pengaruh pemberian ekstrak propolis terhadap sistem kekebalan
pengaruh pemberian ekstrak propolis terhadap sistem kekebalan
pengaruh pemberian ekstrak propolis terhadap sistem kekebalan
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK PROPOLIS TERHADAP SISTEM<br />
KEKEBALAN SELULER PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)<br />
STRAIN WISTAR<br />
THE EFFECTS OF PROPOLIS EXTRACT TO CELLULAR IMMUNE<br />
SYSTEM OF RATTUS NORVEGICUS STRAIN WISTAR<br />
FIRMAN JAYA 1 , LILIK EKA RADIATI 2 , KHOTHIBUL UMAM AL AWWALY 2 , UMI KALSUM 3<br />
1. Alumni Mahasiswa Jurusan Teknologi Hasil Ternak Fakultas Peternakan<br />
Universitas Brawijaya Malang; Mahasiswa Pa s ca Sa rja n a Jurusan Teknologi<br />
Hasil Perta n ia n Fa ku lta s Tekn ologi Perta n ia n Un ivers ita s Bra wija ya Malang<br />
Jl. Veteran Malang 65145 Telp. (0341) 575852<br />
2. Dosen Jurusan Teknologi Hasil Ternak Fakultas Peternakan Universitas Brawijaya<br />
Jl. Veteran Malang 65145 Telp. (0341) 575852<br />
3. Dosen Jurusan Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya<br />
Jl. Veteran Malang 65145 (0341) 575852<br />
PENDAHULUAN<br />
Abstract : The res earch w as experim en tal s tud y to find out the effects of <strong>propolis</strong><br />
extract d os age to cellular im m une s y s tem of Rattus norvegicus . The ad m inis tration per<br />
oral of <strong>propolis</strong> extract w as 40 d ay s and concen tration of d os age of the firs t group w as<br />
9 m g/ d ay , s econd group w as 12 m g/ d ay and th ird group w as 15 m g/ d ay . The<br />
res ults s how ed th at th e average of Rattu s norvegicus leucocy tes in control group w as<br />
3883,33 ± 1563,86 cell/ m m 3. This value con tain ed 75,17 ± 4,36 % ly m phocy tes , 6,67<br />
± 2,66 % m onocy tes and 18,17 ± 5,12 % granulocy te. The average of leucocy tes of the<br />
firs t group w as 3616,67 ± 1085,20 cell/ m m 3 w hich con tained 75,67 ± 4,50 %<br />
ly m phocy tes , 10,50 ± 5,21 % m onocy tes and 13,83 ± 2,14 % granulocy tes . The s econd<br />
group w as 4100 ± 551,36 cell/ m m 3 leucocy tes w h ich con tained 67,33 ± 8,57 %<br />
ly m phocy tes , 3,50 ± 1,38 % m onocy tes and 25 ± 5,48 % granulocy tes . The th ird group<br />
w as 4383,33 ± 1121,46 cell/ m m 3 w h ich con tained 70 ± 5,10 % ly m phocy tes , 1,83 ±<br />
0,41 % m onocy tes and 28,17 ± 5,19 % granulocy tes .The conclus ion w as <strong>propolis</strong> extract<br />
could increas e the num ber of leucocy tes th at influen tial to res pons e cellular im m une<br />
s y s tem of Rattu s norvegicus . The increas e of <strong>propolis</strong> d os age concen tration s ign ifican tly<br />
not related each other becau s e the ly m phocy tes and m onocy tes cell have a s im ilar<br />
correlation.<br />
Key words: <strong>propolis</strong> extract, leucocytes and cellular immune system<br />
Leba h m a du ya n g a da di In don es ia terdiri<br />
a ta s du a jen is ya itu lebah m a du loka l da n lebah<br />
m a du da ri lu a r n egeri. Ma s in g-m a s in g jen is<br />
m em pu n ya i ciri-ciri ya n g berbeda . Leba h loka l<br />
ya n g a s li da ri In don es ia a n ta ra la in Apis<br />
dorsata, Apis ceran a dan Apis ind ica dengan<br />
tem pera m en ga n a s . Leba h lu a r n egeri ya n g<br />
ba n ya k terda pa t di In don es ia ya itu Apis<br />
mellifera den ga n tem pera m en tida k ga n a s dan<br />
m u dah dipelih a ra (Mu rtidjo, 1991). Leba h<br />
m en gh a s ilka n bebera pa produ k s eperti m a du ,<br />
royal jeli, polen dan <strong>propolis</strong>.<br />
Propolis a da la h ba h a n res in ya n g m eleka t<br />
pa da bu n ga , pu cu k da n ku lit kayu . Sifa tn ya<br />
peka t, bergeta h , berwa rn a cokla t keh ita m a n ,<br />
m em pu n ya i ba u ya n g kh a s , da n ra s a pa h it.<br />
Leba h m en ggu n a kan ba h a n <strong>propolis</strong> u n tu k<br />
perta h a n a n s a ra n g, m en gkila tkan ba gia n da la m<br />
sarang dan menjaga suhu lingkungan (Toprakci,<br />
2005).<br />
Ma n u s ia da pa t m em a n fa a tkan <strong>propolis</strong><br />
s eba ga i bah a n kos m etik, tekn ologi pen gola h a n<br />
m a ka n a n da n oba t-oba ta n . Men u ru t Wa de<br />
(2005), <strong>propolis</strong> mengandung senyawa kompleks<br />
vita m in , m in era l, en zim , s en ya wa fen olik dan<br />
fla von oid u n tu k m en gh a m ba t pelepa s a n<br />
h is ta m in den ga n ca ra s ta bilis a s i s ela pu t s el<br />
lipid. Ta bel 1 diba wa h in i m en jela s ka n<br />
mengenai komposisi kimia <strong>propolis</strong>.
