Guld-nanopartiklers optiske egenskaber - Nanolog
Guld-nanopartiklers optiske egenskaber - Nanolog
Guld-nanopartiklers optiske egenskaber - Nanolog
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
1. Semester, P0-projekt 2007<br />
Nanoteknologi
Dato: 21/09/2007<br />
Gruppe: C212 Side 2 af 21
Titel: <strong>Guld</strong>-nanopartikler til<br />
behandling af kræft<br />
Tema: Egenskaber på nanoskala<br />
Projektperiode: 31/08/2007 – 21/09/2007<br />
Projektgruppe: C212<br />
Deltagere:<br />
Synopsis:<br />
Christian Skjødt Hansen<br />
Duy Michael Le<br />
Jakob Polcwiartek<br />
Katrine Østergaard Bugge<br />
Lasse Christiansen<br />
Morten Julian Midtgaard<br />
Rebekka Bartholdy Neergaard<br />
Vejleder: Peter Fojan<br />
Oplagstal: 9<br />
Sideantal: 20<br />
Bilagsantal og -art: 0<br />
Afsluttet den 21/09/2007<br />
Dato: 21/09/2007<br />
Det Ingeniør-, Natur- og Sundhedsvidenskabelige Basisår<br />
Nanoteknologi<br />
Strandvejen 12-14<br />
9000 Aalborg<br />
Tlf. 96 35 97 36<br />
Fax 98 13 63 93<br />
http://tnb.aau.dk<br />
Strandvejen 12-14<br />
Dette projekt omhandler anvendelse af<br />
guld-nanopartikler til diagnosticering og<br />
behandling af kræft. Vi kigger på guldnanopartiklernes<br />
fordelagtige <strong>egenskaber</strong><br />
i denne sammenhæng, men også på selve<br />
opbygningen af partiklerne.<br />
Desuden giver vi et forslag til, hvordan<br />
antistoffer kan bindes på overfladen af<br />
guld-nanopartikler, så man med særlige<br />
detektionsmetoder kan påvise<br />
tilstedeværelsen af guld-nanopartikler,<br />
og dermed også et bestemt antigen, i<br />
kroppen.<br />
Vi beskriver derudover fænomenet<br />
overfladeplasmonresonans (SPR), som<br />
spiller en vigtig rolle i opvarmning af<br />
nanopartikler. Vi konkluderer i<br />
rapporten, at guld-nanopartikler er<br />
kolloider af guldatomer, med en række<br />
kemiske og <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong>, som<br />
giver mulighed for at detektere og<br />
behandle kræft.<br />
Rapportens indhold er frit tilgængeligt, men offentliggørelse (med kildeangivelse) må kun ske efter aftale med forfatterne.<br />
Gruppe: C212 Side 3 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Gruppe: C212 Side 4 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Forord<br />
Denne rapport er udarbejdet i P0, første projekt på basisåret på Aalborg Universitet, hvor den skal<br />
ses som træning til videre rapportskrivning. Rapporten er udarbejdet af gruppe C212, som består af<br />
studerende fra basisåret. Målgruppen for dette projekt er studerende på den første del af basisåret,<br />
med en faglig baggrund fra de gymnasiale uddannelser. Der vil være tale om et overblik over<br />
emnet, og det er derfor ikke tilrådeligt til brug til andet end formidling.<br />
Rapporten er en gennemgang af guld-<strong>nanopartiklers</strong> <strong>egenskaber</strong>, og disse i forhold til kræft.<br />
Igennem rapporten er kilder angivet efter nummermetoden.<br />
Projektet er afsluttet d. 21/09/2007.<br />
________________________________________<br />
Christian Skjødt Hansen<br />
________________________________________<br />
Duy Michael Le<br />
________________________________________<br />
Jakob Polcwiartek<br />
________________________________________<br />
Katrine Østergaard Bugge<br />
________________________________________<br />
Lasse Christiansen<br />
________________________________________<br />
Morten Julian Midtgaard<br />
________________________________________<br />
Rebekka Bartholdy Neergaard<br />
Gruppe: C212 Side 5 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Indholdsfortegnelse<br />
Forord...................................................................................................................................................5<br />
Indledning ............................................................................................................................................7<br />
Initierende problem..............................................................................................................................7<br />
Problemanalyse ....................................................................................................................................7<br />
Problemformulering.............................................................................................................................8<br />
Fakta om kræft .................................................................................................................................8<br />
<strong>Guld</strong>-<strong>nanopartiklers</strong> <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong>..............................................................................................9<br />
Overfladeplasmoner .........................................................................................................................9<br />
Optiske <strong>egenskaber</strong> for to tætsiddende guld-nanopartikler............................................................11<br />
