biotecnología en degradación de fenoles.

BIODEGRADACION DE FENOLEXPERIENCIAS PARA ELFORTALECIMIENTO DE LABIOTECNOLOGIA AMBIENTAL EN LAREGION CARIBE COLOMBIANA

BIOTECNOLOGIACELULAANIMALCELULAVEGETALMICROORGANISMOS

QUE ES ?APLICACION

QUE ES ?APLICACIÓNTECNOLOGICA

ADITIVOSAMBIENTEPROTEINAMICROBIANASECTORALIMENTARIOENZIMASBIOTECNOLOGIAENZIMASINDUSTRIALESAMINOACIDOSFARMACOLOGIADIAGNOSTICOSECTORQUIMICOVITAMINASEPIDEMIOLOGIAMEDICINACOMBUSTIBLES YMATERIAS ORGANICASHORMONASTRATAMIENTO

ENFERMEDADALIMENTACIONAGRICULTURAMICROORGANISMOSENERGIA YMEDIOAMBIENTEBIOTECNOLOGIA

BIOTECNOLOGIAMICROBIANA

TRATAMIENTODE RESIDUOS.CONTROL DEPOLUCIONGENERACION DETECNOLOGIASLIMPIASSUSTENTABLESPRESIONSOCIALBIOTECNOLOGIAAMBIENTALSALUDOCUPACIONALLEGISLACIONAMBIENTAL

AGUAS RESIDUALES Y EFLUENTESINDUSTRIALES. TRATAMIENTO DE AGUA POTABLE RESIDUOS GASEOSOS Y AIRE TRATAMIENTO DE SUELO Y LODOS RESIDUOS SÓLIDOSS

MEJORA DE PROCESOS INNOVACION DE PRODUCTOS

DETECCION Y MONITOREO DECONTAMINANTES. BIOSENSORES. DETECCION Y MONITOREO DEMICROORGANISMOS USADOS PARABIORREMEDIACION. DETECCION Y MONITOREO DE EFECTOSECOLOGICOS.

TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE

APLICACIÓN N A PROBLEMAS BIODIVERSIDAD ELIMINACION DE CONTAMINANTES ENERGIA Y MEDIO AMBIENTE TECNOLOGIAS LIMPIAS ORGANISMOSMODIFICADOSGENETICAMENTE.

POTENCIAL MICROBIANO ENBIOTECNOLOGIA AMBIENTAL:LA BIODEGRADACION YBIORREMEDIACION

BIODEGRADACION Y BIORREMEDIACIONAMBIENTEINTERNOAMBIENTEEXTERNORESIDUOSLIQUIDOSRESIDUOSGASEOSOSRESIDUOSSOLIDOSMENOR IMPACTO AMBIENTAL Y DE SALUD

DEFINICIONESBiorremediación es una estrategia o proceso que utilizamicroorganismos y/o plantas para detoxificarcontaminantes del suelo u otros ambientes.Biodegradación, la cual se refiere a la parcial y algunasveces total, transformación n o detoxificación decontaminantes por microorganismos y plantas.Mineralización, término restringido referente a la completaconversión n de un contaminante orgánico a dióxido decarbono, agua y biomasa por una especie o por unconjunto de microorganismos (consorcio).Cometabolismo, término referente a la transformación n deun contaminante sin que este compuesto sea utilizadocomo fuente de carbono y energía por los(Skipper, 1998)microorganismos degradadores.

ESTRATEGIAS DEBIORREMEDIACIÓN Biorremediación intrisíncanca es la biorremediación natural de unsitio contaminado por la microflora autóctona. Bioestimulación es la adición de nutrientes, tales comonitrógeno y fósforo, para estimular a los microorganismosautóctonos en el suelo. Bioventeo es una forma de bioestimulación donde nutrientesen fase gaseosa, tales como oxígeno y metano, sonsuministrados pasiva o forzadamente dentro del suelo paraestimular la actividad microbiana. Bioaumentación es la inoculación n de un sitio contaminado conmicroorganismos para facilitar la biodegradadación. Losorganismos son seleccionados por su alto potencial dedegradación del contaminante en cuestión.(Skipper, 1998)

AREAS PRIORITARIAS DEINVESTIGACIÓNResiduos tóxicos Solventes Petróleo y sus derivados (HC-halogenados, HPA’S) Insecticidas, herbicidas, etc. Bifenilos policlorados Metales Otros

