MAGISTER en BIOCHIMIE - Université Ferhat Abbas de Sétif

l’extrait méthanolique et des antioxydants standards. L’activité antioxydante (AA%) est
exprimée en pourcentage d’inhibition par rapport au contrôle négatif selon l’équation
suivante:
Activité antioxydante % = [1- (At 0 – At 120 ) test / (At 0 -At 120 ) contrôle] x 100
At 0 : absorbance au temps t = 0.
At 120 : absorbance au temps t = 120 min.
II.5.4. Peroxydation de l’acide linoléique
L’activité antioxydante totale des extraits aqueux et méthanolique de S. chamaecyparissus est
déterminée selon la méthode de thiocyanate ferrique décrite par Gulcin et ses collaborateurs
(2005) avec légères modifications. Premièrement, une émulsion de l’acide linoléique est
préparée en mélangeant 0,028 g d’acide linoléique, 0,028 g de Tween 20 et 10 ml de solution
tampon phosphate (0,04 M, pH 7.0). Le milieu réactionnel contient 600 µl de solutions
d’extraits ou de l’antioxydant standard (BHT) à une concentration bien définie (50µg/ml) et
600 µl de l’émulsion de l’acide linoléique. Le contrôle négatif contient tous les réactifs sauf
l’échantillon à tester (extraits ou antioxydant standard) qui est remplacé par un volume égale
de la solution tampon. Après agitation, le mélange est incubé à 25°C à l’obscurité. La lecture
est faite après 15 min d’incubation puis chaque 24 heures pendant 96 heures, en mélangeant
1ml d’éthanol, 20 µl KCN, 20 µl d’échantillon et 20 µl de FeCl2 et après 3min, l’absorbance
est lue à 500 nm contre un blanc d’éthanol. Le pourcentage d’inhibition de la peroxydation
lipidique est calculé selon l’équation suivante:
% d’inhibition de peroxydation = [(Ac - At)/ Ac] x100
Ac : absorbance du contrôle.
At : Absorbance du test.
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