Test dit eget DNA med PCR

More documents

Recommendations

Info

Del 4 – Gelelektroforese Materialer og reagenser Støbt gel Jeres rør med PCR-produkt (ét pr. elev) 1 nyt PCR rør pr. elev 30 µL 2X Loading buffer pr. hold Pipette + spidser Fremgangsmåde 1. Gelen dækkes med 1X TAE buffer (elektroforesebuffer) 2. Fra PCR røret overføres 15 µL til et nyt PCR rør (HUSK at skrive nr. på røret). 3. Der tilsættes 15 µL loading buffer til det nye PCR rør. Bufferen vil falde til bunds, så søg for at blande. 4. En underviser tilsætter 6 µL DNA-ladder som demonstration af fremgangsmåden, og hjælper derefter hver gruppe med at påsætte 20 µL af deres prøver m. loading buffer til hver sin brønd. ! Når I afsætter prøven, så stik ikke pipettespidsen helt ned i gelen, men lad den ”svæve” i brønden (der er tilsat loadingbuffer for at DNA’et falder til bunds i brønden). Husk også at trække pipetten op af brønden igen inden stemplet slippes, så prøven ikke suges op igen. 5. Gelen køres nu ved 100 V og 400 mA i 45 minutter. Her kan I notere i hvilke brønde I har påsat de forskellige prøver: Brønd 1 Brønd 2 Brønd 3 Brønd 4 Brønd 5 Brønd 6 Brønd 7 Brønd 8 Brønd 9 Brønd 10 Elektroforese kar nr: ___ Side 6 af 7
Del 5 – Resultatbehandling Grupperne hørende til de forskellige geler, kommer til at tage billede af gelen på skift med en underviser. Billedet sammen med ”stigen” nedenfor bruges til at svare på følgende spørgsmål: 1. Hvilken genotype tyder jeres prøver på? Noter resultatet nedenstående skema (1 for hvert hold): Navn Antal bånd og størrelse Genotype (++, +- eller --) 2. Er der andre bånd på gelen end ved de forventede størrelser? Hvis ja, kan I så komme på nogen grunde til dette? (Undervisere vil gå rundt og høre jeres svar) 100bp DNA Ladder (New England Biolabs) Side 7 af 7
Page 1 and 2: Test dit eget DNA med PCR Navn: For
Page 3 and 4: Del 1.1 - Udtagning af menneskelige
Page 5: Del 3 - Støbning af gel til gelele

Test dit eget DNA med PCR

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?