Dendritische Zellen - Dr. Kübler GmbH

Dendritische Zellen
Dendritische Zellen sind die universellen Zellen der Natur für die Antigen Erkennung. Sie
kooperieren mit anderen Lymphozyten, z.B. den T-Lymphozyten. Es gibt mehrere Linien von
Dendritischen Zellen. Ein Teil der Dendritischen Zellen ist für die Immunogenität verantwortlich,
ein anderer für die Aufrechterhaltung der immunologischen Selbsttoleranz, also für die
Vermeidung einer Autoimmunität. Das Persistieren von Bakterien, Viren und Parasiten im
menschlichen oder tierischen Körper kann Autoimmunität zur Folge haben. Das System der
Dendritischen Zellen ist dann überlastet.
Sie kommen im Knochenmark ebenso vor wie in der Blutbahn, dort allerdings nur in geringen
Mengen. Sie lassen sich durch Apherese gewinnen und mit GMCSF und Interleukin-4 zur
Ausreifung bringen. Es ist schwierig sie in großen Quantitäten herzustellen. Wie wir dies beherrschen,
entnehmen Sie bitte unserem Beitrag, publiziert im Journal of Leucocyte Biology
Supl. 2, 1998 mit dem Titel „Isolation and Priming of Circulating Dendritic Cells with
Tumour-Antigenes and Heat-Shock-Proteins derived from Circulating Cancer Cells“.
Dieser Abstract wurde mit Genehmigung der Veranstalter des 5. Internationalen Symposiums
on Dendritic Cells in Fundamental and Clinical Immunology von mir und Mitarbeitern präsentiert,
sh. Schreiben von August 14, 1998 von Prof. Michael T. Lotze an meinen Mitarbeiter,
Herrn Rainer Hoffmann.
Auch bei der Gewinnung dendritischer Zellen aus der Blutbahn ist insbesondere bei bereits an
Tumoren krankenden Patienten darauf zu achten, daß die Gewinnung tumorzellfrei erfolgt, respektive
kontaminierende Tumorzellen eliminiert werden (Purging).
Wie extrem stark, aber vollkommen tolerabel die Immunantwort auch bei scheinbar aussichtslosen
Tumorerkrankungen ist, entnehmen Sie einem sog. Research Letter des Departments für
Urologie der Universität Innsbruck, A - 6020 Innsbruck.
1

Im folgenden eine Liste der Zentren, die mit immunkompetenten Zellen, zu denen übrigens
auch die Lak-Zellen gehören, durchführen.
Nach unseren Erkenntnissen ist es besonders günstig, dendritische Zellen mit Lak-Zellen zu
kombinieren.
Weitere Belege für die Strategie mit dendritischen Zellen heilen zu können, entnehmen Sie
bitte dem Letter to the Editor, publiziert in Head and Neck Cancer, Mai 1998 von Jeffrey N.
Meiers „Adjuvant immunotherapy for patients with melanoma“.
Ebenfalls praktiziert wird dieses Verfahren von Prof. Schadendorf, Mannheim, publiziert in
Deutsches Ärzteblatt 95, Heft 16, 17. April 1998 unter dem Titel „Vaccination von Melanompatienten
mit dendritischen Zellen“. Dieser möchte jedoch diese Therapie nur an Universitäten
durchgeführt wissen.
Dendritische Zellen funktionieren nur dann optimal, wenn sie außerhalb des Körpers mit den
Tumor-Antigen bekannt gemacht werden.
Verschiedene Arbeitsgruppen verwenden dazu diverse Strategien:
Man kann die Tumorzellen entweder mit synthetisch hergestellten Peptiden beladen oder vorzugsweise
mit autologen Tumorzell-Lysaten, die sich durch das für uns patentierte Verfahren
(P 42 28 389, europäisches Patent 93 113 227.8 und das amerikanische Patent 5,529,903) gewinnen
lassen.
Weiteres entnehmen Sie bitte dem zusammenfassenden Kommentar zum 5. Internationalen
Symposium über dendritische Zellen innerhalb der angewandten und der klinischen Immunologie,
Pittsburgh, Pennsylvania, USA vom 23. bis 28.09.1998.
Gerne hört man auf das Argument, es gäbe keine wissenschaftlichen Beweise für die Wirksamkeit
der adoptiven Immuntherapie. Wer dies sagt, hat keine Literaturkenntnis. Wir verweisen
in diesem Zusammenhang auf Immuntherapy in Lung Cancer, publiziert in British Journal
of Cancer, 1998 78, 282-288. Die vergleichsweise schwache und nur in Einzelfällen nachweisbare
Wirkung einer Chemotherapie wurde im gleichen Journal ebenfalls eindrucksvoll
dokumentiert.
2

Rasterelektronenmikroskopische Aufnahme einer dendritischen Zelle
Dendritische Zellen können Antigene präsentieren. Daher versucht man sie im Rahmen von
immunologischen Strategien einzusetzen.
3

5 th International
September 24-28, 1998
Pittsburgh, Pennsylvania
Symposium on
DIANE APPLEGATE
Dendritic Cells
Conference Planner
The in Hutton Fundamental
Group
2006 East Carson Street
Pittsburgh, and Clinical
PA 15203
412-481-2200 Immunology
412-481-2170 FAX
Organizing Committee
MICHAEL T. LOTZE, M.D.
University of Pgh. Cancer Inst.
W1540 Biomedical Science Twr.
University of Pittsburgh
200 Lothrop Street
Pittsburgh, PA 15213-2582
JACQUES BANCHEREAU, Ph.D.
Baylor Inst. For Immun. Research
3500 Gaston Avenue
Dallas, TX 75246-2088
RALPH M. STEINMAN, M.D.
Dept. Of Cell Physiology and Immun.
Rockefeller University
1230 York Avenue
New York, NY 10021-6399
Local Committee
LOUIS FALO, OLIVERA FINN, RONALD
JAFFEE, PENNY MOREL, CHARLES RI-
NALDO, MICHAEL SHURIN, WALTER
STORKUS, HIDEAKI TAHARA, ANGUS
THOMSON, THERESA WHITESIDE, TIMO -
THY WRIGHT
International Committee
JONATHAN AUSTYN, JACQUES BAN -
CHERAU, OLIVERA FINN, ELI GILBOA,
DERECK HART, PATRICK HOLT, AN -
TONIO LANZAVECCHIA, CHRISTIAN
LARSEN, MICHAEL LOTZE, GORDON
MACPHERSON, CHARLES MALIZEW -
SKI, POLLY MATZINGER, MURIEL MO -
SER, ANNE O’GARRA, PAUL RACZ,
PAOLA RICCIARDI- CASTAGNOLI, NI-
KOLAUS ROMANI, GEROLD SCHU -
LER, KEN SHORTMAN, RALPH STEIN -
MAN, GEORG STINGL, WALTER
STORKUS, JOHN TEW, ANGUS
THOMSON
August 14, 1998
R. Hoffman
SIEBERTSTREET 6
MUNICH
GERMANY
Dear Dr. Hoffman:
Your abstract titled, Isolation and priming of circulating dendritic cells with tumor antigens
and heat shock proteins derived from circulating cancer cells., has been accepted for poster
presentation for the 5 th international Symposium on Dendritic Cells in Fundamental and Clinical
Immunology. Please check in at the conference registration desk located on the Mezzanine
Level of the Hilton Hotel on Wednesday, September 23 after 4:00 PM to receive your
poster number and to put up your poster. The poster number information will be included in
with the first author’s registration materials. We would like you also to be present at your
particular poster session to discuss your abstract with the attendees. The poster will need to
be taken down by 5:00 PM on the day of your presentation.
The poster boards display area is 4 foot in height and 8 foot in length. Poster can only be attached
to the board by using pushpins, the pushpins will be provided for you.
Your abstract will be published as submitted in the Journal of Leucocyte Biology. If you
have not registered for the symposium and made your hotel accommodations please remember
to do so as soon as possible and by all means prior to the first day of the symposium! If
you are unable to attend the conference or if another person will be giving your presentation
please let us know as soon as possible. We have had an outstanding response to this conference
and look to an exciting menu at a particularly nice time in Pittsburgh.
If you should have any additional questions or concerns, please call the Conference Coordinator.
We certainly look forward to seeing you at the 5 th International Symposium!
Sincerely yours,
Michael T. Lotze, MD
Professor of Surgery Molecular Genetics and Biochemistry
Chief, Division of Surgical Oncology
University of Pittsburgh Medical Center
Phone: 412-383-9000
Fax: 412-624-1172
E-Mail: lotzemt@msx.upmc.edu
4

RESEARCH LETTERS
CD83 + blood dendritic cells as a
vaccine for immunotherapy of
metastatic renal-cell cancer
Lorenz Höltl, Claudia Rieser, Christine Papesh,
Reinhold Ramoner, Georg Bartsch, Martin Thurnher
Dendritic cells are the most potent stimulators of antigen-specific
immune responses including antitumour
responses. 1-3 Potent immunostimulatory dendritic cells
can be isolated from peripheral blood or cultured from
circulating precursor cells. 1-4 The safety and efficacy of
these cells is now being tested in clinical trials; data
from skin, prostate, and B-lymphocyte have already
been published. 1-3
We did a pilot study of cultured blood dendritic cells in
patients with metastatic renal-cell carcinoma 5 according
to a protocol approved by the local ethical committee.
Patients receive at least three intravenous infusions of
activated, CD83 + dendritic cells 4 simultaneously charged
with autologous tumor cell lysate and with the immunogenic
protein, keyhole-limpet haemocyanin
(KLH). 5-10x10 6 dendritic cells (microbiologically tested
for sterility) were given per infusion. Four patients
have been enrolled in the study protocol and treatment
has been completed in two.
One patient, a 54-year-old man, had five lung metastases
with diameters of up to 3 cm and a tumour volume
of more than 30 cm 3 at diagnosis as well as one skin
metastasis. The skin metastasis was resected and proven
to be renal-cell carcinoma with clear-cell histology.
Tumour mass had increased by more than 100% in this
patient between diagnosis and start of treatment (7
weeks). After two vaccinations with antigen-loaded
dendritic cells, he had delayed-type hypersensitivity
(DTH) reaction in response to subcutaneous injection
of 5 μg of KLH. Immunohistochemical analysis of the
DTH lesion revealed perivascular infiltrates predominantly
consisting of T-lymphocytes. In addition, he had
peripheral blood mononuclear cell (PBMC) proliferative
responses against KLH and, more importantly,
against cell lysates from autologous tumour and normal
kidney cells (NKC). KLH-induced proliferation could
partially be inhibited by monoclonal antibodies against
either major histocompatibility complex class I or class
II indicating the involvement of both CD4 + and CD8 +
T-lymphocytes. Measurement of cytokines produced by
5
KLH-responsive cells showed interferon-γ but not interleukin-4
production indicative of a clear-cut T-helper
(Th) type I immune response. Vaccination with antigen-loaded
dendritic cells also induced high titres of
anti-KLH antibodies (IgM and IgG) and antibodies
(IgM but not IgG) against renal-cell carcinoma and
NKC lysates although at a much lower level.
He became feverish (38•5-40 o C) within a few hours of
the second and third injection in the absence of detectable
viral or bacterial infection. The onset of fever after
the second infusion coincided with a halt in tumour
growth. The arrest of tumour growth was accompanied
by the disappearance of haemoptysis. 4 weeks after the
third vaccination, regression of all lung metastases was
observed (59%, 72%, 52%, 98%, 35%) with an overall
regression of tumour mass of 61%. Further regression
of the metastases was noted after the fourth vaccination.
A biopsy specimen taken from a regressing metastasis
showed only a few vital epithelial cells surrounded
by numerous T-lymphocytes.
Our observation confirm the capability of cultured dendritic
cells to stimulate a strong antigen-specific Th1
type immune response in a patient with metastatic
renal-cell cancer even in the presence of a large tumour
burden.
We thank A. Stenzl for critical reading of the manuscript, our
other colleagues from Deparment of Urology and H. Rogatsch
from the Institute of Pathology, and the Austrian
Science Fund for financial support (project no P11758MED
to MT)
1) Banchereau J, Steinmann RM, Dendritic cells and the
control of immunity. Nature 1998; 392: 245-52.
2) Nestle FO, Alijagic S, Gilliet M, et al. Vaccination of melanoma
patients with peptide - or tumor lysate-pulsed
dendritic cells. NatMed 1998; 4: 328-32
3) Murphy G, Tjoa B, Ragde H, Kenny G, Boynton A. Phase
I clinical trial: T-cell therapy for prostate cancer using
autologous dendritic cells pulsed with HLA-A0201-specific
peptides from prostate-specific membrane antigen.
Prostate 1996; 29: 371-80
4) Rieser C, Böck G, Klocker H, Bartsch G, Thurnher M.
Prostaglandin E2 and tumor necrosis factor alpha cooperate
to activate human dendritic cells: synergistic activation
of interleukin 12 production. J Exp Med 1997; 186:
1603-08.
5) Motzer RJ, Bander NH, Nanus DM. Renal-cell carcinoma.
N Engl J Med 1996; 335: 865-75
Department of Urology, University of Innsbruck, 6020
Innsbruck, Austria (M Thurnher)
THE LANCET • Vol 352 • October 24, 1998

DR. MED. ULRICH KÜBLER
ARZT
SIEBERTSTRASSE 6 • 81675 MÜNCHEN
TELEFON 0 89 / 47 40 15
TELEFAX 0 89 / 47 41 99
Die von uns durchgeführte Therapie mit immunkompetenten Zellen
= dendritische Zellen, LAK-Zellen, Stammzellen, wird inzwischen
von verschiedenen Kliniken durchgeführt, z.B.
in Deutschland von:
♦ von Prof. Mertelsmann in Freiburg Department für Hämatologie und Onkologie
der Albert-Ludwigs-Universität, Hugstetter Str. 55, 79106 Freiburg
♦ der Universität Regensburg
♦ Dr. med. Frank Andrä, Pathologe, Buchtstr. 4, 22087 Hamburg
Im Ausland von:
♦ Professor Rosenberg Nationale Gesunheits-Institute, Chirurgische Abteilung
Bethesda, Maryland 20892, USA
♦ der University of Southern California in San Francisco
♦ Prof. Michael Lotze, Kodirektor des Programms biologischer Therapien, University
Pittsburgh Cancer Institute, 200 Lothrop Street, Pittsburgh, PA 15213,
USA
♦ Kim Lyerly, Department of Surgery, Room 401, Duke University Durham, NC
27710, USA
♦ Prof. Anne Galey, Karmanos Cancer Institute, Wayne State University, 110 East
Warren Avenue, Detroit, MI 48201, USA
♦ Stanford University, Stanford CA 94305-5323, USA
♦ F. Marincola, National Institutes of Health, Bethesda, Maryland 20892, USA
♦ F. Nestle, Department für Dermatologie, Zürich
♦ Universität Innsbruck, Dr. Martin Thurnher, Department für Urologie, 6020
Innsbruck, Österreich
♦ Department of Medical Oncology, Cagliari, Italien
♦ David L. Urdal, Ph. D., Dendreon Corporation, 291 North Bernardo Avenue,
Mountain View, CA 94043, USA
6

AXEL SPRINGER VERLAG
REDAKTION
JOURNAL FÜR DIE FRAU
Telefax an: Absender:
Dr. Ulrich Kübler Redaktion
Siebertstr. 6 Journal für die Frau
81675 München Markus Weber
Brieffach 4510
Axel-Springer-Platz 1
20350 Hamburg
Datum: 13. Oktober 2000 Telefon: (040) 347-27932
Fax: (089) 474199 Fax: (040) 347-27205
Anzahl der Seiten (inkl.): 1 E-Mail: markus.weber.jfdf@asv.de
Sehr geehrter Herr Dr. Kübler,
anbei erhalten Sie zu Ihrer Information die vervollständigte Liste über Kliniken im
deutschsprachigen Raum, die mit dendritischen Zellen den Krebs behandeln.
Mit freundlichen Grüßen
Markus Weber
Medizin-Redakteur
JOURNAL FÜR DIE FRAU
AS

Folgende Ärzte und Kliniken forschen und/oder behandeln mit dendritischen Zellen
(Auswahl, Stand Oktober 2000):
Deutschland
PLZ-Bezirk 0:
• Gebärmutterhalskrebs (Zervixkarzinom):
Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe der Universität Jena, Bachstraße 18, 07740 Jena, Tel.
03641/939471 (Dr. Kaufmann, Dr. Kliche), Homepage: www.unijena.de/ufk/frk_info/inf9804.htm#Impfen
und www.uni-jena.de/ufk/frk_info/inf9704.htm#Papillomvieren
PLZ-Bezirk 1:
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom), Nierenzellkarzinom:
Dermatologische Klinik der Charité, Schumannstr. 20-21, 10117 Berlin, Tel. 030/28022114 (Dr.
Trefzer), Urologische Klinik der Charité, Tel. 030/28025058 (Dr. Roigas)
PLZ-Bezirk 2:
• Eierstockkrebs (Studie im Aufbau, beginnt im Laufe des Jahres 2001):
Universitäts-Frauenklinik Kiel, Michaelisstr. 16, 24105 Kiel, Tel. 0431/5972049 oder -2100 (Prof.
Dr. Jonat, privat-Dozent Dr. Arnold, Dr. Hilbert)
PLZ-Bezirk 3:
• solide Tumoren und Tochtergeschwülste:
Dr. Thomas Neßelhut, Hinterstraße 53, 37115 Duderstadt, Tel. 05527/2056, Fax 05527/73924
• Nierenzellkarzinom:
Nephrologische Klinik der Universität Göttingen, Robert-Koch-Straße 40, 37075 Göttingen, Tel.
0551/396331 (Prof. Dr. Müller), Internet: www.gwdg.de/nephro/krebs/
Urologische Klinik der Universität Göttingen, Robert-Koch-Straße 40, 37075 Göttingen, Tel.
0551/396166 /Dr. Kugler)
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom) und Non-Hodgkin-Lymphom (ab Januar 2001):
Städtisches Klinikum Braunschweig, Medizinische Klinik mit Schwerpunkt Hämatologie/Onkologie,
Celler Str. 38, 38114 Braunschweig, Tel. 0531/5953224 (Prof. Dr. Wörmann), E-Mail: b.woermann@klinikum.braunschweig.de
PLZ-Bezirk 4:
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom):
Klinik und Poliklinik für Hautkrankheiten der Universität Münster, von-Esmarch-Str. 56, 48149
Münster, Tel. 0251/8356569 (Dr. Nashan, Dr. Grabbe; nur vormittags)
PLZ-Bezirk 5:
• Dickdarmkrebs, Non-Hodgkin-Lymphom:
Klinik I für Innere Medizin der Universität Köln, Joseph-Stelzmann-Str. 9, 50924 Köln, Tel.
0221/4785933 (Prof. Dr. Diehl, Dr. Engert)
• Brustkrebs, Eierstockkrebs:
Universitätsfrauenklinik Köln, Kerpener Str. 34, 51993 Köln, Tel. 0221/4785196 (Prof. Dr. Mallmann,
Dr. Stier)
• Eierstockkrebs, Gebärmutterhalskrebs (Zervixkarzinom):
Universitätsklinik Bonn, Abteilung für Frauenheilkunde, Sigmund-Freud-Str. 25, 53105 Bonn, Tel.
0228/2875449 oder 2875450 (Dr. Hernando)

• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom):
Hautklinik der Universität Mainz, Langenbeckstr. 1, 55101 Mainz, Tel. 06131/17-7130 (Prof. Dr.
Enk)
PLZ-Bezirk 6:
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom), Blasen-, Brust- und Eierstockkrebs, Kopf- und
Hals-Tumoren, kleinzelliges und nicht kleinzelliges Bronchialkarzinom:
Krankenhaus Nordwest, II. Medizinische Klinik (Hämatologie/Onkologie), Steinbacher Hohl 2-26,
60488 Frankfurt am Main, Tel. 069/7601-3380 (Prof. Dr. Knuth, Privat-Dozentin Dr. Jäger)
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom):
Hautklinik der Goethe-Universität Frankfurt am Main, Theodor-Stern-Kai 7, 60590 Frankfurt am
Main, Tel. 069/63015311 (Prof. Dr. R. Kaufmann)
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom):
Tumorzentrum Heidelberg/Mannheim, Theodor-Kutzer-Ufer 1, 68135 Mannheim, Tel.
0621/3832126 (Prof. Dr. Schadendorf)
PLZ-Bezirk 7:
• Brustkrebs, chronisch-lymphatische Leukämie, Nierenzellkarzinom:
Medizinische Klinik der Universität Tübingen, Abteilung II: Hämatologie, Onkologie, Immunologie
und Rheumatologie, Otfried-Müller-Str. 10, 72076 Tübingen, Tel. 07071/290(Zentrale), Homepage:
www.medizin.uni-tuebingen.de/%7ewebim2/abtii/immunth.htm und: www.medizin.uni-tuebingen.de/~webim2/abtii/ifa10.htm
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom), Nierenzellkarzinom, Dickdarmkrebs:
Universitätsklinikum Freiburg, Abteilung Hämatologie/Onkologie, Hugstetter Str. 55, 79106 Freiburg,
Tel. 0761/2703405 (Prof. Dr. Mertelsmann)
PLZ-Bezirk 8:
• solide Tumoren und Tochtergeschwülste:
Dr. Ulrich Kübler, Siebertstr. 6, 81675 München, Tel. 089/474015, Fax 089/474199, Homepage:
www.kubler.com
• chronisch-lymphatische Leukämie, akute myeloische Leukämie, Brustkrebs:
Medizinische Klinik und Poliklinik III des Klinikums München-Großhadern, Marchionistr. 15,
81377 München, Tel. 089/70954241 (Prof. Dr. Kolb)
PLZ-Bezirk 9:
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom):
Dermatologische Klinik und Poliklinik der Universität Erlangen/Nürnberg, Hartmannstr. 14, 91052
Erlangen, Tel. 09131/8533661 (Prof. Dr. Schuler)
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom), Nierenzellkarzinom:
Universitätsklinikum Regensburg, Abteilung für Hämatologie und Internistische Onkologie, Franz-
Josef-Strauß-Allee 11, 93042 Regensburg, Tel. 0941/9445501 (Prof. Dr. Andreesen), Homepage:
www.uni-regensburg.de/Fakultaeten/Medizin/HaemOnko/index.htm
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom) und Aderhaut-Melanom:
Klinik und Poliklinik für Haut- und der Universität Würzburg, Josef-Schneider-Straße 2, 97080
Würzburg (Prof. Dr. Bröcker, Privat-Dozent Dr. Kämpgen), E-Mail: kaempgen-e.derma@mail.uniwuerzburg.de;
künftig an der Frauenklinik (Prof. Dr. Dietl) auch Brust- und Eierstockkrebs sowie
an der Kinderklinik (Prof. Dr. Speer) das Glioblastom (agggressiver Hirntumor)

Österreich
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom):
Universitätsklinik für Dermatologie - Abteilung für Immundermatologie, Währinger Gürtel
18-20, A-1090 Wien, Tel. 0043/1/404007700 (Prof. Dr. Stingl, Dr. Maurer, Dr. Schreiber, Dr.
Schneeberger)
• Schilddrüsenkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs:
Universitätsklinik für Chirurgie, Währinger Gürtel 18-20, A-1090 Wien, Tel.
0043/1/404005621 (Prof. Dr. Gnant, Dr. Stift)
Schweiz
• schwarzer Hautkrebs (malignes Melanom), kutanes Lymphom:
Dermatologische Klinik und Poliklinik des Universitäts-Spitals Zürich, Gloriastr. 31, CH-8091
Zürich, Tel. 0041/1/2552533 (Dr. Nestle)

LETTER TO THE EDITOR
ADJUVANT IMMUNOTHERAPY FOR PATIENTS
WITH MELANOMA
TO THE EDITOR:
I am writing regarding an article published in the most recent
issue of Head & Neck titeled „Adjuvant Immunotherapy
for patients with Melanoma: Are Patients With Melanoma
of the Head and Neck Candidates for This Therapy?“
by P. M. Shaw, M. Sivanandham, S. F. Bernik, K.
Ditaranto, and M. K. Wallack.
This is an interesting and timely article, and the authors
have done an excellent job of summarizing current developments
in this complex, rapidly moving area of clinical
and basic science research. Although immunotherapy has
been very strongly developed in a number of institutions,
it is still not routine practice in many hospitals and medical
centers. Therefore, it is important, as the authors
point out, to heighten the awareness of those caring for
patients with melanoma of the head and neck region and
to inform these caregivers that this modality is becoming
a standard of care for patients with stage III disease and
is being used in a variety of clinical trials for patients
with more advanced, recurrent, or refractory disease.
Appropriate patients for adjuvant immunotherapy trials
include patients with thick lesions (stage IIB),regional
lymph node metastases (stage III), and/or distant metastases
(stage IV). Immunologically based protocols exist for
each of these situations, and a survival benefit has been
demonstrated for those patients with stage III disease that
received adjuvant α- interferon, indicating the potential
benefit of enrollment of suitable patients in immunotherapy
clinical trials.
Some other notable areas of investigation into the immunobiology
of melanoma that are worth mentioning include
immunologic assessment of the melanoma patient with
regard to their risk and prognosis and enhancement of the
antitumor immune response through the optimization of
antigen presentation.
Studies by Dr. Jeffrey Lee at the University of Texas M.
D. Anderson Cancer Center and Drs. Joshua Rubin and
Michael Lotze at the University of Pittsburgh Cancer Institute
indicate that the natural history of melanoma and
ist response to immunotherapy may be predicted in part
by „immunophenotyping“. In their
Head Neck 20: 270, 1998
CCC 1043-3074/98/030270-01
© 1998 John Wiley & Sons, Inc
work, these authors have shown that determination of a
patient’s human leukocyte antigen allelic (HLA) expression
can provide important prognostic information. In Dr.
Lee’s work, patients who expressed the HLA class II
DQBl *0301 allele were found to have a higher frequency
of melanoma, more advanced disease, and greater likelihood
of recurrence than were controls. In addition, in
an analysis of patients with metastatic melanoma treated
with interleukin-2(IL-2), Rubin and colleagues found the
allele HLA-DQ1 to be independently associated with clinical
response to this form of immunotherapy.
Over the past several years, significant advances in tumor
immunology have been made through the extensive investigation
in the area of antigen presentation. Pioneering work
of Dr. Ralph Steinmann and his group at Rockefeller University
has shown that dendritic cells can be harvested from
peripheral blood or bone marrow and expanded ex vivo in
tissue culture. These professional antigen-presenting cells
can be pulsed with purified peptide antigens or tumor cell
lysates or transduced with antigen-encoding genes and administered
to patients as a tumor vaccine to enhance the antitumor
immune response. Furthermore, gene therapy strategies
can be used to introduce cytokine genes to dendritic
cells to further stimulate antitumor immunity. Groups of investigators
at the National Cancer Institute, led by Dr. Steven
Rosenberg, and the University of Pittsburgh Cancer Institute,
led by Dr. Michael Lotze, and other centers are
currently evaluating the safety and antitumor efficacy of
dendritic, cell-based antitumor strategies. We await their results
with great interest.
It is hoped that more patient with advanced stage Melanoma
arising in the head and neck region will be entered into immunotherapy
protocols as a result of Dr. Shaw and collegues’
article and we can learn whether head and neck melanomas
have an immunobiology that is distinct from melanomas
wich arise from other regions.
Jeffrey N. Myers MD, PhD.
Department of Head and Neck Surgery
M. D. Anderson Cancer Center
Houston, Texas
1) Shaw PM, Sivanandham M, Bernik SF, Ditaranto K, Wallack
MK. Adjuvant immunotherapy for patients with melanoma:
Are patients with melanoma of the head and neck candidates
for this therapy? Head Neck 1997;19:595-603
270 Letter to Editor HEAD & NECK May 1998

Kommentare zum 5. Internationalen Symposium über dendritische Zellen innerhalb der
angewandten und der klinischen Immunologie, Pittsburgh, Pensylvania, USA vom 23. bis
28.09.1998
Über weite Strecken des Symposiums versuchten die meisten Redner darzulegen, daß die dendritische
Zelle von zwei Zell-Linien (DC1 und DC2) repräsentiert werde, von einer sog. myeloiden
dendritischen Zelle, die vom Knochenmark gebildet werde und aus diesem heraus zirkuliere
und einer lymphoiden dendritischen Zell-Linie, die eher aus den Lymphknoten und
dem Thymus stamme.
Die beiden Zell-Linien hätten unterschiedliche Aufgaben. Die eine sei antigenerkennend, also
sorge für die Immunogenität, die andere sorge für immunologische Selbsttoleranz. Beide Aufgaben
gehören ohne Frage zu den Hauptaufgaben der dendritischen Zell-Linien. Doch ist eine
einfache Zuordnung derzeit in den meisten Fällen noch relativ schwierig. Prof. Ken Shortman
aus Melbourne, Australien ist der Meinung, daß man hinsichtlich der Typisierung der dendritischen
Zell-Linien noch am Anfang stünde und diese so heterogen seien wie die übrigen schon
bekannten T- und B-Lymphozyten.
Kommentar Dr. Kübler:
Vermutlich hat der Australier Recht und hinsichtlich der beiden Aufgaben wird die These von
Prof. Paul Matzinger, die zum internationalen Auswahl-Komitee der zugelassenen Speaker
und Poster-Abstracts gehörte, wohl wichtig werden, wie eine Zelle sich benimmt bzw. im Falle
der Beschädigung stirbt, um von einer dendritischen Zelle erkannt zu werden oder nicht.
Matziger vertritt die Thesis, daß nur apoptotisches Gewebe, das also langsam molekularen
Selbstmord begeht und nicht nekrotisch werdendes Gewebe von der dendritischen Zelle erkannt
werden kann. Auf diese Weise erklärt sie die Tatsache, daß gewisse Tumorzellen nicht
vom Immunsystem erkannt werden; dies sind jene, die wegen Beschädigung der genetischen
Software nicht mehr apoptotisch werden können, sondern nekrotisch werden oder eben unsterblich
sind. Nekrose = einfaches Absterben der Zelle im Unterschied zum langsam molekularen
Selbstmord.
Die meisten der anwesenden Forscher, die in großem Umfange dendritischen Zellen nur einsetzten
und nicht nur in kleinen Mengen für Mäuseversuche gewannen diese nach vorheriger
Stimulation des menschlichen Körpers mit GMCSF per Apherese und hielten die dendritischen
Zellen acht Tage in Kultur und primten sie über Nacht mit dem jeweils gewünschten
Antigen.
Die Zellen wurden dann i.v. oder subkutan appliziert. Prof. Rosenberg testete in großem Umfange
die Verträglichkeit dendritischer Zellen nach leukapheretischer Gewinnung dieser in
Kombination mit Interleukin-2 bei Melanoma-Patienten und fand hervorragende Verträglichkeiten
und gewisse Remissionen, sh. Speaker Abstract S 18.
Weiter interessant war die Behauptung, daß dendritische Zellen pro-angiogenetische Faktoren,
sog. Endotheline produzierten.
Darüber hinaus besitzen einige dendritische Zellen einen sog. Multilektin-Rezeptor und können
auch mit dem multi-drug-Rezeptor interagieren.