INDUSTRIASCOMUNIDADFINCASCONTAMINACIONAGUA SUELO AIREMICROBIOLOGIAAMBIENTALACCION

INDUSTRIAS-SECTORES SECTORES PRODUCTIVOSALTA CARGA ORGANICA Y SUSTANCIAS PELIGROSAS

BACTERIAS DEGRADADORAS

Para la ACGIH, los Solventes a tener en cuenta paraVigilancia Biológica e Indices de Exposición, son lossiguientes: N-Hexano BENCENO TOLUENO Xileno Etilbenceno Estireno Fenol Metiletilcetona Percloroetileno Tricloroetano Tricloroetileno Dimetilformamida Disulfuro de Carbono

FENOL

PSEUDOMONAS:@Bacteria recta o curva.@Tamaño: 0.05 - 1.0 micras x 1.5 - 4.0 micras.@Gramnegativas.@Son adaptables nutricionalmente.@ Los compuestos orgánicos los utilizan comofuente de carbono y donadores de electronespara producir energía.@Son organismos ecológicamente importantes ensuelos y agua.

Degradación de un residuo orgánico por laacción de los microorganismosHumedadTemperaturapHDisponibilidad de nutrimentosDiseDiseño o de reactorFuentes alternativas de carbono

Contaminante enlazado a la enzimaTransporte a travésde la membranaAAAAAAAAA AAACélula bacterianaACélula bacterianaAAAAAAAB ACO 2CH 2 ODO 2DIAGRAMA ESQUEMÁTICO DE LA BIODEGRADACIÓN

SECUENCIA DE UN PROCESOBIOTECNOLOGICO CON EL USO DEMICROORGANISMOS

GIMAGRUPO DE INVESTIGACION MICROBIOLOGIA YAMBIENTEDirector:M.Sc. GUSTAVO ECHEVERRI JARAMILLOInvestigadores:Esp. CLAUDIA CONSUEGRAM.Sc. GESIRA DE AVILAEsp. LERSY LOPEZ

MISIONFomentar y desarrollar innovaciones ytecnologías que integren la microbiología yel medio ambiente para contribuir en lamejora de la calidad de vida de la poblaciónen el Caribe Colombiano.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS Conocer la generación, n, el manejo y la disposición n de residuosgenerados por las comunidades y los diferentes sectores de laproducción, identificando peligros potenciales para el medio ambiente ypara la salud del ser humano. Caracterizar factores de riesgo fisico-ququímico y biológico enaguas, suelo, y aire. Caracterizar metabolitos o analitos y otras sustancias químicas,en muestras de origen biológico. Caracterizar y determinar indicadores de microorganismospatógenos y benéficos aislados en ambiente y el ser humano. Estudiar bioprocesos que contribuyan en el control de riesgosfisicos-ququímicos y biológicos en el ambiente.

LINEA DE INVESTIGACION 1LINEA 1“CalidadAmbiental eIndicadores”Objetivo yejes de línealDesarrollar indicadores microbiológicos y químicos endiferentes ambientes que permitan hacer gestión n deprogramas y monitoreos ambientales y de salud, paracontribuir en la mejora de las condiciones de vida de lapoblación.Espacios públicospEspacios cerrados

LINEA 2“ProcesosBiológicosyBiotecnología”Estudiar bioprocesos con microorganismos aislados en diferentes entornos, con el finde contribuir en el desarrollo biotecnológico para el control de riesgos químicos ybiológicos en el ambiente.Desarrollar procesos de saneamiento ambiental que contribuyan en la disminución n dela contaminación n química o biológica de agua, suelo y aire, utilizandomicroorganismos con capacidad de degradación n o capacidad de atenuación, n, paracontribuir en el control del medio ambiente y mejorar la calidad de vida de laspoblaciones humanas.Objetivo y ejes delíneaBuscar y caracterizar microorganismos con capacidad degradativa o capacidad deatenuación, n, en ambientes impactados por diferentes tipos de contaminación.n.Demostrar en el laboratorio a nivel de microcosmos, la disminución n de sustanciasquímicas o microorganismos de interés s sanitario, hecha por los microorganismosestudiados. Probar en ambientes contaminados de agua, suelo, y aire, el control de lacontaminación, n, a través s de pruebas in situ utilizando los microorganismos con estacapacidad.

