenheit von Enterokokken mit Sicherheit<br />
auszuschließen.<br />
Mikroorganismus Erscheinungsbild<br />
Enterococcus faecalis ATCC 11700 Gutes Wachstum<br />
Enterococcus faecalis ATCC 19433 Gutes Wachstum<br />
Enterococcus hirae ATCC 8043 Gutes Wachstum<br />
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Kein/schwaches Wachstum<br />
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Kein/schwaches Wachstum
Baird-Parker-Agar:<br />
Selektivagar zur Isolierung und Differenzierung von:<br />
• Staphylokokken aus Lebensmitteln<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Fleischextrakt<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Hefeextrakt<br />
• Natriumpyruvat<br />
• Glycin<br />
• Lithiumchlorid<br />
• Agar-Agar<br />
• Zusätzlich: Eigelb-Tellurit-Emulsion<br />
Wirkungsweise:<br />
Der Nährboden enthält Lithiumchlorid und Tellurit zur Hemmung der<br />
Begleitflora, während Pyruvat und Glycin auf Staphylokokken selektiv<br />
wachstumsfördernd wirken.<br />
Auf undurchsichtigen Nährboden zeigen Staphylokokken-Kolonien zwei<br />
diagnostische Charakteristika: durch Lipolyse und Peoteolyse erzeugte<br />
charakteristische Hof- und Ringbildungen sowie Schwarzbildung infolge<br />
Reduktion <strong>des</strong> Tellurits zu Tellur.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 bis 48 Stunden bei 37 °C.<br />
Mikroorganismus Kolonien<br />
Staphyl.aureus Schwarz, glänzend, gewölbt, mit einem weißen Rand,<br />
umgeben von einem klaren Hof von 2 bis 5 mm Breite<br />
Staphyl.epidermidis Schwarz, glänzend, unregelmäßige Form. Nach 24 Stunden<br />
undurchsichtige Zonen um die Kolonien<br />
Micrococcus Gelegentliches Wachstum, : sehr klein, braun bis schwarz,<br />
keine Klärungshöfe<br />
Bacillus Dunkelbraun, matt, mitunter Klärungshöfe nach 48 Stunden<br />
Hefen Weiß, keine Klärungshöfe
Blut-Agar:<br />
Agar zur Isolierung und Züchtung von verschiedener anspruchsvoller Mikroorganismen, und<br />
zur Bestimmung von deren Hämolyseformen:<br />
• Staphylococcus aureus<br />
• Streptokokken<br />
• Listeriamonocytogenes<br />
• Bacillus<br />
• Clostridium<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Herzextrakt<br />
• Peptone<br />
• Natriumchlorid<br />
• Agar-Agar<br />
• Zusätzlich: Blut<br />
Wirkungsweise:<br />
Eine reichhaltige Nährgrundlage bietet allen Mikroorganismen optimale<br />
Wachstumsbedingungen. Zur Bestimmung von Hämolyseformen ist ein Zusatz<br />
von frisch gewonnenem Schafblut am besten geeignet.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 bis 48 Stunden bei 37 °C. Bestimmung von Hämolyseformen.<br />
Die Wiederfindungsrate für alle angegebene Bakterien liegt über 70%. Die<br />
Hämolysearten unterscheiden sich zwischen alpha- und beta-Arten.<br />
Mikroorganismus Erscheinungsbild<br />
Staph.aureus Gutes Wachstum, beta-Hämolyse<br />
Streptok.pyogenes Gutes Wachstum, beta-Hämolyse<br />
Streptok.pneumoniae Gutes Wachstum, alpha-Hämolyse<br />
Bacillus cereus Gutes Wachstum, beta-Hämolyse<br />
Clostrid. perfringens Gutes Wachstum (anaerobe Bebrütung), beta-Hämolyse
Caso-Agar (-Bouillon):<br />
Medium zur Züchtung anspruchsvoller Mikroorganismen:<br />
• Escherichia coli<br />
• Staphylococcus aureus<br />
• Streptokokken<br />
• Bacillus<br />
• Candida<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Pepton aus Sojamehl<br />
• Natriumchlorid<br />
• Agar-Agar<br />
• Für Bouillon: di-Kaliumhydrogenphosphat und D(+)-Glucose<br />
Wirkungsweise:<br />
Aufgrund ihrer reichhaltigen Nährgrundlage sind die Nährböden zur Züchtung<br />
auch anspruchsvoller Mikroorganismen geeignet.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 bis 48 Stunden.<br />
Die Wiederfindungsrate für alle angegebene Bakterien liegt über 70%.<br />
Mikroorganismus Wachstum<br />
Escherichia coli gut<br />
Staphylococcus aureus gut<br />
Streptococcus pneumoniae gut<br />
Bacillus subtilis gut<br />
Candida albicans gut (bis 48 Std.)