Tabel 1.Komposisi Kimia Propolis<br />
Kelas<br />
Komponen<br />
Jumlah Grup Komponen<br />
Resin 45-55% Fla von oid, a s a m<br />
fen ola t da n<br />
Lilin dan<br />
asam lemak<br />
esternya<br />
25-53% Seba gia n bes a r<br />
da ri lilin leba h da n<br />
bebera pa<br />
tanaman<br />
da ri<br />
10% Senyawa volatil<br />
Minyak<br />
essensial<br />
Protein 5% Protein<br />
kemungkinan<br />
bera s a l da ri pollen<br />
dan amino bebas<br />
Senyawa 5% 14 m a ca m m in era l<br />
orga n ik la in<br />
ya n g pa lin g<br />
dan mineral<br />
terken a l a da la h Fe<br />
da n Zn , s is a n ya<br />
s eperti Au , Ag, Cs ,<br />
Hg, La dan Sb.<br />
Senya wa orga n ik<br />
la in s eperti keton ,<br />
la kta n , ku in on ,<br />
a s a m ben zoa t dan<br />
es tern ya , gu la ,<br />
vita m in<br />
gula.<br />
(B3) s erta<br />
Sumber: Krell (1996)<br />
Krell (1996) menyatakan bah wa kom pos is i<br />
<strong>propolis</strong> dapat berfungsi untuk memperbaiki<br />
kon dis i patologi da ri ba gia n tu bu h ya n g s a kit,<br />
bekerja s eba ga i a n tioksida n dan a n tibiotik s erta<br />
m en in gka tka n s is tem kekeba la n tu bu h ba ik<br />
h u m ora l m a u pu n s elu ler ka ren a mengandung<br />
fla von oid s ekita r 15%. Men u ru t Wa de (2005),<br />
flavonoid m eru pa kan a n tioks idan da n a n tibiotik<br />
ya n g berfu n gs i m en gu a tka n dan m en ga n tis ipa s i<br />
keru s a ka n pa da pem bu lu h da ra h s erta bah a n<br />
a ktif ya n g berfu n gs i s eba ga i a n tipera da n ga n<br />
dan antivirus.<br />
Bendich (1992) da n Robin s on (1995)<br />
m en jela s kan bah wa kem a m pu a n <strong>propolis</strong><br />
s eba ga i a n tioksida n dapat m en a n gka p ra dika l<br />
h idroks i da n s u peroksida kem u dia n<br />
m en etra lkan ra dika l beba s s eh in gga m elin du n gi<br />
s el dan m em perta h a n ka n keu tu h a n s tru ktu r s el<br />
da n ja rin ga n s erta da pa t m elin du n gi m em bra n<br />
lipid terh a da p rea ks i ya n g m eru s a k. Remirez et<br />
al. (1997) dala m Ba n kova (2000) m en a m bah kan<br />
ba h wa eks tra k <strong>propolis</strong> berpera n s eba ga i<br />
a n tioks idan ka ren a m en ga n du n g ka feik da n<br />
a s a m feru lik bes erta es tern ya . Men u ru t<br />
Ma s a h a ru a n d Yon g Ku n (1998), a ktifita s<br />
a n tioks idan tertin ggi dih a s ilkan da ri eks tra ksi<br />
den ga n m en ggu n a ka n pela ru t eta n ol. Fla von oid<br />
ya n g tereks tra k a da la h kem ferida (fla von ol),<br />
akasetin (flavon) dan isoramnetin.<br />
Propolis m eru pa kan a n tibiotik ka ren a<br />
m em pu n ya i ka n du n ga n fla von oid, ya itu bah a n<br />
a ktif ya n g berfu n gs i s eba ga i a n tipera dan ga n<br />
da n a n tiviru s . Ha l in i didu ku n g pen elitia n ya n g<br />
dila ku ka n oleh Moriya s u da ri J epa n g bah wa<br />
eks tra k <strong>propolis</strong> da pa t m em a cu a ktifita s<br />
m a krofa g s eh in gga m en in gka tkan s istem<br />
kekeba la n tu bu h . Ha s il pen elitia n dapa t<br />
diketa h u i ba h wa <strong>propolis</strong> da pa t berpera n<br />
s eba ga i a n titu m or. Wa de (2005) m en jela s ka n<br />
ba h wa <strong>propolis</strong> da pat m era n gs a n g s istem<br />
kekeba la n s eca ra la n gs u n g dan m elepa s kan<br />
u n s u r ya n g m eres pon im u n ita s s elu ler m ela lu i<br />
mekanisme fagositosis.<br />
Sis tem kekeba la n tu bu h (s is tem im u n )<br />
diba gi m en ja di du a ya itu s is tem kekeba la n n on<br />
s pes ifik (innate im m un ity ) da n s is tem kekeba la n<br />
s pes ifik (ad aptive im m unity ) ya n g terdiri da ri<br />
s is tem kekeba la n h u m ora l da n s elu ler. Res pon<br />
im u n tu bu h m eru pa ka n h a s il kom u n ika s i da ri<br />
s el s is tem kekeba la n s elu ler (Ra n ta m , 2003).<br />
Linnemeyer (1993) m en gem u kaka n bah wa<br />
s is tem kekeba la n s elu ler terdiri da ri s el T<br />
con toh n ya tipe s el CD8 + (Clus ter Differen tiation)<br />
T, s el pem bu n u h a la m i (n atural k iller cell) ya n g<br />
dis ekres i oleh s el CD4 + T, m a krofa g, sel<br />
dendritik dan sel darah putih.<br />
Salah satu contoh sel yang dapat melakukan<br />
fagositosis a da la h s el da ra h pu tih . Sel da ra h<br />
pu tih berpen ga ru h terh a da p s is tem kekeba la n<br />
tu bu h ka ren a berpera n da la m m em bu n u h<br />
ba kteri, pa ra s it da n m ikroorga n is m e a s in g ya n g<br />
berbah a ya terh a da p tu bu h (Wa de, 2005). Oleh<br />
ka ren a itu , profil da ri s is tem kekeba la n s elu ler<br />
kh u s u s n ya s el da ra h pu tih da pat m en u n ju kka n<br />
res pon im u n da ri a ktifita s <strong>propolis</strong> ya n g<br />
m em a ka i pela ru t eta n ol s eh in gga tu bu h<br />
m em pu n ya i a n tibodi ya n g berfu n gs i s eba ga i<br />
perlindungan <strong>terhadap</strong> penyakit.<br />
Seca ra a la m i <strong>propolis</strong> m en ga n du n g s erpih a n<br />
ka yu , pa s ir da n dau n . Un tu k m em is a h kan<br />
<strong>propolis</strong> den ga n s erpih a n ters ebu t m a ka<br />
digu n a kan m etode eks tra ks i den ga n<br />
m en ggu n a ka n pela ru t eta n ol. Wa la u pu n pela ru t<br />
eta n ol s u da h dipis a h ka n den ga n <strong>propolis</strong><br />
m ela lu i pros es eva pora s i, n a m u n ekstra k<br />
<strong>propolis</strong> m a s ih m em pu n ya i res idu . Ha s il da ri<br />
eks tra k <strong>propolis</strong> perlu di u ji lebih la n ju t<br />
<strong>terhadap</strong> <strong>sistem</strong> <strong>kekebalan</strong> tubuh.<br />
Tujuan penelitian ini adalah :<br />
1. Men geta h u i pen ga ru h eks tra k <strong>propolis</strong><br />
terh a da p s is tem kekeba la n s elu ler h ewa n<br />
coba.<br />
2. Men geta h u i pen ga ru h perbeda a n tin gkat<br />
kon s en tra s i dos is <strong>propolis</strong> terh a da p ju m la h<br />
sel darah putih pada hewan coba.