Prof. Sigal, Long Island, Medical Center in New York teilte mit, daß dendritische Zellen vom
Typ 2 Interferon Alpha produzieren könnten und auf diese Weise Zellen vor parasitärer intrazellulärer
Infektion, beispielsweise mit dem Cytomegalie - oder dem HIV-Virus schützen
könnten. Darüber hinaus spielten Sie eine Rolle bei der Abwehr leukämischer Zellen. Diese
konnten auch andere Forscher in Tierversuchen zeigen.
Eine Therapie chronisch viraler Infekte, die nicht von selbst ausheilen, mittels dendritischer
Zellen hat also eine sinnvolle Basis.
Am 24.09. fragte ich Prof. Anne Galey, Detroit, die über die Isolation dendritischer Zellen
aus peripheren Stammzell-Konzentraten nach Leukapherese von Tumorkranken berichtete,
ob sie sich der Tatsache bewußt sei, daß in Wachstumsfaktor mobilisiertem Blute
von Tumorkranken oft auch disseminierende Tumorzellen zu finden seien, die ebenso wie die
Stammzellen und dendritischen Zellen durch Leukapherese angereichert würden. Ich fragte
Sie weiter, welche Reinigungsschritte sie unternommen habe, um die Kontaminierung der
dendritischen Zellen mit Tumorzellen zu vermeiden. Sie antwortete, mein Hinweis auf die
mögliche Anreicherung von Tumorzellen in Leukapherisaten sei richtig. Sie hätte die
dendritischen Zellen markerspezifisch angereichert. Ansonsten nicht weiter auf Kontaminierung
hin geprüft.
Anwesend bei dieser Fragestellung waren Prof. Schuler und sein Oberarzt ....
Hierüber kann ich eine eidesstattliche Erklärung abgeben.
Wichtig in dem Zusammenhang ist es auch zu erwähnen, daß Prof. Galey in ihrem Vortrag
feststellte, daß 40 % der in der Blutbahn zirkulierenden und durch Leukapherese gewinnbaren
peripheren Stammzellen aus Monozyten bestünden, aus denen sich dann wiederum die dendritischen
Zellen ableiten ließen.
Insofern sind wir gespannt, was Prof. Schuler auf die ihm schriftlich gestellte Frage antwortet,
die da lautet,
halten Sie es für möglich, daß in den leukapheretisch gesammelten Zell-Konzentraten, die
Herrn H. gegeben wurden, sich dendritische Zellen befunden haben.
Bemerkenswert war auch der Vortrag von H. Spitz, Amsterdam, der ausführte, daß sich die
peripheren Stammzellen des Blutes und Knochenmarkes in natürliche Killerzellen, d.h. lymphokinaktivierbare
Killerzellen und dendritische Zellen zu differenzieren vermögen.
In sehr vielen Arbeiten und Vorträgen über individuelle klinische Heilversuche und in Poster
Abstracts wurde dargestellt, daß diese erwähnten Zellen Immunantworten gegen Tumorzellen
auszulösen vermögen.
Auf Englisch lautete meine Frage an Anne Galey:

I have a question related to the purity and naivity of your dendritic cells which you isolated
via leukapheresis from tumour patients as it is known that growth factor mobilised blood often
contains disseminating tumour cells which are consequently enriched by leukapheresis?
Antwort Galey:
That’s possible.
2. Frage Dr. Kübler:
So did you look for contaminating tumour cells in your dendritic cell concentrates?
Die Antwort war ausweichend und lautete:
We did a selection of the dendritic cells by the cd40-marker.
Von besonderem Interesse und beispielhaft für die gute klinische Wirkung ist die per Poster
auf diesem Kongreß präsentierte Arbeit von Martin Thurnher und Claudia Rieser vom Department
für Urologie der Universität Innsbruck über die Behandlung des therapieresistenten
klinisch weit fortgeschrittenen Adeno-Karzinomes mit Hilfe dendritischer Zellen geprimt
mit autologen Tumorzellen des Patienten. Die dendritischen Zellen werden durch eine
Blutabnahme von 40-100 ml aus den Monozyten gewonnen. Man generiert aus 200 Mio. Monozyten
eine entsprechende Zahl reifer dendritischer Zellen und gibt diese nach dem Priming
intravenös. Bereits nach der zweiten Applikation hatte ein Patient, der wegen der Metastasen
bereits Blut hustete, eine objektivierbare Remission.
Die Wissenschaftler signalisierten ihre prinzipielle Bereitschaft auch deutsche Patienten mit
Adenokarzinom zu behandeln, sofern Tumorgewebe oder Tumorzellen vorlägen. Zum Primen
reichen kleinste Mengen aus, die beispielsweise in 96 Wellplatten unterzubringen sind.
Doch Vorsicht, hier gibt es eine Zusammenarbeit mit der Firma Medarex Inc. in Annandale,
New Jersey, 08801 USA.
Der Mitarbeiter heißt Jashwant M. Deo.
Diese Gruppe arbeitet auch über Human Monocyte-Derived Dendritic Cells which produced
macrophage colonies stimulating factor:
inhencement of CFMS expression by interleukin-10.
Geplant ist die Ausdehnung dieser Arbeit auf therapieresistente Prostatakarzinome.
Herr Thuner war mir auch insofern sympathisch als er mir in folgendem zustimmte:
Diejenigen, die die modernen Erkenntnisse der Immunologie auf dem Gebiete der dendritischen
Zellen in der klinischen Anwendung haben, dürfen diese nur per Poster vortragen. Während
jene, die rein über theoretische Dinge forschen und spekulieren, die Plenarvorträge hielten.

Er meinte, dazu könne man sich seine Gedanken machen.
Frau Anne Gayle erklärte übrigens noch, daß insbesondere jene dendritischen Patientenzellen
die patienteneigenen Tumorzellen gut lysierten, die mit c-erb/B2-Peptiden geprimt worden
sind.
Prof. Rosenberg primt bei seinen Melanomazellen mit Mage und Mart, während mir die österreichische
Arbeitsgruppe hierzu sagte, daß ihnen die individuellen multiplen autologen Peptide
als wirksamer erscheinen.
Ganz besonders bemerkenswert dann auch die Arbeiten der Firma Immunex, Seattle, die mit
den Exosomen MHC-Peptide tragenden lysosomalen Partikeln der dendritischen Zellen ebenfalls
von Patienten oder Mäusen isoliert mit bereits 5 Mikrogramm lang anhaltende CTL-gestützte
Tumor-Remissionen erzeugte.
Die gleiche Vorgehensweise ist bei bakteriellen und viralen Infekten geplant oder wird bereits
insgeheim durchgeführt.
Kurzform des Posters L12 von Claudia Rieser und Martin Thurner
Titel:
„Differential effects of prostaglandin E 2 und dendritic cell development materials culture of
human dc peripheral blood monocytes purified by centrifugal elutriation where cultured in
RPMI supplemented with 2 % AB, 1000 U/GMCSF und 500 U/IL4“
Wissenschaftliche Arbeiten: Claudia Rieser und Martin Thunher in 1997, Journal of Experimental
Medicine 186:1603-1608, Prostaglandin E 2 und Tumornekrosefaktor Alpha Cooperate
to activate human dendritic cells.
Poster highlights:
Vitamin D 3 (1,25 OH) 2 D3 reagiert mit Dendritien und beeinflußt deren Differenzierung.
Das Gleiche gilt für Stickoxide. Diese reagieren mit dem TNF-Rezeptor und regulieren diese,
was nicht weiter überraschend ist, da NO ja ein Genregulator ist.
Vom Tumor stammende Faktoren können Apoptose entwickeln, die dendritische Zellen induzieren
Abstract C 1 von Kiertscher, Silvia
UCLA Schule für Medizin Los Angeles, Kalifornia

Eine japanische Arbeit Poster B 69 von Akiyama aus dem Department für Rheumatologie der
Saitama Medical School Japan sagt aus,
daß bei Patienten mit Sjögren Syndrom die Funktion der peripheren dendritischen Zellen gestört
ist.
Nach Ansicht des Professors leiden die Patienten bei dieser autoimmunen Krankheit an einer
primären Lymphozyteninfiltration der Speichel- und Tränendrüsen. Darüber hinaus an einer
Vielzahl immunologischer Störungen.
Besonders interessant auch Poster-Abstract B 67 von Prof. Drexhage, Rotterdam, Universitäts-Hospital
über den Einfluß von Hormonen auf die Bildung von DC1 und DC2. Schilddrüsenhormon
T3 beschleunigt die Umwandlung von Monozyten in dendritische Zellen.
Sodann das Thymus-Hormon THEA, empfiehlt also Monozyten mit T3 und anderen Hormonen
über Nacht bei 37 Grad Celsius zu inkubieren.
Heute am 26.09.1998 um 13.03 Uhr hatte ich ein Gespräch mit Prof. Schuler in Pittsburgh
während der 5. Internationalen Konferenz über dendritische Zellen im Beisein von Hans
Schultz, Präsident der Spectral Inc. USA.
Ich stellte mich Herrn Prof. Schuler als wissenschaftlicher Chefberater der Firma vor und verwies
auf das Buch über dendritische Zellen, publiziert im Verlag Academy Press, das seit gestern
auf dem Weltmarkt ist und welches wir käuflich erworben haben.
Darin stellt in Kapitel 27, das von Prof. Schuler stammt, dieser Verfahren zur Isolation und
Propagieren dendritischer Zellen vor. Insbesondere verweist er für Zwecke der klinischen Anwendung
auf sein inzwischen nochmals optimiertes Verfahren dendritische Zellen aus leukapheretischen
Buffy-Coats zu gewinnen, um diese dendritischen Zellen dann, ohne fötales
Kälberserum in Zellkultur weiter zu vermehren. Ich sagte Prof. Schuler, daß mir der Präsident
der Company, Mr. Schultz folgenden Auftrag gegeben habe:
Ihn zu fragen, ob er
1. interessiert sei, dieses Verfahren zur Nutzung durch uns in den USA zu lizenzieren.
2. Sollte ich mit ihm im Auftrag von Herrn Schultz diskutieren, ob wir bei der Anwendung
dieses Verfahrens FDA-Probleme bekämen und zwar aus folgendem Grunde:
Die FDA schreibt jenen, die immunkompetente Zellen wie Lak-Zellen oder dendritische Zellen
leukapheretisch aus der Blutbahn gewinnen vor, nach kontaminierenden Tumorzellen im
Leukapheresematerial zu schauen.
Daraufhin sagt Schuler:
Ja, das sei ihm bekannt. Er habe dies auch bei Melanoma-Patienten getan, aber nur wenige
Zellen gefunden.
Daraufhin fragten wir ihn, wie er das Monitoring durchgeführt habe.
Daraufhin sagte er mit PCR.

Daraufhin kommentierte Dr. Kübler, das verwundere ihn nicht, denn die PCR-Methode fände
nur in 40 % aller Fälle, wo Melanoma-Zellen leukapherisat seien, solche Zellen, besser sei da
die von der FDA vorgeschriebene Methode der leukapheretischen Anreicherung dieser Zellen
plus nachfolgender immunzytochemischer Detektierung. Dem stimmt er zu.
Der Präsident der Company, Mr. Schultz:
I made it a point, I said very few things and listened most of the time but I asked toward the
end „So you are all using leuk-apheresis for the purpose of isolating cells from the bloodstream“,
and he nodded his head and said, „sorry, yes“.
Prof. Schuler erklärte Hans Schultz und mir noch, daß er in Germany Melanoma-Patienten
Stadium IV mit wenigstens drei viszeralen Metastasierungsorten nach erfolgreicher Radio-
Chemo-Therapie mit leukapheretisch gesammelten dendritischen Zellen behandele.
Auf Bitten von Hans Schultz signierte Herr Prof. Schuler das Buch „Dendritic Cells“. Auf der
2. Innenseite schrieb er - Good luck für leukapheresis approval. G. Schuler“ und gab seine E-
Mail-Adresse an der Universität Erlangen an.
Für weitere Fragen stünde er zur Verfügung.
Seine Aussage ist von besonderer Bedeutung, weil er ja auch zum Internationalen Komitee derer
gehörten, die dieses Symposium über dendritische Zellen veranstalteten. Gem. der Anlage
ist zu sehen, daß nach der Prüfung des Komitee das von mir dort präsentierte Poster von Hoffmann,
Kübler und Wustrow mit dem Titel „Isolation and Priming of circulating dendritic cells
with tumor antigens and heat-shock-proteins derived from circulating cancer cells“ akzeptiert
wurde.
Die Existenz dieser Zellen in der Blutbahn und die Möglichkeit diese leukapheretisch zu isolieren,
hat Prof. Schuler nunmehr Aug in Aug anerkannt.
Last but not least wäre noch zu erwähnen, daß ich Herrn Professor sagen konnte, daß seine
und meine Meinung, daß in leukapheretisch gewonnenen Buffy-Coats bei Tumorkranken Tumorzellen
nachweisbar seien und diese sowohl durch positive als auch durch negative Selektion
herausgereinigt werden müssen, bevor man die immunkompetenten Zellen des Buffy-Coates
einem Patienten wieder zurückgeben könne, sei auch von Prof. Marpara vor wenigen Tagen
auf dem 2. Workshop über die minimale residuale Tumorerkrankung, ausgerichtet von
Prof. Riehtmüller in Berlin vertreten worden, der zeigte, daß bei Weglassen nur eines Reinigungsschrittes
in sog. Nacktmäusen, das sind Mäuse ohne ausreichende Thymusfunktion
durch solche Transplantate dann Tumore ausgelöst würden. Dem stimmte er ebenfalls zu.
Präsident Clinton hat in einer Ansprache heute am 26.09.1998 in Washington verlangt, daß
bis zum Jahr 2000 die Forschung alle Mittel einsetzt, um endlich eine Früherkennungsmethode
zu finden.
Vizepräsident Gore unterstützte ihn in diesem Ansinnen.

Präsident Clinton setzte noch hinzu, daß es sein Eindruck sei, daß Krebs um so behandelbarer
sei, je früher er erkannt werde.
Weitere Beiträge waren von
P. Ricciardi aus Mailand:
„Bakterien sind die effizientesten Stimulatoren dendritischer Zellen“
Eine bakterielle Stimulation dieser rettet dendritische Zellen vor der Apoptose. Er bewahrt
dendritische Zellen vor der Apoptose.
Kommentar Dr. Kübler:
Die dendritischen Zellen sind die kleinen Verwandten der Makrophagen
Kommentar von B. Walker, Boston:
In Botswana sind 42 % aller gebährenden Frauen HIV-positiv. Eine möglicherweise auf dendritischen
Zellen basierende Vaccine sei deswegen dringend erforderlich.
Einige wie E.J. Boa versuchen der Fülle der Tumor-Antigene, die nötig sind, um dendritische
Zellen zu primen oder immunkompetent zu machen, dadurch auszuweichen, daß sie notfalls
aus einer einzigen bioptisch gewonnenen oder disseminierenden Tumorzelle die mRNA, die
für die Tumor-Antigene kodiert, isolieren und mit dieser die dendritischen Zellen zu beladen
versuchen. Sie versuchen dann entsprechende Immunantworten auszulösen.
Sodann zum eigentlich klinischen Teil, also den Referaten von klinischer Bedeutung:
Zuerst Prof. Michael Lotze, Kodirektor des Programmes biologischer Therapien an der Universität
Pittsburgh.
Er behandelt Patienten mit metastasiertem malignem Melanom mit geprimten dendritischen
Zellen. Zunächst erhielten 28 Patienten in einem randomisierten Protokoll lediglich das Tyrosinase-Peptid
ohne dendritische Zellen, was selbstverständlich keinerlei immunologische Antwort
auslöste, vielmehr ein Fortschreiten der Erkrankung. Die Ethik dieser Vorgehensweise
ist mir nicht ganz klar. So etwas kann man in Mäusen ausprobieren. Man sollte das nicht mit
Menschen tun, aber das ist meine Meinung.
Sodann isolierte aus 60 ml Blut dendritische Zellen, pulste diese mit der soeben erwähnten
Tyrosinase und gab dem Patienten pro Vaccine 1 Mio. dendritischer Zellen zurück, und zwar
10 % intrakutan, den Rest intravenös.
Hierbei gab es Erfolge im Einzelfall. So deshalb entschloß man sich soviel dendritische Zellen
wie möglich zu generieren und führt dazu in Zukunft eine vierstündige Leukapherese durch,
mit der man Monozyten aus der Blutbahn isoliert und aus diesen dann in vitro dendritische
Zellen erzeugt, die man entsprechend primt. Darüber gibt es bisher noch keine Daten.
Sodann Kim Verly von der Duke University.

Man focusiert sich dort hauptsächlich auf das Adeno-Karzinom der Brust und des Kolons und
möchte die Tumor-Antigene dieser Tumore mit RNA-Techniken durch Mikrodisektion von
Tumoren isolieren und dann eine möglichst große Zahl von dendritischen Zellen des Patienten
per Leukapherese gewinnen.
Dazu hat man ein eigenes Gebäude errichtet unmittelbar auf dem klinischen Campus, wo man
unter GMP-Bedingungen diese dendritischen Zellen leukapheretisch gewinnt, da man sich auf
ein jahrelanges Testprogramm einrichten möchte.
Sodann F. Nestle, Zürich
Maligne Melanoma-Patienten behandelnd, und zwar Stadium IV. Keine Nebenwirkungen gesehen
habend, lediglich leichte Vitiligo, was aber auch nicht Garantie für eine Remission war
und die Injektion dendritischer Zellen, die er aus 100 ml Blut gewinnt, in den Lymphknoten
zu injizieren bevorzugt, da der Patient dies spüren könne und jetzt leichter zu kontrollieren
sei.
Er sah bei 64 so vaccinierten Patienten in 25 % der Fälle ein Ansprechen und glaubt, daß die
Vorgehensweise auch bei hoher Tumorlast hoffnungsvoll ist.
Dann Jeff Weber von der Medizinschule der Universität Los Angeles in Kooperation mit der
Firma Imunek spricht sich dafür aus, bei malignen Melanoma-Patienten und anderen soviel
dendritische Zellen wie möglich zu erzeugen, was er direkt aus dem Labor heraus nach einem
von ihm selbst erarbeiteten Standardprotokoll ohne jedwede Nebenwirkungen mit einem gewissen
Erfolg betreibt. Er beklagte, daß ihm die Peptide, die ihm bisher von Regierungsstellen
zur Verfügung gestellt wurden, zunächst nach erfolgreichen Erstversuchen vorenthalten wurden,
so daß er jetzt auf ein neues Peptid umstellen muß.
F. Marincola von den Medicinal Insitutes of Health - Initialen F.M. - sh. hierzu auch Speaker-
Abstract F 18, ein Mitarbeiter von Prof. Rosenberg
Behandelt metastasierte maligne Melanomata, Kontrollen der Immunantwort erfolgen vor und
nach der Impfung auf MART-Antigen sah man keine Antwort auf Glykoproteine. Man ist bemüht
soviele dendritische Zellen wie möglich per Leukapherese zu sammeln und gibt diese
hauptsächlich intravenös zurück. Man sah keinerlei giftige Nebenwirkungen und eine Antwort
von einem auf sieben Patienten. Das heißt stable disease oder Schrumpfen des Tumors.
In einem bemerkenswerten Vortrag über die Apoptose von Nina Bhardwaj legte sie dar, daß
die Apoptose sich in drei Stadien untergliedert in
Initiation,
Commitment and
Execusion.
Die Commitment-Phase wird von BCL2 pH-abhängig reguliert. Über diesen Mechanismus
wird der Chlorid-Ionen-Einstrom gesteuert. Ab einem bestimmten Punkte werden dann Enzy-

me freigesetzt (Caspasen). In diesen Caspasen, so der Vorredner Douglas Green aus San Diego,
können virale Bestandteile kooperieren, d.h., diese Viren können in die Apoptose eingreifen.
Die eigentliche Signalvermittlung findet über den P-fas-Rezeptor statt, welche Rolle dabei
FAB spielt, war umstritten. Letzten Endes herrschte in der Zelle eine Balance zwischen BCL2
und BAX Oncoproteinen, die wiederum unter einer gewissen Kontrolle von p53 stehen.
Bezug der dendritischen Zellen zum humoralen Immunsystem (den B-Zellen):
Interleukin-2-abhängig stimulieren dendritische Zellen B-Zell-Antworten, beispielsweise die
IgM-Synthese.
Kevin Bacon, La Jolla, führte aus, daß die Mikrokliazelle und die Astrozyten des zentralen
Nervensystems antigenpräsentierende Zellen sind, also dendritische Zellen.
Kommentar Dr. Kübler:
Somit kann die multiple Sklerose als eine autoimmune Fehlreaktion der dendritischen Zellen,
also der Mikroklia des Gehirnes interpretiert werden und es muß unter therapeutischem
Aspekt gefragt werden, was deren Apoptose auslösen könnte.
In diesem Zusammenhang wird auf Poster L1 verwiesen, eine Arbeit von Salih Al Harbi von
der Kuwait-University, immuntherapeutisches Labor, P.O.-Box 24929 Kuwait 13110, Fax:
9655318454, der bei verschiedensten autoimmunen Krankheiten mit einer Impfung aus dendritischen
Zellen von gesunden Spendern eine Desensibilisierung erzielen konnte.
Beachtenswert dann Poster F5 von Salgaler und Murphy in Vorbereitung einer Phase-1-Studie
zur Behandlung des hormonrefraktären Prostatakrebses mit dendritischer PSNA-beladener
Zell-Vaccine. Auf Frage von Dr. Kübler an Herrn Salgaler, wie er die dendritischen Zellen gewinne,
wurde gesagt, entweder über Leukapherese oder aus Vollblut.
Ich fragte weiter, ob das Blut mobilisiert sei mit Coloniestimulierenden Faktoren oder nicht,
Antwort: nein.
Ich fragte weiter, ob gleichwohl auf disseminierende PSA-positive Zellen hin untersucht würde,
bevor der Patient die Vaccine zurückerhalte. Antwort: nein.
Kommentar Dr. Kübler:
Dies überrasche mich, da die FDA in vergleichbaren Studien bei Brustkrebs ein Monitoring
kontaminierender Tumorzellen verlangt habe.
Antwort Salgaler:
Da die Studie noch nicht genehmigt sei, könne das noch eintreten.
Vergleiche hierzu auch S16 „Administration of autologous dendritic cells .... with prostate
specific membran antigen peptides to patients with prostate cancer“ von Gerald P. Murphy,
M.D., Seattle, Washington,

Es handelt sich dabei um das gleiche Thema, wir wissen also, daß Leukapheresen durchgeführt
werden. Wir wissen also, daß Leukapheresen durchgeführt werden. Wir wissen also, daß
Tumorzellen gesammelt werden.
In diesem Zusammenhang ist auch eine dendritische Zell-Vaccine ein Fusionsprodukt zwischen
dendritischen Zellen und körpereigenen Brustkrebszellen der Harvard Medical School,
Poster F16, von Interesse.
Einen ähnlichen Ansatz verfolgt das Max-Delbrück-Zentrum, Berlin, Poster F9:
Hier wurden Patienten mit transduzierten dendritischen Zellen gefahrlos vacciniert. Beim
transduzierten Gen handelte es sich um MUC1.
Poster F14 „Association of heat-shock-proteins 17 with isolated population of peripheral
blood mononuclear cells“ bestätigt unseren Ansatz, dendritische Zellen mit Heat-Shock-Proteinen
aus Tumorzellen zu primen.
Als ziemlich unfair empfand ich die Tatsache, daß vor dem Meeting ein Sondermeeting stattfand
(am Mittwoch vormittag), in dem die Big-Shots sich über die Interaktion zwischen p53
und dendritischen Zellen unterhielten. Beispielsweise David P. Carbone trug vor, daß mit adenoviral
transduzierten dendritischen Zellen (transduziertes Gen wild-type des p53) zumindest
in Mäusen starke Immunantworten über CTL-Zellen sowohl gegen p53 w als auch gegen p53
m positive Tumore ausgelöst werden konnte.
Diese Arbeit wurde präsentiert zusammen mit Introgen-Therapeutics Incorp. Houston. Ich darf
an dieser Stelle ganz deutlich darauf hinweisen, daß die dendritischen Zellen den Tumor infiltrieren
können.
Ebenso bemerkenswert die Arbeit von Chang et al, San Francisco, Abstract A26, der ausführte,
daß man aus dem Blute von Patienten mit malignem Melanom dendritische Zellen gewinnen
kann.
Ausgangsprodukt waren PBMC’s. Er ließ offen, ob diese apheretisch gewonnen wurden oder
nicht. Ich nehme dies an.
Weitere Beiträge waren von
P. Ricciardi aus Mailand:
„Bakterien sind die effizientesten Stimulatoren dendritischer Zellen“
Eine bakterielle Stimulation dieser rettet dendritische Zellen vor der Apoptose. Er bewahrt
dendritische Zellen vor der Apoptose.
Kommentar Dr. Kübler:
Die dendritischen Zellen sind die kleinen Verwandten der Makrophagen
Kommentar von B. Walker, Boston:

In Bodswana sind 42 % aller gebährenden Frauen HIV-positiv. Eine möglicherweise auf dendritischen
Zellen basierende Vaccine sei deswegen dringend erforderlich.
Einige wie E.J. Boa versuchen der Fülle der Tumor-Antigene, die nötig sind, um dendritische
Zellen zu primen oder immunkompetent zu machen, dadurch auszuweichen, daß sie notfalls
aus einer einzigen bioptisch gewonnenen oder disseminierenden Tumorzelle die mRNA, die
für die Tumor-Antigene kodiert, isolieren und mit dieser die dendritischen Zellen zu beladen
versuchen. Sie versuchen dann entsprechende Immunantworten auszulösen.
Sodann zum eigentlich klinischen Teil, also den Referaten von klinischer Bedeutung:
Zuerst Prof. Michael Lotze, Kodirektor des Programmes biologischer Therapien an der Universität
Pittsburgh.
Er behandelt Patienten mit metastasiertem malignem Melanom mit geprimten dendritischen
Zellen. Zunächst erhielten 28 Patienten in einem randomisierten Protokoll lediglich das Tyrosinase-Peptid
ohne dendritische Zellen, was selbstverständlich keinerlei immunologische Antwort
auslöste, vielmehr ein Fortschreiten der Erkrankung. Die Ethik dieser Vorgehensweise
ist mir nicht ganz klar. So etwas kann man in Mäusen ausprobieren. Man sollte das nicht mit
Menschen tun, aber das ist meine Meinung.
Sodann isolierte aus 60 ml Blut dendritische Zellen, pulste diese mit der soeben erwähnten
Tyrosinase und gab dem Patienten pro Vaccine 1 Mio. dendritischer Zellen zurück, und zwar
10 % intrakutan, den Rest intravenös.
Hierbei gab es Erfolge im Einzelfall. So deshalb entschloß man sich soviel dendritische Zellen
wie möglich zu generieren und führt dazu in Zukunft eine vierstündige Leukapherese durch,
mit der man Monozyten aus der Blutbahn isoliert und aus diesen dann in vitro dendritische
Zellen erzeugt, die man entsprechend primt. Darüber gibt es bisher noch keine Daten.
Sodann Kim Yerly von der Duke University.
Man focusiert sich dort hauptsächlich auf das Adeno-Karzinom der Brust und des Kolons und
möchte die Tumor-Antigene dieser Tumore mit RNA-Techniken durch Mikrodisektion von
Tumoren isolieren und dann eine möglichst große Zahl von dendritischen Zellen des Patienten
per Leukapherese gewinnen.
Dazu hat man ein eigenes Gebäude errichtet unmittelbar auf dem klinischen Kampus, wo man
unter GMP-Bedingungen diese dendritischen Zellen leukapheretisch gewinnt, da man sich auf
ein jahrelanges Testprogramm einrichten möchte.
Sodann F. Nestle, Zürich
Maligne Melanoma-Patienten behandelnd, und zwar Stadium IV. Keine Nebenwirkungen gesehen
habend, lediglich leichte Vitiligo, was aber auch nicht Garantie für eine Remission war
und die Injektion dendritischer Zellen, die er aus 100 ml Blut gewinnt, in den Lymphknoten

zu injizieren bevorzugt, da der Patient dies spüren könne und jetzt leichter zu kontrollieren
sei.
Er sah bei 64 so vaccinierten Patienten in 25 % der Fälle ein Ansprechen und glaubt, daß die
Vorgehensweise auch bei hoher Tumorlast hoffnungsvoll ist.
Dann Jeff Weber von der Medizinschule der Universität Los Angeles in Kooperation mit der
Firma Imunek spricht sich dafür aus, bei malignen Melanoma-Patienten und anderen soviel
dendritische Zellen wie möglich zu erzeugen, was er direkt aus dem Labor heraus nach einem
von ihm selbst erarbeiteten Standardprotokoll ohne jedwede Nebenwirkungen mit einem gewissen
Erfolg betreibt. Er beklagte, daß ihm die Peptide, die ihm bisher von Regierungsstellen
zur Verfügung gestellt wurden, zunächst nach erfolgreichen Erstversuchen vorenthalten wurden,
so daß er jetzt auf ein neues Peptid umstellen muß.
F. Marincola von den Medicinal Insitutes of Health - Initialen F.M. - sh. hierzu auch Speaker-
Abstract F 18, ein Mitarbeiter von Prof. Rosenberg
Behandelt metastasierte maligne Melanomata, Kontrollen der Immunantwort erfolgen vor und
nach der Impfung auf MART-Antigen sah man keine Antwort auf Glykoproteine. Man ist bemüht
soviele dendritische Zellen wie möglich per Leukapherese zu sammeln und gibt diese
hauptsächlich intravenös zurück. Man sah keinerlei giftige Nebenwirkungen und eine Antwort
von einem auf sieben Patienten. Das heißt stable disease oder Schrumpfen des Tumors.

British Journal of cancer (1998) 78(3), 282-288
© 1998 Cancer Research Campaign
Editorial
Immunotheraphy in lung cancer
M Al-Moundhri 1 , M O’Brien 1 and BE Souberbielle 1,2
1 The Royal Marsden Hospital, Downs Road, Sutton, Surrey SM2 5PT; 2 Molecular Medicine, King’s College School of Medicine, 123 Coldharbour Lane,
London SE5 5NU, UK
Summary More research and new treatment options are needed in all stages of lung cancer. To this end immunotherapy
needs a revival in view of recent improved technologies and greater understanding of the underlying biology.
In this review we discuss mechanisms of tumor immunotherapy, non-specific, specific and adoptive, with particular reference
to a direct therapeutic action on all subtypes of lung cancer.
Keywords: immuntherapy; lung cancer; BCG; vaccine
CURRENT TREATMENTS IN LUNG CANCER
Lung cancer remains the leading cause of cancer death
in Western countries (Boring et al, 1993) with more
than half a million new cases diagnosed annually
worldwide, including 40 000 in the UK. About 80 % of
these tumours are non-small-cell histological type, including
squamous (40%), adeno - (40%), and large-cell
carcinoma (20%). The 5-year survival of patients with
non-small-cell lung cancer (NSCLC) is stage related
and remains poor across all stages at about 12%. The
treatment of choice for NSCLC is surgery, but only
20% of tumours are suitable for potentially curative
surgery (Hoffman et al, 1980). Small-cell lung cancer
accounts for the remaining 20% of lung cancer and, despite
displaying initial chemosensitivity, cure is achieved
in only a minority of patient.
How can survival be improved in lung cancer? Different
strategies have been employed to outcome. Despite
the suggested benefit of adjuvant chemotherapy
(NSCLC Group, 1995), the role of adjuvant therapy in
operable disease awaits confirmation in large adjuvant
trials. The value of preoperative (neoadjuvant) chemotherapy
in NSCLC stage I, II and IIIa lung cancer is
currently the focus of large randomized trials, including
the MRC LU22 national study. The interest in this approach
comes from the encouraging positive effect of
this treatment in two randomized studies (Rosell et al,
1994; Roth et al, 1994), which have shown improved
survival in patients treated with chemotherapy before
surgery compared with surgery in resectable stage IIIA
disease. In unresectable stage III disease there is accummulating
evidence to support the use of chemotherapy
before local treatment (radiotherapy or surgery),
with trials showing a small survival benefit with the
combined approach and improved quality of life compared
with local treatment alone (Sause et al, Cullen et
al, 1997). For advanced
patients, chemotherapy in stage IIIb and IV disease
reduces the risk of death by 27% with a survival benefit
of 10% at 1 year, compared with best supportive care
Received January 1998
Accepted 16 February 1998
(NSCLC Group, 1995).
For small-cell lung cancer (SCLC) there is some optimism
that more patients with limited disease will be cured
with dose-intensive chemotherapy treatment (Thatcher
et al, 1997). This approach is being investigated in
randomized trials. However, the problem of maintaining
a chemotherapy-induced remission remains and
needs innovative approaches.
As in all types of lung cancer current treatment options
are limited; there is thus a need to explore new treatments
and with improved technology look again at older
treatments such as immunotherapy. This systemic
anti-tumour approach with low toxicity could form part
of a panoply of future treatments in lung cancer with
chemotherapy used against micrometastases, radiotherapy
or surgery against local disease and possibly immunotherapy
for maintenance of remissions.
TUMOR IMMUNOLOGY
Cancer cells differ from normal cells both qualitatively
and quantitatively. These differences are due to abnormal
glycosylation of surface proteins, expression of viral,
mutated or overexpressed oncogene products or
differentiation antigens (Boon, 1997; Weynants, 1997).
Both the innate (natural killer (NK) cells, macrophages
and granulocytes), and the specific arms (T and B cells)
of the immune system can recognize these tumour-specific
or - associated antigens (TS/AA). NK cells that
detect abnormal glycosylated proteins are efficient at
clearing low tumour load, especially blood-borne micrometastases,
and kill cells that express a low level of
HLA class I molecules. On the other hand, T cells only
recognize and are stimulated by a high level of HLA
molecules. They interact via their T-cell receptor with a
specific peptide antigen presented on a groove of an
HLA molecules. This is the first signal delivered to T
cells. For T-cell activation to take place, a second signal
has to be delivered via lymphokines such as interleukin
(IL-2) or an interaction between the T-cell molecules
(e.g. CD28) and co-stimulatory molecules (B7.1)
on the antigen
presenting cell
(APC)
(Schwartz et al,
Corespondence to: M O’Brien, The Lung Unit, Royal Marsden Hospital, Down Road, Sutton, Surrey, SM2 5PT, UK

1992). Usually, these signals are delivered via professional
APC - like dendritic cells.
The fact that tumour cells are different from normal
cells is not enough for efficient tumour control and, du-
ring the past few years, progress has been made in understanding
the immunological escape mechanisms of
tumour growth. T cells, which have the capacity of immunological
memory (their response is amplified at
Table 1 Randomized adjuvant BCG in NSCLC
Reference Trial design No. of patients Comments
Jansen (1978) Intradermal 54 Improved DFI in BCG group
Pouillart (1978) Intradermal 55 Improved survival (stage I)
Edwards (1979) Subdermal 500 No benefit
Miller (1979) Oral 308 No benefit
McKneally (1981) Intrapleural 169 Improved survival (stage I)
Mountain (1981) Intrapleural 473 No benefit
Millar (1982) Intradermal 92 No benefit
Ludwig Group (1986) Intrapleural 407 Improved DFI in BCG group. No survival difference
a second antigen encounter), are pivotal for any specific
immune response either because they mediate the
killing of the tumour cells as in the case of cytotoxic T
lympho-cytes (CTLs) or because they secrete cytokines,
as both T helper and CTLs do , and regulate NK and
CTL activation and antibody produktion by B lymphocytes.
T-cell anergy to tumour cells could occur from
the absence of tumour-specific antigens, defective antigen
presentation or lack of co-stimulatory signals (Pardoll
et al, 1993). Lack of tumour cell killing by CTLs
cold also occur if the recognition of the tumour cells by
CTLs is impossible because of the lack of antigen presentation
by HLA molecules. Tumour cells can probably
down-regulate the expression of such molecules
(Doyle et al, 1985; Korkolopoulou et al, 1996). Tumours
also secrete immunosuppressive factors that may
have a negative effect on T cells (Yoshino et al, 1992),
e.g. SCLC cells secrete transforming growth factor beta
(TGF)-β (Fischer et al, 1994) and NSCLC cells secrete
a type-2 cytokine pattern (see below) (Huang et al,
1995).
Two main approaches are used to target TS/AA for tumour
killing. The first is active immunotherapy, which
aims to boost the anti tumour immune response of the
patient, using for example a therapeutic tumour vaccine.
The second is passive immunotherapy, which bypasses
the patient’s immune system by administration
of tumour-specific antibodies or T cells.
The two approaches are not mutually exclusive and can
be synergistic. In addition, a complex network of cytokines
and cells regulate the immune response and any
immune therapy that can influence any part of it (antigen
presentation, T-cell or antibody response, cytokine
produktion) could in theory have an effect on tumour
growth. Cytokines are arbitrarily divided into type 1
[IL-2, interferon gamma (IFN-γ), IL-l2], which promotes
T-cell response, and type 2 (IL-4, 4, 6 and 10),
which promotes antibody response (Romagnani et al,
1997). It is thought that tilting the balance towards a
type I response is beneficial in the context of solid tumours
but this rule is too simple to fit all situations.
Therefore, non-specific immunomodulators that could
modify the quality and the intensity of an immune response
could help boost an antitumour effect.
© Cancer Research Campaign 1998
IMMUNOTHERAPY IN LUNG CANCER
NON-specific immunostimulants
There have been several randomized clinical trials
using the bacille Calmette-Guérin (BCG) vaccination in
NSCLC with various administration schedules (Table
1). These trials reported mixed but mainly negative results.
Although the initial trials by McKneally et al
(1981) showed a statistical survival benefit for the vaccinated
arm, subsequent trials failed to show any survival
advantage. Similarly in SCLC, BCG vaccination
following four cycles of chemotherapy showed no benefit
in terms of complete response, disease-free survival
or survival (Maurer et al, 1985). We are at present
testing in lung cancer patients the use of Mycobacterium
vaccae (MV), a heat-killed preparation devoid of
toxicity, with a particular interest in combining this approach
with chemotherapy - the rationale being that
specific tumour activity may be seen after release of tumour
antigens by chemotherapy combined with nonspecific
immunostimulation by MV (O’Brien et al,
1997):
The Ludwig Lung Cancer Group (1985) studied the administration
of intrapleural Corynebacterium parvum in
a randomized phase III trial of 475 patients with respectable
lung cancer. The treated group had a significant
decrease in survival. Levamisole is used in association
with 5-fluorouracil (5-FU) in colon cancer but
appears, overall, to make the outcome worse in lung
cancer. It has been administered in different settings as
shown in Table 2.
British Journal of Cancer (1998) 78(3), 282-288

IL-2 used alone or in combination with other cytokines
or lymphokine-activated killer (LAK) cells in phase II
trials in NSCLC has incluced some responses (Table
3). In the Eastern Co-operative Oncology group trials,
IL-2 was used alone or with IFN-β; only 3 out of 73 patients
showed a response, with a median survival of
35.6 weeks and no added advantage with IFN-β (Kriegel
et al, 1991). Lissoni et al (1994) randomized 60 patients
with advanced cancer to receive low-dose IL-2
and melatonin (pineal immunomodulating hormone) or
cisplatin and etoposide chemotherapy. Although the response
rates were not significantly different (24% and
19% respectively), the mean progression-free period
and percentage survival were significantly different at 1
year in favour of the immunotherapy arm.
The use of IFN alone has not demonstrated activity
against NSCLC, but synergy has been proposed between
interferon and chemotherapy (Bowman et al,
1990). Phase II studies of interferon and chemotherapy
showed response rates comparable with chemotherapy
alone with acceptable toxicity (Table 4). Phase III trials
using IFN alone or IFN and chemotherapy in NSCLC
are shown in Table 5. These studies showed no statistically
significant difference in time to progression or
survival.
Randomized trials have examined the use of recombinant
IFN-α as maintenance therapy following
response to chemotherapy in SCLC (Table 6). All these
studies showed no survival improvement for the IFN
arm except for one study by Mattson et al (1992). In
this study, 237 patients were randomized following
chemotherapy and radiotherapy treatment to no treatment
or maintenance treatment with IFN-α. A statistically
significant difference in long-term survival and
survival in limited stage disease was found in favour of
the immunotherapy group. In conclusion, the concept
of merely boosting the immune system without presentation
of antigens is probably the reason for the overall
lack of success of these approaches.
SPECIFIC IMMUNOTHERAPY
Giving lung tumour-specific or - associated antigens
(TS/Aas) has been tested using either irradiated autologous
or allogenic tumour cells, tumour lysates and soluble
tumour antigens, usually with an immunological adjuvant
such as BCG. Studies of active specific immunization
trials in lung cancer are shown in Table 7. In
1974 Hollinshead et al (1987) reported isolation of
lung cancer tumour-associated antigen (TAA). A phase
II study (Stewart et al, 1976) randomized patients with
resectable NSCLC to receive either soluble TAA in
complete Freund’s adjuvant (CFA), TAA and methotrexate
or no treatment post operatively. There
Table 2 Results of Levamisole trials in treatment NSCLC
Investigator Study design No. of patients Results
Study Group for Bronchogenic Operable NSCLC ± levamisole 111 Trend towards improved sur-
Carcinoma (1975)
vival with levamisole
Amery (1978) Levamisole administered pre - and post -
211 Trend towards improved sur-
operatively
vival with levamisole
Wright (1978) Operable NSCLC; intrapleural BCG ± levamisole
100 No benefit
Anthony (1979) As above 318 significantly poorer survival
Pines (1980) Inoperable squamous cell lung cancer;
BCG and levamisole following RT
50 No benefit
Davis (1982) Advanced NSCLC chemotherapy ± levamisole
381 No benefit
Holmes (1985) Operable NSCLC; surgery ± CT or BCG
130 Decreased survival with le-
and levamisole
vamisole
Herskovic (1988) Stage II and III, surgery + RT ± levamisole 74 No benefit
Perez (1988) Inoperable NSCLC; radiation ± levamisole 227 Decreased survival with levamisole
Table 3 IL-2 in NSCLC
Reference Agents used No. of Patients Results
West (1987) IL-2 continuous infusion 5 1PR
Rosenberg (1989) IL-2, IL-2/LAK or IL-2/INF 7 NR
Yang (1990) IL-2/TNF 16 1PR
Jansen (1992) IL-2/IFN-α 11 NR
Scudeletti (1993) IL-2 intralesional and systemic 8 2PR
Lissoni (1993) IL-2/melatonin 9 2PR
Ardizzoni (1994) IL-2 continuous infusion 11 NR
IFN-α, recombinant alpha interferon; IL-2, interleukin 2; TNF, tumour necrosis factor; LAK, lymphokine activated kil
ler cell; PR, partial response; NR, no response
© Cancer Research Campaign 1998 British Journal of Cancer (1998) 78(3), 282-288

Table 4 Phase II, interferon and chemotherapy in NSCLC
Reference IFN/type/dose/schedule CTX sequence Patient no Response/comments
Bowman (1990) IFN-α
3 MU TIW or
5 MU TIW
Cisplatinum 60 Response rate 26%
Madans (1993) IFN-α
9 x 106 MU TIW
Carboplatin 44 Response rate 37%
Garaci (1995) IFN-α Cisplatin, etoposide
56 Overall response rate 43%,
and thymosin alpha
two CR
Kataja (1995) IFN-α
9 x 106 units TIW
Cisplatin 100 Overall response rate 33%
Silva (1996) IFN-α
3 x 106 Cisplatin, mitomycin
35 Overall response rate 51 %
unit D1-D7 C, vindesine
comparable with chemotherapy
TIW, three times a week; IFN-α, interferon alpha; MU, million unit.
was a significant improvement in survival (78% at 5
years) in favour of immunotherapy or chemoimmunotherapy
over no treatment. Hollinshead et al (1987) reported
cumulative experiences of 5-year survivals of
patients entered into a phase II trial and two phase III
trials of specific TAA immunotherapy. Five - year survival
difference in 234 stage I and stage II NSCLC was
69% for active immunotherapy group
vs 49% for control (P=0.0002). following on, a randomized
trial using the same TAA was conducted. A total
of 86 patients with stage I and II squamous cell carcinoma
were randomized to no treatment, CFA alone or
CFA + TAA with a survival of 34.5%, 53.6% and 75%
respectively at 5 years. The median survival was significantly
different in favour of the immunotherapy
groups (38 months, 71 months, 106 months respectively)
(Takita et al, 1991).
Table 5 Randomized trials of interferon in NSCLC
Reference Design No. of patients Results
Ardizzoni (1993) Cisplatinum/epirubicin/cyclophosphamide 182 Increase response rate but no improvement
or CEP + IFN-α
In DFS or OS
Ciriaco (1995) Preoperative (mitomycin, vinblastine, cisplatinum)
alone or cisplatinum, etoposide,
alpha thymosin and IFN-α
110 No significant difference in DFS or OS
Ardizzoni (1995) Mitomycin C, ifosfamide, cisplatinum alone
(MIP) or MIP and IFN-α
93 No significant difference in DFS or OS
Salvati (1996) Ifosfamide alone or ifosfamide followed
by thymosin alpha and low dose IFN-α
22 No improvement in DFS or OS
DFS, disease-free survival; OS, overall survival.
Table 6 Activity of IFN as maintenance in small-cell lung cancer
Reference Design No. of patients Results
Mattson (1992) CT + RT → CR or PR randomize to natu- 237 Statistically significant difference in longral
IFN-α or observation
term survival and survival in limited group
disease in favour of immunotherapy group
Jett (1994) Chemotherapy + RT → randomized to ob- 120 Time to progression and survival inferior in
servation, or IFN
patients treated with IFN
Tummarello (1994) Chemotherapy → PR or CR → randomi- 75 No difference in response duration or surzed
to IFN-α or observation
vival
Kelly (1995) Limited stage SCLC, following CR rando- 171 No prolongation of response duration or
mized to observation or IFN-α
survival
CR, complete response; CT, chemotherapy; IFN, interferon; RT, radiotherapy; r, recombinant.
More recently, Carbone and his colleagues (Gabrilvich
et al, 1997) have vaccinated lung cancer patients with
peptides encoding mutated ras and p53 oncogene products.
They are using the dendritic cell vaccination approach:
dendritic cells are purified from cancer patients
loaded with the specific peptide antigens and reinfused
intravenously to the patient. The rational behind this
approach is that dendritic cells are professional APCs,
which express high levels of co-stimulatory molecules
and HLA molecules and so an efficient T stimulation
should follow after dendritic cell vaccination.
© Cancer Research Campaign 1998 British Journal of Cancer (1998) 78(3), 282-288

Table 7 Randomized active vaccination trial in NSCLC
Reference Trial design No. of patients Comments
Stewart (1976) Control, TAA, TAA and MTX 58 Improved DFI and overall survival
Perlin (1980) No Rx, BCG alone, allogenic tumour
cells + BCG
51 Trend in favour of immunotherapy
Souter (1981) No Rx vs intradermal injection of autologous
tumour cells and C. parvum
80 No survival difference
Stack (1982) No Rx vs Autologous tumour cells and
BCG
83 No survival difference
Hollinshead (1987) No Rx, CFA alone, CFA + TAA 243 Survival advantage for immunotherapy
arm (see text)
Price-Evans (1987) No Rx vs irradiated autologous cells 120 No survival difference
and BCG
Takita (1991 No Rx, CFA alone TAA + CFA 85 Survival advantage in immunotherapy
group
TAA, tumor-associated antigen; MTX, methotrexate; CFA, complete Freund’s adjuvant.
ADOPTIVE IMMUNOTHERAPY
Rosenberg et al (1986), pioneered the use of tumour-infiltrating
lymphocytes (TILs) and showed that adoptively
transferred TILs exerted anti-tumour activity in
patients with cancer. The ability of IL-2 to expand these
cells in vitro made such an approach feasible. The
initial few small trials that used adoptive immunotherapy
alone or in combination with IL-2 in advanced lung
cancer, demonstrated the feasibility of such an approach
(Bernstein et al, 1989; Kradin et al, 1989; Faradji
et al, 1991). A more recent study (Kimura et al,
1996) used adoptive immunotherapy in 82 patients following
curative resection. The patients were randomized
to receive IL-2 and LAKs following two courses of
combination chemotherapy (cisplatin, vindesine and
mitomycin) or chemotherapy alone. The 5- and 7-year
survival rates of the chemo-immunotherapy group and
chemotherapy group were 58.2% and 31.5% respectively
in stage II and IIIA patients. This difference was
statistically significant (P=0.0038). In patients undergoing
non-curative resection, Kimura et al, (1995) reported
a survival benefit for the immunotherapy arm
(IL-2 and LAK) following randomization of 105 patients
to chemotherapy, radiotherapy or immunotherapy.
The 7-year survival rate was greater in the immunotherapy
group compared with the chemotherapy and chemo-radiotherapy
groups (39.1%, 12.7%, P

mour cells (Freeman et al, 1997). Recently, this approach
has been used in the treatment of pleural mesothelioma
in rats. HSV-TK expressing adenoviral
vectors were injected directly intrapleurally with
significant reduction in tumour burden (Elshami et
al, 1996). Human studies are on-going (Treat et al,
1996).
Another approach is to use anti-idiotypic antibodies.
These antibodies are raised against monoclonal antibodies
recognizing cellsurface tumour antigen and
have a similar shape to the tumour antigen. This approach
is currently the focus of an EORTC trial
(SILVA study) that uses an anti-idiotype BEC2
(anti-idiotype to ganglioside GD3) combined with
BCG adjuvant in SCLC. A pilot study (Grant et al,
1996) using BEC2/BCG in patients with SCLC showed
minimal toxicity, with median survival not reached
after 15 month, which compares favourably
with historic controls.
CONCLUSION
Overall outcome from standard treatments for lung
cancer remains poor. Immunotherapy could have an
important role to play in the treatment of lung cancer.
Active specific vaccination is safe to administer
and available data suggest beneficial effect in the adjuvant
setting; recent advances in tumour antigen
characterization and gene therapy will aid the design
of more effective vaccines.
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3rd International Conference: The Adjuvant Therapy of Malignant Melanoma
London, 19.-20. März 1999
Epidemiologie und prognostische Faktoren
+ therapeutische Vorgehensweise
Aamdal, Norwegen: Detection of occult Tumorcells in BM and PB.
Tumorzellen kommen im PB vor, Chronologie der Metastasierung verläuft über Invasion,
Intravasation, Anhalten der Zellen, Extravasation, Wanderung ins Gewebe, Neovascularisation,
Angiogenese. Die Mehrheit der Zellen wird jedoch im Gefäßsystem absterben,
durch Immunantwort und Begebenheiten in den Mikrogefäßen. Die Anzahl der Zellen im
Blut korreliert jedoch nicht mit dem Krankheitsverlauf. Die Zahl der zirkulierenden Zellen
ist nicht gleichzusetzen mit dem Potential zur Metastasierung.
Nachweis der Zellen Über Flowcytometrie, Immunomagnetische Beats, RT-PCR für Tyrosinase-mRNA.
Tyrosinase-RT-PCR gilt als Marker für Melanomazellen im periphären
Blut.
Problematisch ist Bewertung der Ergebnisse: Können Zellfragmente und absterbende Zellen
auch zu (falsch) positiven Ergebnissen führen? Zum Teil führt eine Abschirmung der
Zellen zu falsch negativen Ergebnissen.
Biologie und Immunologie
Parmiani, Italien: T-Cell recognition of melanoma antigenen und Tumorprogression:
Maligne Melanome spezifische Antigene sind MAGE, BAGE, GAGE, CDK4. Weitere
können Enzyme in der Melaninproduktion (GP100, Tyrosinase, PRAME) sein.
PBL stimuliert mit autologen TuC oder Peptiden.
Hersey, Australien: Induction of Apoptosis in Melanoma Zellen mittels TRIAL (TNF related
apoptosis inducing ligand)
Das Signal über TNF wirkt auf unterschiedliche Rezeptoren und ist Teil des Lyseweges der
NK-Zellen. Ein Decay-R inhibiert das Apoptose-Signal, ebenso NFkappaB. Resistenzen
gegenüber TRAIL ist noch nicht verstanden.
Tumorzellen stammen aus Linien, gezählt wurden sie in Kultur (Anzahl von Kolonien).
Tulley, UK: c-myc Antisens Therapie
c-myc spielt eine Rolle beim Melanomawachstum. Der Spiegel soll gesenkt werden. Dazu
wird eine mRNA-Sonde mit dem Antisens der c-myc-mRNA injeziert, die mit der mRNA
hybridisiert und die Translation unterbindet. Stark erniedrigte Spiegel von c-myc. Im Tiermodell
wurden hervorragende Ergebnisse erzielt.
Dummer, Schweiz: Spezifische Immunotherapie
DC werden als "professionelle" APC eingesetzt und mit Lysaten von soliden Tumoren geprimt.
Isolierung, Priming, Reinfusion. MMC werden Über IL-2 (iv / sc) stimuliert.

