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Universidade Federal Rural de Pernambuco<br />

Programa de Pós-Graduação em Agronomia<br />

Área de Concentração em Melhoramento Genético de Plantas<br />

Diversidade e estrutura genética de populações de<br />

Mangabeira (Hancornia speciosa Gomes)<br />

na Zona da Mata de Pernambuco<br />

Georgia Vilela Martins<br />

Orientador: Prof. Dr. Edson Ferreira da Silva<br />

Co-orientador: Dr. Ildo Eliezer Lederman


Roteiro de apresentação<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

Introdução<br />

Justificativa<br />

Objetivos<br />

Material e métodos<br />

Resultados esperados<br />

Cronograma<br />

Orçamento


Introdução<br />

Classificação botânica<br />

Família Apocinaceae<br />

Genero Hancornia<br />

Espécie Hancornia speciosa Gomes.<br />

A mangabeira é uma espécie nativa do Brasil.<br />

Típica de tabuleiros costeiros, baixadas litorâneas e cerrados


Introdução<br />

Região Nordeste<br />

Medicina popular<br />

Fonte de renda<br />

<br />

<br />

Látex, casca e raízes<br />

Frutos


Introdução<br />

Mangabas<br />

Frutos com ampla aceitação no mercado<br />

(Sorvetes, sucos, polpas, além de xaropes e vinagre).<br />

<br />

Segundo Silva Junior (2006) o processamento só não é maior<br />

por que a produção não é suficiente.<br />

Exploração através de extrativismo em pomares nativos


Justificativa<br />

Situação das mangabeiras em Pernambuco<br />

Degradação das áreas nativas<br />

<br />

Atividade antóropica<br />

Redução das populações naturais<br />

<br />

Erosão genética


Justificativa<br />

Em Pernambuco<br />

Silva Junior et al. (2008) mapearam 11 populações de<br />

mangabeira.<br />

Sete na mata sul e quatro na mata norte


Justificativa<br />

Degradação


Justificativa<br />

Aspecto socioeconômico<br />

Fonte de renda catadoras<br />

Potencial para agricultura familiar<br />

• Ministério do Desenvolvimento Agrário (MDA) prevê a<br />

inserção tecnológica da cultura da mangaba, com a multiplicação<br />

de pomares nos assentamentos da região litorânea do Nordeste<br />

(EMATER, 2006).


Introdução<br />

Importância para a fruticultura tropical<br />

Potencial de expansão para novos mercados como Sul e<br />

Sudeste de país (Ferreira, 2006).<br />

Está entre as dez espécies selecionadas como de altíssima<br />

prioridade pelo programa Plantas do Futuro do CNPq/World<br />

Bank/GEF/MMA/Probio, com maior potencial de uso<br />

imediato entre as fruteiras nativas da região Nordeste.


Justificativa<br />

Recursos genéticos desconhecidos<br />

<br />

Necessita-se de conservação, caracterização e pesquisas para a<br />

utilização e aproveitamento do potencial da espécie.<br />

Preservação das populações naturais<br />

<br />

<br />

Fontes de germoplasma;<br />

Unidades para a conservação.


Justificativa<br />

A máxima quantidade dos recursos genéticos é fundamental<br />

para a preservação de uma espécie (Moran e Hopper, 1987 )<br />

Programas aproveitamento e conservação da espécie<br />

é essencial o conhecimento da variabilidade genética existente<br />

nas populações.


Justificativa<br />

Estudos de diversidade e estrutura genética<br />

Quantificar a variabilidade genética entre e dentro e entre<br />

populações.<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

Frequências alélicas<br />

Heterozigosidade<br />

Endogamia<br />

Número de alelos por locos<br />

Taxa de fluxo gênico<br />

Tamanho efetivo


Justificativa<br />

Estrutura genética<br />

É a distribuição da variabilidade genética entre e dentro<br />

de populações.<br />

Fundamenta-se no teorema de Hardy-Weinberg.