3. Men geta h u i pen ga ru h res idu pela ru t eta n ol<br />
da la m ekstra k <strong>propolis</strong> terh a da p s is tem<br />
<strong>kekebalan</strong> seluler.<br />
BAHAN DAN METODE<br />
Hewan Coba<br />
Hewa n coba ya n g digu n a kan da la m<br />
pen elitia n a da la h tiku s pu tih (Rattu s novergicus )<br />
Stra in Wis ta r ya n g diperoleh da ri La bora toriu m<br />
Fa rm a kologi Fa ku lta s Kedoktera n Un ivers ita s<br />
Bra wija ya . Kriteria n ya beru s ia 2-3 bu la n , bera t<br />
300-400 gra m da n da la m kon dis i s eh a t. Tiku s<br />
h a ru s diberika n perla ku a n a da pta s i terh a da p<br />
kon dis i la bora toriu m ya n g a ka n digu n a kan<br />
sebelum diberikan perlakuan.<br />
Pem elih a ra a n dila ku kan di La bora toriu m<br />
Fa rm a kologi Fa ku lta s Kedoktera n Un ivers ita s<br />
Bra wija ya . Setia p tiku s diberika n m a ka n a n da n<br />
m in u m a n s ta n da r. Ma ka n a n tiku s terdiri da ri<br />
m a kan a n a ya m jen is BR 1 la lu dica m pu r<br />
den ga n s a tu ba gia n tepu n g terigu ya n g<br />
kem u dia n dibu a t pellet. Setia p h a rin ya tiku s<br />
m a kan s eba n ya k 15-40 gra m pellet. Minuman<br />
diberikan secara ad libitu m .<br />
Bahan<br />
Bahan bah a n ya n g digu n a kan da la m pen elitia n<br />
a da la h <strong>propolis</strong> ya n g dia m bil dari petern a k<br />
leba h di Ba tu (Ma la n g), E-pu re, eta n ol da n<br />
Tween 80. Ba h a n u n tu k m en gh itu n g s el da ra h<br />
pu tih bera s a l da ri da ra h tiku s tia p perla ku a n<br />
ya n g diberi la ru ta n EDTA (Ethylene Diamine<br />
Tetra Acetic Acid ) den ga n perban din ga n 1 m g<br />
EDTA u n tu k 1 m l da ra h a ga r tida k terja di<br />
pem beku a n da ra h . Eter digu n a ka n seba ga i<br />
a gen a n es tetik a ga r tiku s m en ga la m i a n es tes i<br />
umum sebelum pengambilan darah.<br />
Alat<br />
Erlen m eyer 500 m l dan 1000 m l, gela s u kur<br />
1000 m l, pen ga du k, coron g gela s , pipet, kerta s<br />
s a rin g, Rotary Evaporator, Therm os tirer (Ika m a g<br />
Red), Vortex-mixer (Model:VM-2000 D.S.<br />
In s tru m en t, In c. Ta ipe, Ta iwa n , R.O.C),<br />
waterbath (Salm En Kipp b.v), Magnetic Stirrer 5<br />
cm , a lu m u n iu m foil, ku lka s m erk SHARP,<br />
Thermometer, botol u n tu k m en yim pa n dos is ,<br />
s u n tik s on de, s pet 5 cc da n toples tem pat tiku s<br />
m en ga la m i a n a s es i u m u m . Ala t ya n g digu n a ka n<br />
u n tu k m en gh itu n g s el da ra h pu tih a da la h ABX<br />
Micros 60-OT. Pen ga m bila n ga m ba r da ra h<br />
menggunakan Flex Fis ion (TOPEX) m em a kai<br />
s oftw are Movie S tud io Vee den ga n m em a ka i<br />
perbesaran obyektif 100 x dan sel 1000 x.<br />
Metode Penelitian<br />
Tekn ik pen ga m bila n s a m pel dia wa li den ga n<br />
pem bu a ta n ren dem en <strong>propolis</strong> da ri <strong>propolis</strong><br />
ka s a r. La n gka h perta m a a da la h m en geks tra ksi<br />
<strong>propolis</strong> den ga n eta n ol s ebaga i pela ru t<br />
m em a ka i perba n din ga n <strong>propolis</strong> : eta n ol a da la h<br />
1 : 10 (Krell, 1996). Ala t ya n g digu n a kan ya itu<br />
Thermostirer berkecepa ta n 150 rpm s ela m a 4<br />
ja m da n dipu ta r den ga n ban tu a n Magnetic<br />
S tirrer 5 cm . Ha s iln ya dis a rin g den ga n<br />
menggunakan kerta s s a rin g s eh in gga dida pa t<br />
filtra t <strong>propolis</strong> . Filtra t dipis a h ka n da ri pela ru t<br />
den ga n ca ra pen gu a pan da la m rotary evaporator<br />
pa da s u h u +<br />
70 oC berkecepa ta n 2-3 rpm .<br />
Ren dem en ya n g diperoleh digu n a ka n s eba ga i<br />
sampel untuk tahap perlakuan berikutnya.<br />
Rendemen dien cerka n a ga r m u da h<br />
diberika n pa da h ewa n coba m ela lu i m etode ora l.<br />
Ha l in i dila ku ka n ka ren a s ifa t fis ik ren dem en<br />
<strong>propolis</strong> ya n g len gket. Ca ra n ya a da la h<br />
ren dem en <strong>propolis</strong> dih itu n g u n tu k m em bu a t<br />
dos is la lu dita m ba h ka n tween 80 s eba ga i<br />
emulsifier da n dien cerka n den ga n E-pure.<br />
Ala s a n m en ggu n a ka n E-pu re u n tu k m en ja ga<br />
kem u rn ia n pen elitia n da ri ka n du n ga n kim ia<br />
ba h a n la in ya n g digu n a ka n sela in efek <strong>propolis</strong><br />
terh a da p h ewa n coba . E-pu re dida pa tka n da ri<br />
hasil pemurnian akuades.<br />
Metode Analisis<br />
Pen elitia n in i m eru pa ka n s tu di percoba a n<br />
u n tu k m en geta h u i efek dos is ekstra k <strong>propolis</strong><br />
terh a da p s is tem kekeba la n tu bu h s elu ler tiku s<br />
pu tih . Metode pen elitia n m en ggu n a ka n postest<br />
control ka ren a m a s in g m a s in g kelom pok h a n ya<br />
m en da pa t s a tu perla ku a n beru pa pem beria n<br />