Opvarmning af guld-nanopartikler.................................................................................................12<br />
Kolloider ............................................................................................................................................13<br />
Forskellige synteser af guld-nanopartikler.....................................................................................14<br />
Syntese af kolloide guld-nanopartikler ......................................................................................14<br />
Syntese af guld-nanoshells.........................................................................................................15<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartikler og svovlbroer..................................................................................................15<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartiklernes opførsel i organismen....................................................................................16<br />
Konklusion.........................................................................................................................................19<br />
Referenceliste.....................................................................................................................................20<br />
Bøger:.........................................................................................................................................20<br />
Artikler:......................................................................................................................................20<br />
Websteder: .................................................................................................................................21<br />
Eksperimenter: ...........................................................................................................................21<br />
Figurer:.......................................................................................................................................21<br />
Gruppe: C212 Side 6 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Indledning<br />
Kræftsygdomme har længe stået øverst på listen over sygdomme, som vi mennesker har ønsket at<br />
bekæmpe. Vi gør store fremskridt hele tiden, men der er stadig lang vej igen, før vi kan betegne<br />
kræftsygdommene som under kontrol. Et af problemerne ved kræft er, at det er en genetisk sygdom,<br />
der er arvelig. Derved fortsætter kræft fra generation til generation, uden vi kan stoppe eller<br />
udrydde den. Et andet problem er, at kræftceller lever og formerer sig iblandt de raske celler og i<br />
princippet bare er raske celler med mutationer i deres DNA. Det er derfor svært at skelne mellem<br />
raske celler og kræftceller, og man kan sjældent dræbe kræftcellerne, uden også at dræbe de raske<br />
celler. En målrettet behandling mod kræftceller har derfor længe været efterspurgt. [1]<br />
Kemoterapi er den mest udbredte af slagsen. Denne behandlingsmetode har til hensigt at dræbe alle<br />
hurtigvoksende celler. Kræftceller vokser hurtigt, så specielt disse dræbes. Men også raske celler,<br />
og i særdeleshed hårceller, bliver dræbt. Dette er en stor ulempe ved denne behandlingsmetode.<br />
Desuden kan kemoterapien sjældent dræbe alle kræftceller, hvis der er for mange af dem. [13]<br />
Nanoteknologi kan være en del af løsningen. <strong>Guld</strong>-nanopartikler er specielt interessante, da de<br />
muliggør en mere målrettet behandling end de traditionelle metoder. På den måde kan det i<br />
fremtiden blive muligt at dræbe de syge kræftceller uden at påvirke de raske celler i kroppen. <strong>Guld</strong>-<br />
nanopartikler er, hvad der i denne rapport vil være fokus på.<br />
Initierende problem<br />
Hvorfor og hvordan ændrer guld <strong>egenskaber</strong>, når det omdannes til kolloid form? Hvordan kan disse<br />
<strong>egenskaber</strong> anvendes i medicinal brug (hovedsageligt kræft)?<br />
Problemanalyse<br />
Man har i mange år forsøgt at behandle kræft gennem metoder som kemoterapi, stråling og kirurgi.<br />
[3] Grundet det store dødstal, som kræft forårsager, har man bl.a. inden for nanoteknologien prøvet<br />
at finde en løsning på problemet. En af disse løsninger kunne involvere guld-nanopartikler pga.<br />
deres særlige <strong>egenskaber</strong>.<br />
Gruppe: C212 Side 7 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Brugen af guld-nanopartikler er ikke et nyt fænomen. Det har vist sig, at man tilbage i det gamle<br />
Egypten brugte kolloidt guld til behandling af forskellige lidelser, deriblandt kræft. [6] Kolloidt<br />
guld blev også brugt i Kina tilbage i år 2500 f.Kr. som et livsforlængende middel. [4]<br />
Vi vil i denne rapport se på fremstilling af guld-nanopartiklerne, hvordan vi lokaliserer<br />
kræftcellerne og hvilke <strong>egenskaber</strong>, der gør guld-nanopartikler gode til at behandle kræft.<br />
Problemformulering<br />