Justificativa<br />

Marcadores bioquímicos<br />

<br />

<br />

Isoenzimas<br />

co-dominantes<br />

Muito utilizados para análise de diversidade genética em<br />

populações naturais<br />

Eletroforese revelação das bandas análise de polimorfismo


Objetivo Geral<br />

Caracterizar a variabilidade genética de populações de<br />

mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco visando à<br />

preservação desses recursos genéticos.


Objetivos Específicos<br />

Analisar a divergência genética entre e dentro de 11<br />

populações de mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco;<br />

Estimar os níveis de endogamia das populações de<br />

mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco;<br />

<br />

Avaliar a diversidade genética nas populações remanescentes<br />

de mangabeira no Estado de Pernambuco.<br />

<br />

Propor estratégias adequadas para a conservação de tais<br />

recursos genéticos.


Material e métodos<br />

Coleta<br />

• Tecido foliar<br />

• Identificação dos indivíduos<br />

utilizando o GPS<br />

•Armazenamento do material a<br />

-20 °C<br />

11 populações naturais em PE<br />

Fonte: Rev Bras. Ciên. Agr. v.3, n.2, p.116-120, abr.-jun., 2008


Material e métodos<br />

Extração e eletroforese<br />

Extração das enzimas<br />

Maceração 300mg tecido foliar<br />

1ml tampão extrator (n° 1 Alfenas et al., 1998)<br />

Eletroforese horizontal gel de amido (13%)<br />

Condições de corrida<br />

200- 260 V<br />

15-20 mA<br />

6:00-6:30 h


Material e métodos<br />

Sistemas Eletroforese tampão horizontal gel/eletrodo<br />

TC (Tris Citrato, pH 7,5), TCB (Tris Citrato Borato, pH 7,5) e<br />

LB (Lítio Borato, pH 8,5)


Material e métodos<br />

Identificação dos sistemas isoenzimáticos<br />

<br />

<br />

Corantes específicos<br />

Obtenção bandas visíveis a olho nu<br />

16 sistemas isoenzimáticos<br />

GDH, ACP, SOD, LAP, POX, ADH, CAT, MDH, EST, GOT, GTDH,<br />

AKP, ALA, PGI, PGM e ACO.


Material e métodos<br />

Análise dos padrões de bandas<br />

Fonte: Sci. For., Piracicaba, v. 36, n. 77, p. 63-72, mar. 2008


Materiais e métodos<br />

Análise dos dados<br />

Variabilidade genética<br />

Freqüências alélicas<br />

Heterozigose esperada (He) e Heterozigose observada (Ho)<br />

Hˆ<br />

Hˆ<br />

e<br />

o<br />

=<br />

=<br />

1<br />

1<br />

−<br />

−<br />

m<br />

∑<br />

i = 1<br />

m<br />

∑<br />

i = 1<br />

pˆ<br />

P<br />

2<br />

i<br />

ii<br />

em que:<br />

He: diversidade esperada<br />

Ho: diversidade observada<br />

m: número de alelos<br />

P ii : freqüência observada de homozigotos para o alelo i<br />

p i : freqüência do alelo i


Materiais e métodos<br />

<br />

Porcentagem de locos polimórficos (P)<br />

<br />

Número médio de alelos por loco (Â)


Materiais e métodos<br />

Índice de fixação alélica<br />

H = H +<br />

T<br />

S<br />

D<br />

ST<br />

Onde,<br />

Ho – estimativa da heterozigose observada<br />

He – estimativa da heterozigose esperada


F<br />

ˆ<br />

⎜⎛<br />

Fˆ<br />

− 0⎟⎞<br />

/ σˆ<br />

F<br />

⎝ ⎠<br />

Material e métodos<br />

Estrutura genética<br />

Fˆ<br />

Estatística de Wright<br />

FIT – índice de fixação alélica para o conjunto das populações;<br />

FIS - índice médio de fixação alélica dentro das populações;<br />

FST - divergência genética entre populações.


