UNIVERSIDAD EARTH - EM | Effective Microorganisms

Dedico este trabajo:DEDICATORIAA Dios por darme la vida y la oportunidad de ser cada día mejor.A la memoria de mi mamá; Carmen Rodríguez García.A mi papá; por estar siempre a mi lado brindándome todo el apoyo necesario,para tener el ánimo de seguir adelante.A todos los miembros de mi familia por todo su apoyo incondicional durante estoscuatro años en EARTH. Especialmente a mi hermano Luis Amado VillagraRodríguez.A Maura Benavides Montenegro, por enseñarme el verdadero valor de la vidaA mis amigos por aceptarme tal cual soy.A todos mis profesores y todos mis compañeros de clases, durante toda mi vidacomo estudianteiii

AGRADECIMIENTOAgradezco grandemente:A Dios por darme la oportunidad de existir.A mis padres y familiares por su apoyo incondicional sin importar lascircunstancias.A Maura Benavides Montenegro, por estar conmigo en los momentos más difícilesde mi vida.A Raúl Botero Botero, Víctor Quiroga y Aristo J. Rodríguez Rodríguez por darmelas pautas a seguir para el desarrollo de este trabajo.Al Profesor Shuichi Okumoto por su apoyo para el desarrollo de este trabajo.Al personal de la Finca Pecuaria Integrada, por su colaboración para la realizaciónde este trabajo, especialmente a Seger Rojas Oñett por su ayuda desinteresadaen el manejo de los novillos utilizados por el proyecto.iv

perdida de nitrógeno no proteico (NNP) y 4% de EM, disminuye la perdida demuchos macronutrientes en el almacenamiento de los BMN. Además se determinóque 6% de EM aumenta el consumo de BMN en un 32% comparado con el testigo,que tenia 0% de EM. Se recomienda utilizar entre 4 y 6% de EM para aumentar elvalor nutritivo y el consumo de los BMN.Palabras claves: microorganismo eficaces, bloques multinutricionales, nitrógenono proteico, contenido nutricional, consumo, almacenamiento, aumento,disminución.Villagra, C. 2004. Evaluación del efecto que tienen los Microorganismos Eficaces(EM) sobre la composición nutritiva y el consumo de los BloquesMultinutricionales (BMN). Proyecto de Graduación Lic. Ing. Agr. Guácimo,CR. EARTH. 67 pvi

TABLA DE CONTENIDOPáginaDEDICATORIA ...............................................................................................IIIAGRADECIMIENTO ...................................................................................... IVRESUMEN...................................................................................................... VABSTRACT................................................................................................... VIITABLA DE CONTENIDO ............................................................................... IXLISTA DE CUADROS .................................................................................... XILISTA DE FIGURAS ..................................................................................... XIILISTA DE ANEXOS ..................................................................................... XIII1. INTRODUCCIÓN.............................................................................................142. OBJETIVOS ....................................................................................................162.1. OBJETIVO GENERAL.............................................................................162.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ...................................................................163. HIPOTESIS .....................................................................................................174. REVISION BIBLIOFIGURA.............................................................................184.1. SITUACIÓN ACTUAL DE LA PRODUCCIÓN ANIMAL...........................184.2. ALTERNATIVAS PARA SUPLIR ESAS DEFICIENCIAS.........................194.3. EL PROPÓSITO DE UTILIZAR BMN ......................................................204.4. ¿QUÉ SON LOS BLOQUES MULTINUTRICIONALES?.........................204.5. VENTAJAS DEL USO DE BMN ..............................................................214.6. LIMITANTES DEL USO DE BMN............................................................224.7. EFECTOS POSITIVOS DEL USO DE BMN............................................234.8. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CONSUMO DEBMN.......................................................................................................234.9. MODO DE EMPLEO DE LOS BMN ........................................................254.10. LOS MICROORGANISMOS EFICACES (EM) ......................................254.10.1. Uso en alimentación animal.......................................................254.10.2. Composición del EM..................................................................264.10.3. Ventaja del EM .........................................................................275. MATERIALES Y METODOS...........................................................................285.1. LUGAR DE ESTABLECIMIENTO DEL ENSAYO....................................285.2. DISEÑO EXPERIMENTAL ......................................................................285.3. TRATAMIENTOS UTILIZADOS ..............................................................295.4. MATERIALES UTILIZADOS PARA LOS BMN ........................................30ix

5.5. PASOS PARA LA ELABORACIÓN DE LOS BMN ..................................315.6. ANÁLISIS DEL CONTENIDO NUTRICIONAL DE LOSBMN.......................................................................................................325.6.1. Toma de las muestras ...............................................................325.6.2. Análisis de contenido nutricional (elementoscompletos)...............................................................................335.6.3. Procedimiento para determinar el % deNitrógeno total, en el análisis de elementoscompletos (análisis foliar)........................................................355.7. PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR EL %NITRÓGENO NO PROTEICO (NNP) DE LOS BMN.............................375.8. DETERMINACIÓN DE PH EN H 2 O .........................................................375.9. PROCEDIMIENTO PARA EVALUAR EL CONSUMOVOLUNTARIO DE BMN POR LOS BOVINOS ......................................386. RESULTADOS Y DISCUSIÓN........................................................................406.1. PERDIDA DE NITRÓGENO AMONIACAL EN ELALMACENAMIENTO DE LOS BMN......................................................406.2. VARIACIÓN DEL % DE HUMEDAD EN ELALMACENAMIENTO DE LOS BMN......................................................426.3. VARIACIÓN DEL PH EN EL ALMACENAMIENTO DELOS BMN ..............................................................................................436.4. PERDIDA DEL CONTENIDO NUTRICIONAL EN ELALMACENAMIENTO DE LOS BMN......................................................446.5. VARIACIÓN DEL CONSUMO VOLUNTARIO DE LOSBMN PROVOCADOS POR LAS DIFERENTESCONCENTRACIONES DE EM..............................................................557. CONCLUSIONES............................................................................................578. RECOMENDACIONES ...................................................................................589. BIBLIOGRAFÍA CITADA ................................................................................5910. ANEXOS .........................................................................................................62x

LISTA DE ANEXOSAnexoPáginaAnexo 1. Contenido de Nitrógeno amoniacal de los BMN condiferentes concentraciones de EM, elaborados cada 15días. .......................................................................................................62Anexo 2. Contenido de Humedad de los BMN con diferentesconcentraciones de EM, elaborados cada 15 días.................................62Anexo 3. Resultados de los valores de PH de los BMN. condiferentes concentraciones de EM, elaborados cada 15días. .......................................................................................................63Anexo 4. Resultados del contenido nutricional de los BMN. ................................63Cuadro 1. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 0%de EM.....................................................................................................63Cuadro 2. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 2%de EM.....................................................................................................64Cuadro 3. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 4%de EM.....................................................................................................64Cuadro 4. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 6%de EM.....................................................................................................64Anexo 5. Requerimientos de nutricional (g/día) para novillos de200 a 400 Kg..........................................................................................65Anexo 6. Resultados del consumo de los BMN, durante 90 díasde evaluación (19 repeticiones) .............................................................65Anexo 7. Análisis estadístico por la prueba de hipótesis segúnFisher del consumo voluntario de los BMN por parte delos bovinos .............................................................................................66Anexo 8. Análisis estadístico por la prueba Dunnet del consumovoluntario de los BMN por parte de los bovinos.....................................67xiii

Como parte de las investigaciones realizadas en la Universidad EARTH conla tecnología de Microorganismos Eficaces (EM), se ha decidido investigar losefectos que tiene el EM. sobre los bloques multinutricionales convencionales quese han venido elaborando y utilizando en la Universidad EARTH para lasuplementación de los animales de la finca pecuaria.EM es la abreviación para “Effective Microorganisms” y fue desarrollado porel doctor Terou Higa en Japón en 1982. Se trata de una mezcla de variosMicroorganismos benéficos, tanto aeróbicos como anaeróbicos; los que tienendiferentes funciones. Estos microorganismos existen en grandes cantidades en lanaturaleza y son usados para el procesamiento de alimentos fermentados parahumanos y para animales; por lo que no son dañinos para los mismos.Recientemente se ha encontrado que el EM sirve para la reducción de lafrecuencia de enfermedades de los animales y reducción del estrés en el ganado.También puede mejorar la eficiencia alimenticia, así como la calidad de laspasturas y heno, porque aumenta la cantidad de aminoácidos esenciales y dealgunos macro nutrientes. Estos efectos mejoran consecuentemente la calidad dela leche y carne, y mejora el valor económico de los productos (Viquez, 1999)15

2. OBJETIVOS2.1. OBJETIVO GENERALDeterminar el efecto que tienen los microorganismos eficaces en la composiciónnutricional y el consumo de los bloques multinutricionales.2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS• Determinar si la inclusión de microorganismos eficaces en la elaboraciónde los bloques multinutricionales afecta su composición nutricional.• Evaluar si los microorganismos eficaces disminuyen la perdida deNitrógeno amoniacal en los bloques multinutricionales durante su tiempode almacenamiento.• Determinar si la introducción de microorganismos eficaces a diferentesconcentraciones afecta el consumo de los bloques multinutricionales porparte de los bovinos.16

3. HIPOTESIS• Los microorganismos eficaces mejoran la calidad nutritiva de losbloques multinutricionales• Los microorganismos eficaces disminuyen la pérdida del nitrógeno enforma de amoniaco de los BMN durante su tiempo de almacenamiento• Los microorganismos eficaces aumentan el consumo de BMN, en losbovinos.17

