Método de descapsulación de nauplios de Artemia sp. para la ...

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Método de descapsulación de nauplios 391

Método de descapsulación de

nauplios de Artemia sp. para la

alimentación de camarones peneidos

Cecilia Vanegas Pérez y Cecilia Robles Mendoza

Campo de aplicación

Este procedimiento complementario se recomienda para la obtención de

nauplios de Artemia sp. que pueden emplearse como alimento para el cultivo

y mantenimiento de camarones peneidos y otras especies marinas.

Material

Probeta de 500 mL, vasos de precipitados de 500 mL, agitador de vidrio, pipeta

serológica de 1 mL (recomendable con graduación de 1/100), bombilla

para pipeta, contenedor plástico con ventana de malla planctónica (100 µL),

contenedor transparente de incubación de 2 L, manguera para acuario, llave

de paso pequeña para acuario y plástico negro grueso.

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Ensayos toxicológicos

Equipo

Lámpara de luz blanca o foco de 40 watts y bomba de aireación.

Reactivos

Hipoclorito de sodio comercial (6% de cloro libre) y agua de mar natural,

artificial o reconstituída.

Organismos

Quistes de Artemia sp.

Procedimiento

Se describe el procedimiento para la descapsulación de 1 g de quistes de Artemia

sp. Se recomienda utilizar cepas de Artemia que garanticen un porcentaje

de descapsulación del 90%.

Descapsulación de quistes

Diluir el hipoclorito de sodio comercial con agua de la llave, en una proporción

de 1:2. Colocar 1 g de quistes de Artemia sp. por cada 100 mL de la

solución diluida de hipoclorito de sodio y agitar constantemente hasta que la

tonalidad de los quistes cambie de café a anaranjado intenso. Dependiendo

de la cepa de Artemia el cambio de tonalidad ocurre entre 5 y 10 minutos.

Transferir inmediatamente los quistes en un contenedor con una ventana de

malla planctónica (para retener los quistes) y enjuagar con agua de la llave

durante mínimo 1 hora para eliminar el cloro (figura F.1A).

Incubación

Colocar los quistes perfectamente enjuagados en el contenedor de incubación

con 500 mL de agua de mar a 34 ups o agua de mar previamente filtrada.

Mantener los organismos durante 24 a 48 horas a una temperatura de 28 °C,

luz y aireación constante (figura F.1B). La aglutinación de los quistes altera

la eclosión por lo cual es importante mantenerlos en constante movimiento

con aireación desde la base del contenedor de incubación.


Recolección de nauplios

Método de descapsulación de nauplios 393

Para la separación de nauplios y quistes se recomienda bloquear la aireación cerrando

la llave de paso y cubrir completamente el contenedor de incubación con

plástico negro, dejando únicamente una pequeña apertura en la parte superior.

Colocar junto a la apertura un foco o lámpara de 40 watts durante al menos 1 hora.

Debido al fototactismo positivo de los organismos, los nauplios se concentrarán en

la parte superior y los quistes precipitados estarán en el fondo del contenedor.

Colectar el precipitado con los quistes sin eclosionar. En otro recipiente

colectar los nauplios eclosionados. Debido a la alta densidad de los nauplios

es probable el incremento de los compuestos de excreción (principalmente

amonio), tanto en el agua como en los nauplios. Estos compuestos pueden a

su vez ejercer un efecto tóxico en las postlarvas de los camarones peneidos.

Por lo tanto, se recomienda enjuagar a los nauplios con agua de mar, concentrarlos

en una densidad máxima de 1500 a 1800 nauplios/mL y mantenerlos

en refrigeración hasta su uso. Se recomienda alimentar a las postlarvas de los

camarones peneidos con quistes de Artemia eclosionados el mismo día.

Conteo de nauplios

Colocar a los organismos colectados en un vaso de precipitado de volumen

conocido con agua de mar. Agitar suavemente para que la distribución de los

Figura F.1. Dispositivos para la obtención de nauplios de Artemia sp. A) Para el lavado de

quistes y B) Para la incubación de nauplios. a) ventana de malla planctónica, b) contenedor

de incubación, c) llave de paso y d) soporte

A B


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Ensayos toxicológicos

organismos sea homogénea y con una pipeta serológica tomar 1 mL del medio

con nauplios. Debido a que la distribución de los organismos en la pipeta es

irregular, se recomienda contar los nauplios que se encuentren en 0.1 mL de la

parte inicial, media y final de la pipeta. Realizar al menos 10 conteos, obtener

el promedio de organismos en 0.1 mL y extrapolar la densidad a 1 mL.

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