ZOLarium 23 - Ziekenhuis Oost-Limburg

urine-onderzoekDe flowcytometer verricht per uur ongeveer 100analyses en maakt daarbij gebruik van een monstervolumevan 0,8 ml niet-gecentrifugeerde urine.Na mengen en opzuigen vanuit de monsterbuis wordeneerst de impedantieveranderingen gemeten. De impedantiegeeft ons informatie over het volume van departikels in de urine die de meetcel passeert. In functievan hun volume vertragen deze partikels de elektrischestroom, hetgeen als een positieve spanningsstootwordt geregistreerd.Bovendien worden aan de urine 2 fluorescerendekleurstoffen toegevoegd: carbocyanine dat niet-specifiekbindt aan de celmembranen, kernmembranenen mitochondriën, én phenanthridine dat aan RNA enDNA bindt.Na kleuring wordt het urinestaal bestraald met Argonlaserlicht (golflengte van 488 nm). De urinepartikels (cellen,cilinders, kristallen, bacteriën) veroorzaken voorwaartselichtverstrooiing (forward light scatter). Deaanwezige fluorescerende stoffen veroorzaken bovendienfluorescentie, dat een andere golflengte heeft. Eenspeciale spiegel zal beide lichtemissies van mekaar scheiden:de forward light-scatter geeft informatie over degrootte of lengte van de partikels, en de fluorescentiedaarentegen over de celinhoud (kern en cytoplasma).Beide lichtemissies worden via lichtgevoelige detectorenin een elektrisch signaal omgezet.25De verschillende elektrische signalen worden versterkt,en door een microprocessor verwerkt.De resultaten worden weergegeven in scattergrams(combinatie van fluorescentie- en forward scatterparameters),histograms (distributie van rode en witte bloedcellenvolgens grootte) én een resultatenveld.Het labo zal in principe enkel de interpretatie vandeze gegevens aan de clinici doorgeven: aantal rodebloedcellen, witte bloedcellen, epitheelcellen, cilindersen bacteriën per microliter.Wanneer met de flowcytometer per microliter meerdan 25 rode of witte bloedcellen worden geteld, is ersprake van significante hematurie respectievelijk leucocyturie.Deze grenswaarden komen overeen met devroegere grenswaarden van 8 cellen/HPF (high powerfield; d.b. microscopische vergroting factor 400).Voorbeelden van signalen- weergave van de flowtijd ofsignaalbreedte (width; uitgedruktin ch; ch staat voor channel) opde verticale as- weergave van de signaalintensiteitop de horizontale as (stippellijn).