4. REVISION BIBLIOFIGURA4.1. SITUACIÓN ACTUAL DE LA PRODUCCIÓN ANIMALLa ganadería bovina es de mucha importancia económica para los paísestropicales, porque en la mayoría de los casos es una actividad familiar ycomplementaría a otras como los cultivos anuales, porque la disponibilidad deforraje es estacional y esta definida por la presencia de lluvia y por los patrones decultivo. Por otra parte, los pastos producidos muchas veces no son suficientes encalidad y cantidad para satisfacer los requerimientos de los animales (Becerra yDavid, 1990). Además en la época seca los pastos disminuyen rápidamente sucalidad, con niveles bajos de nitrógeno y baja digestibilidad, y en muchos casos noson suficientes para satisfacer los requerimientos de los microorganismos delrúmen. (Sánchez, 1998)Según Mancilla (2002) uno de los problemas principales de la ganadería escumplir con las demandas nutricionales de los animales en pastoreo, porquegeneralmente la oferta forrajera cae por debajo de los niveles críticos para losanimales. Es decir, puede que en la época lluviosa se presente suficiente ofertaforrajera, pero la calidad expresada en proteína cruda, carbohidratos totales (fibracruda) y minerales tienden a niveles muy bajos comparados con losrequerimientos para los animales en pastoreo. En otros casos, durante la estaciónseca, además de la baja calidad nutricional de los pastos y forrajes se presentadéficit de oferta forrajera. Estos dos factores pueden hacer colapsar el sistema deproducción animal.Si a lo anterior le sumamos los continuos incrementos de precios en lasmaterias primas agrícolas para la elaboración de alimentos concentrados, loscuales han originado un aumento desproporcionado en los alimentosconcentrados, haciéndose difícil mantener una producción animaleconómicamente sostenible. Tal situación obliga a buscar nuevas alternativas parahacer que la ganadería sea una actividad con un potencial económico atractivo y18

la única forma de hacerlo es usando los recursos locales, para así lograr unareducción de costos y por ende aumentar los beneficios económicos (Sánchez,1997).De allí la necesidad de ofrecer a los animales una suplementaciónnutricional de bajo costo y que además los animales puedan lograr una altaproductividad; ya que las propiedades nutritivas de los alimentos, además de serindispensables para las demandas nutritivas de los animales, también sonnecesarias para un eficiente crecimiento de las bacterias ruminales. Pues la floraruminal es un elemento fundamental que permiten al rumiante aprovechareficientemente los recursos fibrosos de los alimentos ofrecidos (Banco Ganadero,1987).4.2. ALTERNATIVAS PARA SUPLIR ESAS DEFICIENCIASSegún la revista Banco Ganadero (1987) la deficiencia principal en eltrópico es de Nitrógeno No Proteico (NNP) y aunque la urea ha sido el elementomás usado para este propósito, con diferentes técnicas de suministro (disuelta enel agua de beber, disuelta en melaza, etc.), logrando suplementar las deficienciasde NNP el problema de estas técnicas de suministro es que se corre el riesgo deintoxicaciones de los animales con urea. Una alternativa para usar la urea sinriesgos de intoxicaciones, es el uso de bloques multinutricionales, porque ademásde que se incorpora el NNP en la dieta alimenticia de los animales, también sepueden agregar otros elementos nutricionales como minerales, vitaminas y otroscompuestos nitrogenados como los aminoácidos y los péptidos, que están en lasproteínas naturales.Según Botero y Hernández (2001) los bloques multinutricionales sonsuplementos alimenticios de bajo costo, utilizado como vehículo del NNP,elaborado y solidificado en forma artesanal o agroindustrial mediante la mezcla dediversos ingredientes sólidos y líquidos. Asimismo Ríos (2000), dice que los BMNconstituyen hoy en día una alternativa económica para el suministro estratégico de19

minerales, proteínas y energía a los animales que pastorean forrajes de bajacalidad4.3. EL PROPÓSITO DE UTILIZAR BMNEl propósito de suplementar rumiantes con BMN es principalmenteaumentar sus niveles de producción y de reproducción, a través del incremento enla eficiencia de utilización de los nutrimentos consumidos, esta eficiencia se logramediante el aumento de la población y de la actividad de las bacterias y hongosque conforman la flora ruminal, buscando balancear la dieta diaria, cuya base enlos países tropicales son principalmente los forrajes (Botero y Hernández, 2001).También Preston y Leng (1990), citados por Sánchez (1997) dicen que elpapel principal de los BMN al suministrar nitrógeno fermentable es mejorar elecosistema del rúmen, ya que regula el nivel de amoníaco de éste, permitiendoincrementar su población de microorganismos, lo cual permite ser más eficiente enel aprovechamiento de los alimentos, al incrementar la degradación o digestión dela fibra y lograr una menor degradación de la proteína que entra al rúmen. Pues,según Sánchez (1998), para alcanzar altos niveles de producción, se necesita deproteína sobrepasante; es decir, proteína que llegue directamente al intestino delos animales y que no se quede para ser consumida por los microorganismos delrúmen y eso se logra con los BMN, ya que los microorganismos usan el NNP delos BMN para sus funciones, dejando libre la proteína sobrepasante para que estallegue hasta el intestino y allí sea aprovechada eficientemente4.4. ¿QUÉ SON LOS BLOQUES MULTINUTRICIONALES?Según el CIPAV (1987), citado por Sánchez (1997) los BMN sonsuplementos alimenticios balanceado que se ofrece a los animales en formasólida, lo que facilita el suministro de diversas sustancias nutritivas en forma lentay que además de incorporar NNP que está en la urea, también se puedenincorporar otros elementos nutricionales como carbohidratos solubles, minerales yproteína verdadera. También Botero y Hernández (2001) dicen que los BMN son20

material alimenticio balanceado en forma sólida que provee constantemente ylentamente al animal sustancias nutritivasLa composición original de los BMN se formuló en investigaciones hechaspor la FAO en Egipto, donde se usó melaza, urea, cal, sal y salvado de trigo parasu elaboración (Hernández, 2002). Por lo tanto el uso de bloques no es nuevo;Alexander (1978) reporta que, primero en Sudáfrica y luego en Australia, seusaron comercialmente como fuente proteico-energética. También en Colombiase han venido usando BMN desde los años 60 (Becerra y David, 1990).4.5. VENTAJAS DEL USO DE BMNLos BMN tienen las siguientes ventajas:• Pueden ser elaborados con una tecnología económica, artesanal osemiartesanal, con subproductos locales, que se puede adaptar a lascondiciones de grandes, medianos y pequeños productores (Pedraza,2002).• Se pueden elaborar fácilmente en la propia finca, de tamaño y pesoadecuado para su manipulación y transporte, tienen alta palatabilidadpara los animales y sin desperdicio (Sánchez, 1997).• Le proporciona al animal rumiante NNP, en forma lenta y constante,asegurando un nivel óptimo de este, mejorando notablemente elecosistema ruminal, y el crecimiento microbiano en el rúmen (Pedraza,2002).• La naturaleza sólida exige que el animal tenga que lamer el bloque, loque asegura que el consumo sea lento durante todo el día (Pedraza,2002).• Son una forma segura de suministrar urea a los rumiantes sin riesgos deintoxicación, además al presentarse en forma sólida se facilita su21

transporte, manipulación, almacenamiento y suministro a los animales(Pedraza, 2002).• No son perecederos (Hernández, 2002).• Se pueden preparar en diferentes formulaciones, con las posibilidadesde incluir y sustituir diferentes materiales y subproductosagroindustriales regionales, según su disponibilidad (Gutiérrez, 1999).• Son factibles de adaptarse en cualquier ambiente agroecológico y en lossistemas extensivos en: bovinos, ovinos, caprinos e incluso los equinos,en libre pastoreo (Gutiérrez, 1999).• Disminuir las perdidas de peso de los animales en cada época seca,reduciendo la muerte de animales, debido a la desnutrición o por la faltade alimento de buena calidad. (Gutiérrez, 1999).• Pueden servir también para suplir elementos nutritivos fundamentales ypara mejorar la eficiencia de uso del forraje, aún cuando no hayaescasez de alimento (Sánchez, 1998).• Incrementa la productividad de los animales (Sánchez, 1998).4.6. LIMITANTES DEL USO DE BMNSegún Sánchez (1998) estos limitantes de los BMN nunca los podemos vercomo desventajas, simplemente son aspectos a tener en cuenta a la hora deofrecer BMN a los animalesEsos aspectos a tener en cuenta son:• Los bloques son útiles solamente si tienen en su estructura NNP como:la urea, excretas de aves o amoníaco.• No pueden reemplazar la falta de forrajes, hay necesidad de que hayaalguna fuente que le suministre forraje (gramíneas o leguminosas).22

• No bastan para lograr altos niveles de producción, hay necesidad deofrecer proteína que llegue directamente al intestino de los animales(proteína sobrepasante).• El fracaso o la falta de respuesta a un bloque puede deberse a lacalidad irregular de éste.4.7. EFECTOS POSITIVOS DEL USO DE BMNLos rumiantes, al tener una alta población de microorganismos en el rúmen,esto les permite ser más eficientes al incrementar la degradación o digestión de lafibra y logrando una mayor productividad del animal (Sánchez, 1997).Llegándose a garantizar que con el uso de BMN un rumiante puede lograr:• Explotaciones con tendencia a producción de leche: aumenta laproducción desde 15 a 40 %, aumenta el porcentaje de grasa en 0,5 %,hay una mayor reducción de consumo de alimento concentrado para lamisma producción y hay menor mortalidad en las crías (Sánchez, 1997).En la Universidad EARTH se han logrado incrementos del 15% enproducción de leche (Botero y Hernández, 2001).• Explotaciones con tendencia a producir carne: hay un efecto positivopara todas las especies de rumiantes y aumento de la ganancia de pesoaproximadamente 150 g/día en bovinos (Sánchez, 1997)• En bueyes: aumenta la fuerza de trabajo en 20 % al inicio y 40 %después de un mes de consumido el bloque. Estos pierden menos pesocuando están trabajando, usualmente pueden perder 12 Kg. en un messin consumo de los BMN y sólo pierden 2 Kg. cuando consumen losBMN (Sánchez, 1997)4.8. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CONSUMO DE BMNLos aspectos que más influyen en la cantidad de BMN consumido por un animalson:23

