12.04.2013 Views

rezumat RO pt CD.pdf

rezumat RO pt CD.pdf

rezumat RO pt CD.pdf

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

Obţinerea de biosurfactanţi şi utilizarea lor în protecţia mediului şi a culturilor horticole<br />

făcut prin cultivarea coloniilor bacteriene izolate din sol şi apă în mediul MSM cu zaharoză (Wilson<br />

şi Zajic, 1985) şi în mediul MSM în care zaharoza a fost înlocuită cu ulei uzat 3%. La sfârşitul<br />

perioadei de incubare de 7 zile la 28 0 C, s-a examinat intensitatea creşterii bacteriilor, aspectul<br />

peliculei de ţiţei şi formarea de emulsii, acestea fiind principalele efecte prin care s-ar demonstra că<br />

bacteriile testate ar produce substanţe tensioactive ce permit formarea de emulsii stabile. Dintre<br />

noile izolate bacteriene, doar 28 au fost capabile de a forma emulsii în mediul testat. Studiile s-au<br />

concentrat asupra bacteriilor Gram-pozitive, aparţinând genului Bacillus, scopul nostru fiind de a<br />

identifica noi tulpini bacteriene capabile de a produce compuşi tensioactivi şi să fie sigure pentru<br />

mediu şi sănătatea omului. De aceea, din cele 80 noi izolate au fost selectate 18 tulpini<br />

Gram-pozitive, dintre care doar 10 au manifestat capacitatea de a produce biosurfactanţi.<br />

Pentru a limita şi mai mult numărul de tulpini bacteriene care să fie utilizate în experimentele<br />

ulterioare, cele 10 izolate au fost testate şi în privinţa activităţii antagoniste faţă de fitopatogenul<br />

Alternaria tenuis, evidenţiindu-se fa<strong>pt</strong>ul că doar două tulpini au prezentat o activitate inhibitoare<br />

foarte clară. Aceste tulpini au fost notate B1 (tulpină izolată din sol poluat cu hidrocarburi) şi B2<br />

(tulpină izolată din sol, din zona Techirghiol), ele fiind utilizate în experimente de identificare şi<br />

caracterizare a proprietăţilor utile.<br />

Pentru studii comparative, mai ales în privinţa identificării, s-a utilizat şi o tulpină de bacili<br />

Gram-negativi, izolată din apă de mare, capabilă de a produce substanţe tensioactive. Această<br />

tulpină, pe baza unor teste preliminare de identificare, a fost identificată ca aparţinând genului<br />

Pseudomonas. Identificarea izolatelor bacteriene s-a făcut prin utilizarea unei abordări polifazice,<br />

pornind de la metode microbiologice clasice până la tehnici moleculare, moderne:<br />

1. Evidenţierea particularităţilor bacteriilor izolate şi dezvoltate pe medii solide, de geloză, prin<br />

coloraţia Gram;<br />

2. Identificarea tulpinilor bacteriene prin utilizarea sistemului BIOLOG, bazat pe reacţii<br />

chimice metabolice de reducere a tetrazoliului, folosind microplăcile Biolog GP2 şi GN2,<br />

pentru bacterii Gram-pozitive şi respectiv, Gram-negative;<br />

3. Analizarea comunităţilor microbiene din probele naturale de sol şi apă prin tehnica FISH, o<br />

tehnică moleculară de hibridizare in situ.<br />

4. Caracterizarea noilor izolate bacteriene prin tehnici moleculare bazate pe:<br />

Izolarea ADN-ului cromozomal bacterian prin folosirea kitului Wizard Genomic DNA<br />

Purification Promega şi prin metoda Hopwood şi colab. (1985) ada<strong>pt</strong>ată;<br />

Verificarea electroforetică a ADN-ului în gel de agaroză;<br />

6

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!