WBC differentiatie - UZ Leuven

WBC differentiatie 

Critically Appraised Topic 

Kristien Van Pelt 

22 april 2008

Aanvraag WBC differentiatie (bon 3012) 

Sysmex XE-2100 

Staal VOLDOET aan 

validatieregels: 

Negatief





Negatief 

Automatische 

differentiatie



Staal VOLDOET NIET 

aan validatieregels: 

Positief





Positief 

Automatisch uitstrijkje 

CellaVision DM96 

Manuele differentiatie

Percentages

Formule via CellaVision 

◦ Minder juist (Rümke)


◦ Minder juist (Rümke)


◦ Minder juist (Rümke) 

◦ Minder precies (laag aantal cellen, 

interobserver variabiliteit)




interobserver variabiliteit) 

◦ Uitstrijkartefacten





◦ Uitstrijkartefacten 

◦ Langere TAT 

◦ Arbeidsintensief 

◦ Duur (tijd, kennis)





◦ Uitstrijkartefacten 

◦ Langere TAT 

◦ Arbeidsintensief 

◦ Duur (tijd, kennis) 

Automatische WBC 


Mogelijkheden om meer WBC 

differentiaties automatisch te doen 

◦ Extended Differential: 

5DIFF -> IG%+5DIFF 

◦ Smear Scan

IG Master 

DIFF kanaal 

IMI kanaal

Validatie IG master 

volgens BELAC 2-102 Rev 2-2006 

◦ Lineariteit, stabiliteit, kruisreacties, 

interferenties, detectielimiet -> 

Firma (FDA approval) 

◦ Precisie 

◦ Juistheid 

◦ Verificatie van referentiewaarden 

Correlatie tussen toestellen

Precisie: intra run (CV i ) 

Gem IG# 

(XE) 

CV IG# 

(XE) 

Range IG# 

(XE) 

Gem IG% 

(XE) 

CV IG% 

(XE) 

Range IG% 

(XE) 

1 0,01 0,67 0,00 - 0,02 0,2 0,67 0,0 - 0,4 

2 0,04 0,24 0,03 - 0,06 0,4 0,23 0,3 - 0,6 

3 0,11 0,11 0,09 - 0,12 1,8 0,10 1,5 - 2,0 

4 0,16 0,06 0,14 - 0,17 2,7 0,06 2,4 - 2,9 

5 0,56 0,06 0,49 - 0,60 8,0 0,06 7,2 - 8,6 

Gemiddeld: CV i 0,21

Precisie: between run (CV b ) 

Toestel 1 Toestel 2 

IG% IG# IG% IG# 

CV CV CV CV 

Current = 19/9 tem 19/10 Current = 19/9 tem 19/10 

Level 1 0,05 0,06 Level 1 0,05 0,06 

Level 3 0,05 0,05 Level 3 0,05 0,05 

CV CV CV CV 

New = 19/10 tem 3/12 New = 19/10 tem 3/12 

Level 1 0,05 0,07 Level 1 0,05 0,06 

Level 3 0,05 0,05 Level 3 0,04 0,05 

Gemiddeld: 

CV b 0,05 

NEUT% Level 1 0,03 BASO% Level 1 0,03 

CV Level 3 0,02 CV Level 3 0,03 

NEUT# Level 1 0,05 BASO# Level 1 0,05 

CV Level 3 0,01 CV Level 3 0,02

Totale precisie 

CV tot : 0,22 

WBC NEUT EO BASO LYMFO MONO 

Ricos Imprecisie 5.5% 7.0% 10.5% 14% 5.2% 8.9% 

Bias 5.6% 7.0% 19.8% 15.4% 7.4% 13.2% 

Total Error 14.6% 18.4% 37.1% 38.5% 16% 27.9% 

CLIA Total Error +/- 

15% 

Target 

+/- 

3SD 

Target 

+/- 

3SD 

Target 

+/- 

3SD 

Target 

+/- 3SD 

Target 

+/- 

3SD

Juistheid (NCCLS H20-A) 

Selectie stalen (n=120) 

XE 

CellaVision 

10 34 35 31 10 

%IG = 

0,0% 

%IG 0,1 – 

1,0% 

%IG 1,0 – 

2,0% 

%IG 2,0 – 

5,0% 

%IG > 5%

%CV 

Juistheid (NCCLS H20-A) 

Correlatie (n=101) 

10,0 

8,0 

6,0 

4,0 

2,0 

0,0 

0,0 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 

%XE 

R = 0,89

Sensitiviteit 

Sensitiviteit 

Positief = 2% IG (myelo, meta of pro) in een manuele differentiatie 

volgens NCCLS H20-A 

100 

80 

60 

40 

20 

0 

ROC curve 

0 20 40 60 80 100 

100 - specificiteit 

Cut-off 

(%) 

Efficiën 

tie (%) 

Sens 

(%) 

Spec 

(%) 

