ce lien, le diaporama de Mme Austruy et des commentaires comme ...

Titre de l’action

FICHE ACTION AGENDA 21ANNÉE SCOLAIRE 2012/2013Thématiques de l’Agenda 21scolaire dans lesquelless’inscrit l’actionBiodiversité,Diversité Sociale et Culturelle,Santé,Achats/ConsommationDate de réalisation de la fiche 1 / 10 / 2012Date d’actualisation 26/06/2013

Contexte justifiant la mise en place de l’action• Option MPS de 2 nde élaboration d’un projet à composantelocale : vérifier l’action dite bactéricide de certaines de nosplantes médicinales réunionnaises.• Projet réalisé par 2 groupes indépendants de 25 élèves de 2 nde àraison de 1h30 par semaine de février à juin 2013.• Nous avons déjà :• -défriché le terrain pour les cultures et mis en croissance certainesplantes.• -acquis un équipement général de laboratoire.• Nous devons acquérir• -d’autres équipements et• -du consommable pour tester différentes plantes sur 3 ans.budget restreint car fort investissement dans les laboratoires depuis lacréation de notre lycée il y a 2 ans.

Objectifs poursuivis (qualitatifs et quantitatifs)L’utilisation des plantes à visée thérapeutique est unepratique répandue à la réunion. Certaines plantesréunionnaises, dont certaines sont endémiques, auraientun pouvoir bactéricide.Nous nous proposons de vérifier cet effet en testant unedizaine de plantes potentiellement bactéricides d’aprèsnos « tisaneurs » locaux. Si cette étude le permet noussouhaitons au final élaborer un produit novateur: uneémulsion bactéricide à base de produits locaux.Pratique : Votre établissement a-t-il déjà mené des actionsen lien avec le développement durable ?NON

Acquis/Bénéfices de l’action(au niveau pédagogique, comportement...)MEILLEUR CONNAISSANCE DE LA FLORE RÉUNIONNAISE ETDE SES ACTIONS THÉRAPEUTIQUES.APPRENTISSAGE AU DÉVELOPPEMENT DURABLE.APPRENTISSAGE DE TECHNIQUES SCIENTIFIQUES ET DESREGLES DE STERILITE.CRÉATION D’UN PRODUIT LOCAL NOVATEUR.

Équipe pédagogique internemobilisée pour l’actionNom Fonction Fonction dans l’actionMdAustruyProfesseurSciences et vie dela TerreChoix des plantes réunionnaises, conditions deculture, tests de la mortalité bactérienne avecéchantillon total et fractions purifiées.MrJauzeMelleMussardProfesseurPhysiqueschimieProfesseurmathématiquesIsolement des fractions (broyage, distillation)...Création d’une émulsion.Extraction d’un parfum ?Etude statistique des résultats (croissance,mortalité bactérienne…). Calculs de rendementsd’extraction, d’écart type et de densité desfractions. Evaluation des couts de fabrication,Etude de faisabilité et de marché.

Partenaires externes mobilisés(autres que financiers)Nom de la structure Référent Fonction Nature de l’interventionAPELMd S. LerouxprésidenteRecherche partenairesIntervenant privéF. TIBERETisaneurSensibilisation à la floreréunionnaise. Présentationdes plantes étudiées.APLAMEDOMS. BRILLANTChargée demissionEtude du benjoin et autresplantes mauriciennes(publication en anglais)Association pour lesplantes aromatiqueset médicinales de laréunionR. LUCASHOAREAUPrésident del’APNBourse aux plantes

