yöremizde izole edilen mycobacterium tuberculosis suşlarında ...

3.2.3.1. Antibiyotik Solüsyonlarının Hazırlanması
Antibiyotikler SM, INH, RIF, EMB BACTEC MGIT SIRE kiti(Becton
Dickinson, USA) içinde liyofilize halde üretici firma tarafından sağlandı. Liyofilize
halde bulunan ilaçlar sulandırılarak stok solüsyonlar hazırlandı. Her liyofilize
antibiyotik şişesine 4 ml steril distile su eklendi ve tamamen çözünene kadar çalkalandı.
Liyofilize antibiyotik seması ve MGIT 7 ml besi yerindeki son konsantrasyon Tablo 3.1
belirtilmiştir.
Tablo 3.1.MGIT tüplerine eklenen ilaç konsantrasyonları
İlaç Liyofilize Sulandırım
Antibiyotik
içeren flakon
sonrasında
konsantrasyon
MGIT
tüplerine
eklenmesi
gereken volüm
Son
konsantrasyon
MGIT SM 332µg 83 µg/ml 100 µl 1.0 µg/ml
MGIT INH 33.2 µg 8.3 µg/ml 100 µl 0.1 µg/ml
MGIT RIF 332 µg 83 µg/ml 100 µl 1.0 µg/ml
MGIT EMB 1660 µg 415 µg/ml 100 µl 5.0 µg/ml
3.2.3.2. Antibiyogram İşlemi
5 adet 7 ml MGIT tüpü hazırlandı. İlk tüp kontrol tüpü olacak şekilde sırasıyla
SM, INH, RİF ve EMB seklinde işaretlendi. Her birine aseptik şartlarda 0,8 ml
BACTEC MGIT 960 SIRE Supplement( Oleic acid,dextros, catalase, bovine albumin,
polyoxethylene stearate) eklendi. Aseptik koşullar altında, firma önerileri doğrultusunda
sulandırılmış liyofilize ilaç solusyonlarından(Tablo.3.1) 100’er ml alınarak daha önce
işaretlenmiş olan uygun tüplere eklendi. Kontrol tüpü hazırlamak için yukarıda
belirtildiği gibi hazırlanan inokulumdan 0.1 ml alınarak 10 ml steril serum fizyolojik
içinde 1/100 dilüe edildi. Bu süspansiyondan 0.5 ml, ilaç konulmamış kontrol tüpüne
ekim yapıldı. İlaçlı tüplere ise inokulumdan 0.5 ml eklendi. Tüplerin kapakları sıkıca
kapatılarak antibiyotik duyarlılık test(antibiotic susceptibility test : AST) seti ile cihaza
yüklendi.
32