Cetrimid-Agar:<br />
Zur Isolierung und Differenzierung von:<br />
• Pseudomonas aeruginosa<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Gelatine<br />
• Magnesiumchlorid<br />
• Kaliumsulfat<br />
• N-Cetyl-N,N,N-trimethylammoniumbromid(Cetrimid)<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Das Cetrimid dient der weitgehenden Hemmung der Begleitflora. Kolonien von<br />
Ps. aeruginosa bilden einen blau-grünen Farbstoff (Pyocyanin) und<br />
fluoreszieren im UV-Licht.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: bis zu 48 Stunden bei 35 °C. Zur entgültigen Identifizierung von<br />
Pseudomonas sollten weitere Untersuchungen angeschlossen werden.<br />
Mikroorganismus Grün-blaue Kolonien<br />
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 +<br />
Pseudomonas aeruginosa ATCC 25668 +<br />
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 +<br />
Escherichia coli ATCC 8739 -<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 -
Clostridien-Differential-Bouillon (DRCM):<br />
Zur Keimzahlbestimmung von:<br />
• Clostridien<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Fleischextrakt<br />
• Hefeextrakt<br />
• Stärke<br />
• D(+)-Glucose<br />
• L-Cysteiniumchlorid<br />
• Natriumacetat<br />
• Natriumdisulfit<br />
• Ammoniumeisen(III)-citrat<br />
• Resazurin-Natrium<br />
Wirkungsweise:<br />
Clostridien reduzieren Sulfit zu Sulfid, das als Eisensulfid den Nährboden<br />
schwärzt. Da auch andere Bakterien Sulfid bilden, wird durch entsprechende<br />
Vorbehandlung (z. B. durch Pasteurisierung) der Kulturansatz von vegetativen<br />
Formen befreit und danach der Nachweis anaerober Sporenbildner<br />
durchgeführt.<br />
Auswertung:<br />
Nährboden beimpfen, mit sterilisiertem Paraffin 3 bis 5 mm hoch überschichten<br />
und pasteurisieren (30 min bei 75 °C im Wasserbad).<br />
Bebrütung: wenigstens 7 Tage bei 30 °C.<br />
Meist sind bereits nach 3-4 Tagen die bewachsenen Kulturen erkennbar. Die<br />
Nachbeobachtung sollte jedoch bis zu 4 Wochen dauern, da gelegentlich erst<br />
nach längerer Zeit eine Auskeimung von Sporen erfolgt. Die Kulturen werden<br />
auf Schwarzfärbung <strong>des</strong> Nährbodens hin kontrolliert. Zur Identifizierung der<br />
Clostridien sollten weitere Untersuchungen folgen.<br />
Mikroorganismus Wachstum und Schwärzung<br />
Escherichia coli ATCC 25922 gut -<br />
Bacillus cereus ATCC 11778 mäßig -<br />
Clostridium perfringens ATCC 10543 gut +<br />
Clostridium bifermentans ATCC 19299 gut +<br />
Clostridium septicum gut +
DEV-ENDO-Agar:<br />
Selektivagar zur Isolierung und Differenzierung von:<br />
• Escherichia coli<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Fleischextrakt<br />
• Natriumchlorid<br />
• Lactose<br />
• Fuchsin<br />
• Natriumsulfit<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
E. coli und Coliformen wachsen auf den Platten gut. E coli bilden außerdem<br />
einen grünlich-metallischen Fuchsinglanz, Coliformen bilden feuchte rote<br />
Kolonien.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 Stunden bei 37 °C.<br />
Unterscheidung zwischen roten und roten mit Metallglanz Kolonien.<br />
Mikroorganismus Rote Kolonien und Metallglanz<br />
Escherichia coli ATCC 25922 + +<br />
Escherichia coli 194 + +<br />
Enterobacter cloacae ATCC 13047 + -<br />
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + -<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 - -
Dient zum Nachweis von:<br />
• Escherichia coli<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Fleischextrakt<br />
• Natriumchlorid<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Bromkresolpurpur<br />