dos is ekstra k <strong>propolis</strong> (m g/ h r) la lu dilih a t<br />
kuantitas sel darah putih.<br />
Pen en tu a n bes a rn ya dos is ya n g a kan<br />
diberika n pa da h ewa n coba , dila ku ka n a n a logi<br />
den ga n dos is terh a da p m a n u s ia . Men u ru t<br />
Da rm a n s ja h (1995), dos is tiku s a da la h 25 x<br />
s eta ra den ga n m a n u s ia . Ka ren a belu m a da<br />
eks plora s i dos is <strong>propolis</strong> ya n g berpen ga ru h<br />
terh a da p s is tem kekeba la n tu bu h tiku s pu tih<br />
jen is wis ta r, m a ka dila ku ka n percoba a n<br />
pen en tu a n dos is <strong>propolis</strong> ya n g berpen ga ru h<br />
terh a da p ku a n tita s s el da ra h pu tih da ri s istem<br />
<strong>kekebalan</strong> seluler tikus putih jenis Wistar.<br />
Perh itu n ga n dila ku kan den ga n m em bu a t<br />
h om ogen bebera pa kom pon en s eperti ra ta -rata<br />
bera t bada n m a n u s ia da n tiku s .<br />
Perhitungannya adalah :<br />
Rata-rata berat badan manusia yang diambil<br />
secara umum = 50 Kg<br />
Rata-rata berat badan tikus = 300 gram<br />
Dos is pa da tiku s = 25x, 20x da n 15x dos is<br />
manusia
Sta n da r pem beria n dos is <strong>propolis</strong> = 100 m g<br />
(Krell, 1996)<br />
1 ml <strong>propolis</strong> = 860 mg <strong>propolis</strong><br />
Berat rata-rata tikus x standar <strong>pemberian</strong> <strong>propolis</strong><br />
Berat rata-rata manusia<br />
300 g x 100 mg = 0,6 mg<br />
50000 g<br />
Dosis pada<br />
Tikus = 25x, 20x dan 15x dosis manusia<br />
= 25 x 0,6 x 15 = 15 mg/ hr<br />
Karena 1 ml <strong>propolis</strong> = 860 mg<br />
<strong>propolis</strong>, maka :<br />
Dosis : 15<br />
mg<br />
860 mg<br />
= 20 x 0,6 x 20 = 12 mg/ hr<br />
12mg<br />
Dosis :<br />
860mg<br />
0,<br />
014ml<br />
= 15 x 0,6 x 25 = 9 mg/ hr<br />
9mg<br />
Dosis :<br />
860 mg<br />
0,<br />
010 ml<br />
Tabel 2. Komponen Dosis Ekstrak Propolis<br />
Dosis<br />
(ml)<br />
Tween<br />
(µl)<br />
E-Pure<br />
(ml)<br />
Volume<br />
Akhir<br />
(ml)<br />
Konsentrasi<br />
Propolis<br />
(mg/ml)<br />
0,010 100 2,893 3 9 / 3<br />
0,014 100 2,89 3 12 / 3<br />
0,017 100 2,883 3 15 / 3<br />
Volu m e a kh ir dida s a rka n pa da u ku ra n la ru ta n<br />
tes u n tu k h ewa n coba s ebes a r 5-10 m l/ kgBB<br />
(Di Carlo and Oehme, 1992).<br />
Pem ba gia n kelom pok tiku s pu tih u n tu k<br />
<strong>pemberian</strong> dosis <strong>ekstrak</strong> <strong>propolis</strong> adalah sebagai<br />
berikut :<br />
Kelompok I : <strong>pemberian</strong> dosis<br />
9 mg/ 3 ml/ hr<br />
Kelompok II : <strong>pemberian</strong> dosis<br />
12mg/3ml/ hr<br />
Kelompok III : <strong>pemberian</strong> dosis<br />
15 mg/ 3 ml/ hr<br />
Kelompok Kontrol : tidak diberi dosis <strong>propolis</strong>.<br />
Analisa Data<br />
0,<br />
017<br />
An a lis is da ta ya n g digu n a ka n a da lah<br />
a n a lis is kera ga m a n (Analy s is of Variance) da n<br />
m em a ka i Ra n ca n ga n Aca k Len gka p (RAL). J ika<br />
terda pa t perbeda a n di a n ta ra perla ku a n m a ka<br />
dilakukan Uji Jarak Berganda Duncan.<br />
Macam Perlakuan dan Ulangan<br />
Pem ilih a n s a m pel dila ku ka n den ga n ca ra<br />
s im ple rand om s ampling ya n g kem u dia n diba gi<br />
m en ja di em pa t kelom pok. Es tim a s i ju m la h<br />
ml<br />
pen gu la n ga n a ta u bes a r s a m pel pa da pen elitia n<br />
ini dapat dihitung dengan rumus :<br />
(p 1) (n 1) 15<br />
n = jumlah sampel tiap perlakuan<br />
p = jumlah perlakuan<br />
a ka n diu ji den ga n level s ign ifika n 95 %<br />
(Hanafiah, 1991)<br />
J u m la h perla ku a n a da la h em pa t {pem beria n<br />
s a m pel <strong>propolis</strong> dos is 1 (9 m g/ h r), 2 (12 m g/<br />
h r), 3 (15 m g/ h r) da n kon trol}, s eh in gga<br />
didapatkan :<br />
(p 1) (n - 1 15<br />
(4 1) (n 1) 15<br />
n 6<br />
J a di ju m la h s a m pel tia p perla ku a n m in imal<br />
en a m ekor tiku s s eh in gga terda pa t tiga<br />
kelompok perlakuan dan satu kelompok kontrol.<br />
Variabel Pengamatan<br />
Va ria bel ya n g dia m a ti a da la h ku a n tita s s el<br />
da ra h pu tih bes erta jen is -jen is n ya da ri tiku s<br />
putih (Rattus norvegicus ) Strain Wistar.<br />
HASIL DAN PEMBAHASAN<br />
Ekstrak Propolis<br />
Ha s il pen elitia n m en u n ju kka n bah wa eta n ol<br />
ya n g tela h dipis a h kan den ga n eks tra k <strong>propolis</strong><br />
tida k m em pu n ya i res idu ka ren a s elu ru h tiku s<br />
pu tih ya n g dija dika n m edia u n tu k percoba a n<br />
tida k m en ga la m i kea da a n ya n g m eru gikan<br />
seperti stres atau kesulitan untuk bernafas.<br />
Propolis ya n g dieks tra k den ga n<br />
m en ggu n a ka n pela ru t eta n ol m em berika n<br />
ga m ba ra n produ k berwa rn a cokla t keku n in gku<br />
n in ga n , berben tu k peka t da n bers ifa t len gket.<br />