Macaulay, UK: Gentherapie
Ziel ist der Ersatz von defekten oder fehlenden Regulatorproteinen durch einfügen einer intakten
Genkopie. Als Vektoren dienen Plamide oder Viren.
Böni, Schweiz: DC wurden mit Peptid-Cocktails von Tumorlysaten gepulst und erscheinen gute
Resultate zu erzielen.
Tulley, Australien: c-myc korreliert mit schlechterer Prognose bei uveal oder cutanous Tumoren.
91 von 93 Tumoren wiesen ein erhöhtes c-myc auf.
Punt, Niederlande: Immunisierung mit Peptide-pulsed DC
In Tieren wurde die APC-Kapazität gut getestet. Im Menschen ergeben sich zum Teil Probleme,
da die APC-Kapazität geringer ist oder daß eine Toleranz gegenüber der DC entsteht.
2 bis 32 x 10E6 Zellen iv injeziert. Leukapherese, Dichtegradient.
Probleme bei der Kulturmethode, der Rate der Anwendungen, Häufigkeit und Dauer sowie
die Anzahl der DC. Auf kontaminierende Tumorzellen wird nicht getestet.
Als mögliche Vaccinen gelten Peptide, Tumorlysate, RNA oder DNA.
Vorteile: es gibt keine (oder nur leichte) Nebenwirkungen, spezifische CTL Antwort.
Legha, USA: Hochdosistherapie von IL-2 (3 Mio IU/m2/24h) helfen bei renalen CA gut, nicht
bei MM. In Kombination mit IFNa sind gute Remissionen zu erzielen. Eine sequentielle
Anwendung erscheint dabei am günstigsten.
Laufende Studien
Hersey, Australien: Tumor-Vaccine wurden hergestellt aus den Lysaten von soliden Tumoren
Nach deren Lyse wurde das Sediment eines UZ-Schrittes als Vaccine eingesetzt. T-Helfer
Zellen werden stimuliert. In der Studien haben Behandelte besser abgeschnitten als die
Kontrollgruppe.
Die Nebeneffekte sind sehr gering.
CTL werden durch VMCL (Vaccina Melanoma Cell Lysate) stimuliert, es kommt zu einer
"guten Antwort", das Overall-Überleben wird verlängert.
Hausschild, Deutschland: IL-2 und IFNa2b:
Induktion anhaltender Immunaktivierung. Nebenwirkungen nicht zu unterschätzen: Erkältungartig,
Ermüden, thyroidale Fehlfunktion. Aber das overall- und das disease-free-survuival
wird nicht signifikant verbessert.
Spitler, USA: GMCSF als Aktivator von Makrophagen und DC in vitro gezeigt, ebenso deren tumorizide
Aktivität. DC unterscheiden normale Zellen von TuC, die spezifisch abgetötet
werden. Das Überleben steigt an, wobei der Unterschied zur Kontrollgruppe mit der Zeit
nachläßt.
Die Dosierung von 125 g/m2/d sc. Milde Erythrema als Nebeneffekt.
Berd, USA: Hapten-Modifizierung von Tumorvaccinen
Ein solider Tumor wird mittels Collagenase, DNAse und Cryokonservierung lysiert. Antigene
bleiben unspezifiziert. Dinitrophenol und Dinittrofluorobenzene als Reagenzien. Es
kommt zu inflammatorischen Effekten, die die metastasierende Krankheit beeinflußen. Als
Kontrollgruppe dienten Studien in der Literatur. Problematisch ist, daß viel Gewebe nötig

ist (3ccm); eine Expansion der Tumorzellen in Kultur wurde nicht durchgeführt, um Artefakte
zu vermeiden.
Tumormarker
MacKie, UK: S-100 ist ein 21 kDa Protein der Calmodulin-Familie, es kommt überwiegend in
Gliea-Zellen, sonst nur geringen Mengen vor. Der Nachweis über Lumineszenz-ELISA ergibt
einen normalen Serumspiegel von 0.2 µg/l.
Es hat eine Bedeutung in Klasse IIIb Erkrankung und ist besserer Test als andere Tests, wie
z. B. der Leberfunktionstest; Es gilt bei erhöhten Spiegeln als Warnsignal.
Hersey, Australien: Utility of PCR
aus 2ml PB wird die mRNA isoliert und eine Tyrosinase-RT-PCR durchgeführt, sowie der
Serumspiegel von S-100b bestimmt. Zirkulierende Melanoma-Zellen werden gefunden!
Problem gefunden bei OP, mehr Zellen nach OP im PB als davor, ist OP die Ursache?!
PCR korreliert mit Klasse, nicht jedoch S-100. PCR ist sensitiver, S-100 Test spezifischer,
es wurden bei der S-100 Bestimmung weniger falsch positive Ergebnisse gemessen, die bei
der PCR bis zu 16% erreichen konnten. Die Kombination von beiden wird derzeit getestet.
Retsas, UK: Serumspiegel von S-100b gilt als Anzeichen für Aktivität bei MM; die Studie zeigt,
daß S-100 scheinbar mit der Klasse korreliert; S-100b kann als Monitor der Erkrankung
gelten.
Martenson, Schweden: S-100b kommt im CNS vor und interagiert mit p-53. In Kombination mit
Melanoma-Inhibierende-Aktivität (MIA) korreliert es mit der Klasse. Sind beide negativ ist
die Prognose günstig. Ab einem Serumspiegel von 0,1ug/l gilt die Konzentration als grenzwertig.
Eine sichere Aussage ist in Phasen II und III möglich.
Vernon, UK: Hyperthermie
Ziel ist die lokale Überhitzung von Gewebe auf 43¡C für 1h. Dieses führt zu einer direkten
Schädigung durch Hitze, genutzt wird die eingeschränkten Reperaturfähigkeit der TuC.
Das rührt zu einer Radiosensibilisierung des Gewebes. Verbesserte lokale Überhitzung des
Tu-Gewebe durch eine veränderte Fließeigenschaften des Blutes, die das Tumorgewebe
stärker erwärmen läßt.
HT zumeist gut ertragen. Nebenwirkungen: Blasen, Erythrema, Pigmentierung. Bisher ist
die Qualität der Erhitzung schlecht, es werden nur Temperaturen von 39-42¡C erreicht.
Buzaid, Brasilien: CT und BioCT
Mit einer Gabe von IL-2 und IFN werden hohe Remissionsraten erzielt, von bis zu 10% in
Langzeitstudien. In Kombination mit Chemotherapien, IL-2 mit cis-Pt, erscheint die Sensibilität
auf CT erhöht zu sein, besonders, wenn die BioCT direkt im Anschluß erfolgt.
Der Funktionsweg verläuft anscheinend über das Stickstoffoxyd (NO), welches mit dem
DNA-Reparatursystem interagiert.

Dendritic cell mediated immunization
Madhav Dhodapkar, MD; Ralph Steinman, MD and Nina
Bhardwaj, MD, PhD
We are studying the ability of dendritic cells to generate immune responses in humans. Dendritic
cells are immune cells specialized to initiate immune responses. We have developed new methods
that allow us to generate large numbers of these cells in the laboratory from a relatively
small blood sample. These cells are then injected back as a vaccine, into the same individual to
generate immune response to defined antigens.
Current clinical Studies
Healthy volunteers
HIV infected individuals
Malignant melanoma
We are seeking participants on 2 IRB approved protocols for generating immune responses in
normal healthy volunteers and in HIV infected individuals. These studies involve 7-8 visits to
the Rockefeller University GCRC outpatient facility over a 6-month period for blood sampling
for immune measurements and up to 2 hospitalizations (generally overnight) at Rockefeller University
Hospital, for dendritic cell injection. These studies are done at no cost to the participant
and include a stipend of up to $25.00 for each outpatient visit and $250.00 for each hospitalization.
We are also recruiting patients with resected stage III melanoma for participation in an IRB approved
dendritic cell mediated immunization study. This study involves monitoring melanoma
specific immunity at baseline and then up to 4 injections with dendritic cell vaccine carrying melanoma
antigens. Patients must not have received any prior chemo or biological therapy for melanoma.
We are also interested in patients at other stages of disease, with or without prior therapy,
for the purpose of monitoring immunity. The study is performed at no direct cost to the participant
and involve visits to the Rockefeller University outpatient facility and may involve hospitalization
(generally overnight) for vaccination.
Studies involving individuals with Hodgkin's disease are also being planned.
For additional questions regarding participation, please contact:
Coraleen Fosella,
RNP
212-327-8448

Development of human dendritic cells and their function in transplantation
and malignancy
Because dendritic cells are important to the onset of T cell-mediated immune responses, we are
interested in how these cells can be utilized to enhance immunity in human disease. The hematopoietic
progenitor for human dendritic cells has been identified, and under defined cytokine conditions
this CD34+ progenitor can yield pure dendritic cell colonies. The conditions under which
dendritic cells expand and differentiate in suspension cultures in vitro from CD34+ precursors
and their intermediates have also been defined.
We have begun to use developing dendritic cells to generate antigen-specific, MHC-resticted cytolytic
T cell responses. Different methods of loading dendritic cells with antigen are being studied,
including gene transduction. These experiments are pertinent to the generation of anti-viral
and anti-tumor immunity. Based on these in vitro studies, we plan to utilize dendritic cells themselves
as in vivo immunogens to enhance T cell-mediated immunity in human disease and pathologic
conditions.
Additional interests are the ontogeny of dendritic cells and their influence on the reactivity patterns
of developing T cells in vivo in human allogeneic bone marrow transplant chimeras. These
issues are important in understanding the interactions between graft and host, and the reconstitution
of normal immune function.

Die Erfindung Dr. Kübler’s betrifft ein Verfahren, mit dem aus
dem Blutstrom eines Individuums dort zirkulierende transformierte
Zellen (Tumorzellen) isoliert und kultiviert werden können.
Aus diesen Tumorzellen werden dann wiederum sogenannte Tumor-Antigene
isoliert. Mit diesen Tumor-Antigenen kann man
dann andere im Blut enthaltene Zellen, sogenannte dendritische
Zellen, beladen. Diese dendritischen Zellen haben die Aufgabe,
krankhafte Zellen ausfindig zu machen, damit diese dann von der
körpereigenen Immunabwehr eliminiert werden können. Nachdem
sich allerdings die Tumorzellen recht gut vor den dendritischen
Zellen tarnen, ist es erforderlich, diese immunologisch zu trainieren
(primen), das heißt sie mit den gesuchten „feindlichen“ Tumorzellen
vertraut zu machen. Dies geschieht durch das Beladen
mit den Tumor-Antigenen. Die so gewonnenen trainierten dendritischen
Zellen können vermehrt und nach Reinigung von den Tumorzellen
(dieses Reinigen nennt man Purging) in therapeutisch
angemessenen Konzentrationen dem Körper wieder zugeführt
werden, damit sie den Kampf gegen die Tumorzellen aufnehmen
können ...

10 Ärzte Zeitung MEDIZIN Nr. 14 / Dienstag, 26. Januar 1999
Immuntherapie bei Tumoren / Breit anwendbare Konzepte sind noch nicht in Sicht, aber es gibt erste Erfolge
Wie Krebs mit körpereigenen Waffen geschlagen wird
Von Ruth Ney
Neu-Isenburg. Den Krebs mit
körpereigenen Waffen - einer
Immuntherapie - zu zerstören,
ist ein Ziel auf das Wissenschaftler
wie auch Patienten
große Hoffnungen setzen.
Noch ist man von einem breit
anwendbaren Konzept weit
entfernt. Allerdings wird immer
wieder über erste ermutigende
therapeutische Erfolge
berichtet. Prinzipiell werden
drei verschiedene Konzepte für
eine Immuntherapie untersucht:
mit Zytokinen, mit monoklonalen
Antikörpern oder
mit einer T-Zell-gestützten Tumorvakzine.
Wie weit ist die
Forschung also tatsächlich, und
wie funktionieren die verschiedenen
Methoden?
Eine wesentliche Erkenntnis
für die moderne Immuntherapie
in der Onkologie war, daß
Tumorzellen zwar „artfremde“
Antigene präsentieren, das
menschliche Immunsystem
aber - im Gegensatz zur Situation
bei einer Infektion mit
Bakterien und Vieren - nicht
unbedingt darauf reagiert.
Wann also reagiert das
menschliche Abwehrsystem
auf Tumorzellen?
Als wesentlicher Faktor wurde
erkannt, daß es nicht ausreicht,
daß Tumorzellen einfach Antigene
auf ihrer Oberfläche präsentieren.
T-Zellen können mit
den Antigenen nämlich nur in-
teragieren, wenn diese in Form
von Proteinbruchstücken, eingebettet
in die Bindungsgruben
von MHC-Molekülen, angeboten
werden. Denn die MHC-
Moleküle (Major Histocompatibility
Complex), die Gewebeunverträglichkeitantigene,
sind
wesentlicher Bestandteil eines
für die Immunabwehr wichtigen
Regulationssystems. Und
noch ein zweites Signal muß
für eine effektive Immunantwort
ausgelöst werden: sogenannte
akzessorische Moleküle
(CD80 und CD86) müssen mit
einem speziellen T-Zell-Rezeptor
reagieren, wie Professor
Antonio Pezzutto von der Robert-Rössle-Klinik
in Berlin erläutert
(Internist 1998, 11,
1131).
Bislang wurden schon etliche
Tumorantigene identifiziert
Bislang sind bereits etliche Antigene
von Tumorzellen identifiziert
worden, die meisten bei
Patienten mit Melanomen. Als
eines der ersten Tumorantigene
wurde zum Beispiel MAGE-1
(Melanom-assoziiertes Gen)
nachgewiesen. Außerdem wurden
inzwischen noch andere
Genfamilien wie BAGE,
GAGE und RAGE identifiziert,
deren Genprodukte auf
verschiedenen soliden Tumoren
wie Blasen-, Lungen oder
Mammakarzinomen exprimiert
werden. Zudem unterscheidet
man noch vier weitere Anti-
gengruppen, etwa überexprimierte
Antigene, zu denen p53
und Her2-neu zählen, sowie
Onkoproteine, die von Tumorassoziierten
Viren wie Epstein-
Barr- oder Humane Papillom-
Viren kodiert werden.
Ziel einer Immuntherapie ist
zum Beispiel, ausreichend Antigenmaterial
für das Abwehrsystem
zu liefern und die Antigenpräsentation
zu verbessern.
„Da bei Krebskranken sehr unterschiedliche
Tumorantigene
vorliegen können, ist bei jedem
Patienten zunächst ein individuelles
Monitoring nötig. Nur
so ist eine maßgeschneiderte
Therapie möglich“, so Privatdozentin
Dr. Barbara Seliger.
Ihre Arbeitsgruppe an der Universität
Mainz beschäftigt sich
seit einigen Jahren mit der Erforschung
T-Zell-gestützter
Impfstoffe, die die unzureichende
Immunantwort der zytotoxischen
T-Zellen ankurbeln
sollen.
Um dies zu erreichen, gibt es
verschiedene Möglichkeiten,
wie Seliger auf einer Veranstaltung
der Deutschen Krebshilfe
in Bad Neuenahr erläutert
hat. Zum einen wird versucht,
durch Injektion kleiner, definierter
Peptidbruchstücke des
Antigens, des ganzen Antigen-
Peptids oder - das gilt als besonders
vielversprechend -
durch Injektion der DNA, die
das Antigen kodiert, die T-Zel-

len gegen den Tumor zu aktivieren.
Eine zweite Option ist,
entnommene Tumorzellen genetisch
so zu manipulieren,
daß sie besser für die T-Zellen
erkennbar werden. Manche
dieser Zellen sezernieren zudem
Zytokine. Nach Re-Injektion
soll sich der Abwehreffekt
dann auch auf andere Tumorzellen
auswirken. Als effizient
hat sich auch erwiesen, Peptide
direkt in antigenpräsentierende
Zellen, vor allem dendritische
Zellen einzubringen. Dieser
Weg der Immunisierung bietet
nach Ansicht einiger Wissenschaftler
besonderes gute Aussichten
auf klinische Erfolge.
Klinische Erfahrung beruht
meist auf Pilotstudien
Seliger warnt jedoch vor zu
großer Euphorie. Mit den verschiedenen
Verfahren einer T-
Zell-gestützten Impfung gebe
es zwar einige positive Ergebnisse,
etwa bei Melanompatienten.
„Meist hat es sich dabei
jedoch um Pilotstudien gehandelt,
und die Patienten waren
bereits im fortgeschrittenen Erkrankungsstadium“,
räumt die
Wissenschaftlerin ein. Nach ihrer
Einschätzung wird es daher
noch einige Jahre dauern, bis
dieses Immunisierungs-Konzept
Bedeutung für die Praxis
erlangt.
Tumorantigene können jedoch
nicht nur durch die zellgebundenen
Antigen-spezifischen
Rezeptoren der T-Zellen erkannt
werden, sondern auch
durch lösliche Antikörper, die
direkt mit dem passenden Antigen
reagieren. Bei Patienten
mit soliden Tumoren im fortgeschrittenen
Stadium und in-
operabler großer Tumormasse
waren die klinischen Erfahrungen
mit Antikörpertherapien
jedoch überwiegend enttäuschend,
wie Dr. Stefan Braun
von der Ludwig-Maximilian-
Universität München in Bad
Neuenahr berichtet hat.
Zwei Antikörper werden jedoch
inzwischen in der Praxis
angewandt. Der Antikörper
17-1A, der an das Zytokeratin
der Zelle bindet, verringert
zum Beispiel bei Patienten mit
fortgeschrittenem Kolonkarzinom
(Stadium Dukes C) nach
einer Operation signifikant die
Sterblichkeit durch den Tumor
und die Häufigkeit von Fernmetastasen.
Dies wurde vor
kurzem durch die Auswertung
der 7-Jahres-Daten einer
großen Studie bestätigt. Mit
dem Anti-CD20-Antikörper
wurde in Studien bei Patienten
mit rezidivierenden niedrigmalignen
Lymphomen (vor allem
follikulären Lymphomen) eine
gute Ansprechrate von 50 Prozent
erreicht. Bei zwölf Prozent
der Patienten kam es zu
einer kompletten Remission.
Und in den USA ist kürzlich
zudem ein Antikörper gegen
das Her2-neu-Antigen zur Therapie
bei fortgeschrittenem
Brustkrebs zugelassen worden.
Nach Ansicht von Braun ist die
Antikörper-Therapie, die sich
vor allem gegen minimale residuale
Krebserkrankungen nach
einer Operation richtet, zukünftig
etwa als Kombinationsbehandlung
mit einer Chemotherapie
sinnvoll.
Die dritte Form der Immuntherapie
mit Zytokinen hat zwar
noch keine sehr große Bedeu-
tung in der Krebstherapie.
Aber bei einigen malignen Erkrankungen
gehören sie heute
fest in den Therapieplan. Im
Gegensatz zu Interferon-γ, mit
dem die klinischen Erfahrungen
bei Krebs enttäuschend
waren, ist Interferon-α (IFN-α)
unter anderem zugelassen zur
Therapie beim Nierenkarzinom,
Melanom, beim multiplen
Myelom, der chronisch
myeloischen Leukämie und bei
Non-Hodgkin-Lymphomen.
Mit hochdosiertem
Interleukin-2 (IL-2) wurden
beim Nierenkarzinom zudem
immerhin bei fünf Prozent der
Patienten komplette Remissionen
erreicht, weshalb es in den
USA für diese Therapie zugelassen
wurde. In einer großen
Studie sei bei Patienten mit
metastasiertem Nierenkarzinom
vor kurzem zudem ein
synergistischer Effekt von IFNα
und IL-2 nachgewiesen worden,
so Professor Antonio Pezzutto.
Sein Fazit: Aufgrund klinischer
Ergebnisse scheint eine
Immuntherapie vor allem gerechtfertigt
bei metastasierten
Nierenzellkarzinomen (IFNα,
IL-2), malignen Melanomen
(IFN-α), Non-Hodgkin-Lymphomen
(IFN-α, Anti-CD20-
Antikörper) und Kolorektalkarzinomen
(adjuvante Antikörpertherapie).

Drei Wege zu einer
wirksamen Immuntherapie
a) T-Zell-gestützte Vakzinen
Die zytotoxischen T-Zellen
sollen angeregt werden, die
fremden Tumorzellen zu erkennen
und zu zerstören. Das
wird versucht durch Zugabe
von:
• ganzen, von Antigenen exprimierten
Peptiden
• Pepdidbruchstücken, wie sie
auch auf der Tumorzelloberfläche
präsentiert werden
• Antigen-DNA
• genetisch veränderten Tumorzellen
• Antigenbeladung dendritischer
Zellen.
Klinische Erfahrung gibt es
hierzu vor allem aus Pilotstudien.
b) Zytokine
Sie stimulieren das Immunsystem
auf unterschiedliche Art.
• Interferon-α. Das Zytokin
wirkt antiproliferativ, besonders
auf hämatopoetische
Zellen. IFN-α wird vor
allem angewandt bei metastasiertenNierenkarzinomen,
zur adjuvanten Therapie
beim malignen Melanom
(reseziertes Stadium III
und nach Metastasenresektion),
bei chronisch myeloischer
Leukämie und Non-
Hodgkin-Lymphomen (Erhaltungstherapie)
sowie bei
T-Zell-Lymphomen.
• Interleukin-2. Es ist der
wichtigste Wachstumsfaktor
für T-Lymphozyten und ist
in den USA zur hochdosierten
Therapie bei Nierenzellkarzinomen
zugelassen.
c) Antikörper
Anders als die zellgebundenen
Antigen-spezifischen Rezeptoren
der T-Zellen können Antikörper
direkt mit dem Zielantigen
reagieren und so die Zerstörung
einer Tumorzelle auslösen.
Zur Tumortherapiewerden
bislang angewendet:
• 17-1A-Antikörper. Sie werden
zur Therapie bei Patienten
mit Kolonkarzinom im
Stadium Dukes C nach
Operation des Tumors verwendet.
• Anti-CD20-Antikörper. Sie
werden angewandt bei rezidivierten
niedrigmalignen
Non-Hodgkin-Lymphomen.
Antikörper gegen Her2-neu.
Der vor kurzem in den USA
zugelassene Antikörper wird in
der Therapie bei metastasiertem
Brustkrebs angewandt.

Wenn Zellen Krebs besiegen
Erfolge bei Immuntherapie / Aber Nachsorge braucht Geld
Von Sibylle Steinkohl
Gute Erfolge im Kampf gegen Blutkrebs
und einige andere Krebserkrankungen
haben Münchner Wissenschaftler
mit der Immuntherapie erzielt.
Vor einigen Jahren gelang es
erstmals Professor Hans-Jochem
Kolb, dem Leiter der Knochenmarktransplantationseinheit
am Klinikum
Großhadern, Leukämie ohne Chemotherapie
und Strahlentherapie zu heilen.
Seither werden den Patienten mit
einer bestimmten Leukämie-Form
die nach einer Knochenmarkübertragung
einen Rückfall erleiden, so genannte
T-Zellen verabreicht. Diese
stammen aus dem Blut des Spenders
und können die Tumorzellen erkennen
und zerstören. „Die Transfusion
von Lymphozyten ist inzwischen
weltweit als Standardbehandlung anerkannt“,
sagte gestern der Mediziner
Christoph Salat.
Inzwischen haben die Ärzte in einer
Studie begonnen, die Immuntherapie
auch bei fortgeschrittenem Brustkrebs
anzuwenden. Mehrere Patientinnen,
die bereits Metastasen hatten,
seien seit drei Jahren tumorfrei, sagte
Kolb. Ihnen wurden
eigene T-Zellen entnommen. Nach
der Chemotherapie erhielten sie diese
Immunzellen zurück, die mit einem
Antikörper „angestachelt“ worden
waren. Kolb nannte weitere „überzeugende
Beispiele“, wie gesunde T-
Zellen Tumoren zu Leibe rücken
könnten. Forscher anderer medizinischer
Disziplinen und der GSF sind
an der Entwicklung beteiligt.
Die Einheit für Knochenmarktransplantation
im Klinikum Großhadern
umfasst 24 Betten; 12 davon wurden
von der José-Carreras-Stiftung eingerichtet.
Ein Problem sind nun die
fehlenden Mittel für die Nachbehandlung
der Kranken. Wenn sich
das Immunsystem des Spenders im
Empfänger nicht zurecht finde, könnten
schwere Komplikationen auftreten,
sagte Kolb. Doch die fachkundige,
intensive Betreuung der Kranken
erfolge derzeit fast nur ambulant.
Dringend nötig sei eine Nachsorgestation.
Um Geld dafür aufzutreiben,
haben die Ärzte jetzt den „Verein zur
Förderung der Knochenmarktransplantation“
gegründet.