Wirkungsweise:<br />
DEV-Glucose-Bouillon:<br />
Bei Wachstum Glucose-positiver Mikroorganismen schlägt die Farbe der<br />
Bouillon nach Gelb um.<br />
Auswertung:<br />
Bebrüten: 24 Stunden bei 44+/-5 °C.<br />
Positive Reaktion nach dem Farbumschlag <strong>des</strong> Mediums von violett nach gelb.<br />
Mikroorganismus Farbumschlag nach Gelb / Gasbildung<br />
Escherichia coli ATCC 25922 + +<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 + +<br />
Shigella flexneri ATCC 12022 + -<br />
Enterococcus faecalis ATCC11700 + -<br />
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 - -
DEV-Lactose-Bouillon:<br />
Zur Anreicherung und zur Titerbestimmung von:<br />
• Escherichia coli<br />
• Coliformen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Pepton aus Soja<br />
• Natriumchlorid<br />
• Lactose<br />
• Bromkresolpurpur<br />
Wirkungsweise:<br />
Bei Wachstum Lactose-positiver Mikroorganismen schlägt die Farbe der<br />
Bouillon von violett nach gelb um.<br />
Auswertung:<br />
Bebrüten: 48 Stunden bei 37 °C.<br />
Positive Reaktion nach dem Farbumschlag <strong>des</strong> Mediums von violett nach gelb.<br />
Mikroorganismus Farbumschlag nach Gelb / Gasbildung<br />
Escherichia coli ATCC 25922 + +<br />
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + +<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 - -<br />
Enterococcus faecalis ATCC11700 - -<br />
Clostridium perfringens ATCC 10453 + +/-
DEV-SIMMONS-Citrat-Agar:<br />
Selektivagar zur Isolierung und Differenzierung von:<br />
• Escherichia coli<br />
• Coliformen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Ammoniumdihydrogenphosphat<br />
• Di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Natriumchlorid<br />
• Natriumcitrat<br />
• Magnesiumsulfat<br />
• Bromthymolblau<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Der Nährboden ist klar und blaugrün. Citrat-positive Keime (Klebsiella,<br />
Salmonella) zeigen Farbumschlag <strong>des</strong> Nährbodens von Grün nach Blau. Citratnegative<br />
kein Wachstum und keinen Farnumschlag.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 Stunden bei 37 °C.<br />
Positive Reaktion nach dem Farbumschlag <strong>des</strong> Mediums von Grün nach Blau.<br />
Mikroorganismus Wachstum Gasbildung<br />
Escherichia coli ATCC 25922 - -<br />
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + +<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 + +<br />
Citrobacter freundii ATCC 8090 + +<br />
Staphylococcus aureus ATCC 25923 - -
Zur Differenzierung von:<br />
• Escherichia coli<br />
• Coliformen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• DL-Tryptophan<br />
• Natriumchlorid<br />
• KOVACS Indolreagenz<br />
• Indol<br />
Wirkungsweise:<br />
DEV-Tryptophan-Bouillon:<br />
E. coli und Coliforme zeigen ein gutes Wachstum auf dem Nährboden.<br />
Mikroorganismus Wachstum Gasbildung<br />
Escherichia coli ATCC 25922 gut +<br />
Escherichia coli ATCC 11775 gut +<br />
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 gut -<br />
Proteus vulgaris ATCC 13315 mäßig +<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 gut -
ENDO-Agar:<br />
Selektivagar zum Nachweis und zur Isolierung von:<br />
• Escherichia coli<br />
• Coliformer<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Peptone<br />
• di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Natriumsulfit<br />
• Lactose<br />
• Pararosanilin (Fuchsin)<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Natriumsulfit und Fuchsin hemmen grampositive Bakterien. E. coli und<br />
Coliforme verwerten Lactose unter Bildung von Aldehyd und Säure. Aldehyd<br />