FinancementsDépenses prévisionnelles de l’action sur 3 ansMatériels de laboratoire pour bactériologiePlastiques traités culture, flacons, Pipettes stériles, micropipettes, cônes en vrac, portoirmicropipette, anse de platine, Tubes et boites de pétrie stériles. Support de manipulationpour bec électriques. Tube de verre plein.Dépense prévisionnelle: 2 250 € HTDistillateur d’eauDépense prévisionnelle : 1 371 € HTEtuve de culture, AutoclaveDépense prévisionnelle : 3 570 € HTHotte à flux laminaire pour manipulation stérile Dépense prévisionnelle : 3 500 € HTFinancement????Produits et matériels pour la chromatographie et distillationAbsorbants, Plaques, papier et Réactifs spéciaux pour la chromatographie, Seringues deprécision et accessoires, matériel de distillation. Dépense prévisionnelle : 2400 € HT?Produits diversMilieux de culture bactérienne, produits d’émulsion…ConditionnementDépense prévisionnelle : 600 € HTDépense prévisionnelle : 500 € HTRégion Réunion?TOTAL DEPENSES = 14 191 €

MOBILISATIONNombre de réunions ayant eu lieu pour la préparation de cette action durant l’année scolaire ?Profs: chaque semaine durant 5 moisTisaneur: une réunion accessible à tous (élèves, parents, structures institutionnelles)Mobilisation des acteursCette action suscite-t-elle un intérêt de la part dupersonnel techniques, enseignants, administratif ?IntérêtcertainXIntérêtmoyenPeud’intérêtCette action suscite-t-elle un intérêt de la part desélèves ?Cette action suscite-t-elle un intérêt de la part desparents d’élèves ?Cette action suscite-t-elle un intérêt de la part desassociations ?Cette action suscite-t-elle un intérêt de la part desstructures institutionnelles ?XX (APN)XX

INFORMATIONSLa régularité des informations sur les projetsest-elle satisfaisante ? Affichage, réunion…XLes documents de synthèse du projet sontilssatisfaisants?La disponibilité de ces documents est-ellesatisfaisante ?La régularité de l’actualisation de cesdocuments est-elle satisfaisante ?XXXL’actualisation des plans d’actions, desindicateurs…est-elle satisfaisante ?X

Evaluation de ou des action(s)Indicateur objectif *indicateur d'objectif de votre actionNombre de plantes testéesPourcentage d’activité bactéricideAnnée Indicateur Objectif RésultatAnnée 1 3 PLANTES 3 PLANTES 100% (juin 2013)Année 2 3 PLANTES %Année 3 3 PLANTES %… … …. …

LES 10 PLANTES CHOISIESSERONT TOUTES INDIGENESET SI POSSIBLE ENDEMIQUES

Bringellier zépine (Solanum torvum)En culture

Plante indigène devenue endémique par divergencegénétique / aux souches indonésienne et sud africaine(CIRAD)Répartition de la souche ancestraleMap of word repartition of solanum torvumhttp://www.discoverlife.org/mp/20q?search=Solanum+torvum

Fleur jaune des bas (hypericum lancéolatum)Plante indigèneendémiquepréoccupation mineure• En cultureHypericum présente à la Réunion un gradient morphologique altitudinal:• - un morphe de hautes altitudes, probablement ancestral, à feuilles ànervures parallèles [angustifolium] et• - un morphe d'altitudes inférieures, plus récent, à feuilles à nervurestransversales interrompant la nervation parallèle [lanceolatum] (ROBSON 1979).Angustifolium est endémique de la Réunion, Lanceolatum existe également àla Grande Comore.Conservatoire botanique national de Mascarin http://flore.cbnm.org/index.php?option=com_florereunion&view=search&layout=frmsearch&Itemid=5

Hibiscus mahot rempart (Hibiscus columnaris)Plante indigène endémique,gravement menacé d'extinction et protégée à la Réunion (Arrêtéministériel du 6 février 1987).En culture

Répartition de la soucheConservatoire botanique national de Mascarinhttp://flore.cbnm.org/index.php?task=fiche&id=3fb04953d95a94367bb133f862402bce&option=com_florereunion&Itemid=5

Ambaville ou Zambaville (Hubertia ambavilla)• Indigène endémique de Réunion et Maurice, certainesvariantes ne sont présentes qu’à la réunion• préoccupation mineureEn culture

