12.05.2013 Views

Embriogênese Somática e Sementes Sintéticas - Laboratório de ...

Embriogênese Somática e Sementes Sintéticas - Laboratório de ...

Embriogênese Somática e Sementes Sintéticas - Laboratório de ...

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

e translúcido <strong>de</strong>nominado <strong>de</strong> tecido embriogenético, constituído por células alongadas e vacuoladas<br />

do tipo suspensor e por células pequenas com citoplasma <strong>de</strong>nso na região do ápice embrionário.<br />

Conhece-se muito pouco acerca da iniciação e <strong>de</strong>senvolvimento da poliembriogênese somática<br />

em coníferas e tres diferentes hipóteses foram sugeridas por Hakman et al. (1987) para explicar a<br />

origem <strong>de</strong>ste processo: 1) embriões somáticos po<strong>de</strong>m se originar <strong>de</strong> células simples ou pequenos<br />

agregados celulares por uma divisão inicial assimétrica que <strong>de</strong>limita a região apical embrionária da<br />

região do suspensor. No caso <strong>de</strong> Picea abies e P. glauca, as divisões celulares <strong>de</strong>siguais nas<br />

camadas epidérmicas e sub-epidérmicas da região do hipocótilo resultam na formação <strong>de</strong> próembriões<br />

(Nagmani et al., 1987); 2) embriões somáticos po<strong>de</strong>m se <strong>de</strong>senvolver a partir <strong>de</strong> células<br />

meristemáticas da região do suspensor, sendo que as iniciais po<strong>de</strong>m se originar por divisão<br />

assimétrica (Hakman et al.,1987; Schuller et al., 1989); 3) embriões somáticos po<strong>de</strong>m se originar por<br />

um mecanismo similar à poliembriogênese por clivagem, com a separação inicial, ocorrendo na<br />

região do ápice embrionário. Este processo foi <strong>de</strong>scrito em culturas <strong>de</strong> embriões somáticos <strong>de</strong> Abies<br />

alba (Schuller et al., 1989), espécies <strong>de</strong> Pinus e Picea (von Arnold & Woodward, 1988).<br />

Fatores que afetam a poliembriogênese somática<br />

A seleção criteriosa do explante é fator crítico para a indução da embriogênese somática em<br />

coniferas. Diferentes tecidos da mesma planta ou tecidos em diferentes estádios <strong>de</strong> <strong>de</strong>senvolvimento<br />

po<strong>de</strong>m originar diferentes respostas in vitro. Em Picea glauca, por exemplo, apenas uma entre várias<br />

épocas <strong>de</strong> coleta <strong>de</strong> cones revelou respostas morfogenéticas (Lu & Thorpe, 1987). Efeitos similares<br />

do estágio <strong>de</strong> <strong>de</strong>senvolvimento foram observados em Pinus lambertiana (Gupta & Durzan, 1986) e<br />

Pinus taeda (Becwar et al., 1990). De maneira geral, em espécies <strong>de</strong> Pinus, embriões zigóticos em<br />

estágio pré-cotiledonar são os melhores explantes para a indução <strong>de</strong> tecidos embriogenéticos,<br />

enquanto que nas espécies <strong>de</strong> Picea, este resultado é obtido com embriões em estágio cotiledonar.<br />

Estes aspectos mostram a importância da época <strong>de</strong> coleta dos explantes e sugerem a existência <strong>de</strong><br />

um estádio <strong>de</strong> <strong>de</strong>senvolvimento em que o explante é altamente responsivo à indução embriogênica.<br />

Em Larix <strong>de</strong>cidua verificou-se o <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> tecidos embriogênicos a partir das regiões<br />

da chalaza e da micrópila do megagametófito em cultura (von A<strong>de</strong>rkas et al., 1987). A indução <strong>de</strong><br />

tecido embriogênico haplói<strong>de</strong> somente é possível durante um curto período <strong>de</strong> <strong>de</strong>senvolvimento do<br />

cone feminino. Este tecido <strong>de</strong>monstrou autotrofia para reguladores <strong>de</strong> crescimento, já que a indução<br />

embriogenética ocorreu em meio <strong>de</strong> cultura <strong>de</strong>sprovido <strong>de</strong> auxinas e citocininas, sugerindo que o<br />

megagametófito po<strong>de</strong>ria suprir os hormônios necessários para a iniciação da embriogênese (von<br />

A<strong>de</strong>rkas et al., 1990).<br />

Em explantes <strong>de</strong> sementes imaturas <strong>de</strong> Pinus lambertiana, a presença do gametófito feminino<br />

po<strong>de</strong> auxiliar no estabelecimento <strong>de</strong> culturas embriogênicas e esta indução é mais intensa quando o<br />

embrião dominante é removido (Gupta & Durzan, 1986). Não se conhece, contudo, se esta<br />

dominância está relacionada com a presença <strong>de</strong> inibidores ou <strong>de</strong> outros fatores.<br />

Em Araucaria angustifolia e em Pinus elliottii a indução <strong>de</strong> linhagens celulares poliembriogênicas<br />

é <strong>de</strong>pen<strong>de</strong>nte do estádio <strong>de</strong> <strong>de</strong>senvolvimento do pró-embrião zigótico, sendo que os complexos<br />

celulares suspensor-embrionários surgem a partir das células do ápice embrionário. Esta indução<br />

ocorre em meios contendo 2,4-D, BAP e KIN e ciclos repetitivos <strong>de</strong> divisão celular foram<br />

estabelecidos, permitindo a cultura massal <strong>de</strong>stas células (Guerra et al., 1993). Na figura 3 são<br />

apresentados os principais estádios <strong>de</strong> <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> um mo<strong>de</strong>lo poliembriogenético em A.<br />

angustifolia e Picea abies.<br />

O emprego <strong>de</strong> embriões zigóticos maduros <strong>de</strong> sementes armazenadas po<strong>de</strong> proporcionar<br />

explantes durante todo o ano. Culturas embriogenéticas <strong>de</strong> Picea glauca (Tremblay, 1990) e <strong>de</strong><br />

Picea mariana (Tautorus et al., 1991) foram iniciadas a partir <strong>de</strong> embriões zigóticos maduros<br />

armazenados por 11 e 13 anos respectivamente. Depois <strong>de</strong> quatro semanas em cultura, os explantes<br />

produziram um exsudato marron na região do hipocótilo e da radícula, bem como apresentavam um<br />

intumescimento dos cotilédones. Tecidos embriogênicos foram observados surgindo na região citada<br />

seis a oito semanas após a inoculação.<br />

Meios <strong>de</strong> cultura e reguladores <strong>de</strong> crescimento

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!