FUNDAMENTACIONFUNDAMENTACIONDESARROLLODESARROLLOTECNOLOGICOTECNOLOGICOPROBLEMATIZACIONPROBLEMATIZACIONGESTIONGESTIONAMBIENTALAMBIENTALPREVENCIONPREVENCIONCONTAMINACIONCONTAMINACIONGESTIONGESTIONBIOTECNOLOGICABIOTECNOLOGICABIOTECNOLOGIABIOTECNOLOGIAMICROBIANAMICROBIANAAMBIENTALAMBIENTALACTIVIDADESACTIVIDADESHUMANASHUMANASCONTAMINACIONCONTAMINACIONAMBIENTALAMBIENTALAGUAAGUASUELOSUELOAIREAIREBIOFILTROSBIOFILTROSBIOSENSORESBIOSENSORESPROTOCOLOSPROTOCOLOSTECNICASTECNICASDIAGNOSTICODIAGNOSTICOPRODUCTOSPRODUCTOSPARAPARADEGRADACIONDEGRADACION

MACROPROYECTOS POR PROYECTOS Y ENTIDADESESPECIFICAS DE APOYO DESARROLLOS MICROBIOLOGICOS EN AMBIENTESHIDRICOS PERTENECIENTES A LA JURIDICCION DECARDIQUE. ASPECTOS MICROBIOLOGICOS PARA ELDESARROLLO DE UN PROCESO DEBIORREMEDIACION: ESTUDIO DE UN CASO CONFENOL USANDO BACTERIAS DEL GENEROPseudomonas AISLADAS DE AMBIENTESCONTAMINADOS ESTRAEGIAS BIOTECNOLOGICAS PARA ELSANEAMIENTO AMBIENTAL DEL RELLENOSANITARIO DE INGEAMBIENTE.

EXPERIENCIAS

“ ASPECTOS MICROBIOLOGICOS PARA EL DESARROLLODE UN PROCESO DE BIORREMEDIACION: ESTUDIO DEUN CASO CON FENOL USANDO BACTERIAS DEL GENEROPseudomonas AISLADAS DE AMBIENTESCONTAMINADOS“

“ A S P E C T O S M I C R O B I O LO G I C O S P A R A E L D E S A R R O L L OD E U N P R O C E S O D E B I O R R E M E D I A C I O N : E S T U D I O D EU N C A S O C O N F E N O L U S A N D O B A C T E R I A S D E L G EN E R OP s e u d o m o n a s A IS L A D A S D E A M B I E N T ESC O N T A M I N A D O S “ETAPASETAPA 1 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BACTERIANA COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIASETAPA 2 DEGRADABILIDAD BACTERIANAETAPA 3 ASPECTOS PARA UN BIOPROCESO (FILTRO BACTERIANO /FERMENTACION).

OBJETIVOSGENERALConocer el manejo microbiológico en las etapas de un proceso de biorremediación usandoel fenol como contaminante y bacterias del género Pseudomonas como degradadoras, enla ciudad de Cartagena de Indias, Colombia.ESPECIFICOS Aislar e identificar bacterias del género Pseudomonas en ambientes contaminados(ETAPA1) Comprobar el potencial de degradar fenol de Pseudomonas aisladas.(ETAPA 1). Caracterizar bioquímicamente bacterias con potencial de degradar fenol (ETAPA 1) Medir la degradabilidad de las Pseudomonas aisladas.(ETAPA 2) Medir la carga bacteriana de Pseudomonas en diferentes soportes para unbiofiltro.(ETAPA 3) Ensayar la degradación de fenol en biofiltros con los soportes estudiados.(ETAPA 3) Ensayar la degradación de fenol a partir de extractos producidos por las Pseudomonasestudiadas.(ETAPA 3)

SEMILLERO“MARCHAMICROBIOLOGICA PARALA BUSQUEDA EIDENTIFICACIONDEPseudomonasCONPOTENCIALDEDEGRADAR FENOL, ENAMBIENTESDERECEPCION DE AGUASRESIDUALES GENERADASEN LABORATORIOS DE LAUSB-CTGCTG“GUSTAVO E. ECHEVERRIROQUE FIGUEROATERMINADO

PROBLEMAMuestras de aguasresidualesGeneradas por actividades de laboratorios, conuso de sustancias tóxicas.Sitios de almacenamiento de lasaguas residuales.Se encuentren bacterias de del género gPseudomonas con potencial de degradar fenol.MANEJOMICROBIOLOGICONo contar con un protocolo demanejo para el aislamiento deeste génerogen entornoscontaminados.

