EMBRIOGÊNESE SOMÁTICA, SUSPENSÕES CELULARES E ...

CRIOCONSERVAÇÃO DE SUSPENSÕES CELULARES
1. Concentrar a suspensão 3 a 4 vezes;
2. Agregar gradualmente um volume igual de solução crioprotetora;
-DMSO: 5 a 10%
-Glicerol, Prolina, Glicose (1 a 2 M)
-Sacarose e Manitol
3. Dispensar em ampolas de polietileno de 2 ml;
4. Congelar até - 40 o C ou - 70 o C a uma velocidade de congelamento de 1-
2 o C/min;
5. Transferir para N líquido a – 196 0 C;
6. Descongelamento da ampola em água a 37 0 C;
7. Viabilidade depende:
-Tipo de célula e estado fisiológico, tipo do crioprotetor,
velocidade de congelamento, temperatura final de congelamento,
temperatura de armazenamento, processo de descongelamento.
BIORREATORES
Os biorreatores foram incialmente utilizados para a
micropropagação nos EUA, Japão, Taiwan, Coreia, Cuba,
Costa Rica, Holanda, Espanha, Belgica e França (Ziv,
2000);
Propagação de plantas ornamentais, bulbosas, abacaxi,
batata, café, cana de açúcar, florestais, ...;
Redução no custo por propágulo de
U$ 0,17 para U$ 0,06-0,07 (Ziv, 2000);
Um dos maiores problemas da propagação em larga escala
via esta tecnologia é a contaminação;
APLICAÇÕES DAS SUSPENSÕES CELULARES
1. Estudos sobre o ciclo celular
a. Tempo e distribuição das diferentes fases
b. Sincronia ou assincronia
2. Índices de atividade celular e pontos de controle do ciclo celular
3. Fitohormonios e regulação do ciclo celular
- Auxinas: transição entre as fases G1 e S;
- Citocininas: transição entre as fases G2 e M
4. Estudos fisiológicos e bioquímicos
4.1. Absorção de nutrientes
4.2. Eventos metabólicos em suspensões celulares
- Vinca rosea
- Taxus brevifolia
5. Indução e isolamento de mutantes
- Toxinas de agentes fitopatogênicos
- Altas concentrações de sais
- Estresses bióticos e abióticos
6. Embriogênese Somática
Four kinds of bioreactor which might be used for micropropagation
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