wiederum setzt Fuchsin aus der Fuchsin-Sulfit-Verbindung frei, welches dann<br />
die Kolonien rot anfärbt. Bei E. coli ist diese Reaktion so intensiv, dass das<br />
Fuchsin auskristallisiert und dadurch den Kolonien einen grünschimmernden,<br />
beständigen Metallglanz (Fuchsunglanz!) verleit. Lactose-negative zeigen keine<br />
Fuchsinglanz.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 Stunden bei 37 °C.<br />
Kolonien Mikroorganismen<br />
Rot<br />
Lactose-positiv<br />
Rot mit Metallglanz<br />
Escherichia coli<br />
Rot bis rötlich, schleimig<br />
Enterobacter, Klebsiella<br />
Farblos, klar<br />
Lactose-negativ<br />
Mikroorganismus Rote Kolonien Metallglanz<br />
Escherichia coli ATCC 25922 + +<br />
Escherichia coli ATCC 11775 + +<br />
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + kein<br />
Proteus mirabilis ATCC 14153 - kein<br />
Salmonella typhimurium ATCC 14028 - kein
Glucose-Bouillon:<br />
Zur Züchtung und Vermehrung verschiedener Mikroorganismen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Natriumchlorid<br />
• D(+)-Glucose<br />
Wirkungsweise:<br />
Clucose-Bouillon dient insbesondere zum Nachweis <strong>des</strong> typischen Wachstums<br />
(Kettenform) sowie
Harnstoffagar nach CHRISTENSEN:<br />
Zur Differenzierung Harnstoff abbauender Mikroorganismen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Natriumchlorid<br />
• Kaliumdihydrogenphosphat<br />
• Phenolrot<br />
• Agar-Agar<br />
• Harnstoff<br />
Wirkungsweise:<br />
Harnstoff wird durch das Enzym Urease zu Kohlendioxid und Ammoniak<br />
hydrolysiert. Letzteres bedingt eine alkalische Reaktion <strong>des</strong> Mediums, die durch<br />
einen Farbumschlag <strong>des</strong> pH-Indikators Phenolrot von Gelb nach Purpurrot<br />
nachgewiesen wird.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 5 bis 48 Stunden bei 37 °C.<br />
Nährboden Mikroorganismen<br />
Rot Harnstoff-positiv:<br />
Proteus, Klebsiella, einige<br />
Enterobacter und Citrobacter<br />
Gelb Harnstoff-negativ:<br />
Shigella, Salmonella, Escherichia,<br />
Citrobacter, Serratia<br />
Mikroorganismus Wachstum Farbumschlag nach<br />
Escherichia coli ATCC 25922 gut gelb<br />
Shigella flexneri ATCC 12022 gut gelb<br />
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 gut rot<br />
Proteus vulgaris ATCC 13315 gut rot<br />
Proteus mirabilis ATCC 14153 gut rot
Hefeextraktagar:<br />
Zur Züchtung von Hefen und Schimmelpilzen aus verschiedenen Materialien<br />
• Candida<br />
• Aspergillus<br />
• Penicillium<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Hefeextrakt<br />
• Glucose<br />
• Agar-Agar<br />
Auswertung:<br />
Der Nährboden wird im Plattengußverfahren oder im Oberflächenausstrich<br />
beimpft.<br />
Mikroorganismus Wachstum<br />
Escherichia coli ATCC 2922 gut<br />
Candida albicans ATCC 10231 gut<br />
Geotrichum candidum gut<br />
Aspergillus niger gut
Hirn-Herz-Agar (Bouillon):<br />
Zur Züchtung verschiedener anspruchsvoller, pathogener Mikroorganismen:<br />
• Streptococcus<br />
• Staphylococcus<br />
• Clostridium<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Hirn-, Herzextrakt und Peptone<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Natriumchlorid<br />
• Di-Natriumhydrogenphosphat<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Der Nährboden eignet sich zur Züchtung vieler anspruchsvoller Bakterien wie<br />
Streptokokken, Pneumokokken, Meningokokken.<br />
Hirn-Herz-Bouillon ist insbesondere zur Züchtung von Staphylokokken<br />
geeignet.<br />
Hirn-Herz-Agar ist außerdem für den bakteriologischen Bereich auch zur<br />
Züchtung pathogener Pilze geeignet.<br />
