Interferencias analíticas: Hemólisis - hgucr

Interferencias analíticas:HemólisisEsther Fernández GrandeR1 A.Clínicos

Hemólisis: es el proceso de destrucción de los hematíes,que conlleva la liberación del contenido intraeritrocitarioen el plasma alterando su composición. Algunos componentes se hallan en los eritrocitos aconcentraciones superiores (10 veces): K, LDH, FE,FAC, AST, ALT. Su presencia da lugar a errores en las determinacionesde ciertos parámetros. El tipo de magnitud que se veafectada depende de la metodología empleada paramedirla.

Abkürzungsverzeichnis€ Euroa. d. an den / dieAbb.AbbildungAbhängk.Abhängigkeitabiot.abiotischAbLArbeitsgemeinschaft bäuerliche LandwirtschaftAKArbeitskraftAUMArgrarumweltmaßnahme(n)AUPAgrar-UmweltprogrammeBfNBundesamt für Naturschutzbiot.biotischBIPBruttoinlandsproduktBML/BMLEFBundesministerium für Landwirtschaft, Ernährungund ForstenBMUBundesministerium für Umwelt, Naturschutz undReaktorsicherheitBMVELBundesministerium für Verbraucherschutz, Ernährungund Landwirtschaftbspw.beispielsweisebzgl.bezüglichbzw.beziehungsweiseca.circaCEASCentre for European Agricultural StudiesCCCross ComplianceCOGECAConfédération Générale des Coopératives Agricolesde l´Union EuropéenneCOPAComité des Organisations Professionnelles Agricolesde L´Únion EuropéenneCPECoordination Paysanne Européenned. h. das heißtDegr.DegressionDBVDeutscher Bauernverbandeinschl.einschliesslichetc.et ceteraEUEuropäische Unionevtl.eventuellFAAForschungsgesellschaft für Agrarpolitik und Agrarsoziologiee.V.FALBundesforschungsanstalt für LandwirtschaftFts.FortsetzungGAKGemeinschaftsaufgabe Agrarstruktur und KüstenschutzGAPGemeinsame AgrarpolitikGVGroßviehGVEGroßvieheinheit(en)haHektar6

In vitro: es un efecto preanalítico debido auna mala extracción o a las condicionesde transporte y preparación de lasmuestras. Es la causa mas frecuente dehemólisis en las muestras (>95%).

Causas de hemólisis in vitro Flebotomía• Dispositivo de acceso vascular: el uso del catéter, frente al dela aguja, se ha relacionado con una mayor aparición demuestras hemolizadas.• Calibre del dispositivo de extracción: el grado de hemólisis esinversamente proporcional al diámetro del catéter o aguja yaque se produce un aumento el flujo y la fricción causante de lahemólisis.• Lugar de punción: la fosa antecubital disminuye la hemólisis.• Antiséptico: el alcohol utilizado en la desinfección de la zonaantes de la punción puede provocar hemólisis.

Transporte• Tubo neumático: se asocia a cierto grado dehemólisis pero no da lugar a una alteraciónsignificativa de los resultados analíticos. Lamuestra mas susceptible es el suero.• Transporte por carretera: evitar agitación ycambios bruscos de temperatura.

Procesamiento• Tiempo entre recogida y centrifugación: en este periodose produce el consumo de metabolitos por parte de lascélulas, difusión de líquido intracelular por fallo de lossistemas de membrana y hemólisis.• Temperatura de centrifugación: el frío aumenta lahemólisis.• Fuerza centrifuga: debe establecerse el tiempo y lafuerza adecuados para conseguir una correctaseparación sin producir hemólisis

• Fallos en la barrera de separación: debido ahiperproteinemia o a la presencia de contrastesyodados.• Centrifugación de muestras parcialmente coaguladas.• Recentrifugación da lugar al ascenso del suero retenidoen el conjunto celular. . Da lugar a un aumento delpotasio.

Distinción entre in vivo o in vitroIn vivo: : podemos usar como indicadores eldescenso de la haptoglobina sérica, elincremento de la bilirrubina indirecta o elaumento de los reticulocitos que se producepara compensar esa destrucción eritrocitaria.In vitro: : el contenido intraeritrocitario integro sediluye en el plasma de la muestra. Tambiénpodemos diferenciarla si en la extracción algunade las muestras no está hemolizada.

Efecto* La hemólisis tiene diferentes efectos según lasmagnitudes sobre las que actúe: Las que se diluyen, como el sodio. Se infraestiman.