1,0 61 100 46 

1,7 85 97 81 

1,8 85 93 82 

1,9 86 93 83 

2,0 88 93 86 

2,1 89 90 89 

2,2 88 86 89 

2,3 88 79 92 

3,0 87 59 99

Aanpassing SIS rule 53 -> 72 

◦ Suspect flag IMI kanaal 

◦ IG Master: Cutoff 2,1% ipv 1,0% 

met uitzondering van onco/hemato

Toestel 2 

Correlatie twee toestellen 

Correlatie toestellen IG# 

0,8 

0,6 

0,4 

0,2 

0,0 

0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 

Toestel 1 

N = 30 IG% IG# 

R waarde 0,914 0,976

Referentiewaarden 

#IG (x 10 9 /L) 

%IG 

Fernandes 0,00 – 0,03 0,02 – 0,42% 

Bruegel 0,00 – 0,03 0,0 – 0,5% (man) 

0,0 – 0,4% (vrouw) 

Field < 0,1 < 0,54% 

To do: testen in eigen 

populatie

Mogelijkheden om meer WBC 

differentiaties automatisch te doen 

◦ Extended Differential: 

5DIFF -> IG%+5DIFF 

◦ Smear Scan





Negatief 



Positief 


Automatische 

differentiatie 


Automatische 


Manuele 


Enkelvoudige SIS rules 

◦ 51: Abnormal Diff scattergram 

◦ 52: Left Shift 

◦ 54: Blasts? 

◦ 55: Monocytosis 

◦ 58: Abnormal Lymphocytes 

◦ 59: Abnormal Lymphocytes_Lblasts? 

◦ 60: Atypical Lymphocytes 

◦ 68: Diff% limieten overschreden

SIS rule 51 

Abnormal DIFF scattergram

SIS rule 51 

RU51 

Aantal stalen 454 

Abnormal DIFF 

scattergram 

Abnormale cellen 

blasten > 1% absoluut 5 

relatief 1,10% 

NBL > 1/100 WBC absoluut 4 


IG > of = 2% absoluut 15 


Diagnoses 

Lymfomen absoluut 5 


5/396 = 0,01% >10% buiten D.95 

NEUT EO BASO LYMFO MONO 

R waarde 0,93 0,81 0,27 0,92 0,57

SIS rule 52 

Left Shift 

RU52 









Diagnoses 



4/244 = 0,02% >10% buiten D.95 


R waarde 0,89 0,81 0,29 0,90 0,73

SIS rule 54 

Blasts? 

RU54 









Diagnoses 



6/29 = 21% >10% buiten D.95 


R waarde 0,95 0,63 0,23 0,89 0,67

SIS rule 55 

Monocytosis 

> 1,4 10 9 /L 

RU55 









Diagnoses 



9/535 = 1,6% >10% buiten D.95 


R waarde 0,93 0,86 0,39 0,93 0,56

SIS rule 58 

Abnormal Lymphocytes 

- Absolute lymfocytosis (> 4,5 10 9 /L) 

bij volwassene (> 18 jaar) 

- Suspect Flag “Abnormal 

Lymphocytes” EN Hb > 11,5 g/dl

SIS rule 58 

Abnormal Lymphocytes? 

RU58 









24/505 >10% buiten D.95 

17 met gelyseerde cellen! 

Diagnoses 




R waarde 0,93 0,89 0,36 0,93 0,65

SIS rule 59 

Abnormal 

Lymphocytes_Lblasts? 

8/258 = 3,1% >10% 

buiten D.95 

6 stalen met gelyseerde 

cellen! 

RU59 









68% kinderen 

Diagnoses 




R waarde 0,96 0,88 0,43 0,95 0,46

SIS rule 60 

Atypische lymfocyten 

RU60 







12/509 = 2,4% >10% 

buiten D.95 




Diagnoses 




R waarde 0,94 0,84 0,23 0,94 0,58

SIS rule 68 

NEUT% 95: n=113 

LYMPH% 70: n=219 

MONO% >20: n=566 

EO% >30: n=13 

BASO% >5: n=7 

70/911 = 7% >10% buiten 

D.95 


RU68 









Diagnoses 




R waarde 0,97 0,95 0,52 0,97 0,86

Besluit Smear Scan 

◦ SIS rule 52 levert niets op 

◦ SIS rule 60? 

◦ Zeer hoog aantal vals positieven (92%) 

◦ Correlatie en discordanties = alle vlaggen 

Kennis analyser flags! 

> 1% Blasten 

> 2 NBL/100 WBC 

> 2% IG 

Atypische lymfocyten 

Manuele 

Differentiatie 

Commentaar





Negatief 



Positief 


Automatische 



Manuele 






Negatief 

5DIFF+%IG 



Positief 


15% 

Automatische 



+ 5% 

10% 

Automatische 


Manuele 


5%

Stalen zonder 

formule 

Formule via XE 

35% 

65% 

85% 

10% 

5% 

Formule via XE, 

controle via 

CellaVision 

Formule via 

CellaVision

TO DO 

◦ Opdrijven cut-off SIS rule IG van 

1,0 naar 2,1% 

◦ Nazicht review criteria (schrappen 

left shift, vals positieven, …) 

◦ Toetsen Smear Scan, opleiding 

◦ Voorbereiding Implementatie IG 

Master: verificatie 

referentiewaarden IG, contact 

kliniek

WBC differentiatie - UZ Leuven

Transform your PDFs into Flipbooks and boost your revenue!

Delete template?

Save as template ?