Mikroorganismus Wachstum<br />
Streptococcus pyogenes ATCC 12344 gut<br />
Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 gut<br />
Staphylococcus aureus ATCC 25923 gut<br />
Clostridium perfringens ATCC 10543 gut (anaerob)<br />
Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 mäßig
Kanamycin-Äsculin-Azid-Agar:<br />
Zur Isolierung, Differenzierung und Keimzahlbestimmung von D-<br />
Streptokokken:<br />
• Enterococcus faecalis<br />
• Enterococcus hirae<br />
• Enterococcus durans<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Hefeextrakt<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Natriumchlorid<br />
• Natriumcitrat<br />
• Natriumacid<br />
• Kanamycinsulfat<br />
• Äsculin<br />
• Ammoniumeisen(III)-citrat<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Kanamycin und Azid hemmen die Begleitflora weitgehend, während D-<br />
Streptokokken, die eine sehr geringe Empfindlichkeit gegenüber diesen<br />
Substanzen aufweisen, fast unbehindert wachsen können. Sie hydrolysieren das<br />
Glucosid Äsculin in Glucose und Äsculetin, welches mit Eisen(III)-Ionen einen<br />
olivgrünen bis schwarzen Komplex bildet.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: bis 3 Tage bei 37 °C.<br />
Kolonien von D-Streptokokken weisen einen dunklen Hof auf. Sie können<br />
durch weitere Untersuchungen identifiziert werden.<br />
Mikroorganismus Wachstum Olivgrün-schwarz<br />
Enterococcus faecalis gut +<br />
Enterococcus hirae gut +<br />
Enterococcus durans gut +<br />
Escherichia coli kein -
KLIGLER-Agar (Eisen-Zweizucker-Agar nach<br />
KLIGLER):<br />
Zur Identifizierung gramnegativer Darmbakterien nach KLIGLER:<br />
• Escherichia coli<br />
• Citrobacter freundii<br />
• Enterobacter cloacae<br />
• Shigella flexneri<br />
• Salmonella<br />
• Proteus<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Fleischextrakt<br />
• Hefeextrakt<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Natriumchlorid<br />
• Lactose<br />
• Ammoniumeisen(III)-citrat<br />
• Natriumthiosulfat<br />
• Phenolrot<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Der Zuckerabbau unter Säurebildung wird durch einen Farbumschlag <strong>des</strong><br />
Indikators Phenolrot von Rot-orange nach Gelb angezeigt, eine Alkalisierung<br />
durch Verfärbung nach Tiefrot.<br />
Auswertung:<br />
Die zu untersuchende Reinkultur wird auf der Schrägagar ausgestrichen.<br />
Bebrütung: bis 48 Stunden bei 37 °C.<br />
Mikroorganismus Wachstum Schrägfläche<br />
Escherichia coli gut gelb<br />
Citrobacter freundii gut gelb<br />
Enterobacter cloacae gut gelb<br />
Shigella flexneri gut rot<br />
Salmonella enteritidis gut rot<br />
Proteus vulgaris gut rot
Lactose-Pepton-Bouillon:<br />
Anreicherungsbouillon zur Bestimmung <strong>des</strong> Coli-Titers<br />
• Escherichia<br />
• Klebsiella<br />
• Salmonella<br />
• Proteus<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Kaliumdihydrogenphosphat<br />
• Natriumchlorid<br />
• Lactose<br />
Wirkungsweise:<br />
Lactoseverwertung zeigt sich durch Gasbildung in den DURHAM-Röhrchen.<br />
Die Pufferung <strong>des</strong> Nährbodens verhindert eine Wachstumshemmung der<br />
Bakterien durch die Lactoseabbau gebildete Säure.<br />
Mikroorganismus Wachstum Gasbildung<br />
Escherichia coli gut +<br />
Klebsiella pneumoniae gut +<br />
Aeromonas hydrophila gut -<br />
Clostridium perfringens gut +<br />
Salmonella typhimurium gut -<br />
Proteus vulgaris gut +/-
Zur Isolierung von:<br />
• Salmonellen<br />
• Shigellen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Fleischextrakt<br />
• Lactose<br />
• Natriumthiosulfat<br />
