PDF-6.7Mb - Instituto Nacional de Saúde Dr. Ricardo Jorge

A referência laboratorial nas
doenças associadas a vectores
Sofia Núncio
Centro de Estudos de Vectores e Doenças Infecciosas Doutor Francisco Cambournac
Instituto Nacional de Saúde Dr. Ricardo Jorge
O CEVDI é um centro de diagnóstico e
investigação científica na área das
doenças infecciosas transmitidas por
vectores e com interesse para a Saúde
Pública

2006/2008
• Laboratórios BSL 2
• Laboratórios de Biologia Molecular e Culturas Celulares
• 2 Laboratórios BSL 3
• Biotério
• Insectário
• Sala de formação/biblioteca
• Pólo do Museu da Saúde
Estruturas

Diagnóstico de Referência, Vigilância epidemiológica, Formação & Investigação
•Ricketsioses
•Febre Q
•Anaplasmoses
•Ehrlichioses
•Bartoneloses
•Arboviroses
Flavivírus:
West Nile
Dengue
Febre Amarela
Encefalite Transmitida por Carraças
Dhori
Thogoto
Toscana
Chikungunya
•Hantaviroses
•Borrelioses
•Tularémia
•Coriomeningite
Linfocitária
5
DIAGNÓSTICO
Apoio à comunidade respondendo às solicitações de
diagnóstico laboratorial humano no âmbito de
doenças associadas a vectores

América do Norte
Europa ocidental
Europa de leste e
Ásia
Ixodes scapularis
B. borrelia s.s.
B. andersonii
B. bissettii
Ixodes ricinus
B. borrelia s.s.
B. garinii
B. afzelii
B. valaisiana
B. lusitaniae
B. spielmani
Ixodes persulcatus
B. garinii
B. afzelii
B. valaisiana
China,
Nepal,
Tailândia
B. tanukii
B. sinica
Japão
B. garinii
B. afzelii
B. japonica
B. tanukii
B. turdi
B. valaisiana
DIAGNÓSTICO HUMANO
Métodos Indirectos
IFA
ELISA
Imunoblot, Imunoblot rec
IHA
Métodos Directos
Cultura
Detecção de ácidos nucleicos
Genotipagem

Laboratório de referência
1. Apoiar o diagnóstico clínico de infecções transmitidas por
vectores
2. Apoiar laboratórios públicos e privados que realizem análises
clínicas nesta área
3. Manter projectos de I&D e de vigilância epidemiológica
4. Disponibilizar formação interna e externa
5. Divulgação dos resultados e informações relevantes
6. Assessoria técnica a decisores e autoridades de saúde
Função referência
1. Apoiar o diagnóstico clínico de
infecções transmitidas por
vectores
Implementado
• 35 parâmetros analíticos
• Adaptação dos antigénios e
valores de referência
– caso de borrélias e rickettsias
• Validação de novos métodos
– immunoblot para detecção de
anticorpos contra Borrelia
lusitaniae
– Isolamento e detecção de ácidos
nucleicos de arbovírus e
rickettsias

Função referência
2. Apoiar laboratórios públicos e
privados que realizem análises
clínicas nesta área
Implementado
• Biobancos
– Vírus, bactérias, DNA, RNA,
Artrópodes e Soros
– autóctones e de referência,
adquiridos ATCC ou cedidos
por laboratórios
internacionais de referência
Função referência
2. Apoiar laboratórios públicos e
privados que realizem análises
clínicas nesta área
Implementado
• Colaborar na organização de
programas de controlo de
qualidade nacionais
• Disponibilização de materiais,
métodos e valores de referência
para outros laboratórios
– Comparação interlaboratorial
de resultados
• Disponibilização de técnicas de
maior complexidade
(microbiológicas, imunológicas e
biologia molecular)

Função referência
Implementado
• Referência no Isolamento: • Actualmente é o único
laboratório em Portugal a
realizar o isolamento de alguns
dos agentes mencionado.
– importante para
caracterização e identificação
dos agentes e das diferentes
estirpes. Permite a realização
de outros testes, como testes
de resistência a antibióticos.
Função referência
• Referência na imunologia:
• Referência na biologia
molecular:
Implementado
• Técnicas “gold standard”
padronizadas e estabelecidos os
limiares de positividades com
base no estudo da população
Portuguesa e utilizando
antigénios autóctones
• Único laboratório a identificar
molecularmente alguns dos
agentes referidos (por PCR e
sequenciação)

