Biodisponibilidad de los flavonoides de la ... - Cerveza y Salud

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Para la reducción del citocromo c, disolvemos citocromo c oxidado en H2O y añadimos
ditionito sódico en exceso. Posteriormente se pasa por una columna PD-10-
Sephadex G25 M (Pharmacia-LKB), con lo que se consigue la reducción del citocromo
(Trounce et al., 1996).
2.2.12. DETERMINACIÓN DE MALONDIALDEHIDO (MDA) + 4-HIDROXIALKENALES (HAE)
EN HÍGADO Y CORAZÓN DE RATA Y PLASMA HUMANO
Para la determinación del MDA + HAE se utilizó el kit de OXIS, BIOTECH HAE-586 AS-
SAY (OXIS Health Products, Inc. 6040 N Cutter Circle, Suite 317 Portland, OR 97217-
3935 USA)
La oxidación de los ácidos grasos da lugar a la formación de peróxidos lipídicos,
como malondialdehido (MDA) y alkanales. El método HAE-586 esta basado en la reacción
del cromógeno N-metil-2-fenilindol (NMPI) con el MDA y 4-hidroxialkanales
(HAE) a 45ºC. Una molécula de 4-hidroxialkanal reacciona con dos moléculas de NMPI
y da como producto una molécula estable. Posteriormente, se mide espectrofotometricamente
a una λ 586 nm.
2.2.13. DETERMINACIÓN DE LOS NIVELES LA COENZIMA Q 10 Y Q 9 Y VITAMINA E
EN MITOCONDRIAS DE HÍGADO Y CORAZÓN DE RATA
Para la extracción de la coenzima Q10 y Q9 y Vitamina E se siguió la técnica de Takada
et al. (1984) con ligeras modificaciones para determinar la vitamina E. La concentración
de mitocondrias utilizada es de 1 mg de proteína/mL del tampón de aislamiento
de mitocondrias (tampon 1). Añadimos 2 mL de etanol:hexano (2/5 v/v),
sonicamos y centrifugamos a 3.000 rpm durante 3 minutos a temperatura ambiente.
Posteriormente, se recoge la fase hexano. Al resto se le añade de nuevo 2 mL de etanol:hexano,
repitiendo el proceso dos veces. El sobrenadante hexano se evapora con
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