• El bajo consumo de BMN, se ha atribuido más a su dureza, ya que estadepende de los niveles de humedad, cal, melaza, tiempo dealmacenamiento y condiciones de empaque (Hernández, 2002). SegúnBecerra y David (1991) que utilizó ingredientes similares a los utilizadosen este experimento, el % de materia seca de los BMN debe ser de 81% (19% de humedad).• La cantidad de BMN consumida varía de acuerdo a las condicionesparticulares de cada ensayo, y sobretodo a la calidad de los BMN,dependiendo de los ingredientes utilizados y de la calidad del alimentobase utilizado (Hernández, 2002).• La oferta del bloque por tiempo limitado (3 horas/día), es otro de losfactores que origina bajos consumos diarios, en cambio cuando seofrece el bloque en los potreros el consumo se duplica (Hernández,2002).• La calidad del material fibroso ofrecido es importante en el consumo delos bloques. La ingestión del bloque puede aumentar hasta tres vecesen la estación seca, al recibir un alimento base muy deficiente enNitrógeno (Sánchez, 1997)Según Hernández (2002) también hay que considerar los factores del animal, delpasto y de la pradera.Del animal: raza, sexo, edad, peso vivo, etapa de preñez, etapa de lactancia,nivel de producción, condición corporal, salud.Del pasto y pradera:a) Calidad: composición química, digestibilidad, palatabilidad y olor.b) Cantidad: sistema de pastoreo, tiempo en pastoreo, contaminación,asignación de forraje, suplementos y competencia;24

c) Pradera: suelo, fertilización, composición botánica, y madurez, densidad,cobertura y altura del pastoAdemás: clima, estación y época del año, ambiente, manejo.Según Ricca y Conbellas (1993), citados por Sánchez (1998) A mayoroferta, mayor Consumo de bloques. Después del período de adaptación losanimales deberían ajustar su consumo alrededor de 600 a 700 g/día en bovinos y100 g/día en ovinos; aun cuando los consumos puedan ser mayores, dependiendode la raza y etapa de producción, entre otros.4.9. MODO DE EMPLEO DE LOS BMNSegún Botero y Hernández (2001) los BMN se pueden ofrecer a losanimales de diferentes formas:• Para animales en pastoreo los BMN deben ser colocadospermanentemente y para su consumo a voluntad dentro de comederos osaladeros techados, para evitar que se humedezcan o deshagan porefecto del agua de lluvia, en cuyo caso se pueden presentar casos deintoxicación, al beber los animales el líquido o comer en exceso lamezcla deshecha.• En ganado estabulado, los BMN se pueden ofrecer colocados dentro delas canoas o comederos techados, en los mismos que se ofrece elalimento.• En vacas en ordeño, los BMN se pueden ofrecer en los comederos delestablo o en los puestos de ordeño individuales, además desuministrárselos a voluntad en los saladeros de los potreros.4.10. LOS MICROORGANISMOS EFICACES (EM)4.10.1. Uso en alimentación animalSegún Aoki (1994) citado por Gallo y Mera (2001) el EM comúnmente se hautilizado para el procesamiento de alimentos para animales, como el caso de los25

ensilajes. Además según EM Technologies (1997) citado por Gallo y Mera (2001)el EM ayuda a mejorar la estabilidad del pH y a evitar procesos indeseablesdurante el almacenamiento de los alimentos.Según Sangakkata (1999) citado por Gallo y Mera (2001) el EM dentro deltracto digestivo de los animales balancea la microflora, lo que permite mejorar lahabilidad de los animales para utilizar eficientemente los nutrientes de losalimentos.En Alemania se ha utilizado el EM en las fincas lecheras, como unaalternativa de bajo costo para la producción de leche y se ha encontrado que lasvacas que se les da EM en la alimentación aumentan su producción de leche en900 Kg / año/vaca y además se reduce el estrés en las mismas. (Hammes, 2001).Experimentos hechos en China indican que el EM mejora la digestibilidadde los pastos, y aumenta la capacidad de los animales para absorber losnutrientes presentes en las fuentes alimenticias. Además se señala que las vacaslecheras aumentan la producción de leche en 1 Kg/día/vaca, cuando se les ofreceEM en la alimentación (Yu y Li, 1996)4.10.2. Composición del EMEl EM contiene varios tipos de microorganismos con funciones diferentes,entre las cuales se pueden citar: bacterias productoras de acido láctico, levaduras,actinomicetos, hongos filamentosos y bacterias fotosintéticas, que a través demecanismos especiales coinciden dentro de un mismo medio liquido (MOA, 1998).a) Bacterias lácticas:Las bacterias lácticas transforman azucares en acido láctico y encondiciones anaeróbicas ellas descomponen las proteínas en aminoácidos,además las bacterias acido lácticas tiene una fuerte capacidad bactericida, enespecial en el control de la reproducción de microorganismos nocivos. Un grupode este tipo de microorganismo es el que se usa en el yogurt, una bebida lácteaque es utilizada en la alimentación humana (MOA, 1998).26

) Levaduras:Las levaduras producen sustancias necesarias para la reproducción deotros microorganismos eficaces (bacterias lácticas y actinomicetos). Además quesintetizan otras sustancias como las hormonas (MOA, 1998).c) Actinomicetos:Los actinomicetos son microorganismos intermediarios entre las bacterias ylos hongos. Aprovechan los aminoácidos producidos por las bacteriasfotosintéticas y producen sustancias antimicrobianas. Esas sustanciasantimicrobianas controlan microorganismos patógenos y controlan la reproducciónanticipada de sustancias necesarias para el aumento de hongos y bacteriasnocivas produciendo un ambiente favorable para otros microorganismo útiles(MOA, 1998).d) Hongos filamentosos:Este tipo de hongos son muy importantes para la producción de alimentosfermentados. Tienen una fuerte capacidad de formar alcoholes y ácidos orgánicos,teniendo un gran efecto en la reducción de malos olores (MOA, 1998).e) Bacterias fotosintéticas:Son microorganismos autotróficos que tiene como fuente de energía la luzsolar y otras fuentes de calor. Sintetizan aminoácidos, ácidos nucleicos,sustancias bioactivas y azucares, estas sustancias son utilizadas por otrosmicroorganismos para su reproducción y desarrollo (MOA, 1998).4.10.3. Ventaja del EMSegún Higa (1993) citado por Gallo y Mera (2001) una ventaja de estatécnica microbial de control es su bajo costo, pues previo a su uso se activa unasolución de agua y melaza por un periodo de ocho días aumentando el volumende producto para ser utilizado en las unidades productivas.27

5. MATERIALES Y METODOS5.1. LUGAR DE ESTABLECIMIENTO DEL ENSAYOEl ensayo se realizo en la Finca Pecuaria Integrada (FPI) de la UniversidadEARTH, localizada en Mercedes de Guácimo, Limón, Costa Rica, a: 10°11`- 10°15` latitud Norte y 83° 40` - 83° 55` longitud Oeste; siendo su altitud promedio de50 msnm. La precipitación promedio anual es de 3464 mm/año, con unatemperatura media anual de 25°C y una humedad relativa de 87%, esto según losdatos estadísticos de la estación meteorológica EARTH. (Estremadoiro ySanabria, 2002.).5.2. DISEÑO EXPERIMENTALPara lograr cada uno de los objetivos propuestos fue necesario llevar acabo una serie de análisis de laboratorio (en el laboratorio de suelos y aguas de laUniversidad EARTH) y análisis de campo (FPI de la Universidad EARTH), paraasegurar así el éxito del proyecto.Se estableció que los BMN fueran elaborados cada 15 días, elaborando 3bloques multinutricionales por cada tratamiento (lotes de 12 BMN, cada 15 días),esto se hizo con el propósito de sacar las muestras un solo día.Para determinar la composición nutricional de los BMN, se hicieron tresanálisis de elementos completos, no se pudieron hacer más por falta depresupuesto (costos de análisis), y porque el objetivo principal de este análisis eramás que todo observar la calidad nutricional de los BMN el día de elaboración delos BMN, el día que se pueden ofrecer a los animales (día 15 después de suelaboración) y ver como cambia esta calidad después de tres meses y medio (105días). El análisis primer se hizo el día de elaborados los BMN, el segundo serealizó a los quince días de haber elaborado los BMN (una vez secos), porqueesta es la fecha en la que fueron ofrecidos por primera vez a los animales y elultimo análisis de elementos completos se realizo después de tres meses y medio(105 días), que fue la fecha de cierre del proyecto.28

La perdida de nitrógeno se determino mediante análisis de nitrógenoamoniacal, estos análisis se hicieron con intervalos de quince días, durante tresmeses y medio (105 días).Para determinar la variación en el consumo voluntario de los BMN por partede los animales, se utilizaron cuatro animales para cada tratamiento a evaluar (16novillos en total). Este estudio de consumo se hizo durante tres meses (90 díasseguidos)Los BMN se elaboraron cada 15 días, con el objetivo de tener laoportunidad de sacar las muestras para los análisis de laboratorio un mismo día(105 días después de elaborados), además porque en el laboratorio de Suelos yAguas de la Universidad EARTH, no era posible analizar cada 15 días lasmuestras extraídas, por la poca cantidad de estas.5.3. TRATAMIENTOS UTILIZADOSPara la investigación se determino que era necesario hacer 4 tratamientosque consistían principalmente en cuatro diferentes concentraciones de EM (vercuadro 5.1).Cuadro 5.1. Cantidad de materiales para cada tratamiento con 4 diferentesconcentraciones de EM.Melaza Urea Sal Min Cal (CaO) Fibra EMTratamiento…………………………………..%…………………………………..1 50 15 5 10 20 02 50 15 5 10 20 23 50 15 5 10 20 44 50 15 5 10 20 6Nota: Los porcentajes son equivalentes en peso29