Função referência
2. Apoiar laboratórios públicos e
privados que realizem análises
clínicas nesta área
Implementado
• Consultadoria técnica
– Análise de casos
– Elaboração de guidelines
(fluxogramas, protocolos e
instruções de trabalho)
– Recurso aos laboratórios
internacionais de referência
Parcerias e colaborações com instituições
nacionais e internacionais
• The Johns Hopkins Medical
Institutions, EUA
• Universidade do Texas, EUA
• Centers for Diseases Control and
Prevention, EUA
• Instituto Robert Koch, Alemanha
• Instituto de Zoologia, Suíça
• Instituto Carlos III, Espanha
• …
• Direcção Geral de Saúde
• Faculdade de Ciências da Universidade
de Lisboa
• Departamento de Patologia da
Universidade do Texas, Galveston,
Texas. USA
• Instituto de Medicina Molecular
• Laboratório Nacional de Investigação
Veterinária
• Instituto de Meteorologia

Função referência
3. Manter projectos de I&D e de
vigilância epidemiológica
Implementado
• Mosquitos e arbovírus
(REVIVE), ixodídeos,
rickettsias, borrélias, coxiella e
francisella
Projectos em curso
1. Estudo e Vigilância de Infecções causadas por bactérias da Ordem Rickettsiales
2. Borrelia lusitaniae and Lyme borreliosis: Contribution to the study of bacterial an emergent
zoonosis with impact in public health.
3. Hantavírus e Arenavírus. Vigilância no vector/reservatório e Diagnóstico serológico e
molecular humano.
4. Arbovírus. Vigilância no vector/reservatório e Diagnóstico serológico e molecular humano
5. Programa Nacional de Vigilância de Vectores Culicídeos (REVIVE)
6. Doenças associadas a vectores em Portugal. Qual o papel desempenhado por Ornithodoros
erraticus? (FCT)
7. Estudo das Bartonelloses no Homem e Reservatórios/ Vectores
8. Q Fever in Portugal. Coxiella burnetii heterogeneity, antimicrobial susceptibility and host
genetic immune variation
9. Environmental Determinants of the Changing Dynamics of European Tick-borne Disease
systems (FCT)
10. Compreensão dos factores que promovem a prevalência de doenças infecciosas em aves
limícolas migradoras (FCT)
11. Artrópodes e Saúde Pública
12. As aves e os agentes transmitidos por ixodídeos

Função referência
4. Disponibilizar formação interna
e externa
Implementado
• Workshops
• Palestras
• Cursos
• Estágios e Guidelines
– Ex. Captura e identificação de
artrópodes hematófagos; Que
tipo e como enviar amostras
para o laboratório
Função referência
5. Divulgação dos resultados e
informações relevantes
Implementado
• Elaboração de projectos e
protocolos, uni ou pluri
institucionais.
• Apoio de teses para obtenção de
grau académico
• Publicação de artigos em jornais da
especialidade e de divulgação geral
relacionados com o trabalho do
laboratório de referência
• Apresentação de resultados em
reuniões e congressos
• Colocação de sequências genómicas
em bases de dados abertas a
consulta

Função referência
6. Assessoria técnica a decisores e
autoridades de saúde
Implementado
• Identificação e avaliação de problemas
de Saúde Pública na área de actuação
do CEVDI.
• Definição de metodologias específicas
para cada uma das áreas problema
estudadas neste Centro.
• Guidelines para procedimento
laboratorial, caracterização de casos e
prevenção
– West Nile, Dengue, Rickettsias,
– Estudo de alguns agentes
potencialmente susceptíveis de
serem utilizados em
Bioterrorismo (Franciscella
tularensis, hantavirus, Yersinia
pestis e Rickettsia prowazekii).
Problemas
• Mudança de instalações
• Acreditação dos parâmetros analíticos – faseada e
morosa
• Falta de pessoal experiente, diferenciado e fixo
• Limitação da actualização da formação dos recursos
humanos

• Investir
Soluções
– Na formação de recursos humanos (externo e interno)
– Implementação do programa de qualidade e segurança
(acreditação, calibração, etc.)
– Incrementar a colaboração com outros laboratórios
públicos e privados para distribuição de manuais e
materiais de referência actualizados
– Continuar a participar em programas de controlo de
qualidade
RESULTADOS ESPERADOS
Ganhos
em
Saúde

Centro de Estudos de Vectores e Doenças Infecciosas Doutor Francisco Cambournac /
Unidade de Referência e Vigilância Epidemiológica /
Departamento de Doenças Infecciosas