• Ammoniumeisen(III)-citrat<br />
• Natriumcitrat<br />
• Natrium<strong>des</strong>oxycholat<br />
• Neutralrot<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
LEIFSON-Agar<br />
Der Nährboden enthält so hohe Konzentrationen an Desoxycholat und Citrat,<br />
daß die grampositive Flora vollständig unterdrückt und die Coliformen mehr<br />
oder weniger stark gehemmt werden. Salmonellen wachsen ungehindert; einige<br />
Shigellen werden etwas gehemmt.<br />
Abbau von Lactose führt zu einer Säuerung in der Umgebung der betreffenden<br />
Lactose-positiven Kolonien und zu einem Farbumschlag <strong>des</strong> Indikators<br />
Neutralrot nach Rot. Kolonien Lactose-negativer Mikroorganismen sind<br />
farblos. Reduktion von Thiosulfat zu Sulfid wird als schwarzes Eisensulfid<br />
nachgewiesen.<br />
Mikroorganismus Erscheinungsbild<br />
Salmonella typhi Blaß-rosa bis farblos; nach 48h oft mit<br />
grauem Zentralpunkt<br />
Salmonella paratyphi, andere H2S-pos. Blaß-rosa bis farblos; nach 48h oft mit<br />
schwarzem Zentralpunkt<br />
Shigella sonnei Anfangs farblos später blaßrosa, 2 mm groß<br />
Shigella flexneri Wie Sh. sonnei, mit gewölbtem Zentrum<br />
Escherichia coli Gehemmtes Wachstum, rosarote Kolonien<br />
Enterobacter,<br />
Klebsiella<br />
Gehemmtes Wachstum, farblos oder rosarotes<br />
Zentrum, gewölbt, schleimig, undurchsichtig
Zur Isolierung von:<br />
• Salmonellen<br />
• Shigellen<br />
• Coliformen<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Lactose<br />
• Natriumchlorid<br />
• Gallensalzmischung<br />
• Kristallviolett<br />
• Neutralrot<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Mac-CONKEY-Agar<br />
Gallensalze und Kristallviolett hemmen weitgehend die grampositive Flora.<br />
Lactose dient zusammen mit dem pH-Indikator Neutralrot zum Nachweis <strong>des</strong><br />
Lactoseabbaues.<br />
Auswertung:<br />
Lactose-negative Kolonien sind farblos, Lactose-positive sind rot mit einem<br />
trüben Hof infolge pH-Erniedrigung ausgefallener Gallensäuren.<br />
Mikroorganismus Erscheinungsbild<br />
Salmonella, Shigella Farblos, transparent<br />
Escherichia coli Groß, rot, trüber Hof<br />
Enterobacter, Klebsiella Groß, rosa, schleimig<br />
Enterokokken, Staphylokokken Winzigklein, vereinzelt wachsend, opak
Malachitgrün-Bouillon:<br />
Zur selektiven Anreicherung von Pseudomonas aeruginosa<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Fleischextrakt<br />
• di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Malachitgrün-Lösung<br />
Wirkungsweise:<br />
Malachitgrün hemmt weitgehend die unerwünschte Begleitflora, während<br />
Pseudomonas aeruginosa praktisch ungehindert zu wachsen vermag. Der Zusatz<br />
einer geringen Menge Phosphatpuffer stabilisiert den pH der Bouillon.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: 24 bis 48 Stunden bei 37 °C.<br />
Ein positives Ergebnis liegt vor, wenn sich der beimpfte Nährboden eintrübt.<br />
Dies kann, muß aber nicht mit einer Veränderung der Farbe verbunden sein.<br />
Positive Kulturen werden weiter untersucht.
MRS-Agar (Bouillon)<br />
Zur Anreicherung, Züchtung und Isolierung von:<br />
• Lactobacillus-Species<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Fleischextrakt<br />
• Hefeextrakt<br />
• Pepton aus Casein<br />
• D(+)-Glucose<br />
• di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Tween 80<br />
• di-Ammoniumhydrogencitrat<br />
• Natriumacetat<br />
• Magnesiumsulfat<br />
• Mangansulfat<br />
• Agar-Agar (fehlt bei MRS-Bouillon)<br />
Wirkungsweise:<br />
MRS-Nährböden enthalten die für Lactobacillen als spezielle<br />
