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Embriogênese Somática e Sementes Sintéticas - Laboratório de ...

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Com base nisto, uma hipótese a ser postulada é a <strong>de</strong> que padrões diretos <strong>de</strong> embriogênese<br />

somática seriam o resultado <strong>de</strong> uma ativação <strong>de</strong> células responsivas contendo receptores para<br />

<strong>de</strong>terminado regulador <strong>de</strong> crescimento. Estas células seriam rediferenciadas para novas rotas<br />

morfogenéticas, gerando células-mães embrionárias competentes, que po<strong>de</strong>m originar populações<br />

clonais <strong>de</strong> células embriogenéticas. Padrões indiretos <strong>de</strong> embriogênese somática seriam produto <strong>de</strong><br />

uma <strong>de</strong>sdiferenciação <strong>de</strong> células contendo estes receptores, gerando células calosas. Células<br />

responsivas <strong>de</strong>stes calos po<strong>de</strong>m, por processo <strong>de</strong> indução, adquirir competência embrionária,<br />

gerando populações clonais <strong>de</strong> células embriogenéticas.<br />

De uma maneira geral, a embriogênese somática é induzida por auxinas fortes. Neste caso, uma<br />

célula somática adquire competência para originar uma linhagen <strong>de</strong> células-filhas que irão formar<br />

embriões somáticos. O têrmo célula embriogênica tem sido empregado para <strong>de</strong>signar aquelas<br />

células que já não necessitam mais <strong>de</strong> auxinas para produzir os embriões somáticos (De Jong et al.,<br />

1993). Células em transição entre célula somática e célula embriogênica são chamadas <strong>de</strong> células<br />

competentes (Toonen et al., 1994). A indução embriogenética <strong>de</strong> uma célula somática não é<br />

exclusivamente <strong>de</strong>pen<strong>de</strong>nte do uso <strong>de</strong> reguladores <strong>de</strong> crescimento. Choques térmicos, variações nos<br />

níveis <strong>de</strong> pH e utilização <strong>de</strong> outros produtos químicos po<strong>de</strong>m tambem induzir competência<br />

embriogenética em células somáticas (Toonen et al., 1996).<br />

Fatores que afetam a embriogênese somática<br />

Explante<br />

Em geral, quase todas as partes da planta po<strong>de</strong>m ser usadas na indução da embriogênese<br />

somática: ápices caulinares (Cantliffe et al. 1987; Chee & Cantliffe, 1988), hipocótilos (Halperin,<br />

1966); discos foliares (Sondahl & Sharp, 1977); segmentos foliares (Rabéchault et al., 1970; Ahée et<br />

al., 1981); inflorescências (Chu et al. 1984), raízes (Okamura et al. 1973), entre outros.<br />

Em batata-doce cultivar "White Star", os ápices caulinares são excelentes explantes para<br />

indução da embriogênese somática por apresentarem alta frequência <strong>de</strong> produção <strong>de</strong> calos<br />

embriogênicos (Cantliffe et al., 1987). Uma vantagem adicional <strong>de</strong>ste explante é relaciona-se com a<br />

possível manutenção da i<strong>de</strong>ntida<strong>de</strong> genética do material a ser propagado.<br />

Um dos tecidos com maior competência embriogênica é o tecido epidérmico <strong>de</strong> cotilédones. Na<br />

figura 4 são mostrados os estágios da embriogênese somática em Feijoa sellowiana, uma mirtácea<br />

nativa do planalto <strong>de</strong> Santa Catarina. Nesta figura po<strong>de</strong>-se observar a iniciação dos embriões<br />

somáticos diretamente sobre o tecido epidérmico cotiledonar.<br />

Composição do meio nutritivo<br />

Sais minerais<br />

Meios com alta concentração salina tais como o <strong>de</strong> MS (Murashige & Skoog, 1962), o SH<br />

(Schenk & Hil<strong>de</strong>brandt, 1972), e o B5 (Gamborg et al., 1968) têm sido usados pelos efeitos positivos<br />

no crescimento e <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> embriões somáticos. Amirato & Steward (1971) mostraram que<br />

estruturas pró-embriônicas têm melhor <strong>de</strong>senvolvimento nestes meios quando comparados com o<br />

<strong>de</strong>senvolvimento em meio <strong>de</strong> baixa concentração salina, como o <strong>de</strong> White (White, 1943).<br />

A gran<strong>de</strong> vantagem do meio MS é a presença do nitrogênio sob a forma <strong>de</strong> nitrato <strong>de</strong> amônio<br />

(Ammirato, 1983). A forma pela qual o nitrogênio é adicionado ao meio <strong>de</strong> cultura é <strong>de</strong>terminante no<br />

sucesso da embriogênese somática. Sabe-se que a adição simultânea <strong>de</strong> compostos nitrogenados<br />

na forma reduzida e <strong>de</strong> nitrato têm efeito estimulatório na embriogênese somática. (Halperin &<br />

Wetherell, 1965; Reinert et al., 1967; Amirato, 1983; Gleddie et al., 1983). Nitrogênio na forma<br />

amoniacal é essencial para o <strong>de</strong>senvolvimento do pró-embrião (Halperin & Wetherell, 1965; Kato &<br />

Takeuchi, 1966) e na ausência <strong>de</strong> amônio nâo houve formação <strong>de</strong> embriões em cenoura. Para<br />

Reinert et al. (1967) a quantida<strong>de</strong> <strong>de</strong> nitrogênio no meio é mais importante do que a forma do íon,<br />

observando-se a formação <strong>de</strong> embriões em cultura <strong>de</strong> tecidos <strong>de</strong> cenoura tanto em presença <strong>de</strong><br />

KNO3 quanto <strong>de</strong> NH4NO3 .

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