neospora caninum - Ordinevetverona.it

Esami sierologici
All’ inizio dello studio, tutti gli animali in riproduzione dell’allevamento sono
stati analizzati per valutare la sieroprevalenza di Neospora caninum.
Dopodiché, ogni qualvolta si aveva la nascita di un vitello nell’allevamento, si
eseguiva il prima possibile:
1. prelievo di sangue al vitello, prima ancora dell’assunzione di colostro
dalla madre (prelievo precolostrale);
2. prelievo ematico alla madre stessa, per capire se nel frattempo l’animale
potesse aver subito una sieroconversione; 5 vacche hanno infatti subito
una sieroconversione (trasmissione orizzontale).
I prelievi sono stati eseguiti attraverso l’utilizzo di provette vacutainer senza
anticoagulante per permettere la separazione del coagulo dal siero. Nella
vacca il prelievo è stato eseguito dalla vena coccigea, nel vitello invece
attraverso la vena giugulare.
• IFAT
Le analisi con test IFAT, sono state eseguite presso l’Istituto di Malattie
Infettive dell’Università di Parma. Per l’esame si è proceduto in questo modo.
In una piastra a fondo piatto si pongono 290 µl di tampone per fluorescenza
(PBS) per pozzetto. In ogni pozzetto si aggiungono 10 µl di siero in esame
(diluizione 1:30) e dei controlli positivi a 1:300 e un controllo negativo (siero
fetale bovino). Si agita e si trasferiscono con una pipetta 10 µl della soluzione
ottenuta in precedenza, in una nuova piastra (piastra figlia). Si aggiungono
quindi alla piastra figlia 90 µl di PBS, ottenendo così una diluizione del siero
1:300.
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