Sifa t in i m en u ru t Hega zi (1997), dis eba bka n<br />
oleh <strong>propolis</strong> ya n g ba n ya k m en ga n du n g<br />
50-55% resin , 30% ba ls a m , 10% m in ya k eter<br />
da n 5% pollen . Ga m bar 1 m en u n ju kka n h a s il<br />
dari <strong>ekstrak</strong> <strong>propolis</strong>.<br />
Pem beria n eks tra k <strong>propolis</strong> ya n g diberika n<br />
pa da tiku s pu tih tida k m en ga la m i kea da a n ya n g<br />
m eru gikan . Krell (1996) m en ya ta ka n bah wa<br />
etanol m eru pa ka n va ria s i ba h a n pela ru t orga n ik<br />
ya n g pa lin g u m u m digu n a kan teta pi h a n ya<br />
sedikit yang tidak beracun dan dapat digunakan<br />
den ga n a m a n . Ba h ka n m en u ru t Lorim er (1995),<br />
eta n ol la ru t da la m pela ru t ya n g bers ifa t pola r<br />
seperti senyawa fenolik.<br />
Gambar 1. Hasil Ekstrak Propolis
Sel Darah Putih<br />
Setia p dos is m en gh a s ilka n ju m la h s el da ra h<br />
pu tih ya n g berbeda -beda pa da tia p pa ra m eter<br />
ya n g diteliti. Pa da Ga m ba r 1 dis a jikan h a s il da ri<br />
pem beria n eks tra k <strong>propolis</strong> terh a da p s el da ra h<br />
pu tih tiku s pu tih (Rattu s norvegicus ) Stra in<br />
Wistar.<br />
Sel Darah Putih (sel/ mm 3 )<br />
5000<br />
4500<br />
4000<br />
3500<br />
3000<br />
2500<br />
2000<br />
1500<br />
1000<br />
500<br />
0<br />
3883,33<br />
3616,67<br />
4100<br />
Dosis (mg/ hr)<br />
4383,33<br />
Kontrol<br />
9 mg/hr<br />
12 mg/hr<br />
15 mg/hr<br />
Gambar 2. Gra fik Ra ta -ra ta Sel Da ra h Pu tih<br />
Tiku s Pu tih terh a da p Perla ku a n<br />
Dos is Eks tra k Propolis<br />
Dibandingkan dengan Kontrol<br />
Pen in gka ta n ju m la h s el da ra h pu tih<br />
m en u n ju kka n bah wa <strong>propolis</strong> a da la h s u a tu<br />
senyawa biofungsional non-nutritive ya n g<br />
bers ifa t h om eos ta tis , ya itu a ktifita s s en ya wa<br />
<strong>propolis</strong> u n tu k m en da pa tkan kes eim ba n ga n s el<br />
da ra h pu tih da la m tu bu h . Pen elitia n ya n g<br />
dila ku ka n oleh Za ka ria , Nu ra h m a n , Sa n ja ya<br />
da n Sa yu th i (1999) m en jela s kan s eca ra ilm ia h<br />
bahwa ja h e ya n g m eru pa ka n produ k rem pa h -<br />
rem pa h m a m pu m en in gkatkan a ktifita s s el<br />
darah putih.<br />
Pem beria n dos is eks tra k <strong>propolis</strong> s ebes a r<br />
9 m g/ h r da pa t m en u ru n ka n sel da ra h pu tih<br />
diba n din gkan den ga n kelom pok kon trol. Ha l in i<br />
dika ren a kan dos is <strong>propolis</strong> ya n g diberika n pada<br />
tiku s pu tih terla lu ren dah s eh in gga a ktifita s<br />
m eres pon s is tem kekeba la n tidak m a ks im a l.<br />
Men u ru t Weir (1990), tekn ik pem beria n dos is<br />
keda la m tu bu h h ewa n da n pem beria n a n tigen<br />
da la m ben tu k a ju va n da pat m en en tu kan<br />
keku a ta n res pon im u n . Ha l in i didu ku n g oleh<br />
pern ya ta a n Bella n ti (1993) da n Weir (1990)<br />
ba h wa dos is dan in terva l-in terva l a n ta ra<br />
s u n tika n ya n g berbeda dibu ktikan<br />
m en gh a s ilka n kelom pok-kelom pok a n tibodi<br />
den ga n titer da n keku a ta n ya n g berbeda -beda<br />
s eh in gga determ in a n a n tigen ya n g lebih a s in g<br />
a ka n s em a kin ku a t u n tu k m eres pon s is tem<br />
<strong>kekebalan</strong>.<br />
Jenis Sel Darah Putih<br />
Sel da ra h pu tih diba gi m en ja di du a ka tegori,<br />
ya itu gra n u los it da n s el lim foid a ta u<br />
a gra n u los it. Sel lim foid a ta u a gra n u los it terdiri<br />
da ri m on os it da n lim fosit. Sel gra n u los it terdiri<br />
da ri n eu trofil, eos in ofil da n ba s ofil. Jumlah<br />
lim fos it da n m on os it ditunjukkan pada<br />
Gambar 3 dan 4 berikut ini.<br />
Limfosit (%)<br />
Ga m ba r 3. Gra fik Ra ta -ra ta Lim fos it Tiku s<br />
Pu tih terh a da p Perla ku a n Dos is<br />
Eks tra k Propolis Diba n din gkan<br />
dengan Kontrol<br />
Monosit (%)<br />
78<br />
76<br />
74<br />
72<br />
70<br />
68<br />
66<br />
64<br />
62<br />
12<br />
10<br />
8<br />
6<br />
4<br />
2<br />
0<br />
75,17<br />
6,67<br />
75,67<br />
67,33<br />
Dosis (mg/ hr)<br />
10,50<br />
3,50<br />
Dosis (mg/ hr)<br />
Ga m ba r 4. Gra fik Ra ta -ra ta Monosit Tiku s<br />
Pu tih terh a da p Perla ku a n Dos is<br />
Eks tra k Propolis Diba n din gkan<br />
dengan Kontrol<br />
Lim fos it da n m on os it pa da kelom pok 1<br />
m en u n ju kka n ken a ika n ku a n tita s diba n din gka n<br />
dengan kelompok kontrol. Hal ini dimungkinkan<br />
oleh bebera pa kon dis i s eperti a dan ya<br />
m ikroorga n is m e ya n g m a s u k, tiku s m en ga la m i<br />
kea da a n ya n g tida k s ta bil a ta u pem beria n dos is<br />
eks tra k <strong>propolis</strong> ya n g tida k tepa t. Da pa t<br />