Wachstumsfaktoren bekannten Substanzen Polysorbat, Acetat, Magnesium und<br />
Mangan sowie eine reichhaltige Nährgrundlage. Können auch Pediococcus- und<br />
Leuconostoc-Species sowie andere Begleitkeime wachsen.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: bis 3 Tage bei 37 °C.<br />
Die Oberfläche der Platten darf nicht austrocknen, weil sonst an der Oberfläche<br />
die Konzentration an Acetat zunimmt, und dadurch das Wachstum der<br />
Lactobacillen gehemmt wird.<br />
Mikroorganismus Wachstum<br />
Lactobacillus acidophilus gut<br />
Lactobacillus plantarum gut<br />
Lactobacillus casei gut<br />
Lactobacillus fermentum gut<br />
Pseudomonas aeruginosa kein<br />
Bifidobacterium bifidum gut (anaerob)
MR-VP-Bouillon (Methylrot-VOGES-PROSKAUER-<br />
Bouillon):<br />
Testnährmedium zur Durchführung der Methylrotprobe und <strong>des</strong> VOGES-<br />
PROSKAUER-Tests:<br />
• Coliformen<br />
• Aerogenes-Gruppe<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Phosphatpuffer<br />
• Methylrot-Indikatorlösung<br />
• Kaliumhydroxid<br />
• Kreatin<br />
• Kupfersulfat<br />
• Ammoniak<br />
• 10% Kalilauge<br />
• Naphthol-(1)<br />
• Äthanol<br />
Wirkungsweise:<br />
Einige Bakterien verwerten Glucose unter starker Säurebildung, so daß der pH-<br />
Wert <strong>des</strong> Nährbodens unter 4,4 absinkt. Andere bilden weniger Säure, was den<br />
pH-Wert <strong>des</strong> Milieus weniger stark erniedrigt. Dieser Unterschied kann durch<br />
Methylrot sichtbar gemacht werden, welches oberhalb pH 5,1 eine gelbe Farbe<br />
aufweist und erst ab pH 4,4 eine rote Farbe annimmt.<br />
Zahlreiche Mikroorganismen bilden aus Glucose Acetoin, 2,3-Butandiol oder<br />
Diacetyl. Der Nachweis dieser Stoffwechselprodukte erfolgt durch zahlreiche<br />
Reagenzien (Kupfersulfatlösung, Methylrot usw.). Dabei werden im stark<br />
alkalischen Milieu Acetrin und 2,3-Butandiol mittels Luftsauerstoff zu Diacetyl<br />
oxidiert, welches mit dem im Kreatin enthaltenen Guanidin, mit Kupferionen,<br />
Naphthol-(1) rot gefärbte Verbindungen ergibt.<br />
Mikroorganismus Methylrot-Test VOGES-PROSKAUER<br />
Escherichia coli,<br />
Citrobacter<br />
Enterobacter aerogenes,<br />
Enterobacter cloacae<br />
Von Orange nach Rot Keine Farbreaktion<br />
Von Orange nach Gelb rot
OF-Testnährboden:<br />
Zur Erkennung <strong>des</strong> oxidativen und <strong>des</strong> fermentativen Abbaus von<br />
Kohlenhydraten:<br />
• Grammnegative Darmbakterien<br />
• Pseudomonas<br />
• Shigella<br />
• andere<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Hefeextrakt<br />
• Natriumchlorid<br />
• Di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Bromthymolblau<br />
• Kohlenhydrat<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Dem Nährboden wird jeweils ein bestimmtes Kohlenhydrat zugegeben, <strong>des</strong>sen<br />
Abbau zu Säure durch einen Farbumschlag <strong>des</strong> pH-Indikators Bromthymolblau<br />
nach Gelb angezeigt wird. Der Abbau wird sowohl unter Luftzutritt (oxidativer<br />
wie auch fermentativer Abbau möglich) als auch unter Luftabschluß (nur<br />
fermentativer Abbau) geprüft.<br />
Mikroorganismen Glucose Lactose Saccharose Gruppe<br />
aerob anaerob aerob anaerob aerob anaerob<br />
Alc.faecalis - - - - - - nicht-oxyd.Sp.<br />
nicht-ferm Sp.<br />
Ps.aeruginosa S - - - - - oxyd. Spec.<br />
Bact.anitratum S - S - - - nicht-ferm Sp.<br />
Shig.dysenteriae S S - - - - ferm Spec.<br />
Shig.sonnei S S S S - - (anaerogen)<br />
S.enteritidis SG SG - - - - ferm Spec.<br />
E.coli<br />
SG SG SG SG - - (aerogen)<br />
Nicht klass. S S S - variabel oxid. Spec.<br />
Spezies SG SG S - variabel ferm. Spec.