Bericht über den vom Fraunhofer Institut für Grenzflächen und Bioverfahrenstechnik vom
16.-17. November 1999 veranstalteten Workshop über haematopoietische Stammzellen und
dendritische Zellen für Therapie und Forschung
Die Ouvertüre stellte der Vortrag von Dr. habil. Janos Kadar vom Deutschen Roten Kreuz in
Braunschweig über die Rolle der Transfusionsmedizin bei autologer und alogener Blutstammzell-Transplantation
dar, insofern als er feststellte, daß in einigen Häusern, besonders beim
Arbeiten im offenen System hinsichtlich der Beachtung der GLP/GMP-Bedingungen mittelalterliche
Verhältnisse herrschten.
Er zeigte dann das DIA des sog. Business-Systems der Firma Aastrom, welches nach Inoculierung
eines Knochenmark-Aspirates oder eines apheretisch gewonnenen Buffy-Coates die Expansion
immunkompetenter Zellen wie Stammzellen und dendritischer Zellen erlaube.
Man müsse jedoch zumindest über die Wahl bestimmter Zellkultur-Medien, hier empfahl er,
glaube ich, RPMI versuchen die Wachstumsbedingungen für die gleichzeitig mit in das Gerät
aufgenommenen Tumorzellen zu minimieren.
Ansonsten bot er seine GMP-Dienste bezüglich der apheretischen Gewinnung und Expansion
von Stammzellen u.a. mit diesem Aastrom-System Klinikern in ganz Deutschland an.
Das Gleiche gilt für die Kryobank Hannover, einer Kooperation zwischen dem hannoveranischen
Fraunhofer-Institut für Toxikologie und Aerosolforschung, Nicolai-Fuchs-Str. 1, 30625
Hannover und der Gesellschaft für pharmazeutische Präparate und Dienstleistungen mbH,
Feodor-Lynen-Str. 23, 30625 Hannover.
Tätigkeit der Kryobank, sh. Internet-Auszug dieser.
Die Kryobank holt bei jedermann in Deutschland mit eigenem Fahrdienst apheretisch gewonnene
immunkompetente Stammzellen ab, prüft diese unter GMP-Bedingungen im eigenen Institut
in Hannover auf Expandierbarkeit und bewahrt diese bis zur Retransfusion in den Patienten
gegen Bezahlung auf und liefert sie zum Zwecke der Retransfusion auf Abruf wieder ab.
Im gedruckten Material des Workshops gab der Vortragende der Kryobank, Dr. Andreas Emmendörffer
vom Fraunhofer Institut in Hannover an, daß eine Stammzell-Transplantation gegenüber
den Krankenkassen mit bis zu DM 350.000,-- abrechenbar sei. Er sprach auch über
die Impfung mit dendritischen Zellen, diese sei u.a. machbar bei Melanom, beim Gliom, beim
Mamma-Karzinom, beim Prostata-Karzinom.
Sodann sprach in Vertretung von Prof. Gerold Schuler, Prof. Steinkasserer von der Dermatologischen
Klinik der Universität Erlangen-Nürnberg, bekannte sich aber zu einer Kooperation
mit Prof. Schuler und führte über dendritische Zellen aus, daß diese zu Wanderung und Bewegung
und Antigen-Präsentation fähig seien, im Knochenmark, in Epithelien und soliden Orga-

nen vorkommen und die Immunantwort letzten Endes steuerten. Sie seien entscheidend, ob
eine Immunaggression oder eine Immunsuppression stattfände. Er bekannte sich eindeutig zur
möglichen Anwendung dieser dendritischen Zellen in der Klinik. Diese sei zum ersten Mal
von Caux in Nature 1992 geschrieben worden. Dieser hätte die dendritische Zellen aus CD34
positiven Stammzellen generiert, während Schuler und Romani diese zum ersten Mal aus
CD14 positiven Zellen unter Verwendung von GMCSF und Interleukin4 beschrieben hätten.
Nach Ausreifung blieben die dendritischen Zellen auch ohne weiteren Einsatz der genannten
Cytokine 2-3 Tage funktionsfähig.
Sein Impfabstand beträgt 14 Tage.
Sie geben die dendritischen Zellen sowohl subkutan als auch intravenös. Bei der intravenösen
Gabe verschwindet die Antwort der CTL-Zellen in der Blutbahn teilweise. Er interpretierte
dies als mögliches Verschwinden dieser Zellen aus dem Gefäßbett in den malignen Tumor
hinein.
Wegen des Versagens eines Mono-Primings mit Mage-Peptiden, egal, ob diese synthetisch
hergestellt seien oder vom Tumor stammten, versuche man nun einen RNA-Ansatz, um das
komplexe antigene Muster des Tumors besser nachzuahmen.
Nachgefragt, ob die dendritischen Zellen von ihm apheretisch gewonnen würden, bejahte er
dies. In einem von mir aufgenommenen Gespräch zwischen ihm und Priv.-Doz. Werner vom
Paul-Ehrlich-Institut in Langen, der über die Einhaltung der GMP-Bedingungen zu wachen
hat, bekannte er diesem gegenüber, daß die Uni Erlangen erst seit kurzem alles unter eigener
Aufsicht prozessieren könne.
Von mir nachgefragt, bekannte er, daß er die dendritischen Zellen nicht von Tumorzellen gereinigt
habe, da er keine gefunden habe. Ich ersparte ihm die Anfrage, wie er denn den Ausschluß
der kontaminierenden Tumorzellen, die ja gerade bei Stadium IV-Patienten (Melanoma)
zu deren Behandlung er sich bekannte, finden müsse, durchgeführt habe.
In der Diskussion mit ihm war noch interessant, daß einer der Zuhörer anregte, durch Herunterfahren
des GMCSF-Zusatzes, aber Aufrechterhaltung des Interleukin4-Zusatz die Zahl der
unreifen dendritischen Zellen zu vermehren und diese zu geben, denn unreife dendritische
Zellen stünden im begründeten Verdacht, die Immunantwort bei Immunaggressions-Erkrankungen
zu supprimieren.
In seiner Danksagung am Ende des Vortrages bekannte sich Herr Prof. Steingasserer zu einer
Zusammenarbeit mit Enck, Mainz, Kampgen, Würzburg und Nuffield Department of Surgery
Oxford.
Die leukapheretisch gewonnene Ausgangszell-Zahl zur Generierung dendritischer Zellen liegt
bei ihm bei 10 hoch 10. Er hielt es auch für möglich, dendritische Zellen gegen virale Infektionen
einzusetzen.
Klinisch bemerkenswert war da noch der Vortrag von Prof. Wörner Braunschweig, der die
Anwendung ausschließlicher Arztethik bei therapeutischen Studien beklagte und die Einbeziehung
von Patienten zur Etablierung einer Patientenethik verlangte.

Weiter beklagte er die Negativselektion dahingehend, daß die Patienten zu spät mit zu hoher
Tumorlast behandelt würden. Die immunologische Therapiekonzepte, die von so gut wie allen
Patienten gutgeheißen würden, sollten vielmehr die minimal residuale Erkrankung erfassen.
Nachgefragt, wie er denn diese erfassen wolle, hüllte er sich fast in Schweigen, er anerkannte
jedoch, daß es Tumornachweis-Methoden, wenn angeblich auch keine guten zur Erfassung
von Tumorzellen im Gefäßbett von Kranken gebe. Statt Hochdosis Chemotherapie, die anzuwenden
er ohnehin nur nach vorheriger Chemosensibilitäts-Testung für verantwortbar hielt,
empfahl er viel eher darüber nachzudenken, statt der Stammzellen doch an die Anwendung
von LAK-Zellen bei minimal residualer Erkrankung zu denken oder eine Kombination zwischen
Stammzellen und LAK-Zellen.
Bemerkenswert auch noch der Vortrag von Trautmann, Davos. Dieser entnimmt bei Ekzem-
Patienten eine Hautbiopsie, expandiert diese und untersucht die pathophysiologisch bedeutsame
Infiltration autoreagibler Lymphozyten in die Haut des Kranken mit immuncytochemischen
Methoden. Er nimmt an, daß das aus autoreagiblen cytotoxischen T-Zellen, angelockt
durch die dendritischen Zellen, die mit dem Allergen reagierten, sezernierte Interferon Gamma,
zur Apoptose von Keratinozyten mit Hilfe des FAS-Liganden, der löslich in der Haut vorkomme,
führe.
Bemerkenswert war noch der Hinweis eines jungen Zuhörers, daß er dendritische Zellen aus
Zellen einer akuten myeloischen Leukämie, also aus leukämischen Blasten gewonnen habe,
indem er statt Interleukin4 TNF-Alpha eingesetzt habe.
Frau Dr. Kniep vom Fraunhofer-Institut in Stuttgart bezeichnete noch in ihrem Vortrag Interleukin16
als Reifungsinducer für dendritische Zellen. Obwohl sie unter Angabe entsprechender
Marker und unter Vorlage eines optisch einwandfreien Phänotypus dendritische Zellen
präsentierte, wurde sie von Prof. Steingasserer angegriffen, dieser behauptete, daß das was sie
da gezeigt habe, seien gar keine dendritische Zellen. Sie verteidigte sich gut. Er erzeugte bei
den Veranstaltern, den Herren vom Fraunhofer-Institut und den Zuhörern fassungsloses Erstaunen
ob dieser unhöflichen Aggressivität, der m.E. jedwede Grundlage fehlte.

Mittwoch, 8. März 2000, Nr. 57 Natur und Wissenschaft Frankfurter Allgemeine Zeitung
Eine Impfung gegen Krebs
Erfolge beim metastasierenden Nierenkarzinom und Melanom
Eine Impfung gegen Krebs galt in der Blütezeit
der Bakteriologie zu Beginn dieses
Jahrhunderts keineswegs als Utopie. Aber
lange scheiterten alle Versuche einer Immuntherapie.
Erst in den letzten Jahren
konnte man mit monoklonalen Antikörpern
Fortschritte erzielen. Über erstaunliche Erfolge
beim fortgeschrittenen Nierenkrebs
und beim metastasierenden Melanom berichten
jetzt Wissenschaftler der Urologischen
Klinik der Universität Göttingen und
der Hautklinik der Berliner Charité. Während
beim metastasierenden Nierenkrebs
auf die konventionelle Therapie mit Hormonen
oder Chemotherapeutika allenfalls
zehn Prozent der Patienten ansprechen,
reagierten in Göttingen sieben von 17 Patienten
auf die Impfung. Bei zwei Kranken
bildeten sich die Tumorherde vollständig
zurück. Innerhalb von 21 Monaten ist es
nicht zu Rückfällen gekommen. Bei zwei
Kranken konnte ein Fortschreiten des Leidens
verhindert werden.
Die Nebenwirkungen sind, wie Alexander
Kugler und Gernot Stuhler in der Zeitschrift
„Nature Medicine“ (Bd. 6, S. 332)
berichten, offenbar gering. Es kommt zu
Fieberschüben und zu Schmerzen in den
von den Metastasen befallenen Körperregionen.
Mit einer ähnlichen Impfung hat
Peter Walden an der Charité Patienten mit
metastasierenden Schwarzen Hautkrebs erfolgreich
behandelt. Sieben der 16 geimpften
Patienten reagierten auf die Therapie.
Bei einem Patienten bildeten sich die Metastasen
vollständig zurück, bei einem weiteren
verschwanden sie teilweise. Bei fünf
Kranken schritt das sich zuvor massiv ausbreitende
Leiden nicht weiter voran. Die
Nebenwirkungen waren, einer Veröffentlichung
im „International Journal of Cancer“
(Bd. 85, S. 218) zufolge, ebenfalls gering.
Die in Göttingen und Berlin erprobte Impfung
ist von Stuhler und Walden am Max-
Planck-Institut für Biologie in Tübingen
entwickelt worden. Da die Immunabwehr
an der Bekämpfung von Tumoren beteiligt
ist, kommt es darauf an, sie bei einem Versagen
angemessen zu stimulieren. Dies hat
sich als äußerst schwierig erwiesen, weil
die Abwehrzellen zuvor das entartete Gewebe
erkennen müssen. Dafür sorgen besondere
Zellen, die die anzugreifenden
Strukturen aufnehmen und den Abwehrzellen
präsentieren. Diese Funktion erfüllen
am besten die dendritischen Zellen. Die
überragende Bedeutung dieser Zellen für
das Immunsystem wurde Anfang der siebziger
Jahre von dem Amerikaner Ralph
Steinman entdeckt. Er fand heraus, dass
diese sternförmigen Zellen im immunologischen
Netzwerk wichtige Funktionen
wahrnehmen. Sie sind nicht nur die Wächter,
sondern auch die Dirigenten des Immunsystems.
Bei den dendritischen Zellen handelt es
sich um Verwandlungskünstler, die in der
Peripherie des Organismus zunächst fremde
Strukturen, also auch Viren oder Bakterien,
abfangen und verarbeiten. Dann wandern
sie in die Schaltzentralen des Immunsystems,
die Milz und die Lymphknoten.
Gleichzeitig durchlaufen sie einen Reifungsprozess,
der sie schließlich befähigt,
noch ruhende T-Zellen zu aktivieren und
damit die Immunreaktion in Gang zu bringen.
Es lag nahe, die dendritischen Zellen
für die Immuntherapie zu nutzen. Große
Schwierigkeiten bereitet es jedoch sie mit
den entsprechenden Antigenen zu beladen.
Da die Isolierung einzelner an der Tumorerkennung
beteiligter Strukturen nur selten
gelingt, haben Stuhler und Walden antigenpräsentierende
Zellen durch elektri-

sche Impulse gleich mit ganzen Tumorzellen
verschmolzen. Stuhler verwendete dendritische
Zellen, die von fremden Blutspendern
stammten, Walden so genannte B-Zellen,
die ebenfalls Blutspendern entnommen
wurden. Diese Hybride aktivieren im Organismus
die eigentlichen Killerzellen, die
zytotoxischen T-Lymphozyten, die das entartete
Gewebe beseitigen. Künftig will
auch Walden für seine Impfstoffe dendritische
Zellen verwenden.
Durch die Fusion der dendritischen Zellen
mit Tumorzellen ist es nicht nur möglich,
auf die Isolierung einzelner Tumorantigene
zu verzichten, sondern man löst zugleich
eine Immunität gegen eine ganze Reihe
von Antigenen aus. Wenn sich der Tumor
genetisch verändert, was häufig geschieht,
wirkt die Vakzine selbst dann noch, wenn
dadurch einige Antigene verschwinden.
Sollte die weitere Erprobung dieser Impfstoffe
erfolgreich verlaufen, dürfte es sich,
wie Donald Kufe vom Dana-Faber-Krebsinstitut
in Boston in einem Kommentar in
der Zeitschrift „Nature Medicine“ (S. 252)
schreibt, tatsächlich um „einen noch nie da
gewesenen Fortschritt in der selektiven und
nicht toxischen Immuntherapie eines tödlichen
Tumors“ handeln.
R.F.

11. Mai 2000 M EDIZIN
ÄRZTE ZEITUNG 11
Tumorimpfung mit antigenbeladenen dendritischen Zellen / Ergebnisse
bei Mamma- und Ovarial-Karzinom
Impfung aktiviert die immunologische Krebsabwehr
Celle (jh). Können zu Tumorimpfstoffen
umfunktionierte dendritische Zellen Tumorerkrankungen
stoppen? Auf dem Kongreß
der Gesellschaft für biologische Krebsabwehr
in Celle stellte der Gynäkologe Dr.
Thorsten Nesselhut aus Duderstadt erste
Ergebnisse solcher Behandlungen bei Frauen
mit Mamma- oder Ovarial-Ca vor. Bei
einigen Frauen wurden danach Komplettremissionen
erreicht.
Bei dieser im Tumorzentrum Heidelberg
entwickelten Tumorimpfung werden zunächst
Monozyten aus dem Blut gewonnen
, die sich zu dendritischen Zellen differenzieren.
Durch Zytokine aktiviert, werden
sie im Labor vermehrt, mit Antigenen der
Tumorzellen beladen und dann den Patienten
als Impfung gespritzt. Erfolge verspreche
diese Methode deshalb, weil dendritische
Zellen als Teil des Abwehrsystems
die Aufgabe haben, den körpereigenen Killerzellen
die Antigene zu präsentieren, damit
diese die Krebszellen besser attackieren
könnten, so Nesselhut.
Ergebnisse, die allerdings nicht bei einer
kontrollierten Studie gewonnen wurden:
Bei drei von 19 Frauen mit fortgeschrittenem
Brustkrebs wurde ein kompletter
Rückgang der Tumoren erreicht, bei zwei
Patientinnen ein partieller Rückgang. Bei
zwei Frauen sei der Zustand stabil geblieben,
bei zwölf Patientinnen habe die Therapie
allerdings keinen Erfolg gehabt, berichtete
der Gynäkologe.
Ähnliche Ergebnisse gab es auch bei elf
Frauen mit Ovarial-Karzinom, die meisten
von ihnen im Tumorstadium drei bis vier.
Bei einer Patientin bildete sich der Tumor
komplett zurück, bei einer weiteren kam es
zu einer partiellen Remission. Bei zwei
Frauen blieb der Zustand stabil, bei sieben
Patientinnen schlug die Therapie nicht an.
Nach Ansicht von Nesselhut ist aus den Ergebnissen
zu schließen, daß man das Immunsystem
der Patienten auf diese Art gegen
Tumoren aktivieren kann. Andere Forscher
hätten bei Patienten mit Melanomen
oder Nierenzell-Ca Remissionsraten von
über 20 Prozent erreicht. Die etwa 5000
DM teure Impfung werde allerdings nicht
von den Kassen bezahlt.

ÄRZTE ZEITUNG 26. Juli 2000 MEDIZIN
Neue Therapieprinzipien bereichern die Behandlungsmöglichkeiten
Es gibt immer mehr Krebskranke -
aber auch immer mehr Überlebende
Immer mehr Menschen erkranken an Krebs: die Inzidenz etwa von Brustkrebs, Darmkrebs,
Lymphomen oder von Hautkrebsarten steigt seit Jahren kontinuierlich an. Als
Ursache gesehen werden dafür unter anderem Umwelteinflüsse, ungesunde Verhaltensweisen
oder auch zunehmende Lebenserwartung der Bevölkerung. - Soweit die schlechte
Nachricht. Die gute Nachricht lautet: Es tut sich was in der Krebstherapie.
Und dies schlägt sich bei einigen Krebsarten
in längeren Überlebenszeiten bis hin zu
kompletten Remissionen oder in einer verbesserten
Lebensqualität von krebskranken
Menschen nieder. Konnte bei der Behandlung
dieser Menschen lange Zeit nur an
den drei Stellschrauben Chirurgie, Chemotherapie
und Strahlentherapie gedreht werden,
um Verbesserungen zu erreichen, sind
mittlerweile neue Werkzeuge für den Onkologen
hinzugekommen.
• Mit monoklonalen Antikörpern werden
Patienten mit rezidivierenden Lymphomen
oder mit Mammakarzinom behandelt. Die
Antikörper binden an die Tumorzelle. Dadurch
wird die Tumorzelle für immunologische
Effektorzellen wie T-Zellen „sichtbar“
- sie können an den freien Bindungsstellen
des Antikörpers andocken und ihre
Abwehrfunktion erfüllen. So hat sich der
bereits zugelassene CD20-Antikörper Rituximab
(MabThera ® ) als wirksames Lymphom-Therapeutikum
erwiesen. CD20 ist
ein Antigen, das von den meisten B-Zell-
Lymphomen exprimiert wird. Mit dem Antikörper
Trastuzumab (Herceptin ® ) gegen
HER2, das von Brustkrebszellen übermäßig
stark synthetisiert wird, werden ebenfalls
längere Überlebenszeiten erreicht als
bisher.
• Immunologische Strategien werden
etwa beim malignen Melanom angewendet.
Patienten mit Fernmetastasen werden Lymphozyten
entnommen, die im Labor mit
Hilfe von Tumorzellen vermehrt und akti-
viert werden. Die aktivierten Lymphozyten
werden dem Patienten injiziert. Bei der aktiv-spezifischen
Immuntherapie (ASI) werden
während der Krebsoperation maligne
Zellen entnommen, abgetötet und später
wieder injiziert. Die Immunabwehr erkennt
diese Zellen, und kann „Gedächtniszellen“
entwickeln, die helfen, noch lebende Tumoren
zu erkennen.
An der Uni Göttingen wurden bei Nierenkrebspatienten
Krebszellen elektrisch mit
Abwehrzellen eines gesunden Spenders fusioniert
und daraus ein Impfstoff hergestellt.
Unter den täglich bis zu sechs Injektionen
über elf Monate seien gute Rückbildungen
erzielt worden.
Alle diese Therapieformen haben noch experimentellen
Charakter.
• Angiogenese-Hemmer sollen Tumoren
„aushungern“. Kein Blut - kein Sauerstoff -
keine Nährstoffe für die maligne Geschwulst,
lautet das Prinzip. Man weiß, daß
Tumoren ohne neue Gefäße eine Größe
von etwa drei Kubikmillimetern nicht
überschreiten können, weil sie sonst hypoxisch
würden. Gehemmt wird bei dieser -
ebenfalls rein experimentellen Methode -
etwa der Gefäßendothel-Wachstumsfaktor
(VEGF).

Zum Stand der immuntherapeutischen Strategien gegen Krebs
Kongreß in San Diego/Kalifornien vom 25. bis 26.Februar 1998
Die Firma Dendreon führt zusammen mit der Universität von San Francisco erfolgversprechende
individuelle Heilversuche mit dendritischen Zellen bei hormonrefraktär gewordenen
in das Skelett metastasiert habenden Prostata-Carcinomen durch und hat vielversprechende
Immun-Antworten erhalten, beispielsweise Absinken der PSA-Spiegel von 1000 auf 600.
Ausgangsmaterial für die Gewinnung der dendritischen Zellen ist ein leukapheretisch gewonnener
Stammzell-Buffy-Coat.
Zur Durchführung anliegende Literatur (Nr. I).
Sodann setzt die Duke Universität unter Prof. H. Kim Lyerly, Professor für Chirurgie, Immunologie
und Pathologie die Therapie mit dendritischen Zellen gegen verschiedene solide Tumore
ein (Literatur II a).
Die Stanford-Universität setzt die Therapie mit dendritischen Zellen erfolgversprechend gegen
das B-Zell-Lymphom ein (Literatur II b).
Am meisten beeindruckt waren die Teilnehmer durch den Vortrag von Dr. Michael G. Hanna,
früherer Mitarbeiter der Nationalen Gesundheitsinstitute, der nach über 10-jähriger Testphase
die Ergebnisse einer randomisierten Multi-Center-Studie vorstellte, bei der autologe Colon-
Krebszellen als therapeutische Vaccine die rezidivfreie Überlebenszeit und das Nichtauftreten
von Rezidiven statistisch signifikant beeinflußt hatten.
Diese Therapie wurde von ihm als aktive spezifische Immuntherapie bezeichnet. Die Tumorzellen
waren nur mit dem Adjuvanz BCG versetzt und ansonsten enthielt die Vaccine im Gegensatz
zur Heidelberger ASI kein Newcastle Disease-Virus (Literatur III).
Zwischenzeitlich wird gemeldet, daß eine weitere US-Gruppe, am Jefferson-Medical-College,
unter Verwendung autologer Ovarial-Tumorzellen eine starke erfolgversprechende Immunantwort
ausgelöst hat. Eine Studie mit Melanoma-Patienten beginnt demnächst.
Von verschiedenen Teilnehmern wurde betont, daß bei allen Vaccinierungs-Strategien offensichtlich
die Kombination mit dendritischen Zellen besonders wirksam sei.
Wir selbst hatten Literatur IV auf diesem Kongreß vorgestellt:
Isolation and Priming of Circulating Dendritic Cells with Tumor Antigenes and Heat-
Shock-Proteins derived from Circulating Cancer Cells (US-Patent 5,529,903)
Literatur V:
Eine norwegische Gruppe demonstrierte die erfolgreiche Vaccinierung bisher therapieresistenter
Pankreas- und Colon-Carcinom-Patienten durch eine intradermale RAS-Peptid-Vaccine,
isoliert aus autologen Tumorzellen versetzt mit GMCSF in einer Dosis von 100 Mikro-

litern pro Ampulle in wöchentlichen Abständen fünfmal hintereinander und dann nach vierwöchiger
Pause ein weiteres Mal geimpft.
Zwischenzeitlich wird gemeldet (Literatur VI), daß eine ebenfalls amerikanische Gruppe an
der Universität des Staates Washington mit autologen c-erb/B2-exprimierenden Tumorzellen
erfolgreich in Patienten eine Immunantwort cytotoxischer Lymphozyten ausgelöst hat.
Um die Auslösung einer solchen Immunantwort ging es bei allen Vaccinierungs-Strategien.
Die Auslösung dieser Immunantwort wurde erfolgreich nachgewiesen.
Den Stand der Technik repräsentieren auch die anliegenden Arbeiten von Prof. Nicholas P.
Restivo, Senior Investigator des National Cancer Institut und der Nationalen Gesundheitsinstitute
der USA (Literatur VII), insbesondere die folgenden:
N.P. Restifo et al „Newer approaches in cancer treatment: Cancer vaccines. Cancer: Principle
and Practice of Oncology“
Herausgeber: Vincent DeVita and Stephen A. Rosenberg, Lippincott, Philadelphia, S.
3023-3043, 1997 sowie
J.N. Cormier, N.P. Restifo, S.A. Rosenberg „Enhancement of cellular immunity in melanoma
patients“ The Cancer Journal from Scientific American, 3(1):37-44, 1997
V.Bronte, Stephen A. Rosenberg, N.P. Restifo „Antigen expression by dendritic cells correlates
with the therapeutic effectiveness of a model recombinant poxvirus tumor vaccine“, Proceedings
of the National Academy of Scienses; USA, 94(7): 3183-3188, 1997.
Bemerkenswert ist es festzuhalten, daß es unter den rd. 100 Teilnehmern ausser uns nur zwei
Teilnehmer deutscher Universitäten gab und keine Vertreter öffentlich-rechtlicher Körperschaften
oder von Krankenkassen, ganz im Gegensatz zu den Amerikanern, die mehrere Vertreter
der Nationalen Gesundheitsinstitute gesandt hatten.
Zum c-erb/B2:
Dr. Emily S. Winn-Deen von der Firma Oncor trug vor, daß der von ihr entwickelte immuncytochemische
Nachweis von c-erb/B2 an Tumorzellen inzwischen ein von der FDA zugelassener
Test ist.
In einem nächsten Schritt versuche man nun die Serum c-erb/B2-Spiegel bei diesen Patienten
mit den immuncytochemischen am Tumorgewebe und an der Tumorzelle selbst gewonnenen
c-erb/B2-Expressions-Ergebnissen zu korrelieren. In Zusammenhang damit wird auf die umfangreiche
von Prof. Mary Disis von der Universität of Washington vorgestellte c-erb/B2-Literatur
hingewiesen. Diese kommt zusammenfassend zu der Aussage, daß mit Ausnahme einer
italienischen Arbeit alle Autoren in diversen Studien zu dem Ergebnis kamen, daß
das Vorhandensein des Wachstumssignale vermittelnden Oncogenes c-erb/B2 auf einer Tumorzelle
mit weitgehender Chemoresistenz und hoher Invasivität und insgesamt einer
schlechten Prognose assoziiert ist.
Frau Prof. Disees selbst setzt bei Tumorpatienten c-erb/B2-haltige Zellen zur autologen
Vaccinierung ein (Literatur VIII).