En estos tratamientos es importante destacar que se tomó como base parahacer las formulaciones los BMN elaborados desde hace seis años en la FincaPecuaria Integrada de la Universidad EARTH, con la única diferencia que seagrego EM a diferentes concentraciones.5.4. MATERIALES UTILIZADOS PARA LOS BMNPara la elaboración de BMN se utilizaron materiales disponibles en el trópicohúmedo como melaza, urea, sal mineralizada, cal viva molida y fibra seca.Melaza: es un residuo del procesamiento de la caña de azúcar y aportaenergía en forma de azúcares de alta y rápida fermentación, que mantienen másactiva la flora ruminal, pues es una fuente de carbohidratos muy solubles. Susabor dulce la hace muy apetecible a los animales (Botero y Hernández, 2001).Urea: es un fertilizante químico que contiene 46% de nitrógeno y es lafuente de NNP más empleada actualmente en el trópico. Al ingresar al rúmen, laurea es convertida en amoníaco, el cual permite aumentar la población de la floraruminal. La urea sola o disuelta en agua y consumida o bebida en altas cantidadescausa toxicidad, pero al ofrecerse durante todo el día y en forma sólida en losBMN, se elimina el riesgo de intoxicación en los animales que la consumen(Botero y Hernández, 2001).Sal Mineralizada: es una mezcla de sal común con minerales y lo que sequiere es que con la sal común se aporte sodio y cloro y con los minerales aportarmacro y micronutrientes así como vitaminas, para cumplir con las demandasnutricionales de los animales. También la sal común actúa como saborizante ypreservante del bloque (Botero y Hernández, 2001).Cal viva finamente molida o pulverizada (CaO): es el aglutinante demayor uso en el BMN; además de ser aglutinante ayuda a alcalinizar el pH delBMN, evitando la fermentación de los azúcares y reduciendo el desarrollo dehongos contaminantes. (Botero y Hernández, 2001).30

EM: es una mezcla de varios microorganismos benéficos que se han venidoutilizando en la universidad EARTH para la elaboración de muchos alimentos paraanimales.Fibra seca molida: algunas fuentes de fibra seca contienen cantidadesvariables de energía, proteínas, minerales y vitaminas; sin embargo, su funciónadicional en el BMN es absorber la humedad de las fuentes de energía empleadasen su composición, además de darle firmeza y amarre (Botero y Hernández,2001). Como fuente de fibra para este experimento se utilizaron desechos decosecha de maíz y frijoles, bien picadas5.5. PASOS PARA LA ELABORACIÓN DE LOS BMNUna vez que los materiales están listos se procederá a seguir con los siguientespasos:1. Pesar todos los materiales a usar2. Moler la urea en un molino manual.3. Encendido de la máquina mezcladora4. Vaciar la melaza en una mezcladora para concreto y después de 10 minutos,si el tratamiento elaborado lleva EM se debe agregar este.5. Luego de 10 minutos de mezclado, se agrega la urea.6. Después de 10 minutos se agrega la sal mineralizada, pasados 10 minutosse agrega la cal viva molida.7. Esperar hasta que la mezcla quede bien homogenizada.8. Agregar la fibra hasta reducir la humedad de la mezcla y lograr la contexturaapropiada. La contextura apropiada se logra cuando al tomar una muestra dela mezcla sobre la palma de la mano, cerrando luego fuertemente el puño, nosale líquido entre los dedos y al abrir la mano queda formada una masa queno se expande. Si sale líquido entre los dedos es necesario homogenizar la31

mezcla o agregar más fibra. Si la masa se expande es necesariohomogenizar la mezcla o agregar más melaza (Botero y Hernández, 2001).9. Para moldear los BMN se utilizó un recipiente (balde o cubo plástico) de bocamás ancha que el fondo, el cual se recubrió internamente con hojas de papelperiódico cuyos extremos sobrantes se doblan sobre los bordes delrecipiente.10. La mezcla se vertió en el recipiente y se fue apisonando por capas delgadas.Para apisonar se utilizó un pisón de madera. El apisonado o prensado fuefuerte pero no excesivo, para lograr una consistencia de dureza que no afecteel consumo del BMN.11. Al alcanzar el tamaño y peso deseado (10 Kg.), se retiro cuidadosamente elBMN húmedo, y fue colocado en un secador solar para su proceso desecado.12. El proceso de secado en este ensayo fue de 15 días, aunque esto va adepender de la humedad ambiental.5.6. ANÁLISIS DEL CONTENIDO NUTRICIONAL DE LOS BMNDespués de haber elaborado los BMN se procedió a hacer el análisisquímico de todas las muestras de los BMN, las muestras necesarias para cadaanálisis se sacaron un mismo día, pero como los BMN fueron elaborado cada 15días (durante tres meses y medio), entonces se puede decir que entre unamuestra y otra había un intervalo de tiempo de 15 días.5.6.1. Toma de las muestrasLas muestras fueron tomadas de todas las partes de los BMN, en la parteinterna de los BMN se tomaron con un barreno de tomar muestras de suelos, estopara tener una muestra representativa de todas las partes del BMN, las muestrasse tomaron de 4 puntos diferentes de cada Bloque (ver figura 5.1); en la parteexterna se tomaron las muestras con un cuchillo, cortando las partes donde fueran32

más representativas (los lados, arriba y abajo de cada BMN). Se utilizaron 3Bloques para sacar cada una de las muestras.Para el análisis de la perdida de N amoniacal se tomaron 36 muestras(cada 15 días, del día de elaboración de los BMN, hasta el día 105 dealmacenamiento). Para el análisis de elementos completos se tomaron 12muestras (una de cada tratamiento: 1 en el día de elaboración de los BMN, otracuando fueron ofrecidos a los animales por primera vez; el día 15 y por último 1del 105; (fin del proyecto).Figura 5.1. Sitios internos de toma de muestras de los BMN usando barreno.5.6.2. Análisis de contenido nutricional (elementos completos)Para el análisis de los BMN se hizo mediante el método de análisis químicode muestras de tejido vegetal. Siguiendo el manual de laboratorio de suelos yaguas de la universidad EARTH (con algunas modificaciones para adaptar lametodología a los requerimientos del trabajo).Homogenización de las muestrasa) Después de recolectadas las muestras se llevaron al laboratorio elmismo día.b) Se secaron las muestras en una estufa a una temperatura de 50-55°Cc) Posteriormente las muestras se molieron en un molino Wiley de aceroinoxidable utilizando un tamiz de 20 ó 50 Mesh.33

Procedimiento de incineración en seco.a) Se pesó en una balanza analítica 1 gramo de cada muestra de BMNdentro de un recipiente de evaporación (crisol de Gooch).b) Se Incineraron las muestras de 6 a 10 horas en una mufla a unatemperatura de 475 a 500°Cc) Se dejó enfriar y después se humedeció con agua destilada, luego seagregaron 2 mL de HCl concentrado.d) Se evaporó muy lentamente en un baño maríae) Con un dispensador, se agregaron 25 mL de una solución de 1 N de HCly luego se filtróProcedimiento para el análisis de cada uno de los elementosSe tomó 1 mL del filtrado y se agregaron 24 mL de agua destilada (Dilución 1)1. Determinación de P: se tomaron 2 mL de la dilución (1) y se agregaron8 mL de una dilución diluida de Cloruro Estañoso y 10 mL de unadilución diluida de Molibdeno de Amonio. Se dejó en reposo durante 20minutos para el desarrollo del color y luego se leyó el porcentaje de P enel espectrofotómetro (colorímetro) a 600 ó 680 nm.2. Determinación de Ca: se tomaron 2 mL del filtrado (1) y se agregaron8 mL de agua destilada y 10 mL de solución de Lantano al 0,5%, seanalizó utilizando un espectrofotómetro de absorción atómica.3. Determinación de Mg, K Y Na: se tomó 1 mL de la dilución (1) yagregaron 15 mL de agua destilada y 9 mL de dilución de Lantano al0,5%, y se analizó en el espectrofotómetro de absorción atómica.4. Determinación de Cu, Fe, Mn y Zn: se utilizó el filtrado original y no ladilución (1), se analizaron las muestras utilizando espectrofotómetro deabsorción atómica.34

5.6.3. Procedimiento para determinar el % de Nitrógeno total, en el análisisde elementos completos (análisis foliar)Parte A:a) Se secaron las muestras en una estufa a una temperatura de 50-55°Cb) Se molió cada una de las muestras (completamente seco) para reducirel tamaño de las partículas a 20 Mesh o menos.c) Se pesaron 250 mg de la muestra sobre un trozo de papel encerado, enuna balanza analítica, se dobló el papel hasta llevarlo en forma de bolitay se colocó en un tubo de digestión numerado, se hizo esteprocedimiento hasta obtener 2 repeticiones por cada muestra. Ademáspor cada juego de muestras se hicieron dos controles los cualescontenían un papel encerado sin muestra y todos los reactivosutilizados.d) Se agregaron 5 mL de H 2 SO 4 concentrado y media tableta de Kjeltab acada tubo de digestión. La tableta de Kjeltab contenía K 2 SO 4 y uncatalizador, se mezclaron bien tratando de mantener la muestra en elfondo del tubo de digestión. Se colocaron todos los tubos de digestiónen una parrilla de soporte.e) Se precalentó el bloque de digestión hasta una temperatura de 360°C,por 1 hora luego se encendió la campana de gases y se colocó laparrilla de soporte sobre el bloque. Se colocó el sistema de extracciónde gases sobre las bocas de los tubos de ensayo y se les aplicó unvacío moderado.f) Se dejo digerir el contenido de los tubos de ensayo por 45 – 60minutos.g) Se removió el sistema extractor de gases de los tubos de digestión ysacó la parrilla del bloque de digestor. Se dejó enfriar los tubos por unosminutos y luego se agregaron lentamente 100 mL de agua a cada uno35

de ellos, mezclando muy bien el contenido de los mismos y se procedióa destilar.Parte B: Destilación de NH 3a) Se encendió el aparato de destilación, asegurándose de que el agua delcondensador estuviera circulando a la presión necesaria.b) Se colocaron los tubos de digestión en el aparato destilador cuando elagua del balón estaba en ebullición, asegurándose que la boca de losmismos se encontrarán bien selladas contra el paquete de hule. Sedestilaron primero los controles y luego las muestras.c) Se colocó un colector, conteniendo 15 mL de solución de H 3 BO 3 –indicador, en la salida del destilador, asegurándose que el tubo deldestilador estuviera sumergido dentro de la solución de H 3 BO 3 –indicador.d) Se agregaron al tubo que contiene la muestra, 20 mL de solución 10 Nde NaOH, medidos en la escala del destilador, inmediatamente secomenzó con la destilación.e) Se dejó que la destilación procediera por un espacio de 5 minutos, elaparato destilador se apago automáticamente después de este tiempo.Se removió el colector, el contenido del mismo cambió de unacoloración morada- rosada a una verde intensa. Se procedió a titular.Parte C: Titulación de destilado.Se hizo una titulación estándar de HCl o H 2 SO 4 , hasta que la coloracióncambió a rosada o morada. Se anotaron los resultados.Análisis de los resultados de la destilación.El análisis del % de N de las muestras se calculó mediante la siguiente formula:%N = [(M – C) * N * 14.007*100] / P36