Mazambron(Lomatophyllum macrum et borbonicum)Indigène endémiquegravement menacé d'extinction mais non protégé!• MacrumRareté rareborbonicum (bordée de rouge et plus charnu)Endémicité Réunion Rareté exceptionnelEn culture ?Non retenuEndémicité Réunion, Maurice

Cochléaria (Centella asiatica)• Indigène pantropicale assez commun• Utilisé en médecine chinoise sous le nom d’herbe du tigreRecherche de plants en cours

Guérivite ou Colle-Colle(Sigesbeckia orientalis)• indigène, utilisé en dermatologie• non endémique, envahissant seulement en milieux perturbés.En culture

Géranium Rosat (Pélargonium asperum Ehrh)• Réunion (Présence uniquement à l'état cultivé)• non endémique• Nous a permis nos 1 er tests et la mise au point des protocoles.En culture

BENJOIN (Terminalia bentzoe)• Espèce indigène endémique de Réunion, Maurice, Rodrigues• Taxon gravement menacé d'extinction, non protégé!• Pouvoir bactéricide testé par APPLAMEDOM sur les feuilles (pas l’écorce)Arbre voisin du Lycée + culture

Bois d’arnette ou Bois de reinette(dodonaea salicifolia)• Espèce indigène pantropicale à l’odeur de pomme• préoccupation mineure, non protégé.En culture

Quantification de l’inhibitionbactérienne des extraitsvégétaux 2013

Plantes étudiées (6 groupes)• Grp 1: Géranium Rosat feuilles• Grp 2: Géranium Rosat tiges• Grp 3: Benjoin feuilles• Grp 4: Benjoin fruits ou bois• Grp 5: Benjoin écorce ouBois d’arnette feuilles• Grp 6: Bois d’arnette feuilles

Procédés d’extraction• Hydrodistillation (5g plante + 100ml eau) 20’ 70ml distillat tube 1 : 10 ml récoltés et non concentrés à 71 g/l(certains échantillons concentrés 20’ par chauffage à reflux)• Décoction (5g plante + 100ml eau ou éthanol) bouilli 45’ tube 2 : 10 ml récoltés, filtrés et non concentrés à 50 g/l(certains échantillons concentrés 20’ par chauffage à reflux)• Distillation éthanoïque (5g plante + 100ml éthanol absolu) 20’ tube 3 : phase aqueuse récoltée dans le ballon en fin dedistillation et filtrée.• Macération éthanoïque (5g plante + 100ml éthanol) 30’ tube 4 : 10 ml récoltés, filtrés et non concentrés à 50 g/l

Dépôts des extraits végétauxMANIPULATION DANS LA ZONE DE STÉRILITÉ• Stérilisation par chauffage des différentes extractions.• Étalement des tapis bactérriens:2 boites avec 400 ml eau stérile + 3 colonies d’Escherichia Coli à étaler.2 boites avec 400 ml eau stérile + 3 colonies de Bacillus Mégatérium àétaler..• Dépots des disques de papier aquarelle :Imbiber chaque disque dans chaque extrait et le déposer au milieu d’unsecteur défini sur votre gélose. Recommencer pour 5 extraits.Déposer un disque d’Ampicilline dans le secteur 6.• Incubation : 37°C over night (boite à l’envers) 1 à 2 jours.• Quantification de l’inibition bactérienne:mesurer le diamètre d’inhibition du développement bactérien (zonetranslucide autour de chaque disque donc sans croissance bactérienne).

Les résultats

Pour le Géranium Rosat peu d’inhibitions decroissance ont été observées.Seules les extractions de Benjoin et de Boisd’Arnette ont engendré une inhibitionsignificative de croissance bactérienne. Lesmeilleurs résultats obtenus par les élèvesont donc été contrôlés en double par leprofesseur pour chaque extraction etchaque bactérie.