I denne rapport vil vi helt generelt undersøge, hvad guld-nanopartikler er. Det skal danne grundlag<br />
for en redegørelse omkring de generelle <strong>egenskaber</strong> for guld-nanopartikler med henblik på<br />
diagnosticering og behandling af kræft, herunder de <strong>optiske</strong> og kemiske <strong>egenskaber</strong>. Derudover vil<br />
vi diskutere eventuelle bivirkninger ved guld-nanopartiklernes tilstedeværelse i kroppen.<br />
Vi vil i dette projekt prøve at besvare følgende spørgsmål:<br />
• Hvad er guld-nanopartikler helt generelt?<br />
• Hvad er guld-<strong>nanopartiklers</strong> særlige <strong>egenskaber</strong>, som gør dem gode til<br />
diagnosticering/behandling?<br />
• Hvordan binder guld-nanopartikler sig til kræftceller?<br />
• Hvilken virkning har guld-nanopartikler på kroppen?<br />
Fakta om kræft<br />
Kræft er en fælles betegnelse for en række ondartede svulster i kroppens væv. De ondartede svulster<br />
opstår ved, at kroppens celler, der udgør vævet, ændrer sig. Det er i DNA’et, ændringen sker. Dette<br />
kaldes en mutation. For det meste kan mutationer være uden betydning. De genetiske ændringer<br />
skal dog ske på bestemte gener, og flere gener skal mutere, for at cellerne kan udvikle sig til kræft.<br />
Man nævner tit, at den enkelte celle skal have brudt nogle barrierer, som holder på dens rolle, før<br />
den udvikler sig til en fuldmoden kræftcelle.<br />
Fejl i den genetiske kode kan opstå af sig selv, være arvet eller af påvirkninger udefra. Hvis fejlen<br />
opstår af sig selv, rettes fejlen som regel af såkaldte reparationsenzymer således, at cellen det<br />
bestemte sted kan opretholde sin funktion. Lykkes dette ikke, vil cellen gøre det af med sig selv.<br />
Dette gør, at det beskadiget DNA ikke bliver videregivet til nye celler. Det er oftest af påvirkninger<br />
Gruppe: C212 Side 8 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
udefra, at den genetiske sygdom opstår, og i princippet kan alle celler i kroppen blive til kræftceller,<br />
men noget væv og nogle celletyper er mere udsat end andre, som f.eks. huden, lungerne og tarmen.<br />
De celler, der oftest opstår kræft i, faktisk 90 % af tilfældene, bliver kaldt epitelceller, dvs. celler,<br />
som dækker kroppens ydre overflade, huden, og dens indre overflade, slimhinderne.<br />
Kræft starter med en mutation i en bestemt celles eller flere cellers DNA, som får denne eller disse<br />
til at formere sig i forhold til de normale celler, som befinder sig i en hviletilstand. De berørte celler<br />
og efterkommerne bliver ved med at se normale ud. De deler sig dog for hyppigt (hyperplasi).<br />
Kontrollen af de muterede cellers vækst bliver forstyrret yderligere med senere mutationer. Den<br />
forstyrrende vækst resulterer i, at efterkommerne får en unormal form og placering (dysplasi).<br />
Endnu en ændring i cellernes DNA, efter et stykke tid, påvirker cellernes opførsel. Kræftsvulsten<br />
får betegnelsen, cancer in situ, hvis den endnu ikke er brudt gennem de forskelliges vævs grænser.<br />
Den ukontrollerede vækst fortsætter og med stigende hast, så hvis svulsten på et tidspunkt vokser<br />
ind i det underliggende væv, så der sendes celler ind i blod- og lymfekar, er kræftsvulsten blevet<br />
ondartet og begyndt at invadere. Når dette er sket, er det meget svært at stoppe kræften, grundet<br />
dens nye etableringer (metastaser) forskellige steder i organismen. [3]<br />
<strong>Guld</strong>-<strong>nanopartiklers</strong> <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong><br />
Når konventionelle materialer, altså materialer vi direkte kan finde i naturen, reduceres til<br />
nanoskala, udviser de fascinerende <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong>, som man ikke vil kunne se på makroskala.<br />
Der skal rettes opmærksomhed på særlige materialer, hvor de indgående strukturer bliver mindre<br />
end lysets bølgelængde. Derfor er det især metaller, som udviser unikke <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong>, idet<br />
metallet består af elektroner, som bevæger sig frit. Det er svingninger i disse elektroner<br />
(overfladebølger), som vi kort skal beskrive i dette afsnit. [5]<br />
Overfladeplasmoner<br />
For at forstå fænomenet plasmoner må vi tage fat i den klassiske optik, hvor lys udbryder sig<br />
gennem et homogent materiale med et bestemt brydningsindeks. Lyset vil i midlertidig allerede<br />
blive udbredt i form af bølger i overgangen mellem et dielektrisk materiale (f.eks. protein), som<br />
ligger i overfladen af metallet (f.eks. guld). Bølgerne, som følger overfladen af metallet, kaldes<br />
overfladeplasmoner og kendetegner <strong>optiske</strong> bølger. Disse kan svinge i takt med de frie elektroner i<br />
Gruppe: C212 Side 9 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
metallet, og derved får de en selvforstærkende virkning, som kaldes resonans. Ordet plasmon<br />
kommer af det frie elektronplasma inde i partiklen.<br />
Når en plan bølge rammer en guldpartikel<br />
med en diameter på under 50 nm, taler man<br />
om lokaliseret overfladeplasmonresonans<br />