TOMA DE MUESTRA.PISO 3SIFON DE DESAGUEPISO 2PISO 1PLANTA ACTUALEDIFICIO DE LABORATORIOSPunto de muestreo superficies.Punto de muestreo agua.

OBJETIVOSGENERALAislar e identificar bacterias del género Pseudomonas que puedancrecer en medio con fenol en tanques recolectores de aguasresiduales generadas por las actividades de los laboratorios de laUSB.ESPECÍFICOS• Aplicar un protocolo de manejo microbiológico, desde el muestreohasta el aislamiento de cultivos puros en muestras de pared y aguasresiduales en tanque de almacenamiento en la USB.• Comprobar el crecimiento de cepas aisladas puras de los tanquesde almacenamiento, sobre un medio mineralizado con fenol comoúnica fuente de carbono y energía.• Caracterizar bioquímicamente las cepas aisladas de los tanques dealmacenamiento y con crecimiento positivo sobre mediomineralizado con fenol.

METODOLOGÍA A Y RESULTADOSProtocolo de muestreo, aislamiento y caracterización bioquímica debacterias del género Pseudomonas, con potencial de degradar fenol.TOMA DE MUESTRA.PROCEDIMIENTO MICROBIOLÓGICOColoración de Gram.Cultivos Microbiológico.Aislamientoprimario• Cdo. Nutritivo.• A. MacConkey.• A. Cetrimide.Cdo. Nutritivo.A. CetrimideAislamientoespecífico,repiqueA. CetrimideA. CetrimideConservación.Prueba deoxidasa.A. NutritivoInclinado.Tiras Bactident.Potencial dedegradaciónde Fenol.Siembra sobre A.M9 con fenolcomo únicafuente de C yenergía.CaracterizaciónBioquímicaAPI 10SBD BBL CrystalFase 1 Fase 2 Fase 3 Fase 4 Fase 5

PROCEDIMIENTO MICROBIOLÓGICO.COLORACIÓN DE GRAM.40%30%20%10%33%29% 29%4% 4%Baclos Gram -Cocos Gram +Bacilos Gram +Cocos Gram -Levaduras0%1Gráfico.1 Porcentaje de microorganismos en ordendecreciente visto por coloración de Gram en el tanquede aguas residual.

PROCEDIMIENTO MICROBIOLÓGICO.CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSFASE 1 - AISLAMIENTO PRIMARIO DE MUESTRAS DE SUPERFICIES YMUESTRAS DE AGUA RESIDUAL CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSSiembra sobrecaldo nutritivoAcondicionamientobacteriano• Turbidez según escala MacFarlan tubo 1 - 2, 18 horas.•Turbidez según escala MacFarland tubo 10, 36 horas

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSSiembra sobreAgar Mac ConkeyCrecimiento de bacterias GramNegativas. Fermentación de lalactosaLactosaPositivaLactosaNegativaCrecimiento 18 horas.Colonias grandes,mucosas, irregularesCrecimiento escaso 18horas. Colonias pequeñaspuntiformes, viraje aamarillo del medio

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSSiembra sobreAgar CetrimideCrecimiento específico delgénero PseudomonasCrecimiento abundante ymoderado. Colonias puntiformes,medianas y grandes, producciónde pigmento.

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSFASE 2 - FASE DE AISLAMIENTO ESPECIFICO O FASE DE REPIQUE.Repique CaldoNutritivoAgar CetrimideCrecimiento masivo, sediferencian colonias, esperandoque fuesen Pseudomonas.Repique colonia –colonia, cepas puras.

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSRepique AgarCetrimideAgar CetrimideBuena purificación de colonias.Buena diferenciación depigmento.

REPIQUE DE LAS PLACAS DE AGAR CETRIMIDE A AGAR CETRIMIDE9%Positivo38%53%NegativoPositivoInermedioGráfico 2. Porcentaje de producción de pigmentos delas cepas aisladas del tanque de recepción de aguasresiduales. Después de repique de agar Cetrimide aagar Cetrimide.