Durch Krebslysat scharf gemacht
Immunzellmeute auf Tumorjagd
ANN ARBOR - Dendritische
Zellen initiieren und regulieren
die Immunantwort und lassen
sich ohne Schwierigkeiten aus
dem peripheren Blut gewinnen.
„Impft“ man sie mit Tumor-
Lysat und gibt sie dann in den
Körper zurück, können sie
selbst gegen fortgeschrittene
Tumoren noch einiges ausrichten.
Sehr ermutigend sind die Ergebnisse
einer amerikanischen
Phase-I-Studie an zehn Kindern
zwischen drei und 17 Jahren.
Alle litten an einem therapiefraktären
soliden Tumor.
Aus dem peripheren Blut gewannen
die Forscher Monozyten
und wandelten sie in vitro
mit Hilfe von GM-CSF und Interleukin-4
in dendritische Zellen
um. Um die Immunzellen
auf ihre Aufgabe vorzubereiten,
wurden sie für 24 h mit
Tumor-Lysat durchströmt und
dann in drei intradermalen Dosen
in zweiwöchentlichem Abstand
wieder injiziert. Die Kinder
vertrugen die Behandlung
ausnahmslos gut. Einen besonders
eindrucksvollen Erfolg erzielte
man bei einem 16-jährigen
Mädchen mit einem meta-
stasierenden Fibrosarkom.
Zwei Lungenmetastasen von 2
cm Durchmesser bildeten sich
komplett zurück und Läsionen
in der Brustwirbelsäule wurden
um 55% reduziert. Schon nach
einer einzigen Injektion besserten
sich die schweren, bis dahin
opiatpflichtigen Rückenschmerzen.
MW
Quelle: James Geiger et al; The University
of Michigan Medical School,
Ann Arbor, USA; The Lancet, Vol.
356, No. 9236 (2000), S. 1163-1165

Onkologie 2000; 23:544-561
Übersichtsarbeit
Derzeitiger Status der auf dendritischen Zellen basierenden Tumorimpfung
J. Dannull a , T. Cerny b , D.K. Ackermann c , M. Groettrup a
a Laborforschungsabteilung
b Abteilung für Onkologie
c Abteilung für Urologie, Kantonsspital St. Gallen
Schlüsselwörter
Dendritische Zellen
Immuntherapie
Impfung
Tumorassoziierte Antigene
Zusammenfassung
Seit einigen Jahrzehnten haben Studien zur immunologischen Tumortherapie Hinweise
dafür geliefert, daß ein aktiviertes Immunsystem Tumorzellen eliminieren kann. Durch die
Identifikation von Tumorantigenen in den vergangenen 10 Jahren ist es heute möglich,
Krebspatienten antigenspezifisch gegen Tumoren zu immunisieren. Neue Erkenntnisse
über die enorme Bedeutung von dendritischen Zellen (DCs) für die Aktivierung und die
Regulation der Immunantwort haben die Entwicklung von klinischen Studien für die Behandlung
vieler verschiedener Neoplasien entscheidend geprägt. Methoden sind entwickelt
worden, welche die Züchtung von autologen DCs aus Monozyten des peripheren
Bluts in großer Anzahl erlauben und den Weg für deren klinische Anwendung ebnen.
Impfungen mit tumorantigenbeladenen DCs sind klinisch praktikabel und haben das Potential,
starke zelluläre Immunantworten gegen Tumoren zu erzeugen. Dieser Artikel gibt
eine Übersicht über neueste klinische Fortschritte in der Tumorvakzinierung mit DCs und
diskutiert, wie bestehende Probleme mit neuen Therapieansätzen bewältigt werden könnten.
Erzeugen einer starken Antitumorreaktion
Eine Voraussetzung für das Hervorrufen einer starken und dauerhaften Antitumor-Immunreaktion
ist die gleichzeitige Aktivierung von Antigene darstellenden Zellen (APCs) wie
B-Zellen, Makrophagen, dendritischen Zellen (DCs), CD4+-T-Helferzellen (Th-Zellen)
und zytolytischen CD8+-T-Zellen (CTLs) und Antikörper sezernierenden B-Zellen. Bei
der Aktivierung sezernieren Th-Zellen Zytokine, die wiederum CTLs und B-Zellen stimulieren
und darüber hinaus die Aktivität natürlicher Killerzellen (NK) sowie die Fähigkeit
der Makrophagen zur Phagozytose verstärken. CTLs sind in der Lage, Tumorzellen direkt
zu zerstören. APCs spielen in diesem Szenario eine zentrale Rolle, da sie eine Brücke
zwischen den kongenitalen, zellulären und humoralen Teilen des Immunsystems bilden
können. APCs nehmen Tumorzellen oder -antigene teilweise auf, wandeln sie um und
stellen sie als Peptidepitope einer Länge von 9-20 Aminosäuren auf den Proteinen des
Haupthistokompatibilitätskomplexes (MHC) der Klasse I und II dar. Th-Zellen erkennen
ihre zugehörigen Antigene im Zusammenhang mit Molekülen eines MHC der Klasse II,
die sich ausschließlich auf APCs finden, wohingegen dies bei CTLs im Zusammenhang
mit einem MHC der Klasse I der Fall ist, der mit Ausnahme von Hoden, Plazenta und den

meisten Neuronen auf allen Körperzellen exprimiert wird. Alle T-Zellen-Rezeptoren
(TCR) auf naiven T-Zellen binden sich ausschließlich an ihren zugehörigen MHC/Antigen-Komplex,
was zu der für die zelluläre Immunität typischen außerordentlichen Spezifität
führt. Neben der Erkennung fremder Antigene müssen T-Zellen, um voll aktiviert zu
werden, Signale durch ihre Costimulationsrezeptoren empfangen (Abb. 1). T-Zellen, die
ohne richtige Costimulation auf ihr zugehöriges Antigen treffen (z.B. auf Nicht-APCs),
können dadurch anerg bzw. ignorant werden und so eine Immunreaktion verhindern. Die
Costimulation erfolgt durch auf den T-Zellen exprimierte CD28, CD40L (L, Ligand) und
Ox40, die mit den auf professionellen APCs befindlichen Oberflächenproteinen B7-1,
CD40 bzw. Ox40L in Wechselwirkung stehen (Abb. 1). Die Verbindung von CD40 und
CD40L bewirkt ein Heraufregeln von Haft- und Costimulationsmolekülen sowie die Produktion
von IL-12, einem wichtigen Zytokin für die Stimulierung von CTL-Reaktionen,
durch DCs [1]. Darüber hinaus führt die Wechselwirkung zwischen CD28 und Ox40 und
ihren jeweiligen Rezeptoren B7-1 und Ox40L zu einer synergistischen Aktivierung der T-
Zellen-Proliferation, wodurch sich die antigenspezifischen T-Zellen rasch verbreiten. Zusammen
mit CD28 wird auf den Th-Zellen der negative Costimulationsregulator CTLA-4
exprimiert [2]. CTLA-4 kann der CD28-vermittelten Costimulation entgegenwirken und
so die T-Zellen-Reaktion herunterregulieren, indem er die für die effektive Aktivierung
der T-Zellen erforderliche Signalschwelle anhebt oder die gerade stattfindende T-Zellen-
Reaktion beendet. Die Forschung beschäftigt sich intensiv mit Strategien, die auf die Costimulationssignale
zielen und geeignete Therapieansätze für die Manipulation der Immunantwort
liefern könnten.
Dendritische Zellen
DCs stellen ein einzigartiges Zellsystem dar [3], das die Immunantwort auslöst, aufrechterhält
und steuert (Abb. 2: Elektronenmikroskopische Aufnahme einer dendritischen
Hautzelle). DCs entstehen im Knochenmark aus pluripotenten CD34+-Stammzellen und
wandern über den Blutstrom in peripheres Gewebe. Sie sind in fast allen Gewebearten
verbreitet, insbesondere in Gewebe, das mit der äußeren Umgebung in Kontakt steht. Hier
überwachen sie eindringende Krankheitserreger. Die als erstes beschriebenen CDs – die
Langerhans’schen Zellen – finden sich verbreitet in Haut-, Speiseröhren-, Gebärmutterhals-
und Backenepithel. Interstitielle DCs liegen in der Haut und den zellulären Zwischenräumen
praktisch aller Gewebearten (mit Ausnahme des Gehirns) vor. Darüber hinaus
lassen sich versteckte DCs in der afferenten Lymphe und ineinandergreifende DCs in
der Lymphknotenrinde und in der Milz nachweisen. Die DCs in peripherem Gewebe sind
zwar noch nicht ausgereift, können aber Antigene auf dreierlei Art und Weise aktiv aufnehmen:
Einmal ermöglicht die Makropinozytose die Aufnahme löslicher extrazellulärer
Antigene; außerdem können durch direkte, nicht-opsonische Wechselwirkung zwischen
Krankheitserreger, apoptotischen Zellen oder geschwächten Körperzellen und DCs eine
Phagozytose oder rezeptorvermittelte Endozytose initiiert werden. Wie in Abb. 3 a dargestellt
kann die rezeptorvermittelte Aufnahme durch DEC-205 (Multilektinrezeptor auf
DCs und Thymusepithelzellen, dessen menschliches Homolog gp200-MR6 ist), die Mannoserezeptoren,
Collektine (collagenartige Lektine), TLR 2,4 und die Abraumrezeptoren
erfolgen. Antikörper oder Komplement können als Brückenmoleküle zwischen Krankheitserreger
und Fe- (FeγR 1-11) oder Komplementrezeptoren dienen und so eine opsonische
Aufnahme bewirken.
Nach der Antigenaufnahme bewirken DCs durch Produktion von Chemokinen und Entzündungszytokinen,
dass Leukozyten an die Entzündungsstelle gelangen. Danach machen

die DCs bei der Exprimierung von Chemokinrezeptoren einen Wandel durch, der es ihnen
erlaubt, das entzündete Gewebe zu verlassen und zu dränierenden lymphoiden Organen,
insbesondere den T-Zellen-Bereichen der Lymphknoten zu wandern. Dort reifen sie heran
und erwerben die Fähigkeit, T-Zellen durch Exprimierung von MDC (von Makrophagen
stammendes Chemokin) und ELC (EBV-induziertes Molekül ## ) anzuziehen und eine T-
Zellen-Reaktion zu initiieren. Die Reifung der CDs ist von einer Abnahme von Rezeptoren,
die an der Antigenaufnahme beteiligt sind, und der zunehmenden Exprimierung von
Molekülen des MHC der Klasse I und II begleitet. Darüber hinaus erfolgt das für die antigenunabhängige
Bindung ausschlaggebende Heraufregulieren der Costimulations- und
Haftmoleküle (ICAM-1, ICAM-3 und LFA-3) in reifen DCs. Das reife Stadium der DCs
endet mit dem apoptotischen Zelltod im Lymphknoten, der durch immunhemmende Zytokine
wie IL-10 stark beschleunigt wird. Das Verständnis und die Berücksichtigung dieser
Eigenschaften dendritischer Zellen sind für die Konzipierung von Tumorimpfstoffen unumgänglich;
sie werden daher nachfolgend diskutiert.
In-vitro-Herstellung dendritischer Zellen für Impfzwecke
Es wurden zwei Standardverfahren für die in-vitro-Herstellung menschlicher DCs beschrieben
[4,5]. Bei dem ersten Verfahren kommen aus Knochenmark, der Nabelschnur
oder peripherem Blut gewonnene hämatopoetische CD34+-Vorläuferzellen zum Einsatz.
Diese Zellen werden ex vivo in Gegenwart von GM-CSF (Granulozyten-Makrophagen-
Kolonie-stimulierender Faktor) und TNF-α (Tumornekrosefaktor-alpha) gezüchtet. Dabei
ergeben sich Ausbeuten von 10 6 DCs pro 500 ml peripherem Blut und etwa 2x10 6 DCs
pro 1 ml Knochenmark. Bei einem anderen, praktikableren Verfahren werden CD14+-
Monozyten aus Peripherblutzellen verwendet, die in Gegenwart von GM-CSF und IL-4 in
dendritische Zellen differenzieren. Aus 10 ml peripherem Blut lassen sich dabei 10 6 DCs
gewinnen. Die Ausbeute kann durch eine derzeit klinisch getestete Vorbehandlung des
Spenders mit rekombinantem GM-CSF oder ##-3-Ligand (c-fms-artige Tyrosinkinase) bis
auf das 5-10-fache gesteigert werden. Nach der ex vivo-Erzeugung und dem Beladen mit
Tumorantigenen können die autologen DCs den Patienten wieder injiziert werden. Diese
autoadoptive Übertragung lässt sich mit unreifen oder solchen DCs durchführen, die in vitro
durch ein Standardverfahren mit Prostaglandin E2, IL-1β, ##.6 und TNF-α gereift
wurden [6]. Von großer Bedeutung ist, daß Verfahren zur Kältekonservierung gereifter
DCs entwickelt wurden, was ihre klinische Anwendung sehr erleichtert. Zusammenfassend
lässt sich sagen, dass die Verfahren zur ex vivo-Herstellung dendritischer Zellen für
Impfzwecke sich als praktisch und sicher erwiesen haben und man mit ihrer Hilfe außerdem
die bei Krebsgeweben beobachtete Immunsuppression umgehen kann.
Identifizierung von tumorassoziierten Antigenen
Enttäuschende Ergebnisse aus klinischen Impftests könnten den falschen Eindruck vermitteln,
dass Tumoren sich nicht ausreichend von normalem Gewebe abgrenzen, um das Immunsystem
zu aktivieren, und daher nicht immunisierend sind. Es liegen jedoch eindeutige
Beweise dafür vor, dass die fehlende Immunisierung eine Folge der Fähigkeit des Tumors
sein könnte, der Erkennung durch das Immunsystem aktiv zu entgehen. Es wurden
verschiedene Mechanismen nachgewiesen, mit deren Hilfe Tumoren eine Immunreaktion
abschwächen können. Dazu gehören das Herunterregulieren der Exprimierung des MCH
der Klasse I und des β2-Mikroglobulins (und/oder der Verlust des mit der Antigendarstellung
assoziierten Transportermoleküls (TAP)), die Überexprimierung immunhemmender
Zytokine wie TGF-β1 und IL-10 sowie die Induzierung einer Fas-vermittelten T-Zellen-

Apoptose durch Exprimierung des Fas-Liganden (FasL) durch verschiedene maligne Tumoren.
Die Beweise deuten allerdings stark darauf hin, dass nicht-veränderte, irrtümlicherweise
in Tumoren oder auf gewebespezifischer Art und Weise exprimierte Selbst-Antigene
von den T-Zellen der Krebspatienten erkannt werden können. Dementsprechend
entziehen sich autoreaktive T-Zellen, wenn auch u.U. nicht besonders begierig, der Thymuszerstörung
und gelangen in die Peripherie, wo sie die Antitumorreaktion beeinflussen
könnten, sofern sie richtig aktiviert sind. Die Isolierung der ersten menschlichen tumorassoziierten
Antigene (TAAs), die von den CTLs eines Melanompatienten erkannt werden,
stellt einen Meilenstein in der zeitgenössischen Immuntherapie dar [7]. Diese grundlegende
Arbeit zur TAA-Identifizierung beruht auf der Erkennung der zugehörigen (mit cDNA-
Bibliotheken aus Tumorgewebe transfizierten) Zielzellen durch autologe, tumorspezifische
CTL-Klone in vitro.
Die Analyse der serologischen Reaktion auf Tumoren in Kombination mit dem SEREX-
Verfahren für molekulares Klonen (serologische Analyse autologer Tumorantigene durch
rekombinantes Exprimierungsklonen), stellt ebenfalls ein vielversprechendes Mittel zur
Identifizierung neuartiger Antigene dar [8]. Sie erlaubt die objektive Suche nach einer Antikörperreaktion
und die direkte molekulare Identifizierung immunisierender Tumorproteine
aufgrund ihrer Fähigkeit zur Reaktion mit autologen Patientenseren. Die SEREX-Analyse
hat zur Identifizierung zahlreicher neuartiger Antigene geführt, deren klinisches Potential
derzeit untersucht wird.
Schließlich stellt der Ansatz der „reversen Immunologie„ ein sinnvolles Verfahren zur
Identifizierung von TAAs dar. Dabei erfolgt eine computergestützte Identifizierung der
Peptide in der Sequenz der Kandidatenantigene, die die Konsenskriterien für die Bindung
an Moleküle des MHC der Klasse I erfüllen. Die Peptide werden synthetisiert und auf ihre
Fähigkeit zur Stabilisierung dieser Moleküle auf der Zelloberfläche getestet. Danach wird
die Häufigkeit des Auftretens von T-Zellen, die mit einem bestimmten Peptidepitop reagieren,
im Blut von Patienten bewertet, um die in vivo-Relevanz eines Antigens zu überwachen.
Auch die Sequenzbestimmung von Peptiden, die aus Tumorzellmolekülen der
Klasse I eluiert werden können und durch tumorspezifische CTLs erkannt werden, führte
zur Entdeckung neuartiger TAAs.
Definierte menschliche tumorassoziierte Antigene und ihr Potential für Impfverfahren
Wie aus Tabelle 1 ersichtlich wurde ein breites TAA-Spektrum identifiziert [9]. Theoretisch
stellen TAAs, die als Ergebnis somatischer Mutationen in normalen Genprodukten
entstehen, starke Antigene dar, da es unwahrscheinlich ist, dass sie eine Toleranz ausgelöst
haben. Die Identifizierung und Isolierung der TAAs aus einzelnen Patienten ist jedoch
klinisch nicht praktikabel und stellt derzeit keine Option dar. Virale Antigene gäben ebenfalls
hervorragende TAAs ab, sind jedoch nur bei einer sehr begrenzten Zahl maligner Tumoren
anwendbar, bei denen meist eine Virusinfektion vorliegt, z.B. Gebärmutterhalskarzinomen,
die in mehr als 90% der Fälle mit einer Infektion durch das menschliche Papillom-Virus
in Zusammenhang gebracht werden. Ein vielversprechendes Ziel der Immuntherapie
sind TAAs, die normalen Genprodukten, die viele Patienten aufweisen, entsprechen.
Die Hodenkrebsantigene MAGE, GAGE, BAGE, RAGE, SSX und LAGE-1/NY-
FSO-1 sind zwar in den meisten Gewebetypen Erwachsener nicht aktiv, werden aber bei
Krebs verschiedenen histologischen Ursprungs exprimiert. Da die Exprimierung dieser
Gene bei vielen unterschiedlichen Tumoren beobachtet wurde, sind die von ihnen codier-

ten Antigene von enormem praktischen Wert für die Immuntherapie bei Krebs. Die einzigen
normalen Gewebetypen, die laut Untersuchungen diese Gene exprimieren, sind Hoden-
und in einigen Fällen Plazentagewebe, die aufgrund der Nichtexprimierung des MHC
der Klasse I als immunologisch privilegiert gelten.
Eine andere Gruppe vielversprechender Antigene besteht aus Proteinen, die normalen gewebespezifischen
Genprodukten entsprechen. Zu diesen Antigenen, die bei Melanompatienten
gefunden wurden, gehören MART-1/Melan A, gp100 und Tyrosinase. Die Exprimierung
dieser Genprodukte ist auf Melanome sowie auf Melanozyten und pigmentproduzierende
Zellen in der Retina beschränkt. Prostataspezifische Proteine wie prostataspezifisches
Antigen (PSA), prostataspezifisches Membranantigen (PSMA) und Prostata-Säurephosphatase
(PAP) (Tabelle 1) wurden ebenfalls als Impfstoffe gegen hormonresistente
Prostatakarzinome eingesetzt, da ihre Exprimierung häufig in malignem Prostatagewebe
konserviert ist. Darüber hinaus wurde bei einem Großteil der Leberzellkarzinome eine
Überexprimierung oder Regression eines α-Fetoproteins nachgewiesen, und das Karzinoembryonalantigen
(CEA) und ein Mucin (MUC-1) werden von verschiedenen Epitheltumoren
exprimiert (Tabelle 1). Weitere sehr vielversprechende Kandidaten für immuntherapeutische
Strategien sind idiotypische Determinanten von klonalem Ig, die man in B-
Zellen-Lyphomen fand.
Antigenbeladene autologe dendritische Zellen als zelluläre Impfstoffe
Zwar wurden bei der Identifizierung von Tumorantigenen erhebliche Fortschritte erzielt,
doch die herkömmlichen Verfahren zur Herstellung von Antigenen sind anscheinend für
die Immuntherapie bei Krebs nicht ausreichend. Herkömmliche Impfstoffe, die aus deaktivierten
Krankheitserregern oder ihren Bestandteilen bestehen, sollen eine Antikörper- und
bis zu einem gewissen Grad eine Th-Zellen-Reaktion stimulieren. Um Krebszellen zu zerstören,
ist jedoch eine starke CTL-Reaktion notwendig. Krebsexperimente mit Mäusen haben
gezeigt, dass die einfache Peptidimpfung häufig nur zu einer geringen Aktivierung
oder sogar einer Tolerierung der T-Zellen führt [10], wohingegen der Einsatz autologer
DCs, die mit denselben Peptiden beladen waren, zu einer sehr starken CTL-Aktivierung
und zur Elimierung der Tumoren führte. Dies deutet darauf hin, dass antigenbeladene DCs
bei Verwendung als zelluläre Impfstoffe eine stärkere zytotoxische Reaktion hervorrufen
können als herkömmliche Impfstoffe. Bei klinischen Versuchen wurden synthetische Peptide
des MHC der Klasse I zusammen mit Proteinen wie KLH [11], Tetanustoxoid oder
Tuberculin [12], die äußerst immunisierend sind und Th-Epitope enthalten können, im Tumor
selbst jedoch nicht exprimiert werden, ex vivo auf DC-Moleküle der Klasse 1 geladen.
Ein wichtiger Schluss, den man aus den Mäuseexperimenten ziehen kann, ist also,
dass für eine starke Antitumorreaktion eine Impfung mit tumorspezifischen CTL und Th-
Epitopen erforderlich ist [13]. Es wäre daher hilfreich, wenn spezifische Tumorantigenpeptide
des MHC der Klasse I und II eingesetzt werden könnten. Leider wird dieser Ansatz
durch die verschiedenen Allele des MHC der Klasse I und II bei den einzelnen Patienten
sowie durch das völlige Fehlen definierter Peptidepitope des MHC der Klasse II erschwert.
Ein Ausweg aus diesem Dilemma wäre die Beladung der dendritischen Zellen mit rekombinanten
Tumorantigenen in der Annahme, dass sie Epitope für die Darstellung von Molekülen
des MHC der Klasse I und II enthalten. Da dendritische Zellen Proteine zur Darstellung
auf Molekülen der Klasse I und II, die eine Endozytose durchlaufen haben, verarbeiten
können, erscheint eine externe Beladung der DCs mit rekombinanten Proteinen sinn-

voll. Derzeit werden verschiedene Verfahren entwickelt, die alle auf die rezeptorvermittelte
Endozytose oder Phagozytose zielen. Dazu gehören die Glycosylierung rekombinanter
Proteine für die Aufnahme durch DC-Lektin-Rezeptoren oder die Verabreichung von
Ig/Antigenimmunkomplexen für die Aufnahme mittels Feγ-Rezeptoren. Interessanterweise
können dendritische Zellen externe Proteine wesentlich effizienter für die Darstellung
auf Molekülen der Klasse 1 verarbeiten, wenn sie in einer bestimmten Form einer definierten
Größe von 1-10 μm vorliegen [14]. Daher wird derzeit die Beladung der DCs mit
Proteinen untersucht, die in biologisch abbaubare Poly(lactid-co-glycolid) (PLG)-Mikropartikel
gepackt sind [15,16]. Als Alternative können DCs effizient mit Exosomen aus
dendritischen Zellen oder apoptotischem Material aus Tumorzellen beladen werden.
Klinische Versuche mit Impfstoffen auf DC-Basis
Heute haben immuntherapeutische Ansätze auf Basis dendritischer Zellen gerade das Stadium
des klinischen Versuchs am Menschen erreicht. Einige der anfänglichen Ergebnisse
erscheinen sehr vielversprechend und wurden kürzlich vorgestellt (Tabelle 2). Aufgrund
der fundierten Kenntnisse über melanomassoziierte Antigene ist die DC-Immuntherapie
bei Melanomen besonders fortgeschritten. Klinische Versuche mit Stadium-IV-Patienten
(Lebenserwartung ca. 6 Monate) wurden in Erlangen (Deutschland) [12], Zürich
(Schweiz) [11], Farmington [17] und Los Angeles (USA) [18] durchgeführt. Diese Versuche
weisen (mit Ausnahme der MAGE-1-Impfung [17]) trotz unterschiedlicher Antigene
und Verabreichungswege (intravenös (i.v.), intradermal sowie intranodal) ähnliche klinische
Ergebnisse bezüglich der Reaktionsraten, die zwischen 20 und 40% liegen, auf (Tabelle
2). Auch Tumoren, die bislang als wesentlich weniger immunisierend galten als Melanome,
z.B. hormonresistente Prostatakarzinome, lieferten eine klinische Reaktion (Tabelle
2) [19]. Ermutigende Ergebnisse ergaben sich mit Impfstrategien auf CEA-Basis bei
Kolorektal-, Brust und Lungenkarzinomen [20,21], mit mutierten Ras-Peptiden bei
Bauchspeicheldrüsenkarzinomen [22] und mit Tumorlysat bei Nierenzellkarzinomen
[23,24]. Andererseits erzielte man auch bei Anwendung eines anderen Verfahrens sehr ermutigende
klinische Resultate bei der Immuntherapie von Nierenzellkarzinomen [25].
Autologe Tumorzellen wurden dabei mit allogenen dendritischen Zellen in einem elektrischen
Feld vereinigt, bestrahlt, bis sie abstarben, und dann den Patienten erneut injiziert,
was zu verblüffenden klinischen Reaktionen führte. In diesem Stadium ist es noch zu früh,
Schlüsse zu ziehen, welcher Ansatz auf DC-Basis bei der Immuntherapie der vielversprechendste
ist, da der derzeitige Wissensstand hinsichtlich der zentralen Probleme der Krebsimpfung
noch zu vage ist. Zu den wichtigsten noch zu klärenden Fragen gehört die nach
der Anzahl der bei der Impfung verwendeten dendritischen Zellen, die sich bei den verschiedenen
Versuchen um zwei Logarithmen unterscheidet, sowie die nach der Häufigkeit
und dem Verabreichungsschema. Wir wissen beispielsweise nicht, wie lange die Behandlung
fortgeführt werden muss und in welchen Abständen sie zu erfolgen hat. Auch wird
derzeit diskutiert, welches Differenzierungsstadium die dendritischen Zellen am besten
haben sollten und welcher Verabreichungsweg am günstigsten ist. Letzteres wurde jüngst
in einer Studie untersucht, bei der die Biodistribution von in vitro erzeugten, mit
Indium-111-Oxychinolin markierten, antigenbeladenen menschlichen DCs nach i.v., subkutaner
(s.c.) und intradermaler Injizierung analysiert wurde [20]. Die i.v. injizierten DCs
gelangten in die Lunge und verteilten sich dann auf Leber, Milz und Knochenmark, wurden
jedoch in Lymphknoten oder Tumoren nicht nachgewiesen. Dasselbe gilt für s.c. injizierte
dendritische Zellen. Lediglich die intradermale Injektion führte zu einem kleinen
Prozentsatz an DCs, die rasch in die regionalen Lymphknoten wanderten. Es muss betont

werden, dass sich von den Experimenten mit Mäusen nicht auf die verschiedenen Parameter
einer auf dendritischen Zellen beruhenden Impfung des Menschen schließen lässt, und
die Bestimmung dieser wichtigen Parameter in verschiedenen klinischen Tests am Menschen
ist eine kühne, aber unvermeidbare Aufgabe.
Schließlich ist (neben der klinischen Reaktion) die Entwicklung von Standardkriterien für
die Bewertung und den Vergleich der Wirksamkeit von Impfstoffen von großer Bedeutung.
Schwierig ist insbesondere die quantitative Bestimmung spezifischer CTL-Reaktionen,
da spezifische CTLs im Blut nicht so häufig auftreten, als dass man sie in funktionellen
Tests ohne vorangegangene Stimulation mit antigenbeladenen APCs in vitro quantitativ
bestimmen könnte. Durch diesen Amplifikationsschritt könnte sich jedoch das Krankheitsbild
des Patienten verzerrt darstellen.
Das Problem der Autoimmunität
Kürzlich wurde in einem Mäuseversuch belegt, dass eine Impfung mit dendritischen Zellen
zu einer autoimmunen Zerstörung von Inselzellen der Bauchspeicheldrüse führen
kann, die das Zielantigen exprimieren [26]. Während der auf dendritischen Zellen beruhenden
Impfung von Melanompatienten mit Melanozytenantigenen wurde die Tumorregression
gelegentlich mit der Zerstörung von Melanozyten in Zusammenhang gebracht,
was zu einem Pigmentverlust der Haut führt (Vitiligo). Bemerkenswerterweise wurde in
diesen Fällen nicht von Autoimmunsymptomen berichtet, die zu Störungen anderer Organe
führten. Nach extensiven Impfungen wurde lediglich in Einzelfällen eine mäßige und
vorübergehende Erhöhung der antinuklearen oder anti-TSH- (schilddrüsenstimulierendes
Hormon) Rezeptorantikörper beobachtet [11]. Allgemein vertrugen die Patienten die Impfung
mit autologen dendritischen Zellen sehr gut und litten abgesehen von lokalen Reaktionen
(Hautrötung, Induration, Jucken) und erhöhter Körpertemperatur nicht unter Nebenwirkungen.
Selbst in klinischen Versuchen, in denen dendritische Zellen mit Tumorlysaten [11,23]
oder der gesamten Tumor-RNA beladen wurden, wurde nicht über signifikante Autoimmunitätssymptome
berichtet. Eine mögliche Erklärung für die fehlende Autoimmunität
ist, dass die Stimulierung der CTL-Reaktion einfach zu schwach ist, um eine Autoaggression
zu induzieren. Alternativ können die Mechanismen zur Auslösung einer peripheren
Toleranz gegenüber Antigenen, die in Tumorzellen und anderen Geweben vorliegen, eine
Aktivierung der autoreaktiven T-Zellen verhindern. Derzeit ist dieses Problem noch nicht
gelöst und die Impfung mit komplexen und nicht definierten Proteingemischen wird solange
fortgesetzt werden, wie der klinische Beleg für eine schwere Autoimmunzerstörung
fehlt. Wenn es uns jedoch gelingt, die Stärke der Antitumorreaktion durch Entwicklung
besserer Impfstoffe zu verbessern, könnte die Autoimmunität zu einem Problem werden.
In diesem Fall wäre es wichtig, über definierte tumorspezifische Antigene zu verfügen,
die jedoch derzeit für den Großteil der Neoplasien noch unbekannt sind. Diese Antigene
müssten idealerweise in den meisten Tumoren exprimiert werden, nicht jedoch in Gewebetypen,
die überlebenswichtig sind. Die Suche nach Tumorantigenen, die von verschiedenen
Tumorarten exprimiert werden, erscheint daher als gerechtfertigt.
Schlussfolgerung
Die Tumorimpfung auf DC-Basis stellt ein vielversprechendes und neuartiges Behandlungsverfahren
dar, mit dessen Hilfe die Standardbehandlungsoptionen für Tumoren ver-

essert werden können. In Versuchen zur DC-basierten Impfung wurden bei Patienten mit
malignen Melanomen, Nierenzellkarzinomen und hormonresistentem Prostatakrebs Komplett-
und Teilreaktionen in einer Häufigkeit beobachtet, wie sie bei etablierten Behandlungsverfahren
zuvor nicht auftraten. Die klinischen Daten weisen zwar darauf hin, dass
die auf dendritischen Zellen basierende Impfung wirksam sein könnte, doch der endgültige
Beweis des Wirkprinzips erfordert längere Versuche mit randomisierten Patientenkollektiven
zur Bestimmung der statistischen Signifikanz der berichteten Befunde. Die Ergebnisse
solcher Versuche werden zeigen, wie wirksam diese Impfung im Vergleich zu
Bestrahlungs- oder Chemotherapie ist und ob sie im Kampf gegen den Krebs zu einer
Routinemaßnahme wird.
Danksagung
Unser Dank gilt Frank Nestle und Luis Filgueira für das Zurverfügungstellen von Abbildung
2 sowie Frank Nestle und Silke Gillessen für die kritische Durchsicht des Manuskripts.
Unsere Arbeit wird von der Schweizer Krebsliga, der Krebsliga St. Gallen-Appenzell,
der Stiftung Propter Homines, OSKK, der Dietschweiler Stiftung##, der Spühl Stiftung,
dem Krebsforschungsinstitut, der Stiftung CaP CURE und der AstraZencca AG##
unterstützt.
Literatur
Abbildung 1: Costimulation von T-Zellen durch professionelle APCs. Die Ligation von
auf Th-Zellen exprimierten CD40L, Ox40 und CD28 mit CD40, OX40L und B-7.1 und
B-7.2 auf professionellen APCs führt zu einer raschen Verbreitung der antigenspezifischen
CTLs. CTLA-4 wird auf Th-Zellen exprimiert und kann eine CD28-vermittelte Costimulation
abschwächen. CD: Differenzierungscluster, CTLA-4: T-Lymphozyten-assoziiertes
Antigen 4.
Abbildung 2: Aufnahme einer ausgereiften dendritischen Zelle eines Menschen. Das Bild
der aus Haut isolierten Zelle [28] wurde mit einem Rasterelektronenmikroskop aufgenommen.
Zur Verfügung gestellt wurde es freundlicherweise von Frank Nestle und Luis Filgueira
vom Universitätskrankenhaus Zürich.
Abbildung 3: Auf unreifen und reifen dendritischen Zellen exprimierte Schlüsselmoleküle.
a) Unreife dendritische Zellen können Antigene aktiv durch Phagozytose oder rezeptorvermittelte
Endozytose aufnehmen. Danach löst die Produktion von Chemokinen und entzündungsfördernden
Zytokinen eine kongenitale Immunantwort aus. b) Nach der Reifung.
Dendritische Zellen regulieren Moleküle herunter, die an der Aufnahme von Antigenen
beteiligt sind. Moleküle, die an der Wechselwirkung zwischen dendritischen Zellen und
T-Zellen sowie an der Antigendarstellung beteiligt sind, werden dagegen heraufreguliert.
Schließlich rufen die dendritischen Zellen durch Aktivierung des zellulären Teils des spezifischen
Immunsystems eine spezifische Immunantwort hervor. Die Eigenschaften der
auf den DCs exprimierten Moleküle sind im Abschnitt „Dendritische Zellen„ näher erläutert.
a) Kongenitale Immunität: Anlagerung von Granulozyten, Makrophagen, NK
Unreife dendritische Zelle
Erregerassoziierte Pilz- und Bakterienmuster