(LSPR). Her er bølgen, på grund af<br />
partiklens lille størrelse, indskrænket<br />
(fokuseret) til selve guldpartiklen og fører til<br />
en meget høj lysudbredelse i form af intens<br />
overfladeplasmon-absorptionsspektrum og et<br />
Figur 1 – Belysning af et metal danner<br />
plasmonresonans langs overfladen.<br />
forstærket elektromagnetisk felt. Dette absorptionsspektrum gør, at vi oplever partiklen som<br />
værende en anden farve, som er afhængig af materialet, størrelsen, størrelsesfordelingen og formen<br />
af nanostrukturen, såvel som omgivelserne. Det er disse præcise afhængighedsfaktorer, som gør det<br />
til et særdeles interessant fænomen. Ved at ændre på størrelsestætheden af partiklen, kan vi tilmed<br />
ændre på farven. Farveskiftet sker, når partiklerne kommer tæt på hinanden, og der vil i det<br />
efterfølgende afsnit blive kigget nærmere på, hvad der sker, når to partikler rykkes tæt på hinanden.<br />
[8]<br />
Gruppe: C212 Side 10 af 21
Optiske <strong>egenskaber</strong> for to tætsiddende guld-nanopartikler<br />
Ved at lade to nanopartikler tilnærme sig en meget<br />
kort afstand mellem hinanden, sker der en ændring i<br />
deres elektronbevægelse; en såkaldt elektrodynamisk<br />
interaktionsmekanisme. Man har ved eksperimenter<br />
[18] undersøgt, når to sølv-nanopartikler berører<br />
hinanden. Her viser det sig, at der er en stor<br />
afhængighed af det udsendte lysspektrum. I et lignende<br />
forsøg har S.A. Maier [19] undersøgt spektrummet for<br />
to identiske guld-nanopartikler, som har en<br />
tilstrækkelig afstand til at udgøre en kobling. Her<br />
observerede man en forøgelse af bølgelængden, et<br />
såkaldt redshift, af overfladeplasmonet. I dette forsøg<br />
skete forøgelsen, hvor partiklerne sad med<br />
polretningen parallelt med rækkeretningen, som vist på<br />
figur 3,(b). Idet partiklerne sidder med polerne<br />
værende overfor hinanden som figur 3,(c) vil vi opleve<br />
en reducering i bølgelængden, idet polerne modvirker<br />
hinanden. Det er en såkaldt blueshift. I det første<br />
tilfælde (b) opfattes de to partikler blot som en større<br />
(forstrukket) partikel, idet plasmonet har en fin<br />
overgang.<br />
Graferne på figur 2 viser forskellen i udslukkelsen<br />
⎛ 1 ⎞<br />
⎜ log ⎟<br />
⎝ trans ⎠<br />
af spektrummet for fire forskellige<br />
partikelafstande, på henholdsvis 150 nm, 200 nm,<br />
300 nm og 450 nm for de to forskellige<br />
bindingsmåder. På figur 2 (a) er det tydeligt at se, at<br />
jo tættere guld-nanopartiklerne bevæges mod<br />
hinanden, jo længere bliver overfladeplasmonets<br />
Dato: 21/09/2007<br />
Figur 2 – Graferne viser<br />
absorptionsspektrummet for guldnanopartikler<br />
med forskellige afstande med<br />
hinanden i henholdsvis (a) p-pol og (b) s-pol.<br />
Figur 3 – (a) En enkelt nanopartikel. (b) To<br />
tætsiddene guld-nanopartikler, hvis plasmon er<br />
parallelle med hinanden og (c) serielt med<br />
hinanden.<br />
Gruppe: C212 Side 11 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
bølgelængde. Det er disse bølgelængder fra det modtagne lys, der absorberes. Derved kan vi også<br />
konkludere, at partiklerne skifter fra en mere rødlig til en blålig farve, når partiklerne nærmer sig<br />
hinanden. [9]<br />
Opvarmning af guld-nanopartikler<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartikler har vist sig at være specielt interessante til behandling af kræft pga. den<br />
førnævnte plasmonresonans, som opstår på partiklernes overflade ved belysning. Når de<br />
kugleformede nanopartikler belyses, opstår der på deres overflade<br />
lokaliseret plasmonresonans, som resulterer i opvarmning af<br />
partiklen selv, men af større betydning også af deres omgivelser.<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartikler, såvel som alle andre metal-nanopartikler, er<br />
gode at bruge til opvarmning, da næsten al energien, som<br />
partiklen absorberer fra det modtagne lys, omdannes til<br />
varmeenergi. [10]<br />
Eksperimenter foretaget af en større forskningsgruppe fra Ohio<br />
University [11] har vist, at opvarmning af guld-nanopartikler og deres omgivelser er mulig i praksis,<br />
samtidig med, at de indirekte fik indikationer af partiklernes overfladetemperatur. Dette blev gjort<br />
ved at belyse guld-nanopartikler indfældet i is med en laser. Deres eksperiment viste, at selv med en<br />
relativ svag laserstråle, kunne de smelte det omkringliggende is. Ud fra hastigheden, hvorved isen<br />
smelter omkring partiklen, kunne forskerne beregne overfladetemperaturen på nanopartiklen.<br />
Temperaturændringen på overfladen af partiklen, samt ændringen i temperatur af det<br />
omkringliggende medium, kan beskrives med denne formel:<br />
VNP ⋅Q<br />
∆ T ( r) = | RNP ≤ r<br />
4⋅π<br />
⋅k ⋅r<br />
0<br />
Hvor ∆T er temperaturændringen i en given afstand fra nanopartiklens centrum (r), VNP er volumen<br />
af nanopartiklen, k0 er det omgivende mediums varmeledningsevne. Q er den afgivne varmeenergi<br />
