Contribution à l'étude de la qualité bactériologique de ... - BEEP

- 62-2.4.2.3. Dénombrement des anaérobies sulfito-réducteurs(A.S.R.)a - Milieux de cultureDeux milieux peuvent être utilisés :- Gélose trypticase sulfite néomycine (T.S.N.)- Gélose trypticase sulfite cyclosérine (T.S.C.)Le milieu sulfite polymyxine sulfadiazine est également signalé dans la littératurepour le dénombrement des germes. Pour notre étude, nous avons utilisé le TSN.b - Mode opératoireA la différence des recherches précédentes, l'ensemencement des milieuxpour la recherche des ASR se fait en tube. Le milieu est réparti en tubes à raisonde 10 ml par tube. Au moment de leur emploi, il est fondu au bain-marie àIOOoe puis ramené à 45-50°C. L'ensemencement des tubes se fait avec 1 ml desolution mère revivifiée. Après homogénéisation et solidification du milieu, le tubeest incubé à l'étuve 46°C en anaérobiose pendant 48 à 72 heures..c - LectureLes colonies sont noires floconneuses avec un diamètre supérieur à 1mm et la coloration ne diffëre pas dans la gélose.2.4.2.4. Dénombrement des staphylocoques présumés pathogènesa - Milieux de cultureStaphylococcus aureus est isolé sur la gélose de Baird-Parker (BP)additionnée de jaune d'œufet de tellurite de potassium.b - Mode opératoireLe mélange gélose Baird-Parker, jaune d'œufet tellurite de potassiumest coulé en boîte de pétri. Après solidification, il est ensemencé en surface avec0,1 ml de la solution mère. L'inoculum est ensuite étalé à l'aide d'un étaleur enverre ou en plastique. L'incubation se fait à 37°C pendant 48 heures.c - LectureLa présence de staphylococcus aureus se traduit par l'apparition decolonies, brillantes, bombées. Leur diamètre est compris entre 0,5 et 2 mm; Pourconfirmer la pathogénicité des staphylocoques, nous avons effectué le test de lacatalase et le test à la coagulase ou ce dernier test seul.