Géranium RosatDécoction éthanoïqueDécoction aqueuse Hydrodistillation Hydrodistillation Témoin ampicilline

Géranium Rosat• En application locale , l’huile essentielle de Géranium-rosat est utilisée poursoigner plaies, brûlures, eczémas, engelures, ulcérations et inflammationsdiverses, aphtes et angines, douleurs articulaires, engorgement des seins, enoutre elle éloigne les Moustiques! Cette huile essentielle est donc reconnuepour ses vertus cicatrisante, hémostatique, antiseptique, antalgique,parasiticide, antifongique…(Valnet, 1974) (Bardeau, 1976) (Jouhanneau, 1991) (Franchomme, Pénoël & al., 1996) .Par voie interne, quelques gouttes seulement ont des propriétés anti-cellulitique,diurétique (calculs urinaires), anti-diabétique, digestive (ulcère gastrique, entérocolite), anti-coagulante (hémorragies utérines), antirhumatismales, tonique(fatigue), antiseptique…(Valnet, 1974) (Bardeau, 1976) (Jouhanneau, 1991) (Franchomme, Pénoël & al., 1996).• L’infusion des feuilles est agréable et utile pour traiter, en plus des maux déjàévoqués : les jambes gonflées, la grippe, les vers intestinaux (Lavergne, 2004).http://christian.guillermet.perso.neuf.fr/lavergne_medecine.htmlNos résultats pourraient indiquer que les vertus cicatrisantesde cette plante semblent être liées à une action sur laprolifération cellulaire plutôt qu’à une action désinfectante.

Benjoin: Repérage des boites1= Feuille, Macération éthanoïque2=Fruit, Distillation éthanoïque3= Bois, Décoction aqueuse4= Ecorce, Macération éthanoïque5= Ecorce, Décoction aqueuse6=témoin Ampicilline

Tapis d’E. Coli

Tapis de B. Mégatérium

Mesure de l’auréole d’inhibition autour desdisques imbibés des extraits de BenjoinE. Coli(mm)B. Mégatérium(mm)FeuilleMacérationéthanoïqueFruitDistillationéthanoïqueBois sansécorceDécoctionaqueuseÉcorceMacérationéthanoïqueÉcorceDécoctionaqueuse1 à 3 2 à 4 0 1 à 2 1 73 à 5 3 à 6 0 1 à 2 2 à 3 7Ampicilline1/ L’activité bactéricide des feuilles ayant déjà été prouvée sur E. Colipar L. Jelager et al (Pharmaceutical Biology, 1998, Vol 36) , cela confimela validité de nos résultats.2/ Seuls les feuilles, les fruits et l’écorce ont un pouvoir antiseptique. Lapartie végétale la plus efficace semblant à chaque essai être le fruit.

BenjoinC'est l'écorce qui fait toute la richesse du benjoin. Elle fournit un tanin, une résine, àl’agréable odeur de vanille qui est utilisée en parfumerie. En médecine, la décoction d'écorcesert dans les affections cutanées. En inhalation et en tisane, elle guérit l'asthme, la toux et labronchite. En tisane elle est sudorifique, régule le cycle menstruel, lutte contre diarrhée etdysenterie. « Attention à trop forte dose ou pris plus de 3 jours cela peut détraquer l’estomac,constiper ou provoquer vomissements et rétention urinaire ». (F. Tibère)Propriétés vérifiées: diurétique, diminution de l’hypertension, antibactérien (feuilles testéessur E. Coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus)http://www.aplamedom.org/resources/Poster+benjoin.pdf et antimalarien (Screening of medicinal plants fromReunion Island for antimalarial and cytotoxic activity. Jonville MC, et al, J Ethnopharmacol. 2008 Dec )C’est l’écorce qui conduit le benjoin à sa perte: à force de l’écorcher, cet arbre estaujourd’hui classé « En danger critique d’extinction » à la Réunion et non protégéau niveau régional ! (Sonia Françoise/ Cbnm et UICN)Nos résultats semblent indiquer que les vertus désinfectantes de cette plante,(liées à une action sur les affections cutanées, l’asthme, la toux et la bronchite)pourraient aussi bien être détenues par les fruits que par l’écorce, et même avoirune action plus forte d’après nos premiers résultats.Vers juin, apparaissent les petits fruits que nous récoltons déjà afin d’étendre nosrésultats à plusieurs types d’extractions. Les fruits secs seront utilisés afin devérifier la stabilité de cet agent bactéricide dans le temps.