diketa h u i ju ga den ga n m em ban din gkan n ila i<br />
m on os it dan lim fos it n orm a l m en u ru t Sm ith &<br />
Ma n gkoewidjodjo (1998) bertu ru t-tu ru t a da la h<br />
0-5 % da n 63-84 % s edan ga ka n pada<br />
kelom pok 1 m em iliki m on os it 10,5 % dan<br />
limfosit 75,7 %.<br />
Weir (1990) m en ya ta ka n ba h wa m a krofa g<br />
ya n g m eru pa ka n m on os it m a ta n g m em ega n g<br />
pera n u ta m a da la m m em a kan m ikroorganisme<br />
la lu m en gh a n cu rkan n ya da n m em a pa rkan<br />
unsur-u n s u r a n tigen ikn ya kepada lim fos it<br />
u n tu k m en gin du ks ika n im u n ita s . Lim fos it<br />
berta n ggu n g ja wa b u n tu k m en in gka tkan res pon<br />
im u n s eca ra efektif terh a da p a n tigen s eh in gga<br />
terja di res pon im u n . Men u ru t Bella n ti (1993),<br />
kem a m pu a n m eres pon im u n pa da u m u m n ya<br />
rela tif den ga n dita n da i oleh res pon der ku a t<br />
70<br />
1,83<br />
Kontrol<br />
9 mg/ hr<br />
12 mg/ hr<br />
15 mg/ hr<br />
Kontrol<br />
9 mg/ hr<br />
12 mg/ hr<br />
15 mg/ hr
a ta u res pon der lem a h . Seca ra u m u m , res pon<br />
diu ku r oleh kem a m pu a n n ya u n tu k<br />
m en gh a s ilka n lim fos it T. Seda n gka n ju m la h s el<br />
granulosit ditampilkan pada Gambar 5.<br />
Granulosit (%)<br />
30<br />
25<br />
20<br />
15<br />
10<br />
5<br />
0<br />
18,17<br />
13,83<br />
25<br />
Dosis (mg/ hr)<br />
28,17<br />
Kontrol<br />
9 mg/ hr<br />
12 mg/ hr<br />
15 mg/ hr<br />
Gambar 5. Gra fik Ra ta -rata Granulosit Tiku s<br />
Pu tih terh a da p Perla ku a n Dos is<br />
Eks tra k Propolis Diba n din gkan<br />
dengan Kontrol<br />
Gra n u los it ya n g dia n a lis is m eru pa kan<br />
ga bu n ga n da ri n eu trofil, eos in ofil da n ba s ofil<br />
ya n g s em u a n ya ja ra n g ditem u ka n pa da s el<br />
da ra h pu tih . Gra n u los it da ri tiku s pu tih<br />
m en u n ju kka n pen in gka ta n ku a n tita tif<br />
wa la u pu n tida k diberikan in feks i. Men u ru t Weir<br />
(1990), n eu trofil lebih berpera n pa da im u n ita s<br />
n on s pes ifik diba n din gkan den ga n res pon<br />
im u n ita s spes ifik. Eos in ofil berpera n pada<br />
rea ks i a lergi da n ba s ofil ya n g m en gelu a rka n<br />
h is ta m in dan za t-za t pera n ta ra la in pa da rea ksi<br />
alergi.<br />
Pa da pem beria n dos is 9 m g/ h r m en ga la m i<br />
pen u ru n a n , teta pi da la m s ta tis tik pen u ru n a n<br />
in i tida k berm a kn a . Sedan gka n pada<br />
pem beria n dos is 12 m g/ h r dan 15 mg/hr<br />
ju m la h gra n u los it s el da ra h pu tih tiku s (Rattus<br />
norvegicus) m en ga la m i pen in gka ta n ya n g<br />
s ign ifikan . Bella n ti (1993) m en jela s ka n bah wa<br />
m en in gka tn ya ju m la h gra n u los it dis eba bka n<br />
oleh a dan ya ra n gs a n ga n da ri a n tigen da la m<br />
jumlah yang optimal.<br />
Na im (2004) m en jela s ka n ba h wa s en ya wa<br />
fla von oid da la m <strong>propolis</strong> da pa t m en in gka tka n<br />
s is tem kekeba la n tu bu h , teru ta m a da la m pros es<br />
fa gos itos is ya itu bers a m a -s a m a den ga n n eu trofil<br />
m elem a h kan din din g s el ba h a n a s in g ya n g<br />
berba h a ya ba gi tu bu h , s eh in gga din din g s el<br />
ba h a n ters ebu t a kan m elem a h da n a kan<br />
mengalami lisis.<br />
Pe n garuh Eks t rak Propolis t e rhadap Sistem<br />
Ke ke balan Se lule r pada Tikus Put ih (Rattus<br />
norvegicus) Jenis Wistar<br />
Ta h eri, Ra h m a n i da n Pou rreza (2005)<br />
m en ya ta kan ba h wa da la m bebera pa pen elitia n<br />
<strong>propolis</strong> da pa t m eres pon s is tem kekeba la n<br />
tu bu h , con toh n ya da pat m en in gka tka n a ktifita s<br />
m a krofa g (Dim ov et al., 1991), m en in gka tkan IL<br />
1 (In terleu kin 1) (Bra tter et al., 1999; Ha vs teen ,<br />
1983; Iva n ovs ka et al., 1995; Ors olic a n d Ba s ic,<br />
2003), IL 2 (Iva n ovs ka et al., 1995; Pa rk et al.,<br />
2004) da n IL 4 (Pa rk et al., 2004). Aktifita s in i<br />
dis eba bka n oleh a dan ya s en ya wa fen olik da la m<br />
<strong>propolis</strong> beru pa fla von oid, vita m in B kom pleks,<br />
vita m in C, vita m in E da n provita m in A ya n g<br />
da pa t m ela pis i s tru ktu r s el s eh in gga tu bu h<br />
m em iliki perta h a n a n terh a da p m ikroorga n is m e<br />
(Krell, 1996). Vita m in C ju ga berpera n da la m<br />
pen in gkata n s is tem kekeba la n ya itu berikata n<br />
den ga n lim fos it ya n g sela n ju tn ya bers a m a -sama<br />
den ga n n eu trofil m ela wa n in feks i (Eich er-<br />
Pru iett, Morill, Blech a , Higgin s , An ders on , a n d<br />
Reddy, 1992).<br />
J u m la h s el da ra h pu tih n orm a l pa da tiku s<br />
pu tih (Rattu s norvegicus ) Stra in Wis ta r jika<br />
diba n din gkan den ga n h a s il pen elitia n m en u ru t<br />