Phenolrot-Bouillon:<br />
Zur biochemischen Identifizierung mit der „Bunten Reihe“ unter Zugabe von<br />
Reaktionskörpern.<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Pepton aus Casein<br />
• Natriumchlorid<br />
• Phenolrot<br />
• Reaktionskörper<br />
• evtl. Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Der erfolgte Vergärung <strong>des</strong> Reaktionskörper durch die eingeimpfte Kultur<br />
äußert sich in einem Farbumschlag <strong>des</strong> Phenolrots von Rot nach Gelb. Bei<br />
Prüfung von Anaerobiern stabilisiert ein geringer Agarzusatz die Anaerobiose.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung: bis zu 14 Tage bei Optimaltemperatur (37 °C).<br />
Während der Bebrütung wird täglich auf Farbumschlag von Rot nach Gelb<br />
sowie auf Gasbildung in den DURAM-Röhrchen kontrolliert.<br />
Mikroorganismus Wachstum Farbumschlag nach Gelb Gasbildung<br />
St. aureus gut + -<br />
Enter. faecalis gut + -<br />
Klebs. pneumoniae gut + +<br />
Proteus vulgaris gut + + (schwach)<br />
Shigella flexneri gut +/- (orange) -
SABOURAUD-Nährmedien:<br />
Zur Züchtung, Isolierung und Identifizierung von pathogenen Pilzen,<br />
modifiziert nach SABOURAUD.<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Cycloheximid<br />
• Streptomycin<br />
• Chloramphenicol<br />
• Neomycin u. ä.<br />
• evtl. Glucose-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Die Nährböden ermöglichen optimales Pilzwachstum durch relativ hohe<br />
Konzentration an Kohlenhydraten. Sie enthalten keine auf die unerwünschte<br />
Begleitflora selektiv wirkenden Substanzen.<br />
Auswertung:<br />
Bebrütung bei ca. 22 °C und gegebenenfalls bei 37 °C. Dermatophyten<br />
entwickeln sich nach etwa 5 bis 20 Tagen, andere Pilze meist nach 2 bis 5<br />
Tagen.
SIMMONS-Citrat-Agar:<br />
Zur Identifizierung von Mikroorganismen:<br />
• Enterobacteriaceae<br />
• gewisser Pilze<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Ammoniumdihydrogenphosphat<br />
• di-Kaliumhydrogenphosphat<br />
• Natriumchlorid<br />
• Natriumcitrat<br />
• Magnesiumsulfat<br />
• Bromthymolblau<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Die Verwertung von Citrat führt zu einer Alkalisierung <strong>des</strong> Mediums, welche<br />
durch einen Farbumschlag <strong>des</strong> pH-Indikators Bromthymolblau nach Tiefblau<br />
angezeigt wird.<br />
Mikroorganismus Wachstum Farbumschlag nach Blau<br />
Escherichia coli kein -<br />
Shigella flexneri kein -<br />
Morganella morganii kein -<br />
Enterobacter cloacae gut +<br />
Salmonella typhimurium gut +<br />
Klebsiella pneumoniae gut +
Tergitol-7-Agar:<br />
Selektivnährboden zum Nachweis coliformer Bakterien und Frühnachweis von<br />
E. coli:<br />
• Coliforme<br />
• E. coli<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Pepton aus Fleisch<br />
• Hefeextrakt<br />
• Lactose<br />
• Natriumheptadecylsulfat<br />
• Bromthymolblau<br />
• TTC<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Natriumheptadecylsulfat (Tergitol 7) hemmt die grampositiven<br />
Begleitorganismen. Der Abbau von Lactose zu Säure wird durch einen<br />
Farbumschlag <strong>des</strong> pH-Indikators Bromthymolblau nach Gelb angezeigt.<br />
Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) wird von allen Coliformen, außer E. coli, in<br />
kurzer Zeit zu einem rotgefärbten Formazan reduziert, wodurch eine<br />
Früherkennung der gelben E. coli-Kolonien möglich ist.<br />
Mikroorganismus Wachstum Mediumumschlag<br />
Escherichia coli gut gelb<br />
Klebsiella pneumoniae gut gelb<br />
Enterobacter cloacae gut gelb<br />
Salmonella typhimurium gut blau<br />
Proteus mirabilis gut blau<br />
Bacillus cereus kein -
YGC-Agar (Yeast Extract Glucose Chloramphenicol):<br />
Selektivagar zur Keimzählung und Isolierung von Hefen und Svhimmelpilzen.<br />
Inhaltsstoffe:<br />
• Hefeextrakt<br />
• D(+)-Glucose<br />
• Chloramphenicol<br />
• Agar-Agar<br />
Wirkungsweise:<br />
Der Nährboden enthält Chloraphenicol zur Unterdrückung der bakteriellen<br />
Begleitflora. Gegenüber vergleichbaren antibiotikumhaltigen Nährböden, wie<br />
etwa OGY-Agar, hat er Vorteil, komplett autoklavierbar zu sein.<br />
Auswertung:<br />
Wird meist im Plattengußverfahren beimpft und ca. 4 Tage bei 25 °C bebrütet.<br />
Danach werden die Hefe- und Schimmelpilzkolonien ausgezählt.<br />
Mikroorganismus Wachstum<br />
Geotrichum candidum gut<br />
Penicillium spp. gut<br />
Aspergillus niger gut