Los que aumentan significativamente su concentraciónen el plasma:• Potasio: : concentración intracelular (140mEq/L)concentración extracelular (4 mEq/L)• AST: 7-15 veces mayor en eritrocitos• LDH:Se sobreestiman.

Interferencia espectral: Incremento del coeficiente de extinción en lamedición de 300 a 700 nm, esta condicionado por la alta extinciónpropia de la hemoglobina entre 400 y 600 nm: BT, AMI, FAL, GGT,AU, FOS, PT, ALB.

Interferencia química:• DD (proteasas eritrocitarias disminuyen factorescoagulación y fibrina).* BT y BD (actividad pseudoperoxidasa de la Hb).• CK (adenilatocinasa de los eritrocitos).

Determinación de CK2 ADP ATPLa adenilato quinasa intraeritrocitaria, a partir de 2 moléculas ADP,sintetiza nuevas moléculas de ATP, que actúan como sustrato de laHexokinasa para producir Glu-6P que se oxidará dando lugar aNADH, sobreestimando así la actividad CK.

Interferencia de la Hg en Lx 20

Hemólisis en Advia 2400

Detección de la hemólisis• Visual: poco fiable. Hay magnitudes que se sobreestiman enmuestras ligeramente hemolizadas dificiles de detectar de formavisual.• Método de referencia: Cianometahemoglobina (HiCN)Consiste en diluir la sangre en una solución de ferrocianuro potásico ycianuro potásico.El ferrocianuro potásico oxida las hemoglobinas a metahemoglobinas (Hi) yel cianuro potásico proporciona los iones cianuro (CN-) para formar elhemiglobincianuro o cianmetahemoglobina que tiene una absorción máximaa una longitud de onda de 540 nm. La capacidad de absorción de lasolución se mide en un espectrofotómetro a 540nm.Los resultados se llevan a una curva estándar realizada con soluciones decianometahemoglobina comercial, de donde se extrapolan lasconcentraciones de hemoglobina de las muestras problema. Nos relacionala absorción de la muestra con su concentración de hemoglobina.

* Índice séricoLos índices séricos son una guía cualitativa de laapariencia de las muestras.

Cálculo del Índice El analizador aspira una parte alícuota de la muestra delpaciente, la diluye con una solución de ClNa al 0.9% yrealiza una medición bicrómatica (600/570 nm). A partir de este valor de absorbancia (mAbs), elinstrumento calcula el valor del índice H del pacientemediante una relación matemática.

Corrección de la hemólisis mediante fórmulasmatemáticas: No se recomienda Si Hb> 100mg/dL (IH 70): el potasioaumenta en 0.4 mmol/L Potasio corregido = K medido-(IH*0.004)

Actuación frente a muestras hemolizadas(OMS).No informar muestras deterioradas sin comentario específico. Encaso de no poder eliminar la interferencia sustituir el valor de lamagnitud por el comentario.Cuando exista efecto significativo por la hemólisis deben indicarselos límites a partir de los cuales no debe realizarse el análisis.

Hemólisis en Advia 2400

Actuación frente a muestras hemolizadas(OMS).No informar muestras deterioradas sin comentario específico. En caso de no podereliminar la interferencia sustituir el valor de la magnitud por el comentario.Cuando exista efecto significativo por la hemólisis deben indicarse los limites a partirde los cuales no debe realizarse el análisis.Utilizar métodos alternativos no influidos por la hemólisis en magnitudes cuyadeterminacion se vea afectada.Considerar la interferencia como significativa cuando exceda el valor de referenciao error sistemático deseable.Distinción entre hemólisis in vivo o in vitro.Identificar la causa de la hemólisis, y utilizar material de calidad y personaladecuadamente formado.

Datos urgenciasEnero - Octubre 2012Hemólisis635425000031119770Resto MUY LIGERAMEN HEMOLIZADNúm ero de m uestras 63542 3 11 1977Número de muestrasMuestras de Urgencias3,02%0,00%0,02%96,90%

• > 95% efecto preanalíticoConclusiones• No realizar las determinaciones, sustituirlas por un comentario ypedir nueva muestra.• Utilizar sistemas automatizados de cuantificación de hemoglobinasérica.• El laboratorio debe establecer la significación del efecto de lahemólisis para cada magnitud.• Rechazar sueros que presenten concentraciones de hemoglobinaiguales o superiores a 0,5 g/dL

GRACIAS POR SUATENCIÓN