Donde:M = mL del ácido gastado en la titulación de la muestraC = mL de ácido gastado en la titulación del blancoN = normalidad del ácidoP = peso de la muestra (mg)5.7. PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR EL % NITRÓGENO NOPROTEICO (NNP) DE LOS BMNPara determinar el % de NNP de los bloques multinutricionales, se siguió elmismo procedimiento para la determinación el % de nitrógeno total (análisis foliar),con algunas variaciones, con el objetivo de evitar la perdida del Nitrógenoamoniacal (NNP), por medio del proceso de volatilización no se secaron en unaestufa a una temperatura de 50-55°C (Determinación de la cantidad de NNPfue realizada en muestra húmeda, pero el cálculo de % de NNP se hizo enbase seca), para lo cual fue necesario secar por aparte parte de la misma muestraen la estufa a una temperatura de 50 – 55°C, solo con el objetivo de determinar %de Humedad y con este % de Humedad se calculó el % de NNP de cada BMN enbase seca.Además no se pudo moler las muestras en el molino Wiley de aceroinoxidable utilizando un tamiz de 20 o menos, esto porque la muestra estabahúmeda y no era posible pasarlo por el molino, por lo tanto solo se disminuyo eltamaño de las partículas por medio de un picado de la muestra. Esto no permitióuna buena homogenización de la muestra. En todo lo demos se siguió el mismoproceso descrito para determinar N Total (análisis foliar).5.8. DETERMINACIÓN DE PH EN H 2 O1. Se pesaron 10 g de cada muestra2. Se colocó cada muestra en un erlenmeyer3. Se agregaron 100 mL de agua destilada4. Se agitó a 200 revoluciones por 20 Minutos37

5. Se determino el pH con el pHmetro5.9. PROCEDIMIENTO PARA EVALUAR EL CONSUMO VOLUNTARIO DEBMN POR LOS BOVINOSa) Primeramente se seleccionaron 16 novillos que fueran homogéneos enla Finca Pecuaria Integrada de la Universidad EARTHb) Los novillos seleccionados tenían una edad promedio de año y medio,con un peso promedio al inicio del proyecto de 234 Kg y al final de 292Kg con una ganancia de peso promedio de 647 g / día Los animales nopertenecían a una raza específica ya que eran cruces de las diferentesrazas, que se usan en la Finca.c) Se construyeron ocho apartos (potreros); para poder rotar los animalescon la frecuencia necesaria. Los apartos fueron construidos con cercaseléctricas, con sus respectivos comederos techadosagua.y bebederos ded) Se hicieron análisis de composición botánica antes de que los animalesingresaran a cada potrero, determinando así la producción de forraje delos potreros por cada pastoreo, con este análisis también se determinóuna carga animal de 2 UA/ha/añoe) Los datos de composición botánica revelaron que los potreros estabancompuestos de: 40.17% de Ischaemum indicum (Ratana) 38.29% dePennisetum purpusum (Gramalote), 6.93% de Brachiaria brizanta,8.64% de Panicum maximun (Guinea) y 5.96% de Malezas. Estavariabilidad de especies se da porque hace algunos años estos potrerosfueron sembrados con pastos mejorados (Brachiaría y Guinea), pero nose le ha dado el mantenimiento adecuado y han sido colonizados porpatos nativos (Ratana y Gramalote).f) El consumo voluntario se midió ofreciéndole a los animales los BMN enlos comederos techados, en el mismo comedero se ofreció salmineralizada. Estos comederos fueron ubicados cercas de los38

ebederos de agua para hacerle más accesible los BMN a los animalesy de esta forma incentivar el consumo.g) Los BMN fueron ofrecidos cada cinco días, durante un periodo denoventa días. Los BMN tenían un peso aproximado de 10 Kilogramos.Antes de colocar el siguiente bloque se pesaba el residuo del bloqueanterior para determinar así la cantidad consumida por cada animal.39

6. RESULTADOS Y DISCUSIÓNPara analizar los datos de perdida de NNP se usaron programas deregresión lineal que nos indicaron la perdida de NNP de los BMN a través de sutiempo de almacenamiento, de igual forma se analizaron los datos de cambio depH de los BMN. Para determinar si había una correlación entre tratamientos sehizo determinando la R 2, los tratamientos tienen correlación sí la R 2es mayor a0,5, sí es menor a esto se concluye que no hay correlación entre tratamientos,porque los puntos están muy disperso con respecto a la línea de regresión lineal.Los datos de composición nutricional solo se analizaron por medio degraficas en Excel, porque no habían suficientes muestras (repeticiones) parahacer un análisis estadístico de los mismos, de igual forma se analizó el % dehumedad de los BMN.Para analizar la variación en consumo se utilizaron los programasestadísticos de Fisher y Dunnet que nos muestran la diferencia entre lostratamientos, mostrando si son significativamente diferentes o no.6.1. PERDIDA DE NITRÓGENO AMONIACAL EN EL ALMACENAMIENTO DELOS BMNLos datos obtenidos del laboratorio se analizaron por el método deregresión lineal (Figura 6.1) para determinar si había pérdida de N amoniacal enel tiempo de almacenamiento de los BMN. La representación Figura nos muestrauna pequeña tendencia hacia la perdida de N (pendiente negativa), solamente eltratamiento con 6% de EM es que no se observa una perdida de N (Pendiente de0). La perdida de N en los BMN se debe a la volatilización del NNP, debido a lastemperaturas tan variables que son sometido en su tiempo de almacenamiento.Estadísticamente estos resultados no son significativos, ya que la R 2menor a 0.5. Por lo que se puede decir que no hay correlación (no hay regresiónsignificativa). Esta falta de correlación puede atribuirse a las variacionesambientales a los que fueron expuestos los BMN a la hora de su elaboraciónes40

(elaborados cada 15 días; cada día con sus condiciones ambientales diferentes) yademás a las variaciones climáticas sometidos los BMN en el proceso dealmacenamiento.Las concentraciones (%) de NNP de los tratamientos variaconsiderablemente entre cada análisis realizado, pero en el día 15 es cuando seve una pequeña homogeneidad entre los tratamientos (alrededor de 8%), despuésde este día los % de NNP varían ampliamente sin seguir ninguna tendencia quenos indique los resultados específicos de un tratamiento en especial.Cabe señalar que solo se hizo un análisis de nitrógeno amoniacal de cadamuestra (por falta de presupuesto), aunque lo ideal hubiera sido hacer al menostres análisis de cada muestra; para que cada punto de la Figura fuera un promedioy no un solo análisis como es este caso. Con esto talvez hubiera disminuido ladispersión de los puntos y el margen de error de los resultados.11,0y = -0,01x + 8,32R 2 = 0,12y = -0,01x + 8,17R 2 = 0,09y = -0,02x + 8,13R 2 = 0,28y = 0,00x + 7,50R 2 = 0,010% EM2% EM4% EM9,06% EM% de NNP7,05,00 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)Linear(0% EM)Linear(2% EM)Linear(4% EM)Linear(6% EM)Figura 6.1. Perdida de Nitrógeno Amoniacal de los BMN con diferentes concentraciones deEM, durante 105 días de almacenamiento.41

6.2. VARIACIÓN DEL % DE HUMEDAD EN EL ALMACENAMIENTO DE LOSBMNTeniendo en cuanta que el % de humedad de los BMN es una de losfactores que afecta el consumo de los BMN, se procedió a analizar este en cadauno de los tratamientos con los datos brindados por el laboratorio de análisis demateria seca de los BMN.Sabiendo que el % de humedad de los BMN depende de muchos factorescomo; las condiciones ambientales (% humedad relativa del ambiente ytemperatura) y de los materiales con los que fueron elaborados los BMN, por estono se puede decir que hay un % humedad estándar para todos los BMN; perosegún Becerra y David (1991), que utilizaron materiales parecidos a los de esteexperimento señala que el % de humedad de los BMN debe estar alrededor de19%.En este experimento como era de esperar el % humedad varió mucho enlos días de secado (del día de elaborados los BMN al día 15), pasando de 25% deHumedad en el día de elaborados los BMN (día cero) a un promedio de 19% en eldía 15 de almacenamiento en los 4 tratamientos (ver Figura 6.2). Después deldía 15 la variación de humedad es mínima, lo que indica que la humedad no fueun factor que influyó en las discrepancias de los datos de consumo de BMN entrelos diferentes tratamientos.Se toma el día 15 como referencia, porque esta es la fecha en que los BMNfueron ofrecidos a los animales (15 días de tiempo de secado de los BMN), lavariación de humedad después del tiempo de secado está estrechamente ligadaa las condiciones ambientales a las que son sometidos los BMN.42