Sm ith & Ma n gkoewidjodjo (1998) a da la h 5-13 x<br />
10 3 s el/ m m 3. Ha l in i da pa t dia rtikan ba h wa<br />
wa la u pu n tida k m em pen ga ru h i s is tem<br />
kekeba la n tu bu h n a m u n ekstra k <strong>propolis</strong> ya n g<br />
m eru pa kan pa n ga n fu n gs ion a l non-nutritive<br />
da pa t m en ja ga kes eh a ta n tu bu h ka ren a da pat<br />
m em perta h a n kan ju m la h sel da ra h pu tih pa da<br />
ba ta s dis tribu s i n orm a l. Ardia n sya h (2005)<br />
m en jela s kan ba h wa pa n ga n fu n gsional<br />
(function al food s ) tela h dia n da lka n s eba ga i<br />
pem elih a ra kes eh a ta n da n kebu ga ra n tu bu h<br />
ba h kan h a ru s da pat m en yem bu h ka n a ta u<br />
m en gh ila n gka n efek n ega tif da ri pen ya kit<br />
terten tu . Pen elitia n ya n g dila ku ka n oleh Za ka ria<br />
dkk. (1999) m en em u ka n ba h wa s a la h s atu<br />
produ k pa n ga n fu n gs ion a l s eperti m in u m a n<br />
ja h e ya n g diberikan pa da m a h a s is wa<br />
m en u n ju kka n a da n ya perba ika n s is tem im u n<br />
(<strong>kekebalan</strong> tubuh).<br />
KESIMPULAN<br />
Ha s il pen elitia n m en u n ju kkan ba h wa<br />
eks tra k <strong>propolis</strong> da pa t m en in gka tka n ju m la h s el<br />
da ra h pu tih s eh in gga berpen ga ru h terh a dap<br />
s is tem kekeba la n s elu ler tiku s pu tih .<br />
Peningkatan kon s en tra s i dos is <strong>propolis</strong> tidak<br />
berh u bu n ga n s eca ra s ign ifika n terh a da p jumlah<br />
s el da ra h pu tih pa da h ewa n coba ka ren a a n ta ra<br />
s el lim fos it da n m on os it m em iliki korela s i ya n g<br />
sama. Pelarut eta n ol tida k berpen ga ru h n ega tif<br />
<strong>terhadap</strong> <strong>sistem</strong> <strong>kekebalan</strong> tubuh.<br />
Dis a ra n ka n a ga r pem beria n ekstra k <strong>propolis</strong><br />
m em a ka i u ji s u bkron ik ya n g dila ku ka n s ela m a<br />
90 h a ri u n tu k m en geta h u i efek-efek s pes ifik<br />
dari bahan bioaktif <strong>terhadap</strong> organ dan biokimia<br />
hewan coba.
DAFTAR PUSTAKA<br />
Ardia n s ya h . 2005. Pangan Tradis ion al s e bagai<br />
Pangan Fungsional. Universitas Tohoku.<br />
Jepang. w w w .Red pel beritaiptek .com .<br />
Diakses tanggal 8 April 2006.<br />
Ba n kova , V. 2000. De t e rm in in g Qualit y In<br />
Propolis Sam ple . J ou rn a l Su m m er<br />
2000. 7 (2).<br />
Bendich , A. 1992. Physiological Role of<br />
An t ioxidants in t h e Immune Sys t e m .<br />
Hu m a n Nu trition Res ea rc h , Hoffm a n n -<br />
LaRoche Inc., Nutley, NJ 07110.<br />
Ba ra ta widja dja , K. G. 1998. Im unologi Das ar.<br />
FKUI. Jakarta.<br />
Bella n ti, A. B. 1993. Im un ologi III. Penerjemah<br />
: A. Sa m ik Wa h a b. Ga dja h Ma da<br />
University Press. Yogyakarta.<br />
Bevila cqu a , M., Bevila cqu a , M., Serra , E.,<br />
Via n ello, A., Ga rrou , E., Spa ra gn a , B.,<br />
Ba ra le, U., a n d Za cca gn a , A. C. 1997.<br />
Nat ural Re s in As s oc iat ion s uc h as<br />
In c e ns e an d Propolis In<br />
Zootechnology. Els evier Scien ce<br />
Publishing. Italy.<br />
Ca rs on , C. F a n d Riley, T. V. 1995.<br />
An t im ic robial Ac t ivit y Of Th e Major<br />
Com pon e nts Of Th e Es s e n t ial Oil Of<br />
Me lale uc a Alt e rn ifora. Journ al of<br />
Applied Bacteriology. 78: 264-269.<br />
Ch ew, B. P a n d Pa rk, J . S. 2004. Carotenoid<br />
Ac t ion on t h e Im m une Re s pons e . The<br />
Am erican S ociety for Nutrition al S ciences<br />
Journal of Nutrition. 134: 257S-261S.<br />
Da rm a n s ja h . 1995. Das ar Toks ikologi;<br />
Hubun gan An t ara He wan Coba De n gan<br />
Manusia. Farm a kologi da n Tera pi.<br />
Fakultas Kedokteran UI. Jakarta.<br />
Di Ca rlo, F. J a n d Oeh m e, F. W. 1992. Animal<br />
Models In Toxicology. Edited by Shayne<br />
Cox Ga d & Ch ris toper P. Ch en gelis .<br />
Marcel Dekker, Inc. New York.<br />
Goldm a n , A. S a n d Pra bh a ka r, B. S. 1993.<br />
Immunology Ove rvie w.<br />
www.gsbs.utmb.edu/microbook/ch001b.<br />
htm. Diakses tanggal 8 April 2006.<br />
Gu yton , A. C. 1990. Fis iologi Man us ia dan<br />
Me kan is m e Pe n yakit . Alih Ba h a s a :<br />
Petru s An dria n to. Edis i ketiga . EGC.<br />
Jakarta.<br />
Ha n a fia h , Kem a s Ali. 1991. Rancangan<br />
Percobaan. Rajawali Pers. Jakarta.<br />
Ha rta n to, B. 2005. Ide n t ifikas i Pars ial Kapang<br />
Pada Ke ju Gouda dan Ke re n t an an n ya<br />
Te rh adap Propolis . Tu ga s Akh ir.<br />
Fakultas Peternakan UNIBRAW. Malang.<br />
Hill, R. 2000. Propolis-Th e Natural An t ibiot ic.<br />
www.Arkson.com/resources/i-<strong>propolis</strong> .<br />
Htm. Diakses tanggal : 24 Juli 2005.<br />
Hou gh ton , P. J a n d Ra m a n , A. 1998.<br />
Laborat ory Handbook for Th e<br />
Frac t ionat ion of Nat ural Extrac t s.<br />