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSFASE 3 -CONSERVACIÓN N DE COLONIAS Y PRUEBA DE OXIDASA.Colonias puras deAgar CetrimideRepiqueAgar Nutritivo inclinado.Conservación de las cepas.31 cepas puras.Codificación.PTE – Pseudomonas Tubo Externo.

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOSFASE 3 -CONSERVACIÓN DE COLONIAS Y PRUEBA DE OXIDASA.Prueba de Oxidasa, con tiras comerciales Bactident. Paraidentificación de no fermentadores (PTE-2 Negativa)15%3%82%PositivaPositiva retardadaNegativaGráfico 3. Porcentaje de Oxidasas de las cepasaisladas en tanques de recepción de aguaresiduales.

FASE 4 - COMPROBACIÓN DE CRECIMIENTO Y POTENCIAL DEDEGRADACIÓN SOBRE AGAR MÍNIMO CON FENOL.Cepas Conservadas en AgarNutritiva y Oxidasa PositivaSiembra sobre Agar M9 con100ppm.Siembra directaSuspensión 200µLen Sln SalinaRevisar 24-48-72 y92 horasEscaso Crecimiento 24 horas.PPE-2 PPA-1.2 PPA-1.3PPT-1.2 PPD-2.2 PVC-2.2PVC-1.2 PPI-1.3 PVC-1.3

FASE 5 - CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE LAS CEPAS CONCRECIMIENTO EN AGAR MÍNIMO CON FENOLCaracterización bioquímicacon API 10S y BD BBL CrystalCepas con crecimiento a las 24horas y cepa Oxidasa negativaPVC-2.2PPE-2No Clasifico con API 10SPPT-1.2Pseudomana aeruginosa.Con API 10SPVC-1.2PPA-1.2Pseudomona spp.ConPPD-2.2API 10SPseudomona spp.Con API 10SPPI-1.3Pseudomona spp.ConPPA-2.2API 10SStenotrophomonasmaltophila.Con Crysta ID SystemPseudomanaaeruginosa.Con PVC-1.3 API 10SMiscelanea.Confirmar purezadel aislamientoMiscelanea.Confirmar pureza delaislamiento.

“ A S P E C T O S M I C R O B I O LO G I C O S P A R A E L D E S A R R O L L OD E U N P R O C E S O D E B I O R R E M E D I A C I O N : E S T U D I O D EU N C A S O C O N F E N O L U S A N D O B A C T E R I A S D E L G EN E R OP s e u d o m o n a s A IS L A D A S D E A M B I E N T ESC O N T A M I N A D O S “ETAPASETAPA 1 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BACTERIANA COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIASETAPA 2 DEGRADABILIDAD BACTERIANAETAPA 3 ASPECTOS PARA UN BIOPROCESO (FILTRO BACTERIANO /FERMENTACION).

TESIS DE GRADO“SONDEO DE BACTERIAS DELGENEROPseudomonasPRESENTES EN ELECOSISTEMA MARINO CONPOTENCIAL DE DEGRADACIÓNDE FENOL EN LA ZONA DEINFLUENCIA DE LOSVERTIMIENTOS DE LAREFINERÍA DE PETRÓLEO, ENEL SECTOR INSDUSTRIAL DEMAMONAL EN LA HABIA DECARTAGENA, ULTIMA SEMANADE MAYO DE 2004“ALIANZA CON CARDIQUETERMINADOETAPA 2KATIA PRASCALUISA SAMACAROQUE FIGUEROA

PROBLEMAVERTIMIENTOS EN ZONAINDUSTRIAL CONTAMINANDOBAHIACONCENTRACIONES DE FENOL < 5 mg/LLEGISLACION NO > 0.2 ppmBACTERIAS DEL GÉNERO GPseudomonas CONPOTENCIAL DE DEGRADAR FENOL EN BAHIA ?COMPORTAMIENTO DE ESTASBACTERIAS ?Pseudomonas IDENTIFICADAS CONCAPACIDAD DE DEGRADAR FENOL ?