fra nanopartiklen. Denne kan estimeres til at være energiforskellen mellem den modtagne og den<br />
reflekterede lysstråle, da den energi metal modtager, kun i meget lav grad omdannes til andet end<br />
varme. RNP er radius på nanopartiklen og det betyder, at formlen kun er gældende i partiklens<br />
omgivende medium. [12]<br />
Figur 4 – Temperaturændringens<br />
afhængighed af afstanden til<br />
partiklens centrum. Gælder ikke<br />
inde i partiklen.<br />
Gruppe: C212 Side 12 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Formlen fortæller os bl.a., at temperaturændringen aftager, når afstanden, r, til partiklens centrum<br />
stiger. Grafisk ser ∆T som funktion af r [nm] ud som på figur 4:<br />
Som man kan se, er ∆T stærkt aftagende tæt på nanopartiklens overflade, så nanopartiklen skal<br />
være tæt på et legeme, før dens opvarmning får en effekt. Det må nødvendigvis betyde, at der skal<br />
en stor koncentration af guld-nanopartikler til, for at opvarme et større område af f.eks. kræftceller.<br />
Hvis der kun er for få guld-nanopartikler til stede, vil kun små dele af svulsten blive opvarmet. Man<br />
skal derfor finde en måde at koncentrere guld-nanopartiklerne i f.eks. en svulst, hvis man vil<br />
opvarme og dræbe alle cellerne deri. Hvordan dette kan lade sig gøre, bliver beskrevet senere i<br />
afsnittene ”<strong>Guld</strong>-nanopartikler og svovlbroer” og ”<strong>Guld</strong>-nanopartiklernes opførsel i organismen”.<br />
Kolloider<br />
En kolloid opløsning er en opløsning, hvor det tilsatte stof ikke bundfældes, men i stedet bevæger<br />
sig rundt i opløsningen. Hvis vi blander et salt i vand, vil saltet blive opløst indtil opløsningen er<br />
mættet og det resterende salt bundfælles. Hvis vi i stedet tager en lille portion flødeskum og blander<br />
det i vand, vil det ikke blive opløst på samme måde som med saltet. Det er fordi flødeskum er<br />
kolloidt. Størrelsesordenen på kolloider er mellem 1 nm (10 -9 m) og 1 µm (10 -6 m).<br />
Kolloider fremkommer altså som partikler i et medium, hvor partiklerne ikke bliver bundfældet.<br />
Dette kan ses ved hjælp af Tyndalls effekt, hvor vi lyser med intenst lys gennem vores opløsning.<br />
Man vil kunne se, at lyset flere steder i blandingen bliver reflekteret af kolloiderne i væsken. Dette<br />
er Tyndalls effekt og beviser tilstedeværelsen af kolloiderne. Dog skal man tage forbehold for f.eks.<br />
støvpartikler der kan forekomme. Det er også godt at bemærke, at det man ser i opløsningen, ikke er<br />
selve partiklen, da den er alt for lille til at se med vores øjne, men derimod ser man refleksionen af<br />
lyset.<br />
Kolloiderne i væsken er neutrale, men optager et lag af<br />
ensladede ioner, som derefter vil tiltrække et lag af modsatladede<br />
ioner. Der vil altså fremkomme en elektrostatisk frastødning<br />
mellem partiklerne, der gør, at de ikke aggregerer med hinanden<br />
og derfor ikke danner større partikler, der til sidst vil bundfælde.<br />
Figur 5 – Eksempel på to kolloider<br />
med ionlag.<br />
Gruppe: C212 Side 13 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Det kan dog godt lade sig gøre at få kolloiderne til at aggregere og derved ”ødelægge dem”. Dette<br />
kaldes koagulation og kan ske ved f.eks. opvarmning af opløsningen. Når man tilfører opløsningen<br />
varme, vil hastigheden af de kolloide partikler stige, og de vil støde ind i hinanden med en sådan<br />
hastighed, at ionlaget vil blive ødelagt, og partiklerne derfor vil aggregere med hinanden. Når dette<br />
sker tilstrækkelig mange gange, vil partiklen til sidst blive så stor at den bundfældes. Kolloiderne er<br />
altså afhængige af temperaturen, og det er vigtigt at vide, når de skal fremstilles. [2]<br />
Når vi vil fremstille guld-nanopartikler, gør vi det efter kolloid teori, da en guld-nanopartikel<br />
kemisk set er en kolloid, og opnår på den måde også videre i forløbet, at partiklerne ikke<br />
bundfælder og aldrig kommer frem til kræftcellen i kroppen.<br />
Forskellige synteser af guld-nanopartikler<br />
Der er mange forskellige måder at fremstille guld-nanopartikler på, der kan bruges til behandlingen<br />
af kræft. Der kan nævnes metoder som reduktion af forskellige stoffer til kolloidt guld vha. UV-<br />
stråling og ultralyd, og afsmeltningstekniker involverende laser. [4] I det følgende forklares to af de<br />
dominerende metoder og deres fordele.<br />
Syntese af kolloide guld-nanopartikler<br />
En af måderne at fremstille guld-nanopartikler på, er ved at lave en<br />
opløsning af HAuCl4 og destilleret vand og så tilsætte trinatriumcitrat-<br />
dihydrat, som reducerer og stabiliserer HAuCl4. Tetrachloroaurat-ionen [4]<br />
vil så under opvarmning blive reduceret til kolloide guldpartikler efter<br />
følgende reaktionsskema:<br />
Figur 6 – Kolloidt guld.<br />
6 AuCl - 4 + (-OOCCH2)2C(OH)(COO - ) + 15 OH - → 6 Au(kolloid) + 6 CO2 + 24 Cl - + 10 H2O [14]<br />
Dette foregår ved ca. 95 °C, indtil opløsningen bliver rød. Disse partikler får ved syntesen en<br />
gennemsnitlig størrelse på omkring 20 nm, men de vil aggregere i løbet af to timer. For at gøre<br />