Chapman and Hall. Tokyo.<br />
Krell, R. 1996. Value-Adde d Produc t s From<br />
Be e ke e ping; FAO Agric ult ural Se rvic e s<br />
Bullt e in No. 1 2 4 . Food a n d Agricu ltu re<br />
Orga n iza tion of th e Un ited Na tion s Rom e<br />
1996. www.fao.org/docrep.htm. Dia kses<br />
tanggal : 24 Juli 2005.<br />
Kos a lec, I., Pepeljn ja k, S., Ba km a z, M.,<br />
Kn ezevic, S. V. 2005. Flavonoids<br />
An alays is an d An t im ic robial Ac t ivit y<br />
of Com m e rc ially Available Propolis<br />
Products. Acta Pharm. 55: 423-430.<br />
Lin , C. S. 2001. De part m e n t of Me dic in e .,<br />
Taipe i Me dic al Unive rs it y. Em a il<br />
Songchow@tmu.edu.tw.<br />
www.arkson.com/resources/i<strong>propolis</strong>.htm.<br />
Dia kses ta n gga l 24 J u li<br />
2005.<br />
Lin n em eyer, P. A. 1993. Th e Im m un e System --<br />
An Ove rvie w. A Fa ct Sh eet from th e<br />
Sea ttle Trea tm en t Edu ca tion Project.<br />
w w w .thebod y .com / s tep/ im m une.h tm l<br />
im m uno s y s tem . Dia ks es ta n gga l : 28<br />
Mei 2005.<br />
Lorim er, L. T. 1995. En c yc lope dia of<br />
Knowledge Vol. 7. Grolier Inc. USA.<br />
Ma s a h a ru , I., Yon g Ku n , P. 1998. Preparation<br />
of Wat e r an d Ethanolic Extrac t s of<br />
Propolis an d Evaluat ion of Th e<br />
Preparation. 2 nd In tern a tion a l Electron ic<br />
Con feren ce On Syn th etic Orga n ic<br />
Ch em is try (ESOC-2). UNICAMP, 13081-<br />
970, caixa postal 6177, Campinas. Brazil
Mu rtidjo, A. 1991. Me m e lih ara Le bah Madu.<br />
Kanisius. Yogyakarta.<br />
Na ka m in e, A. 2003. De c larat ion Of<br />
Conformity. By ABX Dia gn os tics .<br />
France.<br />
Nych a s , G.J .E. 1995. Nat ural Antim ic robials<br />
From Plan t s . In Gou ld, G. W. New<br />
Meth ods of Food Pres erva tion . Ch a pm a n<br />
and Hall. London.<br />
La bora toriu m Fa rm a kologi. 2000. Petunjuk<br />
Prakt ikum Farm akologi.<br />
w w w .geocities .com / k uliah_farm / prak tk u<br />
m_farmakologi/hewan_coba.doc. Dia ks es<br />
tanggal : 28 Mei 2005.<br />
Priya m bodo, S. 1995. Pe n ge n dalian Ham a<br />
Tikus Te rpadu. Pen eba r Swa da ya .<br />
Jakarta.<br />
Ra dia ti, L. E. 2002. Penghambatan<br />
Enteropatogen ole h Eks t rak<br />
Diklorom e tan J ah e. Habitat. XIII (2):<br />
ISSN: 0853-5167.<br />
Ra n ta m , F. A. 2003. Me t ode Im un ologi.<br />
Ceta kan Perta m a . Airla n gga Un ivers ity<br />
Press. Surabaya.<br />
Sh a idi, F. a n d M. Na czk. 1995. Food Phe n olic s.<br />
Technomic Co., Inc. Lancaster.<br />
Sm ith , J . B & Ma n gkoewidjojo, S. 1998.<br />
Pe m e lih araan , Pe m biakan dan<br />
Pe n ggun aan He wan Pe rc obaan Di<br />
Dae rah Tropis . Un ivers ita s In don es ia<br />
Press. Jakarta.<br />
Su bowo. 1996. Imunobiologi. Pen erbit<br />
Angkasa. Bandung.<br />
Su m a rs on o, T. 2002. Se put ar Mas alah<br />
Re s is te ns i An t ibiotika. Pikira n Ra kya t.<br />
Bandung.<br />
Ta gglia s a cch i, D. a n d Ca rbon i, G. 1997. Blood<br />
Cells. Tra n s la tion revis ed by Da vid W.<br />
Walker. www.funsci.com. Dia ks es<br />
tanggal : 24 Juli 2005.<br />
Ta h eri, H. R., Ra h m a n i, H. R da n Pou rreza , J .<br />
2005. Hum oral Im m un it y of Broile rs is<br />
Affe c te d by Oil Extrac t e d Propolis<br />
(OEP) in t h e Die t . In ternation al Journ al<br />
of Poultry Science. 4 (6): 414-417.<br />
Ta m a rkin , D. 2006. Wh it e Blood Ce ll. STCC<br />
Foundation Press.<br />
Toda , M., Oku bu , S., Ika gi, H., Su zu ki, T.,<br />
Suzuki Y. a n d Sh im a m u ra , T. 1991. The<br />
Prote c t ive of Te a Again s t In fe c t ion by<br />
Vibrio Ch olera e O1 . Journ al of Letters In<br />
Applied Bacteriol. 70: 109-112.<br />
Topra kci, M.B.S. 2005. Kom pilas i Ke t e ran gan-<br />
Ke t e ran gan Me n ge n ai Propolis.<br />
w w w .z aaba313.com s .ph/ catalog.h tm l.<br />
Diakses tanggal : 9 Mei 2005.<br />
Wa de, C. 2005. Can Be e Propolis Re juve n at e<br />
Th e Im m un e Sys t e m ?<br />
w w w .then aturals hopper.com/buy-beesupplements/article.htm.<br />
Dia kses ta n gga l<br />
: 19 Mei 2005.<br />
Wea ver, B. 1995. In FDA<br />
Bac t e riologic al An alytic al Manual.<br />
8 th e d. AOAC In tern a tion a l.<br />
Gaithersburg.<br />
www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts<br />
/ Tw een_80_W ater.pdf#s earch='tw een%20<br />
80'. Diakses tanggal : 2 April 2006<br />
Weir, D. M. 1990. Aids To Im m un ology. Alih<br />
ba h a s a : Yu liu s E. S. Bin a ru pa Aks a ra .<br />
Jakarta.<br />
Za ka ria , F. R., Nu ra h m a n , Sa n ja ya da n Sa yu th i,<br />
D. 1999. Pe n garuh Kon sum s i J ah e<br />
t e rh adap Pe rlin dun gan Se l Lim fos it<br />
dari Stre s Oxidaif pada Mah as is wa di<br />
Pondok Pe s ant re n Ulil Albab, Ke dun g<br />
Badak, Bogor. Pros id Sem in a r Na s ion a l<br />
Tekn ologi Pa n ga n , PATPI &<br />
MENPANGHOR.