Composita 215 submuestras porduplicadoMuestra porduplicado15 Sub-muestras de500 ml para un totalde 7500 ml.15 Sub-muestras de500 ml para un totalde 7500 ml.250 ml 250 mlConcentración yaislamiento porfiltración pormembranaMedia UFC/250 ml de PseudomonasMedia UFC/250 ml de PseudomonasPurificar cepasen CetrimidePrueba deOxidasaNegPosConservar cepaspuras en A. nutritivoVerificarpotencial dedegradación deFenol.CrecimientoPositivoCrecimientoNegativoCaracterizaciónbioquímica con ID 32GN (Mini API)

OBJETIVOSGENERALHacer un sondeo de bacterias del género Pseudomonas presentes en un ecosistema marino y através de pruebas bioquímicas, caracterizar e identificar las cepas que tengan potencial dedegradación de fenol, utilizando un protocolo propuesto para su recuperación; en las zonasaledañas a los efluentes de la refinería de petróleo de la bahía de Cartagena, en la últimasemana de mayo de 2004, sentando bases para estudios futuros que busquen desarrollarproyectos de biorremediación.ESPECÍFICOSRecuperar mediante técnicas microbiológicas las especies del género Pseudomonas en la zona de influencia de losvertimientos de la refinería de petróleo, en la bahía de Cartagena.Comparar el comportamiento poblacional de las bacterias del género Pseudomonas, aisladas en los diferentespuntos de muestreo, expresándolo en UFC/250ml.Observar el potencial de degradación de las cepas presuntivas de Pseudomonas recuperadas, enfrentándolas a unaconcentración de fenol de 200 ppm, en medio mínimo sólido M9.Evidenciar el potencial de degradación de las cepas obtenidas frente a una concentración de fenol de 200 ppm enmedio mínimo líquido M9, midiendo densidad óptica durante 7 días.Caracterizar bioquímicamente mediante sistema ID 32 GN, las cepas que presenten crecimiento en medio líquido ysólido M9, identificando el género y la especie.Conserva las cepas con potencial de degradación de fenol caracterizadas bioquímicamente, para que contribuyancomo insumo a estudios posteriores, en el área de microbiología y ambiente saludable.

Tabla. Relación UFC – informe cualitativo decrecimiento para conteo de colonias presuntivas dePseudomonas.O – 67 UFC/100 mlEscaso68 -134 UFC/100 ml Moderado135 – 200 UFC/100 ml AbundanteLos rangos se obtuvieron dividiendo 200 comolímite máximo para obtener 3 intervalos de 67colonias cada uno aproximadamente.200180160140120100806040200188176154159145144126Compos #1 Compos #2 Compos #3 Compos #4 Compos #5 Compos #6 Compos #7

Características macroscópicas de las colonias aisladas de cada una de las submuestras, de la zona de influencia de losvertimientos de la refinería de petróleo en la bahía de Cartagena, en la última semana de mayo del 2004.120%100%100%80%60%40%20%35%47%18%76%12%6% 6%58%41%35%65%0%PigmentoPequeñaMedianaGrandeBlancaAmarillaMarrónTransparenteBorde enteroBorde IrregularCon haloSin haloTamaño Color Tipo de borde Presencia Halo6% 0% PositivaRetardadaNegativa94%Porcentaje prueba de oxidasa en las cepas aisladas puras de la zona de influencia de los vertimientos dela refinería de petróleo, en la bahía de Cartagena, en la última semana del mayo del 2004.