% de Humedad3025201510500 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)0% EM2% EM4% EM6% EMFigura 6.2. Perdida de Humedad de los BMN con diferentes concentraciones de EM, durante105 días de almacenamiento.6.3. VARIACIÓN DEL PH EN EL ALMACENAMIENTO DE LOS BMNSegún EM Technologies (1997) el EM ayuda a mejorar la estabilidad del pHy a evitar procesos indeseables durante el almacenamiento de algunos alimentos,por esto se analizó el pH de los BMN elaborados para ver sí el EM tenia un efectosobre el comportamientos de los diferentes tratamientos. Los resultados obtenidos(ver Figura 6.3) revelan que no hay ningún efecto del EM sobre el PH de losbloques multinutricionales.Además se puede notar que los BMN tiene un pH muy alcalino (alrededorde 10), cumpliendo con los requerimientos del pH de los BMN; porque segúnBotero y Hernández (2001) la alcalinidad del PH en los BMN es muy importantepara balancear el pH del rúmen de los animales lo que permite un buencrecimiento de los Microorganismos en el mismo, para evitar la fermentación delos azúcares y sobretodo para reducir el desarrollo de hongos contaminantes enlos BMN.43

pH de los BMN14131211109y = -0,01x + 11,40R 2 = 0,21y = -0,01x + 11,27R 2 = 0,098y = -0,01x + 11,47R 2 = 0,13y = -0,02x + 11,58R 2 = 0,4570 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)0% EM2% EM4% EM6% EMLinear(0% EM)Linear(2% EM)Linear(4% EM)Linear(6% EM)Figura 6.3. Variación del pH de los BMN con diferentes concentraciones deEM, durante 105 días de almacenamiento.6.4. PERDIDA DEL CONTENIDO NUTRICIONAL EN EL ALMACENAMIENTODE LOS BMNLa composición nutricional de los BMN varía de acuerdo a cadaexperimento, porque esto está ligada más que todo al tipo de materiales utilizadospara su elaboración, por lo que fue difícil encontrar datos confiables para compararcon los datos mostrados en este experimento, por esto no se puede saber concerteza si el contenido nutricional de los BMN elaborados en este experimento sonlos apropiados para este tipo de suplemento para rumiantes, pues no se encontróun estudio que haya evaluado los mismos materiales con los que se elaboraronlos BMN en este trabajo.Teniendo los datos del análisis de elementos completos se procedió haanalizar cada elemento por medio de Figuras en Excel que nos muestran lascurvas de variación del contenido nutricional en el tiempo de almacenamiento delos BMN. Como se menciono anteriormente lo ideal hubiera sido tener más puntosmuestreados para tener suficientes datos para hacer un análisis estadístico y asítener conclusiones más decisivas del efecto del EM en la composición nutricionallos BMN en su tiempo de almacenamiento.44

El Nitrógeno total (N)La Figura 6.4 muestra una tendencia a la disminución del % de N total amedida que transcurre el tiempo de almacenamiento de los BMN, teniendo mayorconcentración de N total en el día 15 de almacenamiento, comparado con el día105, lo que indica que hay una perdida de nitrógeno tanto amoniacal como total enel tiempo de almacenamiento los BMN. El todos los tratamientos (excepto el de4% de EM) tienen una tendencia a la perdida de N desde el primer día que fueranalmacenados, pero en el tratamiento con 4% de EM se da una ganancia de N enlos primeros 15 días de almacenamiento y después de este día sigue el patrón delos demás tratamientos. Entonces se puede decir que un 4% de EM en los BMN,reduce la pérdida de N total en el tiempo de almacenamiento de estos, y nosmuestra que el día 15 los BMN tienen mayor valor nutricional (después de sutiempo de secado).8.508.00% de N total7.507.006.506.000% EM2% EM4% EM6% EM5.505.000 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)Figura 6.4. Variación en el % de N total de los BMN elaborados con 4diferentes concentraciones de EM.El Calcio (Ca)El Ca es el elemento mineral más abundante en el organismo animal. Es uncomponente esencial de los huesos y dientes, Además es un componente muy45

importante de las células, en los sistemas enzimáticos y los impulsos nerviosos delcuerpo. Los requerimientos varían dependiendo de las exigencias del animal (verAnexo 5). Las deficiencias en los animales jóvenes se manifiestan en uncrecimiento raquítico, en animales adultos se manifiesta en osteomalacia; en laque el Ca movilizado de los huesos no es reemplazado, haciéndose frágiles loshuesos y se fracturan con facilidad. Es importante tener en cuanta la relación deCa:P, Lo más recomendable para rumiantes es 2:1. (Mcdonald, 1993)La Figura 6.5 nos muestra que la cantidad de Ca en los BMN tiende aaumentar en los primeros 15 días de almacenamiento y a medida que transcurresu tiempo de almacenamiento va disminuyendo paulatinamente. El tratamientoque aumento más en los primeros 15 días, es el tratamiento con 2% de EM y fueel que al final de los 105 también presento mayor cantidad de NCal. El tratamientocon 4% de EM es el que no presenta perdida, presentando incluso un aumentomínimo de Ca.1210% de Ca8640% EM2% EM4% EM6% EM200 15 30 45 60 75 90 105 120Timepo de almacenamiento (días)Figura 6.5. Variación del % de Ca de los BMN elaborados con 4 diferentes concentracionesde EM46

El Fósforo (P)El P tiene una estrecha relación con el Ca, se encuentra en las proteínas,los ácidos nucleicos y fosfolípidos, es vital para aumentar la fertilidad del ganado.Los requerimientos varían conforme a las necesidades de cada animal (ver Anexo5), En las zonas tropicales se presentan grandes deficiencias de este elemento,pudiéndose considerar como la deficiencia de mayor importancia económica deestas regiones. La deficiencia se manifiesta en una baja fertilidad reproductiva delganado, además que distorsiona el apetito de los animales; en vacas puedereducir la producción de leche (Mcdonald, 1993)Las cantidades de P en los BMN aumentaron aceleradamente en losprimeros 15 días de almacenamiento de los BMN, después de este día hay unaperdida constante de P (ver Figura 6.6) los tratamientos que más aumentaron lacantidad de P en los primeros 15 días son los tratamientos con 4 y 6% de EM,pero a media que transcurre el tiempo son los que más pierden, indicándonosnuevamente que los BMN no se deben almacenar por tiempos muy prolongados.0.700.60% de P0.500.400.300.200.100% EM2% EM4% EM6% EM0.000 15 30 45 60 75 90 105 120Timepo de almacenamiento (días)Figura 6.6. Variación en el % de P de los BMN elaborados con 4 diferentes concentracionesde EM47

El Potasio (K)El K realiza una importante función en la regulación osmótica de los líquidosdel organismo y en el mantenimiento del equilibrio ácido – base. Se encuentrafundamentalmente en el interior de las células, interviene en la excitabilidadnerviosa y muscular, participando en el metabolismo de los carbohidratos. Sonmuy raras las deficiencias, pero cuando se presentan se manifiestan en un retrasodel crecimientos y la muerte de los animales. Algunas investigaciones indican queun exceso de este elemento pueden interferir en la absorción de Magnesio porparte de los animales. (Mcdonald, 1993)En este experimento las cantidades de K tienden disminuir en los primeros15 días de almacenamiento, pero después de este día se mantienen lascantidades de K hasta el día 105 de almacenamiento (ver Figura 6.7). Eltratamiento con 4% de EM es el que presenta menor perdida en los primeros 15días de almacenamiento, manteniendo esa cantidad (un mínimo aumento) hasta eldía 105, por lo que es recomendable utilizar 4% de EM para mantener el K.% de K2.001.801.601.401.201.000.800.600.400.200.000 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)0% EM2% EM4% EM6% EMFigura 6.7. Variación en el % de K de los BMN elaborados con 4 diferentes concentracionesde EM.48

El Magnesio (Mg)El Mg esta estrechamente relacionando con el Ca y el P. Es el activador deenzimas más común; se encuentra en gran parte en el esqueleto. Las deficienciasbajan las concentraciones de este elemento en el esqueleto, esto puede provocarla enfermedad de tetania y muerte de los animales. Los requerimientos varíanconforme a las necesidades de cada animal (ver Anexo 5), En animales enpastoreo presenta un problema importante, porque se ha demostrado que losrumiantes solo utilizan el 5% del Mg que consumen en el pasto, por lo que esindispensable suplementarlo en la alimentación (Bondi, 1989)Según la Figura 6.8 las cantidades de Mg en los BMN tienden a aumentaren los primeros 105 días de almacenamiento de los BMN, después de este dia semantienen sin variar mucho hasta el día 105. El mayor aumento en el tiempo dealmacenamiento de los BMN lo presentó el tratamiento con 4% de EM. Por lo quese puede utilizar 4% de EM para aumentar o mantener las concentraciones de Mgen los BMN.0.500.450.40% de Mg0.350.300.250.200.150.100.050% EM2% EM4% EM6% EM0.000 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)Figura 6.8. Variación en el % de Mg de los BMN elaborados con 4 diferentes concentracionesde EM49