Bois d’Arnette: Repérage des boites1= Hydrodistillation concentrée2= Décoction aqueuse (2 ech)3= Distillation ethénoïque4= Macération éthanoïque concentrée5= Décoction éthanoïque (2 ech)6=témoin Ampicilline

Tapis de B. Mégatérium

Mesure de l’auréole d’inhibition autour desdisques imbibés des extraits de Bois d’ArnetteDistillationaqueuseDécoctionaqueuseDistillationéthanoïqueMacérationéthanoïqueDécoctionéthanoïqueAmpicillineE. Coli(mm)B. Mégatérium(mm)1 0 0 1 1 à 2 73 à 6 4 à 5 4 à 6 5 à 6 4 à 5 71/ Seuls nos résultats démontrent l’activité bactéricide des feuilles deBois d’Arnette.2/ Leur pouvoir antiseptique sur certains germes semble nonnégligeable car tout à fait comparable à ceux obtenus avec unantibiotique courant tel l’ampicilline.

Bois d’ArnetteL'infusion de feuilles fraîches au goût de pomme est agréable et dépurative (aide àéliminer les toxines). « C’est une plante remarquable sur les calculs rénaux, utiliséeaussi contre la goutte, les douleurs rhumatismales, la sciatique et l’arthrose(Lavergne & Véra, 1989) (Lavergne, (Lavergne, Smadja & Véra, 1990) (Lavergne, 1995) (Lavergne 2004)(APLAMEDOM, 2004). Huiles essentielles et extraits foliaires ont aussi une activitéantihypertensive, antibactérienne, analgésique et antiparasitaire… Elle a de bonneschances d’être inscrite à la pharmacopée car il n’y a pas d’équivalent» (ClaudeMarodon/ pharmacien).Les graines ont une activité analgésique et molluscicide (en particulier contrel’Escargot).L’activité anti-hypertensive et diurétique a été confirmée au laboratoire (A. et H.Adersen, 1997). Les flavonoïdes présents dans la plante ont une activité antiviraleimportante (rhino-virus, polio-virus…) et certaines molécules ont des propriétésanti-oxydantes et des effets analgésiques démontrés sur des Souris (APLAMEDOM,2004, http://christian.guillermet.perso.neuf.fr/lavergne_medecine.html)Nos résultats confirment les vertus désinfectantes remarquablessur certaines bactéries des feuilles de Bois d’Arnette, ces testsn’ayant jamais été publiés à notre connaissance.

ConclusionLes plantes étudiées cette année dans le cadre du module MPS du Lycée Maison Blanchesont très utilisées pour leurs vertus médicinales. Toutes celles testées semblent avoir un rôlebactéricide, cependant peu de publications scientifiques confirment ces modes d’actions...Nos résultats nous incitent à continuer plus en avant nos études:- Poursuivre nos études sur les fruits du Benjoin afin de valoriser leur utilisationdans nos tisanes et ainsi diminuer l’écorçage trop courant de ces arbres endémiquesmagnifiques. Nous gardons l’infime espoir que nos tests puissent contribuer un jour à unchangement des habitudes réunionnaises…-Sélectionner l’extraction par Macération éthanoïque des feuilles de Bois d’Arnettepour la tester sur d’autres bactéries et pour la confection de notre produit final: notre crèmebactéricide.-Tester l’huile essentielle de géranium extraite à petite France de façon à avoir unproduit plus concentré- Étudier 2 ou 3 autres nouvelles plantes pour l’année 2013-2014.E. AUSTRUYPr de SVT au Lycée Maison BlancheDr ès-sciences en oncogenèse