nanopartiklerne mere holdbare tilsættes TWEEN20 (polysorbat).<br />
Gruppe: C212 Side 14 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Syntese af guld-nanoshells<br />
<strong>Guld</strong>-nanoshells består af en kerne af silicium med et tyndt lag guld rundt om. Disse bruges ofte i<br />
stedet for kolloide guld-nanopartikler, da de har mange af de samme <strong>egenskaber</strong> som<br />
nanopartiklerne. Fordelen ved nanoshells er, at man ved at variere tykkelsen af siliciumkernen og<br />
tykkelsen på guldlaget, kan variere de <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong>. Det vil altså sige, at man kan designe<br />
bølgelængden på de stråler, partiklen vil absorbere, så man f.eks. kan vælge den bølgelængde, hvor<br />
strålerne nemmest trænger igennem menneskevæv (Near-Infra-Red). Samtidig er guld-nanoshells<br />
mere modstandsdygtige over for kemisk denaturering.<br />
For at syntetisere guld-nanoshells starter man med at lave en opløsning af silicium-nanopartikler.<br />
Dette kan man gøre ved at reducere tetraethylorthosilicium med NH4OH i ethanol. Så laver man en<br />
nitratoverflade på siliciummet, så guldkolloiderne kan sætte sig fast på den vha. en molekylær<br />
forbindelse. <strong>Guld</strong>kolloider lægger sig på overfladen af silicium-nanopartiklen som et<br />
usammenhængende guldlag. Vha. en kemisk reduktion med kaliumcarbonat og HAuCl4, sættes<br />
Figur 7 – <strong>Guld</strong>-nanoshells.<br />
mere guld på siliciumoverfladen. Fordi man til denne syntese<br />
bruger de samme kemiske metoder som ved en guldkolloid<br />
syntese, er overfladen på en guld-nanoshell kemisk magen til<br />
overfladen på en guld-nanopartikel. Dette gør selvfølgelig, at<br />
guld-nanoshells har de samme kemiske <strong>egenskaber</strong> på<br />
overfladen som kolloide guldpartikler. Derfor kan man bruge<br />
den følgende metode til at sætte antistoffer på overfladen af<br />
både guld-nanopartikler og guld-nanoshells. [7]<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartikler og svovlbroer<br />
En guld-nanopartikel er elektrisk neutral, men dette forhindrer den ikke i at have en<br />
overfladespænding. Det kommer af den måde en guld-nanopartikel er opbygget på, som er forklaret<br />
i det følgende. Når man laver en guld-nanopartikel, samler den sig af partikler på væskeform til en<br />
kerne. Denne kerne tiltrækker andre atomer, der lægger sig over kernen som et kuglelag. Dette<br />
kuglelag vil så være trukket ind mod kernen af en binding. Indersiden er negativt ladet, og<br />
ydersiden er positivt ladet. Det kan begrundes med en større tæthed af elektroner inde i selve stoffet.<br />
Denne overfladespænding er ens over hele partiklen.[2]<br />
Gruppe: C212 Side 15 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Når overfladen har en positiv ladning, er man i stand til at binde en negativt ladet partikel på<br />
ydersiden med krydsbinding. I denne sammenhæng er det mest aktuelt at binde et svovlatom, som<br />
sidder i enden af en kulstofkæde på guld-nanopartiklen. En meget praktisk løsning er at binde en<br />
kulstofkæde med en HS-forbindelse i den ene ende og en vilkårlig aktiv gruppe alt afhængig af,<br />
hvad man ønsker, i den anden. Her kommer så PSA, Prostate-Specific Antigene, ind i billedet. Dette<br />
protein er et direkte antigen til prostatakræft.<br />
PSA er et protein bygget op af aminosyrer, som derfor kan bindes til en kulstofkæde, hvis man<br />
matcher endegrupperne. De aktive grupper i PSA har hver deres opbygning, og man kan derfor<br />
binde dem på forskellig vis til en kulstofkæde. Det kan lade sig gøre, hvis man har den rigtige<br />
aktive gruppe i enden af kulstofkæden, som er bundet til guld-nanopartiklen gennem svovlet, og<br />
eksempelvis kan man bruge en syregruppe til at binde sig på kvælstofgruppen på en lysinsyre med<br />
en peptidbinding. Bindingen er en fordel, da det er en stærk kovalent binding,<br />
som ikke opløses ved småting. Bindingen modstår pH-værdier helt ned til 1 og<br />
temperaturer op til 60 °C. Dog findes der flere forskellige løsninger,<br />
eksempelvis den mulighed at bruge en cysteinsyre som bindes direkte på guld-<br />
nanopartiklen, i forbindelse med det svovlatom, som denne er udstyret med til at<br />
binde direkte på guldpartiklen. En cystien findes bl.a. i den anden aktive gruppe<br />
af PSA. Så kan man hæfte en guld-nanopartikel på et protein, som kan genkende<br />
prostatakræft.<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartiklernes opførsel i organismen<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartiklerne har nogle specielle <strong>egenskaber</strong>, som gør, at de kan bruges til at lokalisere<br />
kræftcellerne i menneskets krop og fæste sig til dem. Hvis man ændrer på guld-nanopartiklernes<br />
struktur fra værende guld-nanokugler til guld-nanocylindere, kan de nemmere finde kræftcellerne.<br />
<strong>Guld</strong>-nanocylindere bliver kaldt nanostænger, og de kan komme dybere ind i kroppen og finde<br />
kræftsvulster.<br />
