EFECTOS AGUDOS DEL EXTRACTO DEL Cestrum nocturnum ...

Resumen
Instituto de Neurología y Neurocirugía
EFECTOS AGUDOS DEL EXTRACTO DEL Cestrum nocturnum
(GALÁN DE NOCHE) SOBRE DIFERENTES MODELOS DE EPILEPSIA
EXPERIMENTAL
Lic. María Teresa Buznego Rodríguez 1 y Dr. Héctor Pérez Saad 2
Se investiga la posible acción antiepiléptica de decocciones de hojas secas de C. nocturnum mediante la administración aguda intraperitoneal
en modelos de epilepsia experimental inducidos por isoniacida, picrotoxina, electrochoque (en ratones) y en el foco epiléptico inducido por
la administración tópica cortical de penicilina, en ratas curarizadas. El extracto al 30 % prolongó significativamente la latencia de aparición
de las crisis y la muerte provocadas por isoniacida, pero no las inducidas por electrochoque o picrotoxina. El extracto al 5 % redujo
significativamente la amplitud de espigas del foco penicilínico. Estos resultados apoyan o justifican el empleo tradicional de esta planta en
los trastornos convulsivos.
DeCS: PLANTAS MEDICINALES; EXTRACTOS VEGETALES/uso terapéuticos; ANTICONVULSIVOS/uso terapéutico; EPILEP-
SIA/quimioterapia; EPILEPSIA/inducido químicamente; RATAS WISTAR; MODELOS ANIMALES DE ENFERMEDAD;
ISONIACIDA/efectos adversos; PICROTOXINA/efectos adversos; ELECTRO SHOCK.
Summary
The possible antiepyleptic action of decoctions of dry leaves of C. nocturnum by acute intraperitoneal administration in experimental
epilepsy models induced by isoniazid, picrotoxin and electroshock (in mice) and in the epyleptic focus induced by the topic cortical
administration of penicillin in curarized rats is investigated. The extract at 30 % prolonged significantly the latency of appearance of
seizures and death caused by isoniazid, but not those induced by electroshock or picrotoxin. The extract at 5 % reduced markedly the
amplitude of spikes of the penicillin focus. These results support or justify the traditional use of this plant in convulsant disorders.
Subject headings: PLANTS, MEDICINAL; PLANT EXTRACT/therapeutic use; ANTICONVULSANTS/ therapeutic use; EPILEPSY/
drug therapy; EPILEPSY/chemically induced; RATS WISTAR; DISEASE MODELS, ANIMAL; ISONIAZID/adverse effects;
PICROTOXIN/adverse effects; ELECTROSHOCK ISONIACIDA/efectos adversos; PICROTOXINA/efectos adversos; ELECTRO
SHOCK.
C. nocturnum L. fue seleccionada por su potencial
antiepiléptico sobre la base de reportes en la literatura de la
medicina tradicional. 1
Estudios anteriores sobre el perfil neurofarmacológico
mostraron propiedades sedantes y analgésicas en esta planta,
2 por lo que se propone comprobar la existencia de una
posible actividad antiepiléptica asociada, mediante la administración
aguda de los extractos de hojas secas sobre las
convulsiones inducidas por isoniacida, picrotoxina, electrochoque
y en el mundo de foco penicilínico.
1 Licenciada en Ciencias Biológicas. Investigadora Auxiliar.
2 Doctor en Ciencias Médicas. Investigador Titular.
Métodos
REV CUBANA PLANT MED 2002;7(2):73-7
La identificación del material vegetal fue realizada por
el doctor Víctor Fuentes y está registrado con el número de
herbario Roig 4633, en la Estación Experimental de Plantas
Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig".
Los experimentos se realizaron en ratones de la línea
OF1 y ratas Wistar, machos, de 18 a 22 g y de 150 a 200 g de
peso corporal respectivamente. Se prepararon decocciones
de 1, 5 y 30 g de hojas secas en 100 mL de agua destilada con
un tiempo de decocción de 10 min; luego se completó el
73

volumen inicial. Los extractos y la solución salina fueron
administrados por vía intraperitoneal, en volúmenes de 0,01
mL/g de peso corporal, 20 min antes de comenzar la observación.