Material e métodos<br />

Por meio do Biosys-l será obtida uma matriz de<br />

distância/similaridade genéticas e um representação gráfica da<br />

análise de agrupamento através de um dendrograma-UPGMA.<br />

Dendrograma esquemático<br />

Fonte: Sci. For., Piracicaba, v. 36, n. 77, p. 63-72, mar. 2008


Material e métodos<br />

<br />

Para estimar o fluxo gênico (N m ) entre as populações será<br />

utilizada a forma indireta, segundo o modelo proposto por<br />

Crow e Aoki (1984)<br />

Nm<br />

1<br />

⎡<br />

⎛<br />

⎞ ⎤<br />

⎢⎜<br />

1<br />

= ( )<br />

⎟ −1<br />

⎥<br />

4α<br />

⎢<br />

ˆ<br />

⎣⎝<br />

F ST ⎠ ⎥⎦<br />

N m = número de migrantes por geração<br />

α= (n / (n-1)) 2<br />

n= número de populações<br />

FST = divergência genética entre populações, que será calculado para a<br />

combinação das populações duas a duas utilizando-se também o programa<br />

BIOSYS 1.


Resultados esperados<br />

• Espera-se ao final desse projeto, divulgar estudos sobre a<br />

variabildade e estrutura genética das populações de<br />

mangabeira do Estado de Pernambuco, disponibilizar<br />

informações sobre riscos e/ou cuidados para com a erosão<br />

genética nessa espécie visando dar subsídio para se<br />

estabelecer estratégias de coservação dos recursos genético da<br />

espécie.<br />

• Divulgar, pelo menos um, artigo científico em periódico<br />

indexado –A - qualis Capes ou de circulação internacional.


Cronograma<br />

Atividades 2009 2010<br />

Adequação do laboratório<br />

1º<br />

sem.<br />

x<br />

2º<br />

sem.<br />

1º<br />

sem.<br />

2º<br />

sem.<br />

Aquisição de reagentes<br />

x<br />

Adequação do protocolo p/ eletroforese em gel<br />

de amido<br />

x<br />

x<br />

Teste de sistemas isoenzimáticos x x<br />

Coleta de materiais p/ eletroforese e obtenção x x<br />

dos dados<br />

Tabulação dos dados x x x<br />

Apresentação de resultados parciais em<br />

x<br />

x<br />

congresso<br />

Analise dos dados x x<br />

Redação de trabalhos científicos e de relatório<br />

final<br />

Defesa de dissertação<br />

x<br />

x


Orçamento<br />

Descrição Quantidade Valor<br />

N-(3 Aminopropyl – Morpholine) Cod. Sigma: 9028 500ml 958,00<br />

NAD Cod. Sigma N-7004 5g 1.443,00<br />

Tris Base Cod. Sigma: T-1503 – VETEC 1Kg 666,00<br />

α-Naftil Acetato Cod. Sigma: N-8505 25g 1.008,00<br />

Isocitric Acid, Na 3,<br />

Cod. Sigma: I-1252 5g 973,00<br />

α-Naftil Fosfato Ácido de Sódio, Cod. Sigma: N-7000 10g 725,00<br />

Fast Black K-Salt, Cod. Sigma: F-7253 25g 142,00<br />

Fast Garnet GBC Salt, Cod. Sigma: F-8761 5g 615,00<br />

MTT, Cod. Sigma: M-2128 3g 1.476,00<br />

L-Malic Acid, Na, Salt Cod. Sigma: M-1125 25g 518,00<br />

PMS, Cod. Sigma: P-9625 5g 853,00<br />

Ferrocianato de Potássio Cod. Sigma: P-9387 100g 142,00<br />

PVP, Cod. Sigma: PVP-40 100g 296,00<br />

Sacarose – VETEC 500g 9,70<br />

NADP + , Na 2<br />

Cod. Sigma: N-0505 2g 3.458,00<br />

Tris Citrato de Sódio Trisódico – VETEC 500g 14,10<br />

Ácido cítrico – VETEC 500g 12,50<br />

NaOH- VETEC 500g 14,80<br />

Fast Blue BB Salt 80%- Sigma 25g 1.038,00<br />

Ácido indobultírico 5g 60,20<br />

Valor total do Projeto 19.914,90


Apoio


Fˆ<br />

Georgia Vilela Martins Mestranda em<br />

Melhoramento Genético de Plantas<br />

georgiavm@gmail.com

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