2011 - USAMV Cluj-Napoca

Dr. Duma Mihaela Teză de doctorat 2011
Studiul a avut în vedere testele de laborator la care au fost supuse probele de creier
de ovine pentru supravegherea şi/sau monitorizarea formelor de encefalopatii
spongiforme transmisibile la rumegătoarele mici, în judetul Cluj între anii 2004-2010.
Pe parcursul anilor luaţi în studiu a fost examinat un număr total de 1540 ovine, cu
respectarea grupelor „ţintă” stabilite de prevederile legislaţiei referitoare la EST.
Astfel, un număr de 610 probe au provenit de la ovine moarte, 594 probe de la
ovine sacrificate de urgenţă (în această categorie înscriindu-se şi ovinele sacrificate în
scop de confirmare de diagnostic sau ca urmare a necesităţii eliminării din efectiv, cum
este cazul celor cu diagnostic de epididimită infecţioasa, maedi-visna), iar un număr de
336 probe au provenit de la ovine clinic sănătoase sacrificate pentru consum uman
(sacrificare tradiţională pentru consum familial).
Urmărind precizările tehnice ale Programului pentru eradicarea şi monitorizarea
encefalopatiilor spongiforme transmisibile, în cazul probelor de creier recoltate de la
animalele moarte şi de la animalele sacrificate de urgenţă (cu excepţia celor improprii
procesării histologice) s-a efectuat atât screening-ul rapid, cât şi examenul histologic,
conform procedurii specifice.
Screening-ul rapid s-a făcut utilizând metoda BIO-RAD TeSeE, metodă validată în
laboratorul de histopatologie al LSVSA Cluj şi acreditată de către Organismul Naţional de
Acreditare din România (RENAR.). Este o metodă imunoenzimatică ce utilizează 2 anticorpi
monoclonali şi permite determinarea calitativă a proteinei anormale prionice PrP res
rezistentă la proteinaza K, în ţesutul nervos central, după denaturarea şi concentrarea
proteinelor.
Histopatologic, pentru fiecare probă s-au examinat în total câte 20 de secţiuni din
bulb rahidian, protuberanţă anullară, mezencefal cu zona de colliculus anterior, cerebel,
cortex cerebral şi măduva rahidiană din zona cervicală, procesate prin tehnica la parafină
şi colorate Hematoxilină Eozină.
Astfel, din totalul de 1540 probe de creier supuse examinarii prin teste rapide, un
număr total de 541 au fost supuse şi examenului histopatologic pentru evidenţierea
leziunilor caracteristice scrapiei, după cum urmează: 330 probe de creier prelevate de la
cadavre (ovine moarte în ferme, gospodăriile populaţiei, pe păşune, în timpul
transportului, în abator, sau în cazul unor accidente, indiferent de natura acestora), 208
[252]