Los experimentos se llevaron a cabo en horario de la
mañana y a temperatura de 21 °C.
En general, se utilizaron 5 grupos de animales, a los
cuales se les administraron decocciones al 1, 5, 30 %, solución
salina (NaCl 0,9 %) y diazepam (10 mg/kg, ip.) como
control positivo, correspondientemente.
Convulsiones inducidas por isoniacida. Se empleó una
dosis de 210 mg/kg, ip. El tiempo de observación fue de 90
min. Se midió la latencia de la primera convulsión clónica
completa y el tiempo de muerte (tiempo transcurrido entre la
inyección y la muerte). 3
Convulsiones inducidas por picrotoxina. Se utilizó una
dosis de 7 mg/kg, ip., a partir de la cual los animales fueron
observados durante 50 min. Se midió la latencia de la primera
convulsión clónica completa y el tiempo de muerte.
Crisis por electrochoque máximo. Las crisis fueron inducidas
por el paso de pulsos cuadrados de 170 V con una
duración de 100 ms, mediante electrodos auriculares. Esta
estimulación produce una convulsión tónica generalizada
con hiperextensión de las patas posteriores seguida de convulsiones
clónicas. El parámetro medido fue la duración de
la hiperextensión. 4
Foco epiléptico inducido por penicilina. Se realizó de
acuerdo con los procedimientos realizados por Lueders. 5 Las
ratas fueron traquectomizadas bajo anestesia con éter
dietílico, inyectadas con atropina (0,2 mg, im.) e
inmovilizadas con d-tubocurarina (2,4 mg/kg, ip.); y conectadas
a un respirador artificial. Después se fijaron a un
estereotáxico y se les realizó 2 trépanos craneales
ipsolaterales: uno en la corteza sensoromotora (foco primario)
y otro en la corteza occipital (foco secundario). Se infiltró
lidocaína al 2 % en todos los puntos de incisión y heridas
para evitar el sufrimiento del animal. La actividad eléctrica
se registró desde la superficie cortical por mediación de capilares
de vidrio con un diámetro interno de 1 mm, rellenados
con solución Ringer endurecida en agar. La actividad epiléptica
es provocada en la corteza sensoromotora añadiendo
penicilina g sódica dentro del capilar, a una concentración
que varía desde 100 000 hasta 250 000 IU/mL hasta producir
espigas de 0,5 mV de amplitud en la corteza occipital, como
criterio de foco estable. Los extractos fueron administrados
después de un período de 2 h (tiempo de estabilización del
foco) y al finalizar este período se tomó la media de los porcentajes
como control. Los experimentos se llevaron a cabo
con 2 grupos de ratas, a un grupo se le administró inyecciones
intraperitoneales del extracto al 5 % y al otro grupo (control)
se le administró solución salina. Las inyecciones se realizaron
con intervalos de 30 min durante 2 h.
Resultados
La administración aguda del extracto de C. nocturnum
al 30 % prolongó significativamente la latencia y el tiempo
de muerte de las convulsiones inducidas por isoniacida (figuras
1 y 2). Los extractos al 1, 5 y 30 % no influyeron sobre
la latencia y el tiempo de muerte de las convulsiones inducidas
por picrotoxina (figuras 3 y 4), o electrochoque (figura 5).
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Latencia (min)
70
60
50
40
30
20
10
0
70
60
50
40
30
20
10
0
Salina 1 % 5 % 30 % Diazepam
FIG. 1. Efecto de los extractos de C. nocturnum sobre la latencia de
las convulsiones inducidas por isoniacida. Las barras representan
la media y el error estándar. El asterisco indica diferencia
significativa (p < 0,05) respecto al control, según las pruebas de
ANOVA y Duncan (n = 10).
Tiempo de muerte (min)
90
80
FIG.2. Efecto de los extractos de C. nocturnum sobre el tiempo de
muerte en las convulsiones inducidas por isoniacida. Las barras
representan la media y el error estándar. El asterisco indica
diferencia significativa (p < 0,05) respecto al control, según las
pruebas de ANOVA y Duncan (n = 10).