Porcentaje de crecimiento observado en medio mínimo M9 en fase sólida, de las cepas aisladas en la zona de influenciade los vertimientos de la refinería de petróleo en la bahía de Cartagena, en la última semana de mayo del 2004.18%12%46%AbundanteModeradoEscasoNegativo24%Tabla. Resultados de la medida de absorbancia a 540 nm, en medio M9 líquido, decada una de las cepas aisladas en la zona de influencia de los vertimientos de larefinería de petróleo, en la bahía de Cartagena, en la última semana de mayo del200421-Oct 22-Oct 25-Oct 26-Oct 28-Oct 29-OctC1a1 0,08 0,13 0,17 0,21 0,16 0,02C1b1 0,07 0,13 0,13 0,16 0,14 0,02C2a1 0,04 0,04 0,1 0,14 0,11 0,010,30,25C2b1 0,08 0,09 0,15 0,21 0,15 0,03C3a1 0,08 0,14 0,18 0,2 0,15 0,02C3b1 0,07 0,07 0,1 0,15 0,15 0,01C4a1 0,07 0,07 0,15 0,21 0,12 0,01C4b1 0,03 0,04 0,17 0,18 0,13 0,010,20,150,10,05C1a1Control +Control -C4b2 0,08 0,08 0,13 0,18 0,14 0,02C5a1 0,08 0,08 0,17 0,17 0,14 0,03C5a2 0,06 0,06 0,12 0,12 0,11 0,01021-oct-0422-oct-0423-oct-0424-oct-0425-oct-0426-oct-0427-oct-0428-oct-0429-oct-04C5b1 0,1 0,1 0,18 0,2 0,17 0,07C6a1 0,06 0,05 0,16 0,21 0,18 0,08C6b1 0,07 0,05 0,15 0,15 0,13 0,01C7a1 0,09 0,09 0,15 0,15 0,15 0,01C7a2 0,1 0,1 0,14 0,17 0,14 0,03C7b1 0,09 0,09 0,12 0,19 0,18 0,02Control + 0,1 0,14 0,2 0,24 0,24 0,22Control - 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,04

Tabla . Caracterización bioquímica de cada una de las cepas aisladas con su respetivo potencial dedegradación en medio mínimo M9 en fase líquida y sólida.Cepa aisladaCrecimiento medio mínimo M9Sólido (72 horas)Líquido (pico máximo deAbs .a 540 nm al 6 día)CaracterizaciónC1a1 Abundante 0,21 Pseudomonas aeruginosaC1b1 Abundante 0,16 Pseudomonas aeruginosaC2a1 Moderado 0,14 Burkholderia cepaciaC2b1 Moderado 0,21 Pseudomonas aeruginosaC3a1 Abundante 0,2 Pseudomonas aeruginosaC3b1 Abundante 0,15 Pseudomonas aeruginosaC4a1 Abundante 0,21 Pseudomonas aeruginosaC4b1 Abundante 0,18 Pseudomonas aeruginosaC4b2 Moderado 0,18 Pseudomonas aeruginosaC5a1 Abundante 0,17 Pseudomonas aeruginosaC5a2 Abundante 0,12 Pseudomonas aeruginosaC5b1 Escaso 0,2 Pseudomonas putidaC6a1 Negativo 0,21 Pseudomonas aeruginosaC6b1 Escaso 0,15 Pseudomonas aeruginosaC7a1 Negativo 0,15 Pseudomonas aeruginosaC7a2 Moderado 0,17 Pseudomonas aeruginosaC7b1 Negativo 0,19 Pseudomonas aeruginosa

“ A S P E C T O S M I C R O B I O LO G I C O S P A R A E L D E S A R R O L L OD E U N P R O C E S O D E B I O R R E M E D I A C I O N : E S T U D I O D EU N C A S O C O N F E N O L U S A N D O B A C T E R I A S D E L G EN E R OP s e u d o m o n a s A IS L A D A S D E A M B I E N T ESC O N T A M I N A D O S “ETAPASETAPA 1 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BACTERIANA COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIASETAPA 2 DEGRADABILIDAD BACTERIANAETAPA 3 ASPECTOS PARA UN BIOPROCESO (FILTRO BACTERIANO /FERMENTACION).

BIODEGRADACION DE FENOL EN AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES EN BIOFILTROSILTROSETAPA 3EN DISEÑO

BIODEGRADACION DE FENOL EN AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES EN BIOFILTROSILTROSPROYECTO PARA CONVOCATORIAETAPASETAPA 1 (AISLAMIENTO SELECTIVO E IDENTIFICACION DEMICROORGANISMOS DEGRADADORES DE FENOL)TESIS EN BACTERIOLOGÍA: AISLAMIENTO SELECTIVO DE BACTERIAS AEROBIAS COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIAS DEGRADADORASETAPA 2 (DISEÑO Y MONTAJE A ESCALA LABORATORIO DE UNBIOFILTRO AEROBIO PARA LA DEGRADACION DE FENOL EN AGUASRESIDUALES).TESIS EN INGENIERIA QUIMICA: ESTUDIO DE INOCULO Y SOPORTES PARAMETROS DEL BIOREACTOR EFICIENCIA DEL BIOFILTRO

CONCLUSIONES