Komplementfixiertes Antigen
Komplementrezeptor
Antikörperfixiertes Antigen
Chemokine
Entzündungsfördernde Zytokine
Mannoserezeptor
Geschwächte Körperzellen
Abraumrezeptor
Apoptotische Zellen
Collektine
b) Spezifische zelluläre Immunität
Reife dendritische Zelle
T-Zelle
Zellhaftmoleküle
Costimulation
Chemotaxis
LN-Endothel
Tabelle 1. Definierte menschliche TAAs
Melanozytendifferenzierungsantigene (exprimiert in Melanomen, Melanozyten, Retina)
MART-1 (Melan-A)
Glycoprotein (gp)100 (Pmel17##)
Tyrosinase
Gp75 (Trp-1), Trp-2 40% Aminosäurehomologie mit Tyrosinase
Weitere gewebegebundene Antigene
CEA Darm-, Magen-, Bauchspeicheldrüsenkarzinom, NSCI.C##
α-Fetoprotein Leberzellkarzinom, Keimzellentumoren
Muc-1) Darm-, Bauchspeicheldrüsen-, Lungen-, Brustkarzinom
PSA Beinahe ausschließlich in der Prostata exprimiert (normales,
hyperplastisches und malignes Gewebe)
PSMA dito
PAP dito
PSCA dito
ber-abl Akute lymphoblastische Leukämie
IgG-Idiotyp β-Zellen-Lymphome
G250 Nierenzellkarzinom
Onkofetales Antigen Kolorektal-, Eierstock-, Brustkarzinom
Hodenkrebsantigene
MAGE-1-13 In unterschiedlichem Maße bei Melanomen, Speiseröhren-,
Eierstock-, Blasen-, Prostata-, Lungenkrebs exprimiert
(MAGE-3 auch bei Kopf- und Halskrebs SCC)
GAGE-1-8 dito
BAGE dito

RAGE dito
PAGE-1.2## dito
NY-ESO-I/I AGE-1##
SSX-2 (HOM-MEL40##) 1(X:18) Translokation eines Synovialsarkoms
HOM-TES-14 Gliom und Brustkrebs
Tumor- und patientenspezifische mutierte Genprodukte
CDK-4 Cyclinabhängige Kinase, Melanom
β-Catenin Melanom
Caspase-8 Mutation eines Stop-Kodons in SCC
HLA-A2 Nierenzellkarzinom
Mum-1 Mutation einer Intron-/Exongrenze
KIAA0205## in Blasenkarzinom-Zellinie entdeckt
P53 exprimiert in zahlreichen Tumoren, „Hotspots“
Ras häufig bei Bauchspeicheldrüsen- und Darmkarzinomen,
„Hotspots„
Viraler Ursprung
HPV-16 E7## Gebärmutterhalskarzinom (menschliches Papillom-Virus 16
frühes Genprodukt 7)
HERV-K10 env##-Protein eines menschlichen endogenen Retrovirus in
RCC
EBV 1.MP2B, EβNA-4,##
gp320 Nicht-Hodgkin-Lymphom, Nasenrachenkarzinom
HBV, HCV-Kernproteine Hepatom
Verbreitet exprimiert, aber nur in Tumorgewebe erkannt
SART-1 Lunge, Speiseröhre
PRAMF NK-Inhibitionsrezeptor, Melanom
p15 Melanom
Muc-1 = Mucin 1; Mum = mutiert im Melanom; PAP = Prostata-Säurephosphatase;
PRAMF = vorzugsweise exprimiertes Melanomantigen; PSA = prostataspezifisches Antigen;
PSCA = Prostatastammzellenantigen; PSMA = prostataspezifisches Membranantigen;
SART = von T-Zellen erkanntes SCC-Antigen; SCC = Schuppenzellkarzinom; TRP
= Tyrosinaseähnliche Proteine

Tabelle 2. Versuche mit Impfstoffen auf Basis dendritischer Zellen
Impfstoff Klinische Reaktion Literatur
Malignes Melanom
MAGE-1-Peptid + unreife DCs i.v. 3 Patienten, keine Reaktion 17
MART-1, Tyrosinase, gp100-Peptid + 16 Patienten, 2 CR, 2 PR, 2 MR 18
unreife DCs i.v.
Tyrosinase, MART-1, gp100, MAGE-1 16 Patienten, 2CR, 3 PR, 1 MR 11
und -3-Peptidgemisch, unreife DCs
intranodal + KLH
MAGE-3-Peptid, reife DCs intradermal 11 Patienten, 6 PR 12
+ Tetanustoxoid/Tuberculin
Nierenzellkarzinom
Tumorlysat + reife DCs + KLH 7 Patienten, 1 PR, 5 SD 23,24
DC-Tumorzellfusion, durch Bestrahlung 17 Patienten, 4 CR, 2 PR, 2 SD 25
abgestorben
Bauchspeicheldrüsenkarzinom
Peptidmutante p21ras + PBMC i.v. 5 Patienten, keine klinische Reaktion 22
Nicht-Hodgkin-Lymphom
Mit Id + KLH i.v. immunologisch
trainierte (geprimte) unreife DCs 10 Patienten, 3 CR/PR, 6 SD 27
Prostatakarzinom
2 Peptide aus PSMA, unreife DCs i.v. 33 Patienten, 2 CR, 6 PR, 1 SD 19
Kolorektal-, Brust-, Lungenkarzinom
Mit CEA-RNA immunologisch trainierte
(geprimte) unreife DCs 26 Patienten, 1 CR/PR, 2 MR, 4 SD 20,21
Aus CEA stammende Peptide i.v. 19 Patienten, 1 MR, 1 SD 20,21
CR = Komplettreaktion
PR = Teilreaktion
MR = gemischte Reaktion
SD = stabile Erkrankung

Cancer Res 2001 Feb 1;61(3):842-7
Vaccination of malignant glioma patients with peptide-pulsed dendritic
cells elicits systemic cytotoxicity and intracranial T-cell infiltration.
Yu JS, Wheeler CJ, Zeltzer PM, Ying H, Finger DN, Lee PK, Yong WH, Incardona F,
Thompson RC, Riedinger MS, Zhang W, Prins RM, Black KL.
Maxine Dunitz Neurosurgical Institute, Cedars-Sinai Medical Center, Los Angeles, California
90048, USA. blackk@cshs.org
In this Phase I trial, patients' peripheral blood dendritic cells were pulsed with peptides eluted
from the surface of autologous glioma cells. Three biweekly intradermal vaccinations of peptide-pulsed
dendritic cells were administered to seven patients with glioblastoma multiforme
and two patients with anaplastic astrocytoma. Dendritic cell vaccination elicited systemic cytotoxicity
in four of seven tested patients. Robust intratumoral cytotoxic and memory T-cell
infiltration was detected in two of four patients who underwent reoperation after vaccination.
This Phase I study demonstrated the feasibility, safety, and bioactivity of an autologous peptide-pulsed
dendritic cell vaccine for patients with malignant glioma.
Publication Types:
• Clinical trial
• Clinical trial, phase i
PMID: 11221866 [PubMed - indexed for MEDLINE]

AMT Übersicht
Dendritische Zellen
Möglichkeiten und Grenzen der Immuntherapie von
Krebserkrankungen
B.Hildenbrand, P. Jantscheff, U. Massing, C. Unger und M. Azemar, Freiburg
Seit vielen Jahrzehnten werden unterschiedliche immunologische Ansätze
zur Therapie von Tumorerkrankungen klinisch getestet. Dabei konnte gezeigt
werden, dass immunologische Effektormechanismen prinzipiell in der Lage
sind, auch große Tumorzellenmassen in vivo spezifisch zu zerstören. Klinische
Erfolge konnten jedoch bis vor wenigen Jahren nur in Einzelfällen erzielt
werden. Neue Erkenntnisse im Bereich der Tumorimmunologie haben in
den letzten Jahren dazu geführt, dass antitumorale Immuntherapien wieder
in den Mittelpunkt des Interesses gerückt sind. Zum einen konnten Antigene
identifiziert werden, die von -Tumorzellen exprimiert werden und damit als
potentielle Ziele für antitumorale Immuntherapien dienen können, zum anderen
versteht man heute die Funktion und Regulation des Immunsystems wesentlich
besser. Dabei haben die Erkenntnisse über die Bedeutung von dendritischen
Zellen (DC) bei der Aktivierung und Regulation der Immunantwort
zur Entwicklung neuer Erfolg versprechender immuntherapeutischer Ansätze
bei unterschiedlichen Tumorenititäten geführt. Eines dieser Therapieprinzipien
beruht darauf, dass autologe oder allogene dendritische Zellen mit Hilfe
etablierter In - vitro - Methoden gewonnen und anschließend mit Tumorantigenen
„beladen“ werden. Die Vakzinierung mit Tumorantigen (TA) - beladenen
dendritischen Zellen hat wenige Nebenwirkungen und ist mittlerweile für
die klinische Anwendung geeignet. Dieser Übersichtsartikel soll die neuesten
Fortschritte bei der Vakzinierung mit dendritischen Zellen beleuchten und
diese Form der antitumoralen Immuntherapie kritisch diskutieren. (Arzneimitteltherapie
2002;20:7-13.)
Auslösen einer antitumoralen
Immunreaktion
Um eine spezifische antitumorale
Immunantwort auszulösen,
gibt es drei grundsätzliche Voraussetzungen:
1. Die Antigenität der Tumorzellen
bzw. Die Expression Tumor
- spezifischer oder - assoziierter
Antigene in diesen Zellen.
2. Die Präsenz Antigen - präsentierender
Zellen (APC) - wie
dendritischer Zellen, Makrophagen
oder B - Zellen - und ihre
Fähigkeiten, Tumorantigen auf-
zunehmen, zu prozessieren und
zu präsentieren.
3. Das Vorhandensein und die
Stimulierbarkeit spezifischer, restringierter,
CD8+-zytotoxischer
T - Zellen (DTLs) und CD4+-
Helferzellen (ThZellen)
Neben Antigen - spezifischen
antitumoralen Immunreaktionen
sind auch unspezifischere Reaktionen
durch Makrophagen oder
natürliche Killerzellen (NK) bekannt.
So können zum Beispiel
Tumorzellen, die keine MHC-
Moleküle mehr exprimieren und
damit die Fähigkeit zur Antigenpräsentation
verloren haben, von
aktivierten NK - Zellen erkannt
und zerstört werden [1].

Abkürzungen
DC: Dendritische Zellen
APC: Antigen-präsentierende Zellen
NK: Natürliche Killerzellen
TA: Tumorantigen
TAA: Tumor-assoziiertes Antigen
TSA: Tumor-spezifisches Antigen
Th-Zelle: CD4+-T-Helferzelle
CTL: CD8+ zytotoxische T-Zelle
GM-CSF: Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierender
Faktor
TNF-α: Tunornekrosefaktor alpha
DTH: delayed-type hypersensitivity
test
Tab.1 Definierte menschliche Tumorantigene
Hodentumorantigene MAGE-1-3,
GAGE-1-8,
BAGE,
RAGE,
PAGE-1-2,
LAGE-1
HOM-TES-14
Melanozytendifferenzierungs-
Antigene
Prostatagewebsspezifische
Antigene
Andere gewebsspezifische
Antigene
Tumor- und Patientenspezifische
mutierte
Genprodukte
Abb. 1. APC: Antigen-Aufnahme und Antigen-Präsentation (PAMP
= pathogen-associated molecular patterns)
Tyrosinase, gp75 (Trp-1),
gp100
MART-1
PSA, PSMA,
PAP, PSCA
IgG-idiotyp
Onkofetales Antigen
CEA
Alpha-Fetoprotein
Muc-1
G250
HLA-A2
P53
ras
β-Catechin
Mut L9
CDK4
Bcr-abl
Virale Antigene HPV-16 E7
EBV LMP28
EBNA-4
Ösophaguskarzinom, Melanom,
Ovarialkarzinom, Blasenkarzinom,
Prostatakarzinom, Lungentumoren
Glioblastom, Mammakarzinom
Melanom, Melanozyten und Retina
Gutartiges und bösartiges
Prostatagewebe exprimiert
B-Zell-Lymphom
Mammakarzinom, Ovarialkarzinom,
kolorektales Karzinom, NSCLC
Lebermalignome, Pankreaskarzinom,
Mammakarzinom
Keimzelltumoren, Lebermalignome
Lungentumoren, kolorektales Karzinom
Nierenzellkarzinom
Nierenzellkarzinom
Unterschiedliche Tumorentitäten
Häufig im Pankreas- und Kolonkarzinom
Melanom
Fibrosarkom
Melanom
CML
Zervixkarzinom
Non-Hodgkin-Lymphom
Nasopharyngeales Karzinom
Muc-1=Mucin 1, PAP=prostatic acid phosphatase, PRAME=preferentially expressed antigen of melanoma, PSA=prostatespecific
antigen, PSCA=prostate stem cell antigen, PSMA=prostate specific membrane antigen, CDK4=cyclin-dependent
kinase

Eine zentrale Rolle bei der Initiation
einer Tumor - spezifischen
Immunantwort spielen
Antigen - präsentierende Zellen
(Abb. 1). Ihre primäre Funktion
besteht darin, Antigene aufzunehmen,
zu prozessieren und zu
präsentieren. Nach Prozessierung
durch die zelleigene Maschinerie
der Antigen - präsentieren
- den Zellen (Proteasomen,
Transportprotein assoziiert
mit Antigen - Prozessierung =
TAP, Lysosomen) werden Antigene
in Form von 8-10 und 15
bis 23 Aminosäuren langen Peptiden
in den entsprechenden Bindungstaschen
der MHC-
Klasse-1- und der MHC - Klasse
- II-Moleküle physikalisch gebunden
und auf der Zelloberfläche
präsentiert.
Die antigenen Peptide können
von CD8+-toxischen Zellen
(MHC Klasse I) oder DC4+-T-
Helferszellen (MHC Klasse II)
spezifisch erkannt werden, sie
führen zu einer Stimulation dieser
Effektorzellen. Dabei werden
die immunologischen Effektorzellen
je nach Art der Antigen -
Präsentation, der Zytokin - Zusammensetzung
und des Aktivierungsstatus
reguliert [2,3].
Aktivierte CD8+-toxische Zellen
können antigene Strukturen erkennen,
die auf MHCS der Klasse
I präsentiert werden. Sie sind
in der Lage, die Antigen - tragenden
Zellen zu zerstören.
Voraussetzung für einen spezifischen
Angriff von CD8+-toxischen
Zellen auf Tumorzellen ist
demnach, dass die Tumorzellen
sowohl MHC - Klasse - I - Moleküle
als auch die entsprechenden
antigenen Peptide der Tumorantigene
auf der Oberfläche
exprimieren [4].
Tumorantigene
Prinzipiell kann zwischen Tumor
- spezifischen (TSA) und
Tumor - assoziierten (TAA) Antigenen
unterschieden werden.
Mehrere Arten von Tumorantigenen
wurden bisher beschrieben
(5, 6].
Während Tumor - spezifische
Antigene definitionsgemäß ausschließlich
in Tumorzellen detektierbar
sind, kommen Tumor -
assoziierte Antigene auch in normalen
Zellen vor. Sie werden jedoch
von Tumorzellen stark
überexprimiert oder anomal präsentiert.
Die In - vitro -Identifikation der
auf MHC - Klasse - I - Molekülen
präsentierten und durch Tumor
- spezifischen CD8+-toxische
Zellen erkannten antigenen
Peptide erfolgt hauptsächlich
durch vier Methoden:
1.Transfektion rekombinanter
DNS aus Tumor - DNS - Bibliotheken
in Zellen, die präsentierende
MHC - Moleküle exprimieren
[5]
2. Biochemische Reinigung von
Peptiden, die von MHC - Molekülen
aus Tumorzellen eluiert
wurden [7]
3. Computer - gestütztes Design
von Peptiden [8]
4. Screening der zellulären Immunantwort
gegen Tumorantigene
[9, 10]
Diese Methoden haben bereits
zur Identifizierung von neuen
Antigenen geführt. Die potentiellen
- spezifischen Peptide werden
jeweils auf ihre Fähigkeiten
getestet, spezifisch an bestimmte
MHC - Klasse - I - Moleküle zu
binden. Außerdem wird im Blut
oder anderen Geweben von Tumorpatienten
mit entsprechenden
MHC - Klasse - I - Molekülen
nach CD8+-toxischen Zellen
nachweisbar, werden sie amplifiziert
und ihre Zytotoxizität gegen
verschiedene normale Zel-
Abb. 2. Interaktion von T-Zellen
und Antigen-präsentierende Zelle
(APC). Um inaktive T-Zellen aktivieren
zu können, muss der Antigen-spezifische
T-Zell-Rezeptor
(TCR) an ein präsentiertes Peptidantigen
binden, das durch MHC-
Moleküle der Klasse I oder II präsentiert
wird. Unmittelbar nach
der Antigen/TCR-Bindung kommt
es zu einer forcierten Expression
des CD40-Liganden, der mit dem
CD40-Rezeptor der APC in
Wechselwirkung tritt. Das dadurch
ausgelöste Signal aktiviert
die APCs und verstärkt die Expression
und Oberflächenpräsentation
kostimulatorischer Moleküle,
wie B7-1, B7-2 oder Ox40L.
Die kostimulatorischen Moleküle
der APC binden an T-Zell-Rezeptoren
wie CD28 oder Ox40 und
führen zu einer vollständigen Aktivierung
der T-Zellen. Nach einer
Aktivierungszeit von 12 bis 24 h
exprimieren die T-Zellen verstärkt
CTLA-4, einen zweiten Liganden
für B7-1/B7-2. CTLA-4
erhöht die Erregungsschwelle für
die T-Zellaktivierung und führt so
zu einer verminderten Erregbarkeit
der T-Zellen.
len, geprüft. Wird die Tumor -
spezifische antigene Potenz bestätigt,
kann ihr klinisches Potential
im Rahmen klinischer
Studien untersucht werden.
Definierte Tumorantigene

Sowohl Tumor - spezifische als
auch Tumor - assoziierte Antigene
können von CTLS spezifisch
erkannt werden. Sie eignen sich
daher als Zielstrukturen für immunologischeTherapiestrategien.
Wie aus der Tabelle I ersichtlich
ist, konnte mittlerweile
ein breites Spektrum von Tumor
- spezifischen Antigenen identifiziert
werden[11]
Viele Tumorantigene sind in der
Regel gut detektierbar, aber nur
bei einer begrenzten Anzahl von
Tumoren nachweisbar, zum Beispiel
beim Zervix - Karzinom,
das in über 90% der Fälle mit einer
Infektion durch menschliche
Papilloma - Viren assoziiert ist.
Viel versprechende Targets für
Immuntherapien sind Tumor -
spezifische Antigene, wie die
Peptidmoleküle der cancer testis
family (MAGE; GAGE; BAGE;
RAGE); die in unterschiedlichen
Ausmaß von Tumoren der Ovarien,
der Blase, der Prostata, der
Lunge oder der Haut exprimiert
werden. Weitere Beispiele sind
die Melanozyten - Differenzierungsantigene
MART-1, gp 100,
TRP1-2 und Tyrosinase - diese
Tumor - spezifischen Antigene
treten insbesondere beim Melanom
auf - sowie die Prostatakarzinome
- Antigene PSA (Prostata
- spezifisches Membranatigen)
und PAP (prostatic acidic
phosphatase). Außerdem wurde
in der Mehrzahl der hepatozellulären
Karzinome die Überexpression
des karzinoembryonalen
Antigens (CEA) und von
Mucin (MUC-1) in mehreren
epithelialen Tumoren gezeigt.
Weitere Kandidaten sind idiotypische
klonale Immunglobuline bei B -
Zell - Lymphomen.
Dendritische Zellen
Abb. 3. Vakzinierungsschema mit dendritischen Zellen (DC) (TU = Tumor,
TC = T-Zelle)
Dendritische Zellen sind eine
heterogene Gruppe von spezialisierten
Antigen - präsentierenden
Zellen, welche die einzigartige
Fähigkeiten haben, naive T -
Zellen zu aktivieren[12]. Sie
verfügen über eine intrazelluläre
Maschinerie, die in der Lage ist,
fremde Antigene aufzunehmen,
zu prozessieren und als lösliche
Peptide auf MHC Klasse I und II
zu präsentieren, und damit sowohl
CD8+zytotoxische T - Zellen
als auch CD4+T-Helferzellen
zu stimulieren. Für die klinische
Anwendung interessant ist
die Fähigkeit von „Antigen -beladenen“
dendritischen Zellen,
als eine Art zelluläres Adjuvans
auch gegen schwach immunogene
Antigene - dazu zählen auch
Tumorantigene - eine ausreichende
Immunantwort zu induzieren.
Ein Großteil der dendritischen
Zellen differenzieren sich auf
dem Monozyten - Makrophagen
-Differenzierungsweg aus
CD34+-Knochenmarksvorläuferzellen
[13,14]. Monozyten
wandern über das Blutsystem in
periphere Organe, wo sie sich
entweder zu Makrophagen oder
dendritischen Zellen differenzieren.
Dendritischen Zellen rei-
chern sich vor allem in Geweben
an, die den Organismus gegenüber
der Umwelt abgrenzen, wie
Haut, Gastrointestinal- oder
Urogenitaltrakt, und fungieren
dort als Wächter für eindringende
Pathogene. Interstitielle dendritische
Zellen kommen in nahezu
allen Geweben mit Ausnahme
des Gehirns vor.
In den peripheren Geweben residieren
die dendritischen Zellen
als „unreife“ Zellen. Insbesondere
in Gegenwart von inflammatorischen
Signalen nehmen dendritische
Zellen sehr schnell
fremde Antigene auf, durchlaufen
eine Differenzierung zu potenten
Antigenen -präsentierenden
Zellen und wandern in die
sekundären Iymphoiden Gewebe,
vorzugsweise in die T - Zellregion
der drainierenden
Lymphknoten ein [15]. Dort präsentieren
sie die zuvor aufgenommenen
Antigene den T- oder
B - Lymphozyten und induzieren
eine Immunantwort.
Aufgenommen werden die Antigene
über phagozytäre Mechanismen
wie Makropinozytose,
Coiling oder Rezeptor - vermittelte
Endozytose [16,17]. Verantwortlich
für die Rezeptor

-vermittelte Aufnahme sind in
erster Linie Multilectin - Rezeptoren,
Mannose - Rezeptoren,
Kollektine (collagen - like lectins),
toll - like receptors (TLR 2
und 4) und die scavenger receptors.
Antigene können auch
durch Antikörper oder Komplement
opsoniert werden, die als
Brückenmoleküle zwischen dem
Antigen und spezifischen Fc -
Rezeptoren (FcγR I-II) oder
Komplement - Rezeptoren dienen
und so zu einer verstärkten
Aufnahme führen [17,18].
Während des Reifungsprozesses
kommt es zu einer verstärkten
Expression von Zytokinen. Damit
sind die dendritischen Zellen
in der Lage, T - Zellen anzulocken.
Durch die gleichzeitig erhöhte
Expression von Adhäsionsmolekülen,
wie zum Beispiel
intrazellulären Adhäsionmulekülen
(ICAM-1 + 3) oder des Leukozytenfunktionantigens
LFA-3), kommt es zu einer verstärkten
Bindung zwischen dendritischen
Zellen und T - Zellen
[19,20].
Zur vollständigen Aktivierung
benötigen T - Zellen zusätzlich
zu den passenden über MHC-
Moleküle präsentierten Antigenen
einer Reihe weiterer Signale
durch - kostimulatorische Rezeptoren,
wie zu Beispiel
B7/CD28, Ox40/Ox40L oder
CD40/CD40L [21-23], (Abb.2).
Die Interaktion von CD28 und
Ox40 mit ihren jeweiligen Rezeptoren
B7 1 und Ox40L aktiviert
die T - Zell - Proliferation
und kann eine enorme Expansion
der Antigen - spezifischen
T - Zellen verursachen. Interagieren
CD40 und CD40L, führt
dies dazu, dass dendritische Zellen
IL-12 produzieren, ein wich-
tiges Zytokin bei der Stimmulation
der CTL- Antwort [24].
T - Zellen, die auf passende spezifische
Antigen treffen, ohne
durch zusätzliche kostimulatorische
Signale aktiviert zu werden,
tendieren zu Anergie - dadurch
fehlt
dann eine Immunantwort [25].
Auch kann die Kostimulation
selbst beeinflusst werden,
zum Beispiel durch CTLA-4,
das die CD28-assoziierte Kostimulation
inhibiert, die Erregungsschwelle
für T - Zellen erhöht
und so zur Hemmung der T
- Zell - Antwort beiträgt [26].
Die T - Zellantwort gegen Tumorantigene
wird häufig durch
die Tumorzellen selbst limitiert.
Verantwortlich dafür sind Immun
„Escape“ - Mechanismen
wie