Latencia (min)
25
20
15
10
5
0
Salina 1 % 5 % 30 %
*
*
*
*
Diazepam
Salina 1 % 5 % 30 % Diazepam
FIG. 3. Latencia de las convulsiones inducidas por picrotoxina, en
ausencia (salina) y presencia de la administración previa de
decocciones de C. nocturnum. Las barras representan la media y el
error estándar. El asterisco indica diferencia significativa (p < 0,05)
respecto al control, según las pruebas de ANOVA y Duncan (n = 10).
*
*

Tiempo de muerte (min)
50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
Amplitud de espigas (%)
110
100
90
80
70
Salina 1 % 5 % 30 % Diazepam
FIG. 4. Tiempo de muerte en las convulsiones inducidas por
picrotoxina, en ausencia (salina) y presencia de la administración
previa de decocciones de C. nocturnum. Las barras
representan la media y el error estándar. El asterisco indica
diferencia significativa (p < 0,05) respecto al control, según
las pruebas de ANOVA y Duncan (n = 10).
Hiperextensi n de las
patas posteriores (s)
25
20
15
10
5
0
Salina 1 % 5 % 30 % Diazepam
FIG.5. Duración de la hiperextensión de las patas posteriores
en las convulsiones inducidas por electrochoque, en ausencia
(salina) y presencia de la administración previa de
decocciones de C. nocturnum.
*
*
*
0 2 3 4 5 6 7h
F - primario
F - primario - control
*
F - secundario
F - secundario - control
FIG. 6. Efecto del extracto al 5 % de C. nocturnum sobre el foco
penicilínico.
*
*
El extracto de C. nocturnum al 5 % disminuyó
significativamente la amplitud de espigas hasta el 85 y 80 %
en el foco primario y secundario, respectivamente (figura 6).
Discusión
Los resultados muestran que los extractos de C.
nocturnum presentan actividad antiepiléptica en el modelo
de las convulsiones inducidas por isoniacida, a diferencia
del diazepam, el cual bloqueó totalmente las convulsiones
en los 3 modelos conductuales. Es conocido que las
benzodiacepinas facilitan la inhibición presináptica medular
y la postsináptica de áreas del sistema nervioso central, 6
interactuando a través de su receptor con el del ácido gammaaminobutírico
(GABA) y el canal del ion cloro. 7 Por otra
parte, se conoce que el mecanismo de la acción
convulsivante de la isoniacida es diferente al de la
picrotoxina. En el primer caso se trata de un inhibidor de la
glutámico-L decarboxilasa enzima limitante de la síntesis
del GABA con la subsecuente reducción de la neurotrasmisión
gabaérgica. 8 En el segundo caso el mecanismo es un
bloqueo postsináptico que involucra al receptor del GABA. 9
Esto sugiere que el posible mecanismo de acción del C.
nocturnum está relacionado con un incremento en la síntesis
y/o liberación del neurotrasmisor, mecanismo que resultaría
insuficiente para impedir las consecuencias del bloqueo
postsináptico de los receptores gabaérgicos producido por
picrotoxina. Es concordante el hecho de que las espigas epilépticas
inducidas por aplicación tópica de penicilina también
son reducidas por los extractos de C. nocturnum, ya que
se ha sugerido que el mecanismo de acción del antibiótico
en la neurotrasmisión gabaérgica también es de carácter
presináptico, 10 reduciendo la recaptación del GABA y la actividad
del GAD. 11,12
Estos resultados confirman las propiedades anticonvulsivantes
atribuidas al C. nocturnum en la medicina tradicional.
Agradecimientos
Se les agradece a Lorgia Carrión y a Nancy Meléndez
por la asistencia técnica prestada.
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Recibido: 19 de marzo de 2002. Aprobado: 3 de agosto de
2002.
Lic. María Teresa Buznego Rodríguez. Instituto de Neurología
y Neurocirugía, Avenida 29 y calle D, Ciudad de La Habana
10 400, Vedado, Cuba.