Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
jästkoloni och inkuberas vid 25-30 °C, 2 dygn. Vid positiv assimilation<br />
ändras substratets färg från grön till blå (se bilaga 3:17).<br />
Speciella tester för C. neoformans<br />
Kryptokockkolonin är vitbeige, ofta slemmig p.g.a. kapseln. Äldre<br />
(1 vecka) kolonier blir bruna. Alla kryptokocker är icke-fermentativa<br />
aerober.<br />
Fenoloxidasaktivitet, d.v.s. bildningen av melaninliknande pigment (ortooch<br />
parafenoler) används för snabb preliminär identifiering av C.<br />
neoformans. Många olika substrat kan användas för att påvisa<br />
melaninbildning, t.ex. dopamin och dihydroxyfenylalanin (DOPA).<br />
Förmåga att bilda bruna kolonier på dessa substrat är tecken på förekomst<br />
av fenoloxidas (bilaga 3:10).<br />
Agarplattor med DOPA-medium inokuleras med misstänkt koloni<br />
C. neoformans och inkuberas vid 20-30 °C i minst 3 dagar. C. neoformans<br />
framträder som mörkbruna till svarta kolonier. Positiv och negativ<br />
kontroll odlas på varje platta (bilaga 4).<br />
Ureahydrolys (bilaga 3:22): Ureasbildning är ett karakteristikum, som är<br />
användbart för att identifiera kryptokocker och flera andra basidiomycetjästarter.<br />
Alla Rhodotorula och de flesta Trichosporon-arter bildar också<br />
ureas. Mediet är Christensens ureaagar som även används för bakterier.<br />
Ett rör med ureamedium inokuleras med en ögla jästmaterial. Det är<br />
lämpligt att lägga till en positiv och negativ kontroll (bilaga 4). Rören<br />
inkuberas vid 25-30 °C. En rosa färg uppträder efter 2-5 dagar vid positiv<br />
reaktion p.g.a. alkaliskt pH genom ammoniakbildning.<br />
Diagnostiska kits<br />
Med den ökande kunskapen om att svampars genus- och speciestillhörighet<br />
också ger relativt säker terapeutisk vägledning har ett stort<br />
antal produkter för typning av jästisolat utvecklats och saluförts. De bygger<br />
oftast på identifiering av karakteristisk enzymbildning, vilket ibland kräver<br />
induktion på specifika medier. Stor följsamhet till producentens anvisningar<br />
om inokulat och inkuberingsförhållande krävs i allmänhet för goda resultat.<br />
Exempel på kits är ID32C och API20 Caux (bägge Bio Mérieux). På<br />
svenska mykologlaboratorier används sådana huvudsakligen för att komma<br />
vidare med atypiska isolat. Resultaten bör verifieras med mikromorfologi<br />
och andra metoder.<br />
89
Change language