De fleste kræftceller har et protein, som kaldes<br />
Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) over hele<br />
deres overflade, mens normale celler ikke har det i så<br />
store mængder. Ved at binde et antistof, kaldet anti-<br />
EGFR, på en guld-nanopartikel, så vil guld-<br />
Figur 8 – Cystein.<br />
Figur 9 – Her ses hvordan guldnanopartikler<br />
hæfter sig til en kræftcelle.<br />
Gruppe: C212 Side 16 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
nanopartiklen fæste sig til en kræftcelle og lyse op i forhold til de almindelige celler. Når man<br />
ændrer guld-nanopartiklerne fra kugleformede til nanostænger, kan man sænke frekvenserne, som<br />
guld-nanopartiklerne reagerer på fra det synlige lysspektrum. Da kan man få guld-nanopartiklerne<br />
til at reagere på det infrarøde lysspektrum, som gør det muligt for infrarød laserstråling at gå<br />
længere ind under huden og udslette kræftceller uden at gøre betydelig skade på det<br />
omkringliggende væv. En anden fordel med denne nye teknologi er, udover at gøre det muligt at<br />
lokalisere kræftcellerne, at man kan halvere kraften som bruges under laserstrålebehandling. [15]<br />
Figur 10 – Billedet viser hvordan<br />
guld-nanopartikler har fæstet sig til<br />
kræftcellerne. Bemærk de store<br />
lyse områder.<br />
Til medicinsk brug i lokalisering af kræftceller bruges typisk<br />
større guld-nanopartikler, hvor antistoffer mod et ønsket protein<br />
fastgøres på partiklerne. Man har fundet ud af, at guld-<br />
nanopartikler af en størrelse på 35 nm [4], virker bedst til<br />
formålet. <strong>Guld</strong>-nanopartiklerne kan derefter i en mikroskopisk<br />
undersøgelse afsløre, om target-proteinet er til stede, hvor og i<br />
hvor stor en mængde.<br />
Med nanopartiklernes størrelse er det nu muligt at undersøge<br />
væv, celler og områder i celler. Man kan bruge guld-<br />
nanopartikler eller quanteprikker i forskellige størrelser afhængigt af hvilke mål disse skal kunne<br />
lokalisere.<br />
I fremtiden håbes der meget på, at der udover placering af antistoffer på guld-nanopartiklerne mod<br />
bestemte proteiner, at det vil blive muligt at give guld-nanopartiklerne en dobbeltfunktion således,<br />
at medicin mod kræft kan blive hæftet på dem, så en behandling kan blive mulig. Af andre idéer<br />
inden for behandling kan der nævnes, at man vil have mulighed for at brænde sygt væv af vha.<br />
guld-nanopartiklernes <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong> som stærkt lydabsorberende. [6]<br />
Brugen af guld-nanopartikler er stadig ikke udbredt, pga. uvisheden om eventuelle bivirkninger.<br />
Man har bl.a. prøvet at blande guld-nanopartikler og brystkræftceller sammen og lyse på dem,<br />
hvilket resulterede i, at alle kræftcellerne blev dræbt. Man har også indsprøjtet guld-nanopartikler i<br />
mus med kræft, som også gav et positivt resultat. Alle kræftcellerne blev dræbt inden for nogle<br />
dage. Musene som blev brugt under dette forsøg var i live 150 dage efter eksperimenterne og havde<br />
ingen tegn på nogen tumorvækst [16]. Desuden har man også prøvet at eksperimentere med at<br />
Gruppe: C212 Side 17 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
drikke nanoguldvand under 10 nm i forbindelse med prostatakræft, for at sænke PSA’en. PSA er en<br />
måde at måle, hvor stor en mængde prostatakræft man har. I alle tilfældene førte dette til, at PSA’en<br />
sank, og i et forsøgene blev PSA-værdien lig nul [17]. Brugen af guld-nanopartikler ser vældig<br />
positiv ud. Den er under stor udvikling, og man håber i den nærmeste fremtid, at dette kan være det<br />
store gennembrud for at få helbredt kræft en gang for alle.<br />
Gruppe: C212 Side 18 af 21
Dato: 21/09/2007<br />
Konklusion<br />
Efter at have arbejdet med projektet, kan vi konkludere, at guld-nanopartikler opnår særlige <strong>optiske</strong><br />
<strong>egenskaber</strong>, når de kommer på nanoskala. Dette kan benyttes til behandling af kræft. Når en guld-<br />
nanopartikel modtager lys, opstår der plasmoner på overfladen, som sammen med elektronernes<br />
oscillation, skaber en resonans. Disse elektronmagnetiske bølger skaber en absorption af et bestemt<br />
bølgelængdeområde. Denne overfladeplasmonresonans udnyttes idet farveskiftet afhænger af<br />
massetætheden. Ved at lade to guld-nanopartikler komme tæt nok på hinanden, skabes et farveskift<br />
fra rød til lilla. Når et antistof af proteinet EGFR bindes til guld-nanopartikler kan man nemmere få<br />
dem til at fæste sig til kræftcellerne, og pga. partiklernes <strong>optiske</strong> <strong>egenskaber</strong> er det muligt at<br />
detektere dem. Samtidig med detektering af tætsiddende guld-nanopartikler, er det muligt at<br />
opvarme dem og deres omgivelser til bekæmpelse af kræftsvulst.<br />
<strong>Guld</strong>-nanopartikler er guldkolloider og de derved følgende <strong>egenskaber</strong> er fordelagtigt i medicinsk<br />
øjemed. Der er mange forskellige måder at fremstille disse guld-nanopartikler på, men især guld-<br />