El Hierro (Fe)Más del 90% del Fe se encuentra combinado con las proteínas, la másimportante de las cuales es la hemoglobina; así como en el suero sanguíneo.Además forma parte de la mayoría de las enzimas. Los requerimientos para losrumiantes van de 25 a 40 ppm. Las deficiencias pueden afectar la formación dehemoglobina, presentándose anemia en los animales jóvenes. Cantidades muyaltas pueden ser toxicas, manifestándose en trastornos en la alimentación, retrasodel crecimiento y deficiencias de P (Bondi, 1989)Según la Figura 6.9 la cantidad de Fe tiende a aumentar en los primeros 15días de almacenamiento de los BMN. Los tratamientos que presentaron un mayoraumento son los tratamientos de 0% y 2% de EM, pero también son los quepierden Fe en el tiempo de almacenamiento de los BMN. Los tratamientos con 4 y6% son los que presenta menor aumento en los primeros 15 días dealmacenamiento de los BMN y prácticamente esa misma cantidad se mantienenen para el día 105 de almacenamiento. Por lo que es recomendable utilizar 4 o 6%de EM en los BMN para mantener las concentraciones de Fe en los mismos.14001200ppm de Fe10008006004002000% EM2% EM4% EM6% EM00 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)Figura 6.9. Variación la cantidad (ppm) de Fe de los BMN elaborados con 4 diferentesconcentraciones de EM50

El Cobre (Cu)El Cu se considera como un vehículo del Fe. Es muy importante en elmetabolismo del oxigeno y para la síntesis de muchas enzimas, es necesario parala pigmentación de la pile y el pelo de los animales. Las deficiencias semanifiestan en anemias, alteraciones óseas, infertilidad y despigmentación de lapiel y pelo de los animales. Los requerimientos por los animales rumiantes van de5 a 10 ppm. Alimentos con alto Cu hacen muy común las intoxicaciones con Cu,acumulándose los excesos en el hígado, pudiéndose considerar como un venenoacumulativo. Mayores a 30 ppm, pueden producirse acumulaciones, ya más de1000 ppm son cantidades peligrosas (Bondi, 1989).Según la Figura 6.10 las cantidades de Cu varían considerablemente en eltiempo de almacenamiento de los BMN, presentado un aumento acelerado de Cuen los primeros 15 días de almacenamiento y después de este día se presentauna perdida bastante apreciable de dicho nutriente hasta el día 105 dealmacenamiento de los BMN. Según los resultados el EM no tiene influencia en lasconcentraciones de Cu de los BMN10080ppm de Cu6040200% EM2% EM4% EM6% EM00 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)Figura 6.10. Variación la cantidad (ppm) de Cu de los BMN elaborados con 4 diferentesconcentraciones de EM51

El Zinc (Zn)El Zn se ha encontrado en todos los tejidos de los animales, se encuentraen gran cantidad en la piel y el pelo, así como en varias enzimas, siendo a la vezactivador de estas. Las deficiencias en bovinos se presentan con inflamaciones enla boca y las extremidades y rigidez de las articulaciones. Generalmente no sepresentan intoxicaciones por este elemento, pero se ha comprobado que lascantidades excesivas de Zn reducen el consumo de alimento y puede provocardeficiencia de Cu (Mcdonald, 1993)La Figura 6.11 nos muestra que el Zn tiene un comportamiento similar alCu, aumentando aceleradamente la cantidad de Zn, en los primeros 15 días dealmacenamiento de los BMN y después de este día se presentan perdidasconstantes de este elemento. Como en mucho de los elementos discutidosanteriormente la cantidad de Zn es mayor en el día 15 de almacenamientocomparado con el día 105. Demostrándose que los BMN pierden su calidadnutricional a través de su tiempo de almacenamiento. Prácticamente el EM notiene efecto en las cantidades de Zn en los BMN.250ppm de Zn200150100500% EM2% EM4% EM6% EM00 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de almacenamiento (días)Figura 6.11. Variación la cantidad (ppm) de Zn de los BMN elaborados con 4 diferentesconcentraciones de EM52

El Manganeso:El contenido en el organismo animal es muy bajo; las mayores cantidadesse encuentran en los huesos, hígado, riñón, páncreas y glándula pituitaria. Es muyimportante como activador enzimático. Las deficiencias se manifiestan en retrasodel crecimiento, anormalidades en el esqueleto y trastornos reproductivos. Elrango de toxicidad es muy amplio, pero si lo hay se manifiesta en disminución delapetito y retraso del crecimiento (Mcdonald, 1993)Según los resultados (ver Figura 6.12), las cantidades de Mn aumentan enlos primeros 15 días de almacenamiento y disminuyen paulatinamente hasta el día105 de almacenamiento de los BMN. Los tratamientos con 0% y 2% de EM fueronlos que más aumentaron en los primeros 15 días de almacenamiento de los BMN,pero después de este día al igual que los tratamientos con 4 y 6% de EMcomienzan a perder su contenido de Mn. El EM no tiene influencia sobre lasconcentraciones de Mn.140120ppm de Mn1008060400% EM2% EM4% EM6% EM2000 15 30 45 60 75 90 105 120Tiempo de alamacenamiento (días)Figura 6.12. Variación la cantidad (ppm) de Mn de los BMN elaborados con 4 diferentesconcentraciones de EM53

Todas las Figuras analizadas anteriormente indican que cada elemento enlos BMN tiene un comportamiento particular, pero en general casi todos tienen unatendencia a la pérdida de su valor nutricional en el tiempo de almacenamiento delos BMN. Solo dos nutrientes (K y Mg) son los que no presentan perdida. Ademásse observa que en el día 15 de almacenamiento es cuando las concentracionesnutricionales de los bloques son más altas, comparado con el día 105; por lo quees recomendable no almacenar los BMN, por tiempos muy prolongados antes deofrecerlos a los rumiantes para su consumo.En la mayoría de los macroelementos (N, P, Ca, K y Mg) el tratamiento con4% de EM es el que presenta los mejores resultados, reduciendo la perdidanutritiva o manteniendo el valor nutricionales el tiempo de almacenamiento de losBMN. En los micronutrientes (Fe, Cu, Zn y Mn) prácticamente el EM no tiene unefecto marcado, solo en el Fe es que hay una tendencia a mantener la cantidadinicial del elemento hasta el día 105 de almacenamiento.Además como se ha venido resaltando, con los resultados mostrados eneste experimento, no se puede concluir algo definitivo en cuanto al efecto del EMsobre esta composición nutricional de los BMN. Primeramente porque losresultados varían mucho de un muestreo a otro y también porque los puntos demuestreos son muy pocos (solo 3), lo que no permite hacer una correlaciónrepresentativa de las variaciones del contenido nutricional de los BMN, en sutiempo de almacenamiento. Por lo que es recomendable tener más puntos demuestreo para así determinar con precisión la fecha de almacenamiento en quelos BMN comienzan a perder su valor nutritivo. Pero a pesar de esto en estetrabajo se puede concluir que si hay perdida nutricional de los BMN en su tiempode almacenamiento.No sé puede dar una razón que explique, el porque de la variación en elvalor nutritivo de los BMN, porque no sé encuentra en la literatura un trabajo quehaya analizado estos aspectos de los BMN y mucho menos un trabajo con EM54

similar a este experimento. De allí la importancia de este trabajo, generandoinformación al respecto.6.5. VARIACIÓN DEL CONSUMO VOLUNTARIO DE LOS BMNPROVOCADOS POR LAS DIFERENTES CONCENTRACIONES DE EMLos resultados obtenidos en la evaluación del consumo de los BMN porparte de los bovinos a diferentes concentraciones de EM, muestran que ha medidaque se aumenta la cantidad de EM en los MMN aumenta su consumo (ver Figura6.13). Según el análisis estadístico de Fisher (Anexo 7) hay diferenciassignificativas entre los tratamientos (p = pequeña; medias diferentes),. De igualforma el análisis estadístico según Dunnet (Anexo 8) señala que hay diferenciassignificativas entre los tratamientos (p = pequeña).La diferencia en consumo entre el testigo (0% de EM) y los tratamientosque tienen EM son de: 28 g/día con respecto al tratamiento de 2% de EM (7% másde consumo), 93 g/día con respecto al tratamiento con 4% de EM (25% más deconsumo) y 121 g/día con respecto al tratamiento con 6% de EM (32% más deconsumo). Por lo tanto el tratamiento que aumento más el consumo de BMN, es eltratamiento con 6% de EM, aunque se puede recomendar el de 4% de EM, parareducir costos y también da excelentes resultados.Este aumento en el consumo de los BMN se puede deber a lo que señalaSangakkata y EM Technologies en la revisión biblioFigura, donde dicen que lasreacciones que tiene el EM cuando se agrega a un suplemento alimenticio paraanimales, evita la fermentación de los azúcares, evitando procesos indeseablesdurante el almacenamiento de los alimentos, balancea la microflora tractodigestivo de los animales. Lo que permite mejorar la habilidad de los animalespara utilizar eficientemente los nutrientes de los alimentos. También colocar EM enlos BMN, además de aumentar el consumo de los BMN, se tiene la ventaja de quelas heces de los animales ya estarían inoculadas con EM, lo que evitaría el malolor en las mismas, por lo tanto ya no sería necesario inocularlas con EM si sequiere elaborar Bokashi con la misma sin generar malos olores. .55

600500473.44501.11Consumo ( g/día )400300200380.24407.8810000% de EM 2% de EM 4% de EM 6% de EMTratamientosFigura 6.13 Consumo (g/día) de BMN por parte de los bovinos, presentandolas variaciones de consumo provocados por las diferentesconcentraciones de EM.56

7. CONCLUSIONESSegún los resultados de este experimento se puede concluir que:• Los BMN tienen una perdida de su contenido nutricional cuando sealmacenan por tiempos muy prolongados.• El mayor contenido nutricional de los BMN, se presentan inmediatamentedespués de su tiempo de secado (después del día 15 de elaborados), por loque esta es la mejor fecha para ofrecerlos a los animales.• Hay una perdida importante de NNP y N total cuando se almacenan losBMN por mucho tiempo.• El tratamiento con 6% de EM presenta una tendencia a evitar la perdida deNNP en el almacenamiento de los BMN.• En la mayoría de los macroelementos el tratamiento con 4% de EM es elque presenta los mejores resultados. En los micronutrientes prácticamenteel EM no tiene un efecto marcado,• El EM aumenta el consumo de los BMN en los rumiantes a medida que seaumenta la cantidad de EM en los mismos. El tratamiento con 6% de EMfue el que presentó mayor consumo, con 32% más de consumo comparadocon el testigo (0% de EM).57

