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Evaluation de la qualité de la semence fraîche des boucs d ...

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2.1.2. Conservation <strong>de</strong> <strong>semence</strong> <strong>fraîche</strong> et influence<br />

du glycérol<br />

L’effet du glycerol, un cryo-protecteur utilisé pour les<br />

milieux <strong>de</strong> conservation <strong>de</strong> <strong>semence</strong> congelée, sur <strong>la</strong><br />

<strong>semence</strong> <strong>de</strong>s <strong>boucs</strong> considérés individuellement, est<br />

variable. Cet effet peut être directement observable, comme<br />

le montre le bouc D (après 1h). Son effet toxique est plus<br />

visible après 24h à 18 °C. La mobilité <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> <strong>de</strong>s<br />

<strong>boucs</strong> A, B, D et G est nulle à ce sta<strong>de</strong> (figure 2).<br />

Figure 2<br />

Mobilité <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> caprine avant et après 24h<br />

<strong>de</strong> conservation à 18 °C ; analyse microscopique Cryo<strong>la</strong>b<br />

2.2. MESURE DE LA MOTILITE ET<br />

DE LA VIABILITE PAR LE % DE<br />

SPERMATOZOÏDES VIVANT/MORT<br />

AVEC COLORATION SYBR-14/PI<br />

Cytométrie <strong>de</strong> flux vs analyse microscopique<br />

L’évaluation <strong>de</strong> <strong>la</strong> mobilité <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> <strong>fraîche</strong> après 24h<br />

<strong>de</strong> conservation, ne montre pas <strong>de</strong> différence par rapport à<br />

l’évaluation du % <strong>de</strong> spermatozoï<strong>de</strong>s vivant/mort mesuré par<br />

microscope ou cytométrie <strong>de</strong> flux (figure 3).<br />

Figure 3<br />

<strong>Evaluation</strong> <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> après 24 <strong>de</strong> conservation<br />

à 4°C et 18°C : % spermatozoï<strong>de</strong>s vivant/mort<br />

par analyse cytométrique (coloration Sybr14/PI)<br />

et mobilité par analyse microscopique<br />

2.3. ANALYSE CYTOMETRIQUE DE L’INTEGRITE<br />

DE LA MEMBRANE PLASMIQUE ET<br />

DE L’ACROSOME DES SPERMATOZOÏDES<br />

APRES COLORATION FITC-PNA/PI<br />

Le % d’acrosomes intacts <strong>de</strong>s spermatozoï<strong>de</strong>s vivants <strong>de</strong><br />

chaque bouc ne diffère pas significativement du % <strong>de</strong><br />

cellules mobiles ou du % <strong>de</strong> spermatozoï<strong>de</strong>s vivants.<br />

Figure 4<br />

Acrosomes intacts, spermatozoï<strong>de</strong>s vivants<br />

par analyse cytométrique sur coloration PNA/PI<br />

2.4. FERTILITE<br />

Pour 6 <strong>de</strong>s 8 <strong>boucs</strong> évalués, <strong>la</strong> fertilité moyenne provisoire<br />

après I.A. en <strong>semence</strong>s <strong>fraîche</strong>s sur <strong>la</strong> pério<strong>de</strong> 2003/2004<br />

varie <strong>de</strong> 49 % à 73 % (figure 5). Ces données ont été<br />

obtenues par GKN. Le bouc A est mort et le bouc E ne<br />

présentait pas une <strong>qualité</strong> <strong>de</strong> <strong>semence</strong> suffisante pour être<br />

utilisée en insémination artificielle.<br />

Figure 5<br />

<strong>Evaluation</strong> <strong>de</strong> <strong>la</strong> <strong>semence</strong> après 24h <strong>de</strong> conservation<br />

à 4°C et 18°C ; % Vivant/Mort par cytométrie <strong>de</strong> flux<br />

(coloration Sybr14/PI) et mobilité par analyse microscopique<br />

Symposium satellite caprin - 8 décembre 2004 - Paris, France<br />

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