nanoshells har vist sig at være ekstra favorable, da man nemmere kan designe deres <strong>optiske</strong><br />
<strong>egenskaber</strong>. Derudover har guld-nanopartikler en række kemiske <strong>egenskaber</strong>, som gør det muligt at<br />
forbinde dem til biologisk aktive komponenter, og derved kan de lokalisere kræftceller.<br />
I fremtiden håbes og satses der på, at man udover at knytte antistoffer på guld-nanopartikler, også<br />
kan binde medicin på, så en medicinsk behandling bliver mulig. Eksperimenter har indtil nu vist<br />
positive resultater for behandling af kræft ved hjælp af guld-nanopartikler. Man har dog ikke<br />
overført forsøgene til mennesker, da man stadig er i tvivl om bivirkningerne for tilstedeværelsen af<br />
guld-nanopartikler i kroppen.<br />
Gruppe: C212 Side 19 af 21
Referenceliste<br />
Dato: 21/09/2007<br />
Bøger:<br />
[1] Kræftens Bekæmpelse, Kort om kræft, Erhvervsskolernes forlag, Svendborg 2002, s. 7-9.<br />
[2] Steven S. Zumdahl & Susan A. Zumdahl, Chemistry Ed. 7, University of Illinois, 2007, Kap.<br />
11.8.<br />
[3] Kræftens Bekæmpelse: Kort om kræft, Erhvervsskolernes forlag, 2002, s. 37-38 & s. 7-9,11-<br />
12,19-20.<br />
[4] Challa Kumar: Nanomaterials for Cancer Diagnosis, Louisiana state university 2007, s. 87 &<br />
106-110.<br />
[5] Mike van der Poel & Alexandra Boltasseva, Optiske horisonter, Kapitel 1, Institut for<br />
Kommunikation, Optik & materialer, DTU, 2007.<br />
Artikler:<br />
[6] Dansk kemi, 88, nr.6/7, 2007, s. 14+15.<br />
[7] Technology in Cancer Research & Treatment, Vol. 3, nr. 1, Februar 2004.<br />
[8] Eliza Hutter & Janos H. Fendler, Exploitation of Localized Surface Plasmon Resonance,<br />
WILEY-VCH forlag, Department of Chemistry and Center for Advanced Materials Processing,<br />
Clarkson University, 2004.<br />
[9] W. Rechberger, A. Hohenau, A. Leitner, J.R. Krenn, B. Lamprecht, F.R. Aussenegg, Optical<br />
properties of two interacting gold nanoparticles, Institute for Experimental Physics, Karl-Franzens-<br />
University Graz and Erwin-Schrödinger Institute for Nanoscale Research, 2003.<br />
[10] M1: Alexander O. Govorov og Hugh H. Richardson; Generating Heat with Metal<br />
Nanoparticles; Nanotoday; Volume 2; februar 2007; side 30-38.<br />
[11] Hugh H. Richardson, Zackary N. Hickman, Alexander O. Govorov,<br />
Alyssa C. Thomas, Wei Zhang, and Martin E. Kordesch; Thermooptical Properties of Gold<br />
Nanoparticles Embedded in Ice: Characterization of Heat Generation and Melting; Vol. 6; Nr. 4.<br />
[12] Alexander O. Govorov og Hugh H. Richardson; Generating Heat with Metal Nanoparticles;<br />
Nanotoday; Volume 2; februar 2007; side 30-38.<br />
Gruppe: C212 Side 20 af 21
Websteder:<br />
[13] www.cancer.dk, Kræftens Bekæmpelse, d. 19/09/2007.<br />
Dato: 21/09/2007<br />
[14] Professor Thomas Bjørnholm, Lærervejledning: Syntese af kolloidt guld, URL:<br />
http://www.nanotek.nu/word/syntese_af_kolloidt_guld_l_word.<br />
[15] NCI: National Cancer Institute, Alliance for Nanotechnology in Cancer, URL:<br />
http://nano.cancer.gov/news_center/nanotech_news_2006-03-27b.asp.<br />
[16] New Scientist (Magazine): Gold “nano-bullets” shoot down tumours 13:02 04 November 2003<br />
NewScientist.com news service Shaoni Bhattacharya, URL:<br />
http://www.newscientist.com/article/dn4341.html.<br />
[17] Nanotech 2007 Vol.2: Technical Proceedings of the 2007 NSTI Nanotechnology Conference<br />
and Trade Show, Volume 2. Nano gold can drop PSA level, forfatter H.D. Shen, s. 325-328, URL:<br />
http://www.nsti.org/procs/Nanotech2007v2/4/W78.203.<br />
Eksperimenter:<br />
[18] H. Tamaru, H. Kuwata, H.T. Miyazaki, K. Miyano, Appl. Phys. Lett. 80 (2002) 1826.<br />
[19] S.A. Maier, M.L. Brongersma, P.G. Kik, S. Meltzer, A.A.G. Requicha, H.A. Atwater, Adv.<br />
Mater. 13 (2001) 1501.<br />
Figurer:<br />
Figur 1: Mike van der Poel & Alexandra Boltasseva, Optiske horisonter, Kapitel 1, Institut for<br />
Kommunikation, Optik & materialer, DTU, 2007.<br />
Figur 2 og 3: W. Rechberger, A. Hohenau, A. Leitner, J.R. Krenn, B. Lamprecht, F.R. Aussenegg,<br />
Optical properties of two interacting gold nanoparticles, Institute for Experimental Physics, Karl-<br />
Franzens-University Graz and Erwin-Schrödinger Institute for Nanoscale Research, 2003.<br />
Figur 4: Alexander O. Govorov og Hugh H. Richardson; Generating Heat with Metal<br />
Nanoparticles; Nanotoday; Volume 2; februar 2007; side 30-38.<br />
Figur 5: Zumdahl & Zumdahl, Chemistry Ed. 7, University of Illinois, 2007, Kap. 11.8.<br />
Figur 6: Professor Thomas Bjørnholm, Lærervejledning: Syntese af kolloidt guld, URL:<br />
http://www.nanotek.nu/word/syntese_af_kolloidt_guld_l_word.<br />
Figur 7: Technology in Cancer Research & Treatment, Vol. 3, nr. 1, Februar 2004.<br />
Figur 8: Lavet af Lasse Christiansen i programmet ChemSketch.<br />
Figur 9: Institute for nano scale technology, University of Technolgy Sydney URL:<br />
http://www.nano.uts.edu.au/research/nanobody.html.<br />
Figur 10: Dansk Kemi, Kemisk månedsblad nr. 6/7, Juni 2007, 88. årgang.<br />
Gruppe: C212 Side 21 af 21