Tab. 2. Klinische Studien zur Vakzinierung mit antigenbeladenen dendritischen Zellen (CR = komplette Remission,
PR = partielle Remission, MR = geringe [minor] Remission, SD = stabile Erkrankung, KLH = keyhole limpet
hemocyanin, Hämocyanin der Schlüsselloch-Napfschnecke, ein hochmolekulares Antigen mit guter Immunogenität)
Tumorentität Vakzinierung Klinische
Ansprechrate
Malignes Melanom Peptide: MART-1, Tyrosinase, gp100; APC:autolo- 16 Patienten:
ge unreife DCs; Applikation: intravenös
2 CR, 2 PR, 2 MR
Malignes Melanom Peptide: Tumorzell-Lysat or MAGE-1, MART-1,
gp100, u.a. + KLH; APC: autologe unreife DCs;
Applikation: intranodal
Malignes Melanom Peptide: MAGE-3 + Tuberkulin/Tetanustoxoid;
APC: autologe reife DCs; Applikation: intrakutan,
subkutan und intravenös
Nierenzellkarzinom Peptide: Tumorzell-Lysate + KLH; APC: autologe
reife DCs; Applikation: intravenös
Nierenzellkarzinom Fusion von Tumorzellen und allogenen DCs, letal
bestrahlt; Applikation: subkutan
Prostatakarzinom Peptide: PSMA; APC: unreife autologe DCs; Applikation:
intravenös
CEA-pos. Tumoren
(Bronchial-, Brust- oder
kolorektales Karzinom)
1. die Herunterregulation oder
der Verlust der Expression der
MHC - Moleküle [27,28],
2. die Veränderung der Antigenprozessierung,
die zu einem Verlust
der Antigpräsentation durch
Tumorzellen führt [29].
3. die Abwesenheit kostimulatorischer
oder Adhäsionsmoleküle
[30,31] und
4. die Produktion von Faktoren,
z.B. TGF-β, IL-10 oder Fas - Ligand
(FasL), welche die Immunantwort
modifizieren [32,33].
Diese Mechanismen haben sich
im Zuge der Tumorentwicklung
Peptide:CAP-1; APC: unreife autologe DCs; Applikation:
intravenös, intradermal
Glioblastom Peptide: tumorspezifisch; APC: autologe DCs; Applikation:
subkutan
Non-Hodgkin,
B-Zell-Lymphom
Peptide: tumorspez. Immunglobuline + KLH; APC:
autologe DCs; Applikation: intravenös + subkutan
erfolgreich im Rahmen der Auseinandersetzung
mit immunologischenÜberwachungsmechanismen
entwickelt [34] und sind
für den Erfolg oder Misserfolg
einer Gen/Immuntherapie von
großer Bedeutung [35,37].
Entwicklung und „Beladen“
von dendritischen Zellen
Zwei Standardmethoden für die
Generierung von menschlichen
dendritischen Zellen wurden bisher
beschrieben [38,39]. Mit
Hilfe der ersten Methode werden
hämatopoetische CD34+-
16 Patienten:
2 CR, 3 PR, 1 MR
11 Patienten:
0 CR, 6 PR
7 Patienten:
0 CR, 1 PR, 5 SD
17 Patienten:
4 CR, 2 PR, 2 SD
37 Patienten:
1 CR, 10 PR
21 Patienten:
0 CR/PR, 1 MR, 1 SD
9 Patienten:
verlängertes Überleben
John et al. 2001
4 Patienten:
1 CR, 1 PR, 1 SD
Literatur
[52]
[49]
[50]
[58]
[53]
[54]
[55]
[61]
[62]
Stammzellen aus dem Knochenmark
[40], dem Nabelschnurblut
[41] oder dem peripheren Blut
[42,43] isoliert und in Gegenwart
von GM-CSF und TNF-α
kultiviert.
Für den klinischen Einsatz praktikabler
ist die Gewinnung von
dendritischen Zellen aus
CD14+Monotyten aus dem peripheren
Blut. Nachdem sie in vitro
mit GM-CSF und IL-4 kultiviert
wurden differenzieren sich
die Monozyten zu dendritischen
Zellen [39,44]. Durch zusätzliche
Faktoren wie TNF-α, IL-1β,

Prostaglandin E2, IL-6 oder monozyte
conditioned medium
kann eine Reifung der dendritischen
Zellen induziert werden
[45-47].
Auf diesem Weg können sowohl
autologe als auch allogene MHC
- kompatible DCS in vitro gewonnen
und mit Tumor - Antigenen
„beladen werden (Abb.3).
Zum passiven „Beladen“ können
zum Beispiel synthetische Peptide
von Tumor - Antigenen verwendet
werden. Es ist jedoch
auch möglich, unreife dendritische
Zellen mit kompletten Antigenen,
zum Beispiel Tumorextrakten,
zu „füttern“, so dass die
DCS die Proteine aufnehmen und
selbst prozessieren. Alternativ
können die dendritischen Zellen
mit Tumor - RNS, -DNS oder
mit cDNS von etablierten Tumor
- Antigenen transfiziert werden.
Eine zusätzliche Möglichkeit,
Tumor - Antigen - präsentierende
dendritischen Zellen herzustellen,
ist die Zellfusion von
dendritischen Zellen mit Tumorzellen.
Der Vorteil dieser Methode
besteht darin, dass auch
bisher nicht indentifizierte Tumor
- Antigene von den dendritischen
Zellen präsentiert werden
können.
Klinische Studien zur DC-
Vakzinierung
Gegenwärtig haben die DC - basierten
immuntherapeutischen
Ansätze das Stadium der klinischen
Studien erreicht. Erste Ergebnisse
erscheinen viel versprechend
und wurden mittlerweile
publiziert (Tab.2). Am weitesten
fortgeschritten ist die Entwicklung
der DC-Vakzinierung bei
der Behandlung von Patienten
mit Melanomen [48-52]. Diese
Studien zeigten untereinander
vergleichbare klinische Ergebnisse
mit einer Ansprechrate von
20 bis 40%. Sehr ermutigende
klinische Resultate wurden auch
bei der Immuntherapie von Nierenzellkarzinomen
erreicht [53].
So führte die Vakzinierung mit
allogenen dendritischen Zellen
nach Fusion mit autologen Tumorzellen
zu einem bemerkenswerten
klinischen Ansprechen
mit einer verhältnismäßig hohen
Remissionsrate von etwa 35%.
Diese hohen klinischen Ansprechraten
sollten allerdings
noch in weiteren Studien bestätigt
werden. Auch bei der Therapie
von weniger immunogenen
Tumoren, wie dem hormonrefaktären
Prostatakarzinom, wurde
ein klinisches Ansprechen erreicht
[54]. Weiter ermutigende
Ergebnisse konnten auch mit
Vakzinierungsstrategien erreicht
werden, bei denen Antigene wie
CEA für kolorektale Karzinome,
Brust- und Lungenkarzinome
[55, 56] oder Tumorzell - Lysate
für Nierenzelltumoren verwendet
wurden [57, 58].
Derzeit ist noch nicht abzusehen,
welche der DC - basierten
Vakzinierungen am geeignetsten
für eine Tumorbehandlung sein
werden. Wichtige Fragestellungen
sind noch nicht geklärt und
betreffen vor allem das genaue
Procedere der Vakzinierung,
zum Beispiel die Anzahl der
dendritischen Zellen, die Häufigkeit,
die Art und Ort der Applikation
oder Behandlungsdauer.
Um die optimale Applikationslokalisation
zu ermitteln, wurden
Untersuchungen mit radioaktiv
markierten dendritischen Zellen
durchgeführt. Hier zeigte sich lediglich
nach intrakutaner Injekti-
on eine Anreicherung der dendritischen
Zellen in den regionalen
Lymphknoten, während sich
die intravenös und subkutan injizierten
dendritischen Zellen vorwiegend
in der Lunge und später
in der Leber, der Milz und im
Knochenmark anreicherten [55].
Festzuhalten bleibt, dass es bisher
noch keine einheitlichen Kriterien
oder klinischen Standards
zu Durchführung immunologischer
Therapieprotokolle gibt.
Bei der zukünftigen Planung von
DC-Vakzinierungen sollten die
Klärung der Indikationsstellung
und die Optimierung des klinischen
Ansprechens verstärkt berücksichtigt
werden. Außerdem
ist es notwendig, Fragen zum genauen
Procedere der immunologischen
Therapien zu Gunsten
einer besseren Reproduzierbarkeit
in zukünftigen Studien mit
einzubeziehen.
Die Vakzinierung mit dendritischen
Zellen wurde von den Patienten
unabhängig von der Applikationsart
sehr gut toleriert.
Bis auf lokale Reaktionen im
Bereich des Applikationsortes
(Ödeme, Indurationen, Pruritus)
und gelegentliche Fieberreaktionen
zeigten sich keine größeren
Nebenwirkungen. Lediglich bei
Melanompatienten war nach
Vakzinierung mit Melanozytenantigenen
von einer Depigmentierung
der Haut (Vitiligo begleitend
zur Tumorregression
berichtet worden. Auch fanden
sich im Blut gelegentlich geringe
detektierbare Mengen an antinukleären
oder anti-TSH-(Thyroidea-stimulierendesHormon)-Rezeptor-Antikörper
[49]. Zeichen
einer Autoimmunität, die zur
Dysfunktion von Organen führten,
wurden bisher noch in keinem
Fall beschrieben. Auch kli-

nische Studien, in denen Tumorzell
- Lysatae oder Tumor - DNS
bzw. - RNS zur DC - Beladung
verwendet wurden, konnten bisher
von keiner signifikanten Autoimmunität
berichten.
Immundiagnostik
Immundiagnostische Methoden
dienen dazu, unspezifische oder
Antigen - spezifische Immunreaktion
zu bestimmen und zu
quantifizieren. Eine gute immunologische
Analytik könnte die
Basis der Tumorimmuntherapie
verbessern, die Vorauswahl geeigneter
Patienten
ermöglichen und im Idealfall abschätzbarer
machen, wie Patienten
auf immunologischer Therapien
ansprechen erden. Bisher
gibt es allerdings keine allgemein
anerkannte, standardisierte
immundiagnoistische Methode,
die eine ausreichende In - vivo-
oder In - vitro-Korrelation zwischen
Testergebnis und klinischen
Ansprechen der Therapien
zulässt.
In - vivo - Test
Zu den im Rahmen der Studien
häufig eingesetzten In - vivo -
Tests gehört der delayed-type
hypersenisitivity test (DTH). Die
Handhabung der DTH, zum Beispiel
des Multitest Merieux, ist
einfach. Bei entsprechender
Standardisierung kann der DTH
als Instrument eingesetzt werden,
um die spezifische Immunantwort
in vivo zu messen. Einige
klinische Studien konnten
bisher eine positive Korrelation
zwischen nachgewiesener DTH -
Reaktion und klinischen Ansprechen
der Immuntherapie zeigen
[49,59]. Ergänzend können
Hautbiospsien im Bereich der
DTH - Reaktion entnommenen
werden, die eine genauere immunhistologische
Analyse der
vorhanden Lokalreaktion ermöglichen
[60].
In - vitro - Test
Zur Untersuchung der Immunantwort
ist auch eine Vielzahl
von In - vitro - Methoden entwickelt
worden, zum Beispiel die
Durchflusszytometrie mit Fluoresceinbeladenen
MHC -Peptid -
Tetrameren, Zytotoyizitäts -
Assay, der Lymphoproliferation
- Assay, der Enzyme - linked Immunsoorbent
- Assay, (-ELISA)
oder der Enzyme - linked Immunosopot
- Assay (ELISPOT).
Die erwähnten Assays sind zwar
in der Lage, immunologische Parameter
zu bestimmen, eine eindeutige
reproduzierbare Korrelation
von Testergebnis und klinischen
Ansprechen konnte jedoch
bisher bei keinem der Testverfahren
gezeigt. werden.
Schlussfolgerung
Die Tumorvakzinierung mit dendritischen
Zellen ist eine viel
versprechende neue Behandlungsmethode.
Die in den bisherigen
Studien gezeigten Remissionen
bei Patienten mit Melanomen,
Nierenzelltumoren und
hormonrefraktären Prostatakarzinom
erreichten Häufigkeiten,
die den etablierten Methoden
zum Teil überlegen waren. Bestätigen
sich die ersten Ergebnisse,
könnte diese Form der Immuntherapie
zukünftig in der
Lage sein, die bisherigen antitumoralen
Behandlungsoptionen
zu erweitern.
Obwohl die klinischen Daten für
die Effektivität der DC - basierten
Vakzinierung sprechen, sind
für den endgültigen Beweis der
Wirksamkeit größere prospektiv
- randomisierte Studien werden
zeigen ob diese Form der Immuntherapie
das Potential hat, in
Zukunft das Spektrum der antitumoralen
Therapieoption zu erweitern.
Danksagung
Wir danken Renate Müller für
Durchsicht und Korrektur des
Manuskripts.
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Gegendarstellung
von Dr. med. Ulrich Kübler zum Report „Tumorzellen-Analyse mit kombinierter Magnetanreicherung.
Laser-Scanning-Zytometrie und visueller Kontrolle“ der Autoren Katharina
Pachmann et al
In Laborwelt IV/2001 wurde auf Seite 23 ff. im Rahmen des Reports „Tumorzellen-Analyse mit
kombinierter Magnetanreicherung. Laser-Scanning-Zytometrie und visueller Kontrolle“ der Autoren
Katharina Pachmann et all für die Klinik für Innere Medizin II der Friedrich-Schiller-Universität
Jena und für das Labor für spezielle Immunhämatologie und Gendiagnostik, Bayreuth,
behauptet, daß es bislang kein Verfahren gab, um das Ansprechern der zikulierenden Tumorzellen
auf eine adjuvante Chemotherapie direkt zu überprüfen.
Hierzu stelle ich Dr. med. Ulrich Kübler, fest, daß ich bereits im Jahre 1992 ein Verfahren erfand,
welches dies erlaubt. Hierbei werden transformierte Zellen in den Nachweisbereich hinein
angereichert, aus der Blutbahn isoliert und molekular charakterisiert. Die Zahl der disseminerenden
Tumorzellen kann dadurch quantifiziert werden und der Expressionsgrad aller relevanten
Onkoproteine inklusive des c-erb/B2 und der Chemoresistenz-assoziierten Onkoproteine kann
festgestellt werden.
Durch entsprechende Kontrollen der Zunahme oder Abnahme der Zahl zirkulierender Tumorzellen
sowie der Zunahme oder der Abnahme der Zahl der zirkulierender Tumorzellen sowie der
Zunahme oder der Abnahme des Expressionsgrades der exprimierten Onkoproteine kann somit
das Ansprechen auf die gewählte Therapieform seit 1992 dokumentiert werden.
Das Verfahren bedient sich validierter Sonden und monoklonaler Antikörper und im Unterschied
zum Nachweis lediglich tumorverdächtiger Zellen durch das Maintrac-Verfahren, bedient es sich
nicht irgendwelcher Surrogat-Marker, sondern der tatsächlicher Isolierung und molekularen Charakterisierung
disseminierender Tumorzellen. Das geschilderte Verfahren ist zugunsten der Dr.
Kübler GmbH patentrechtlich geschützt (Deutsches Bundespatentamt 4228389. Europäisches Patent
0.5584.715, US-Patent 5,529,903 GM 200 02319.5).
Die Autorin Prof. Dr. Pachmann hat sich unter dem 30.11.2001 mir gegenüber verpflichtet, die
oben genannte Behauptung zukünftig im geschäftlichen Verkehr nicht mehr zu wiederholen.
München, den 04.12.2001
Dr. med. Ulrich Kübler
Dr. Kübler GmbH, Tumor-Forschung,
Siebertstr. 6
81675 München
20 | Nr. I/2002 transkript LABORWELT

Fact Sheet 7.2
Cancer Facts
Date reviewed: 01/16/2001
Editorial changes made: 05/07/2002
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Biological Therapies: Using the Immune
System To Treat Cancer
Biological therapy (sometimes called immunotherapy, biotherapy, or biological
response modifier therapy) is a relatively new addition to the family of cancer
treatments that also includes surgery, chemotherapy, and radiation therapy. Biological
therapies use the body's immune system, either directly or indirectly, to fight
cancer or to lessen the side effects that may be caused by some cancer treatments.
The immune system is a complex network of cells and organs that work together
to defend the body against attacks by "foreign," or "non-self," invaders. This network
is one of the body's main defenses against disease. It works against disease,
including cancer, in a variety of ways. For example, the immune system may recognize
the difference between healthy cells and cancer cells in the body and work to
eliminate those that become cancerous.
Cancer may develop when the immune system breaks down or is not functioning
adequately. Biological therapies are designed to repair, stimulate, or enhance the
immune system's responses.
Immune system cells include the following:
● Lymphocytes are a type of white blood cell found in the blood and many other
parts of the body. Types of lymphocytes include B cells, T cells, and Natural
Killer cells.
B cells (B lymphocytes) mature into plasma cells that secrete antibodies (immunoglobulins),
the proteins that recognize and attach to foreign substances known as
antigens. Each type of B cell makes one specific antibody, which recognizes one
specific antigen.
T cells (T lymphocytes) directly attack infected, foreign, or cancerous cells. T
cells also regulate the immune response by signaling other immune system defenders.
T cells work primarily by producing proteins called lymphokines.

Natural Killer cells (NK cells) produce powerful chemical substances that bind to
and kill any foreign invader. They attack without first having to recognize a specific
antigen.
● Monocytes are white blood cells that can swallow and digest microscopic organisms
and particles in a process known as phagocytosis. Monocytes can also
travel into tissue and become macrophages, or "big eaters." Cells in the immune
system secrete two types of proteins: antibodies and cytokines.
Antibodies respond to antigens by latching on to, or binding with, the antigens.
Specific antibodies match specific antigens, fitting together much the way a key
fits a lock.
Cytokines are substances produced by some immune system cells to communicate
with other cells. Types of cytokines include lymphokines, interferons, interleukins,
and colony-stimulating factors. Cytotoxic cytokines are released by a type of T
cell called a cytotoxic T cell. These cytokines attack cancer cells directly.
Nonspecific Immunomodulating Agents
Nonspecific immunomodulating agents are substances that stimulate or indirectly
augment the immune system. Often, these agents target key immune system cells
and cause secondary responses such as increased production of cytokines and
immunoglobulins. Two nonspecific immunomodulating agents used in cancer
treatment are bacillus Calmette-Guerin (BCG) and levamisole.
BCG, which has been widely used as a tuberculosis vaccine, is used in the treatment
of superficial bladder cancer following surgery. BCG may work by stimulating
an inflammatory, and possibly an immune, response. A solution of BCG is instilled
in the bladder and stays there for about 2 hours before the patient is allowed
to empty the bladder by urinating. This treatment is usually performed once a
week for 6 weeks.
Levamisole is used along with fluorouracil (5–FU) chemotherapy in the treatment
of stage III (Dukes' C) colon cancer following surgery. Levamisole may act to restore
depressed immune function.
Biological Response Modifiers
Some antibodies, cytokines, and other immune system substances can be produced
in the laboratory for use in cancer treatment. These substances are often called biological
response modifiers (BRMs). They alter the interaction between the body's
immune defenses and cancer cells to boost, direct, or restore the body's ability to
fight the disease. BRMs include interferons, interleukins, colony-stimulating factors,
monoclonal antibodies, and vaccines.
Researchers continue to discover new BRMs, learn more about how they function,
and develop ways to use them in cancer therapy. Biological therapies may be used
to:

● Stop, control, or suppress processes that permit cancer growth;
● Make cancer cells more recognizable, and therefore more susceptible, to destruction
by the immune system;
● Boost the killing power of immune system cells, such as T cells, NK cells, and
macrophages;
● Alter cancer cells' growth patterns to promote behavior like that of healthy cells;
● Block or reverse the process that changes a normal cell or a precancerous cell
into a cancerous cell;
● Enhance the body's ability to repair or replace normal cells damaged or destroyed
by other forms of cancer treatment, such as chemotherapy or radiation; and
● Prevent cancer cells from spreading to other parts of the body.
Some BRMs are a standard part of treatment for certain types of cancer, while
others are being studied in clinical trials (research studies with people). BRMs are
being used alone or in combination with each other. They are also being used with
other treatments, such as radiation therapy and chemotherapy.
Interferons (IFN)
Interferons are types of cytokines that occur naturally in the body. They were the
first cytokines produced in the laboratory for use as BRMs. There are three major
types of interferons—interferon alpha, interferon beta, and interferon gamma; interferon
alpha is the type most widely used in cancer treatment.
Researchers have found that interferons can improve the way a cancer patient's immune
system acts against cancer cells. In addition, interferons may act directly on
cancer cells by slowing their growth or promoting their development into cells
with more normal behavior. Researchers believe that some interferons may also
stimulate NK cells, T cells, and macrophages, boosting the immune system's anticancer
function.
The U.S. Food and Drug Administration (FDA) has approved the use of interferon
alpha for the treatment of certain types of cancer, including hairy cell leukemia,
melanoma, chronic myeloid leukemia, and AIDS-related Kaposi's sarcoma. Studies
have shown that interferon alpha may also be effective in treating other cancers
such as metastatic kidney cancer and non-Hodgkin's lymphoma. Researchers are
exploring combinations of interferon alpha and other BRMs or chemotherapy in
clinical trials to treat a number of cancers.
Interleukins (IL)
Like interferons, interleukins are cytokines that occur naturally in the body and
can be made in the laboratory. Many interleukins have been identified; interleukin–2
(IL–2 or aldesleukin) has been the most widely studied in cancer treatment.
IL–2 stimulates the growth and activity of many immune cells, such as lymphocytes,
that can destroy cancer cells. The FDA has approved IL–2 for the treatment of
metastatic kidney cancer and metastatic melanoma.

Researchers continue to study the benefits of interleukins to treat a number of
other
cancers, including colorectal, ovarian, lung, brain, breast, prostate, some leukemias,
and some lymphomas.
Colony-Stimulating Factors (CSFs)
Colony-stimulating factors (CSFs) (sometimes called hematopoietic growth factors)
usually do not directly affect tumor cells; rather, they encourage bone marrow
stem cells to divide and develop into white blood cells, platelets, and red
blood cells. Bone marrow is critical to the body's immune system because it is the
source of all blood cells.
The CSFs' stimulation of the immune system may benefit patients undergoing cancer
treatment. Because anticancer drugs can damage the body's ability to make
white blood cells, red blood cells, and platelets, patients receiving anticancer
drugs have an increased risk of developing infections, becoming anemic, and bleeding
more easily. By using CSFs to stimulate blood cell production, doctors can
increase the doses of anticancer drugs without increasing the risk of infection or
the need for transfusion with blood products. As a result, researchers have found
CSFs particularly useful when combined with high-dose chemotherapy.
Some examples of CSFs and their use in cancer therapy are as follows:
● G-CSF (filgrastim) and GM-CSF (sargramostim) can increase the number of
white blood cells, thereby reducing the risk of infection in patients receiving chemotherapy.
G-CSF and GM-CSF can also stimulate the production of stem
cells in preparation for stem cell or bone marrow transplants;
● Erythropoietin can increase the number of red blood cells and reduce the need
for red blood cell transfusions in patients receiving chemotherapy; and
● Oprelvekin can reduce the need for platelet transfusions in patients receiving
chemotherapy.
Researchers are studying CSFs in clinical trials to treat some types of leukemia,
metastatic colorectal cancer, melanoma, lung cancer, and other types of cancer.
Monoclonal Antibodies (MOABs)
Researchers are evaluating the effectiveness of certain antibodies made in the
laboratory called monoclonal antibodies (MOABs or MoABs). These antibodies
are produced by a single type of cell and are specific for a particular antigen. Researchers
are examining ways to create MOABs specific to the antigens found on the
surface of the cancer cell being treated.
MOABs are made by injecting human cancer cells into mice so that their immune
systems will make antibodies against these cancer cells. The mouse cells producing
the antibodies are then removed and fused with laboratory-grown cells to
create "hybrid" cells called hybridomas. Hybridomas can indefinitely produce large
quantities of these pure antibodies, or MOABs.
MOABs may be used in cancer treatment in a number of ways:

● MOABs that react with specific types of cancer may enhance a patient's immune
response to the cancer.
● MOABs can be programmed to act against cell growth factors, thus interfering
with the growth of cancer cells.
● MOABs may be linked to anticancer drugs, radioisotopes (radioactive substances),
other BRMs, or other toxins. When the antibodies latch onto cancer cells,
they deliver these poisons directly to the tumor, helping to destroy it.
● MOABs may help destroy cancer cells in bone marrow that has been removed
from a patient in preparation for a bone marrow transplant.
MOABs carrying radioisotopes may also prove useful in diagnosing certain cancers,
such as colorectal, ovarian, and prostate.
Rituxan® (rituximab) and Herceptin® (trastuzumab) are examples of monoclonal
antibodies that have been approved by the FDA. Rituxan is used for the
treatment of Bcell non-Hodgkin's lymphoma that has returned after a period of improvement
or has not responded to chemotherapy. Herceptin is used to treat metastatic
breast cancer in patients with tumors that produce excess amounts of a protein
called HER–2.
(Approximately 25 percent of breast cancer tumors produce excess amounts of
HER–2.) Researchers are testing MOABs in clinical trials to treat lymphomas, leukemias,
colorectal cancer, lung cancer, brain tumors, prostate cancer, and other types
of cancer.
Cancer Vaccines
Cancer vaccines are another form of biological therapy currently under study.
Vaccines for infectious diseases, such as measles, mumps, and tetanus, are effective
because they expose the body's immune cells to weakened forms of antigens
that are present on the surface of the infectious agent. This exposure causes the
immune cells to produce more plasma cells, which make antibodies. T cells that
recognize the infectious agent also multiply. These activated T cells later remember
the exposure. The next time the agent enters the body, cells in the immune system
are already prepared to respond and stop the infection.
For cancer treatment, researchers are developing vaccines that may encourage the
patient's immune system to recognize cancer cells. These vaccines may help the
body reject tumors and prevent cancer from recurring. In contrast to vaccines
against infectious diseases, cancer vaccines are designed to be injected after the
disease is diagnosed, rather than before it develops. Cancer vaccines given when
the tumor is small may be able to eradicate the cancer. Early cancer vaccine clinical
trials (research studies with people) involved mainly patients with melanoma.
Currently, cancer vaccines are also being studied in the treatment of many other
types of cancer, including lymphomas and cancers of the kidney,

east, ovary, prostate, colon, and rectum. Researchers are also investigating ways
that cancer vaccines can be used in combination with other BRMs.
Side Effects
Like other forms of cancer treatment, biological therapies can cause a number of
side effects, which can vary widely from patient to patient. Rashes or swelling
may develop at the site where the BRMs are injected. Several BRMs, including interferons
and interleukins, may cause flu-like symptoms including fever, chills,
nausea, vomiting, and appetite loss. Fatigue is another common side effect of
BRMs. Blood pressure may also be affected. The side effects of IL–2 can often be
severe, depending on the dosage given. Patients need to be closely monitored during
treatment. Side effects of CSFs may include bone pain, fatigue, fever, and appetite
loss. The side effects of MOABs vary, and serious allergic reactions may occur.
Cancer vaccines can cause muscle aches and fever.
Clinical Trials
Information about ongoing clinical trials involving these and other biological therapies
is available from the Cancer Information Service (see below) or the clinical
trials page of the National Cancer Institute's Web site at
http://cancer.gov/clinical_trials/ on the
Internet.
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Sources of National Cancer Institute Information
Cancer Information Service
Toll-free: 1–800–4–CANCER (1–800–422–6237)
TTY (for deaf and hard of hearing callers): 1–800–332–8615
NCI Online
Internet
Use http://cancer.gov to reach NCI's Web site.
CancerMail Service
To obtain a contents list, send e-mail to cancermail@cips.nci.nih.gov with the
word "help" in the body of the message.
CancerFax® fax on demand service
Dial 1–800–624–2511 or 301–402–5874 and follow the voice-prompt
instructions.
http://cis.nci.nih.gov/fact/7_2.htm (7 von 7) [30.07.2002 21:36:19]