8. RECOMENDACIONESPara tener más conclusiones acerca del uso de EM en los BMN serecomienda:• Darle seguimiento a los resultados concluidos en este trabajo, haciendoexperimentos similares a este.• Analizar las muestras para NNP mediante análisis de Nitrógeno amoniacalcon equipos especializados, para disminuir el margen de error de losresultados. Haciendo más análisis de cada muestra para tener en cadapunto un promedio de los datos y no solo un análisis como es el caso deeste trabajo• Realizar este trabajo por un tiempo más prolongado, donde se puedamedir ganancia de peso de los animales que son suplementados conBMN con EM.• Hacer pruebas de digestibilidad de los BMN ofrecidos a los animales, paradeterminar si el EM al aumentar el consumo de BMN aumenta gananciade peso de los animales.• Elaborar los BMN un mismo día y hacer los análisis de laboratorio cada 15días, para disminuir las posibilidades de variaciones de resultados por lainfluencia de las diversas condiciones ambientales a la hora que seelaboran los BMN.Con los resultados del proyecto se puede recomendar:• No almacenar los BMN, por tiempos muy prolongados antes de ofrecerlosa los rumiantes para su consumo, esto para evitar la perdida nutricional deestos.• Colocar concentraciones entre 4% y 6% de EM en la formulación de losBMN, para evitar su perdida nutricional y aumentar su consumo.58

9. BIBLIOGRAFÍA CITADABanco Ganadero. 1987. Los Bloques Multinutricionales. Bogotá, CO. Revista Vol.7(2). CIPAV. 72 pBecerra, J y David, A. 1990. Observaciones sobre la elaboración y consumo debloques de urea / melaza. (en línea). Montería, CO. Universidad deCórdoba. Consultado 17 mayo 2004. Disponible en:http://www.cipav.org.co/lrrd/lrrd2/2/becerra.htmBecerra, J y David, A. 1991. Variación del peso vivo y de la producción láctea devacas mestizas (Bos taurus x Bos indicus) suplementadas con bloques deurea-melaza durante la estación lluviosa., Montería, CO. Universidad deCórdoba. Consultado 17 mayo 2004. Disponible en:http://www.cipav.org.co/lrrd/lrrd3/2/becerra.htmBondi, A. 1989, Nutrición animal. Zaragoza, ES. Editorial Acribia, S.A. 546 pBotero, R y Hernández, G. 2001. Avances en la elaboración y uso de BloquesMultinutricionales (en línea). Guácimo, San José, CR. EARTH. Consultado24 mayo 2004. Disponible en: http://usi.earth.ac.cr/glas/sp/50000037.pdfCarcelén, F, et al. 2000. Confección de una prensa artesanal para la elaboraciónde Bloques Multinutricionales. (en línea). Revista de InvestigacionesVeterinarias del Perú. Vol. 11(2):279-281. PE. Laboratorio de Nutrición -FMV – UNMSM. Consultado 24 abr. de 2004. Disponible en:http://www.visionveterinaria.com/rivep/art/13oct61.htmCentro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT). 2001. Revista PasturasTropicales. (en línea). CO. CIAT. Consultado 24 abr. de 2004. Disponibleen: http://www.ciat.cgiar.org/forrajes/forrajeses/pasturas_ultima_edicion.htmEscalona, E; et al. 1995. Una nota sobre el uso de Bloques Multinutricionales enun ganado de ceba. (en línea).Revista ZOOTECNIA TROPICAL.Vol.13(1):87-94. FONIAP. Bramón, VE. Consultado 24 abr. 2004.Disponibleen:http://www.ceniap.gov.ve/bdigital/ztzoo/zt1301/texto/unanota.htmEstremadoiro, F y Sanabria, J. 2002. Competencia de malezas en cultivos demaíz y fríjol bajo dos sistemas de labranza en el trópico húmedo Proyectode Graduación Lic. Ing. Agr. Guácimo, CR. EARTH. 46p.Fundación Mokiti Okada (MOA). 1998. Microorganismos eficaces EM en laagricultura natural. Centro de pesquisa. Sao Pablo, BR. 29 p.Gallo, M y Mera, M. 2001. Evaluación de ensilaje de cáscara de banano maduropara consumo de ganado bovino. Proyecto de Graduación Lic. Ing. Agr.Guácimo, CR. EARTH. 31 p59

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10. ANEXOSAnexo 1. Contenido de Nitrógeno amoniacal de los BMN con diferentesconcentraciones de EM, elaborados cada 15 días.Tiempo (Días)% de NNP0% EM 2% EM 4% EM 6% EM0 8.61 8.38 8.81 6.6715 8.23 8.25 8.02 8.6330 6.60 7.45 5.61 6.9145 8.70 6.79 7.42 7.6860 8.66 9.11 7.74 8.0775 7.84 6.04 8.13 7.8290 6.05 8.84 5.43 7.58105 7.97 6.53 6.27 7.21Anexo 2. Contenido de Humedad de los BMN con diferentes concentracionesde EM, elaborados cada 15 días.Tiempo de almacenamiento(Días)% de Humedad0% EM 2% EM 4% EM 6% EM0 22.63 24.15 25.66 26.4315 19.9 19.43 20.55 19.8330 19.65 20.22 20.62 19.8745 21.37 19.13 14.8 20.1760 19.86 19.69 18.98 19.7275 19.77 19 21.08 19.3790 20.99 19.52 18.57 15.55105 21.53 20.44 19.77 20.5162

Anexo 3. Resultados de los valores de PH de los BMN. con diferentesconcentraciones de EM, elaborados cada 15 días.Tiempo dealmacenamiento (días)pH0% EM 2% EM 4% EM 6% EM0 11.60 11.73 11.50 11.4015 11.79 11.34 11.86 10.7330 11.54 10.20 10.33 11.3345 10.90 11.47 11.51 11.3860 10.08 9.72 9.61 9.3175 10.94 11.40 10.75 11.0790 11.22 11.25 10.78 12.16105 11.43 9.63 9.40 9.30Anexo 4. Resultados del contenido nutricional de los BMN.Cuadro 1. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 0% de EMTiempo dealmacenamiento(días)Contenido NutricionalN P K Ca Mg Fe Cu Zn Mn……………………%………………...................................ppm........................0 7.75 0.12 1.48 4.28 0.24 464.00 17.00 47.00 64.0015 7.64 0.57 1.16 9.32 0.37 1025.00 88.00 205.00 121.00105 7.22 0.47 1.59 5.50 0.39 675.00 17.00 45.00 68.0063

Cuadro 2. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 2% de EMTiempo dealmacenamiento(días)Contenido NutricionalN P K Ca Mg Fe Cu Zn Mn……………………%……………….. .................................ppm........................0 7.63 0.11 1.45 4.17 0.24 499.00 18.00 46.00 64.00156.79 0.58 1.28 10.47 0.41 1225.00 72.00 206.00130.00105 6.68 0.43 1.65 6.55 0.42 850.00 16.00 43.00 61.00Cuadro 3. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 4% de EMTiempo dealmacenamiento(días)Contenido NutricionalN P K Ca Mg Fe Cu Zn Mn……………………%……………….. .................................ppm........................0 7.54 0.12 1.45 4.08 0.25 484.00 18.00 49.00 67.00157.95 0.65 1.43 5.90 0.38 726.00 79.00 199.00107.00105 7.29 0.44 1.79 6.34 0.45 700.00 14.00 35.00 54.00Cuadro 4. Contenido nutricional de los BMN elaborados con 6% de EMTiempo dealmacenamiento(días)Contenido NutricionalN P K Ca Mg Fe Cu Zn Mn……………………%……………….. .................................ppm........................0 7.31 0.13 1.80 5.16 0.32 646.00 22.00 53.00 71.0015 7.16 0.65 1.43 5.90 0.38 726.00 79.00 199.00 107.00105 6.98 0.39 1.43 5.40 0.33 715.00 12.00 36.00 58.0064

Anexo 7. Análisis estadístico por la prueba de hipótesis según Fisher delconsumo voluntario de los BMN por parte de los bovinosconstantes:t (tratamientos) 4b (repeticiones) 19n (total repeticiones) 76(sy) 2 /n (negrita) 14758025Análisis de varianza en bloques del Consumo (g/día) de los BMNF.V. S.C. G.L. C.M. F fisher ( p )tratamientos 179619.6 3 59873.19 49.48 0.0000repeticiones 65474.09 18 3637.4 3.01 0.0009error 65342.82 54 1210.05total 310436.49 75Para tomar decisiones, acerca de tratamientos:La probabilidad conseguida es pequeña (p

Anexo 8. Análisis estadístico por la prueba Dunnet del consumo voluntariode los BMN por parte de los bovinosconstantes:t (tratamientos) 4b (repeticiones) 19n (totalrepeticiones) 76(sy) 2 /n (negrita) 14758025.1Análisis de varianza en bloques del consumo (g/día) de los BMNF.V. S.C. G.L. C.M. F fisher ( p )tratamientos 179619.58 3 59873.2 49.48 0.000repeticiones 65474.1 18 3637 3.01 0.001error 65342.82 54 1210.05total 310436.5 75Nota: Mi probabilidad ( p = 0.01) es menor que 0.05; entonces, se rechaza la hipótesis nula,es aconsejable realizar la prueba de dunnet:Prueba de hipótesis según DunnetCálculo de comparador Dunnet:tabla de dunnet = 2.43ee diferencia = 11.29comparador = 27.42promedios: Diferencia es mayorTratamientos c/u testigo resta que el comparador0% de EM 380.24 380.24 0.00 NOSEREHO:2% de EM 407.88 380.24 27.64 SEREHO:4% de EM 473.44 380.24 93.20 SEREHO:6% de EM 501.11 380.24 120.87 SEREHO:67