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Embriogênese Somática e Sementes Sintéticas - Laboratório de ...

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processo (Konar & Nataraja, 1969). Masuda et al. (1981) observaram que sacarose ou maltose foram<br />

os carboidratos mais efetivos na indução <strong>de</strong> embriogênese somática em cenoura, quando<br />

comparados com glucose, manose, rafinose e glucose + frutose.<br />

Substâncias reguladoras <strong>de</strong> crescimento<br />

Atenção tem sido dada ao tipo, concentração e período <strong>de</strong> tempo em que os reguladores <strong>de</strong><br />

crescimento são mantidos na cultura, objetivando minimização da sua concentração e tempo <strong>de</strong><br />

exposição (Ammirato, 1989). As auxinas e citocininas, estas nem sempre necessárias, têm papel<br />

fundamental na embriogênese somática <strong>de</strong> várias espécies <strong>de</strong> plantas. Algumas espécies<br />

necessitam que o meio seja suplementado com ácido giberélico ou ácido abscísico para o<br />

<strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> embriões somáticos, enquanto outras não necessitam <strong>de</strong>sta suplementação<br />

uma vez que o processo <strong>de</strong> indução foi estabelecido.<br />

Auxinas<br />

As auxinas estão envolvidas com a indução e a iniciação <strong>de</strong> embriões somáticos. Tem sido<br />

sugerido que as auxinas são necessárias para a formação <strong>de</strong> agregados embriogênicos a partir <strong>de</strong><br />

células individuais expresando a totipotencia das células competentes (Komamine et al., 1992). Em<br />

muitas espécies, o processo <strong>de</strong> iniciação se verifica ao se cultivar o explante em meio com<br />

concentração relativamente elevada <strong>de</strong> 2,4-D. O <strong>de</strong>senvolvimento subsequente dos embriões<br />

somáticos ocorre após transferência do calo ou suspensão celular para meio com baixa<br />

concentração <strong>de</strong> auxinas, ou <strong>de</strong>sprovido <strong>de</strong>sta <strong>de</strong>las (Halperin & Wetherell, 1964; Reinolds &<br />

Murashige, 1979; Chée & Cantliffe, 1988). Isto ocorre porque após a iniciação, as auxinas,<br />

particularmente o 2,4-D, inibem o <strong>de</strong>senvolvimento subsequente dos embriões. Tem sido sugerido<br />

que a manutenção prolongada das culturas embriogênicas em meio com 2,4-D causa variações<br />

genéticas e epigenéticas que afetam o potencial embriogênico (Caligari & Shohet, 1993). Observouse<br />

em alguns sistemas que os embriões somáticos tornam-se habituados durante períodos<br />

prolongados <strong>de</strong> sub-cultivos em 2,4-D, resultando na perda do potencial <strong>de</strong> maturação (Tautorus et<br />

al., 1991). Em Ipomoea batatas culturas submetidas a longos peródos em 2,4-D per<strong>de</strong>m a<br />

capacida<strong>de</strong> dos embriões converterem em plantas.<br />

O efeito das auxinas no <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> embriões somáticos é primariamente inibitório, e se<br />

manifesta nos estádios subsequentes ao globular. Isto foi <strong>de</strong>monstrado pelo trabalho <strong>de</strong> Halperin e<br />

Wetherell (1964), em cenoura, em culturas mantidas em meio com 1 mg/l <strong>de</strong> 2,4-D. Newcomb &<br />

Wetherell (1970) também verificaram que, na presença <strong>de</strong> 2,4-D, os embriões somáticos se<br />

<strong>de</strong>senvolviam até o estádio <strong>de</strong> pró-embrião. Desenvolvimento posterior para os estádios globular,<br />

cordiforme, maturo e plantas adultas só ocorria em meio <strong>de</strong>sprovido <strong>de</strong> 2,4-D.<br />

Citocininas<br />

As citocininas po<strong>de</strong>m favorecer a produção <strong>de</strong> calo embriogênico (Chée & Cantliffe, 1988), mas,<br />

em algumas famílias, como a Umbelliferae, elas parecem não serem necessárias (Ammirato, 1983).<br />

Schenck & Hil<strong>de</strong>brandt (1972), entretanto, afirmaram que baixas concentrações <strong>de</strong> citocininas são<br />

necessárias para a embriogênese somática na maioria das culturas <strong>de</strong> células <strong>de</strong> dicotiledôneas. Em<br />

suspensão celular <strong>de</strong> soja foi mostrado que a zeatina não foi efetiva, que a benzila<strong>de</strong>nina foi<br />

a<strong>de</strong>quada e que a cinetina teve ótimo efeito na formação <strong>de</strong> embriões somáticos (Phillips & Collin,<br />

1981). Recentemente, Gosukonda et al.(1993) observaram que o thiadizuron apresentou a melhor<br />

resposta para produção <strong>de</strong> embriões somáticos em batata-doce entre as várias citocininas testadas<br />

Ácido Abscísico<br />

O ácido abscísico afeta o <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> embriões somáticos. Fujimura e Komamine (1975)<br />

observaram que embora o número total <strong>de</strong> embriões somáticos em <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong>crescia com<br />

o aumento da concentração <strong>de</strong> ácido abscísico no meio, o número <strong>de</strong> embriões que permaneciam<br />

nos estádios globular e cordiforme não se alterava. Isto indica que todo o processo <strong>de</strong> embriogênese<br />

somática foi inibido e não apenas o <strong>de</strong>senvolvimento dos embriões dos estádios precoce aos<br />

tardios. Concentrações <strong>de</strong> ABA entre 10 -4 - 10 -7 po<strong>de</strong>m favorecer o crescimento, <strong>de</strong>senvolvimento e<br />

produção <strong>de</strong> embriões somáticos normais, evitando a germinação precoce dos mesmos (Ammirato,<br />

1977). Quanto mais cedo se adicionar o ABA no meio <strong>de</strong> cultura, mais efetivo é o seu efeito no

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