Evaluation de la qualité de la semence fraîche des boucs d ...
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2.1.2. Conservation <strong>de</strong> <strong>semence</strong> <strong>fraîche</strong> et influence<br />
du glycérol<br />
L’effet du glycerol, un cryo-protecteur utilisé pour les<br />
milieux <strong>de</strong> conservation <strong>de</strong> <strong>semence</strong> congelée, sur <strong>la</strong><br />
<strong>semence</strong> <strong>de</strong>s <strong>boucs</strong> considérés individuellement, est<br />
variable. Cet effet peut être directement observable, comme<br />
le montre le bouc D (après 1h). Son effet toxique est plus<br />
visible après 24h à 18 °C. La mobilité <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> <strong>de</strong>s<br />
<strong>boucs</strong> A, B, D et G est nulle à ce sta<strong>de</strong> (figure 2).<br />
Figure 2<br />
Mobilité <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> caprine avant et après 24h<br />
<strong>de</strong> conservation à 18 °C ; analyse microscopique Cryo<strong>la</strong>b<br />
2.2. MESURE DE LA MOTILITE ET<br />
DE LA VIABILITE PAR LE % DE<br />
SPERMATOZOÏDES VIVANT/MORT<br />
AVEC COLORATION SYBR-14/PI<br />
Cytométrie <strong>de</strong> flux vs analyse microscopique<br />
L’évaluation <strong>de</strong> <strong>la</strong> mobilité <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> <strong>fraîche</strong> après 24h<br />
<strong>de</strong> conservation, ne montre pas <strong>de</strong> différence par rapport à<br />
l’évaluation du % <strong>de</strong> spermatozoï<strong>de</strong>s vivant/mort mesuré par<br />
microscope ou cytométrie <strong>de</strong> flux (figure 3).<br />
Figure 3<br />
<strong>Evaluation</strong> <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> après 24 <strong>de</strong> conservation<br />
à 4°C et 18°C : % spermatozoï<strong>de</strong>s vivant/mort<br />
par analyse cytométrique (coloration Sybr14/PI)<br />
et mobilité par analyse microscopique<br />
2.3. ANALYSE CYTOMETRIQUE DE L’INTEGRITE<br />
DE LA MEMBRANE PLASMIQUE ET<br />
DE L’ACROSOME DES SPERMATOZOÏDES<br />
APRES COLORATION FITC-PNA/PI<br />
Le % d’acrosomes intacts <strong>de</strong>s spermatozoï<strong>de</strong>s vivants <strong>de</strong><br />
chaque bouc ne diffère pas significativement du % <strong>de</strong><br />
cellules mobiles ou du % <strong>de</strong> spermatozoï<strong>de</strong>s vivants.<br />
Figure 4<br />
Acrosomes intacts, spermatozoï<strong>de</strong>s vivants<br />
par analyse cytométrique sur coloration PNA/PI<br />
2.4. FERTILITE<br />
Pour 6 <strong>de</strong>s 8 <strong>boucs</strong> évalués, <strong>la</strong> fertilité moyenne provisoire<br />
après I.A. en <strong>semence</strong>s <strong>fraîche</strong>s sur <strong>la</strong> pério<strong>de</strong> 2003/2004<br />
varie <strong>de</strong> 49 % à 73 % (figure 5). Ces données ont été<br />
obtenues par GKN. Le bouc A est mort et le bouc E ne<br />
présentait pas une <strong>qualité</strong> <strong>de</strong> <strong>semence</strong> suffisante pour être<br />
utilisée en insémination artificielle.<br />
Figure 5<br />
<strong>Evaluation</strong> <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> après 24h <strong>de</strong> conservation<br />
à 4°C et 18°C ; % Vivant/Mort par cytométrie <strong>de</strong> flux<br />
(coloration Sybr14/PI) et mobilité par analyse microscopique<br />
Symposium satellite caprin - 8 décembre 2004 - Paris, France<br />
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