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INFORME DE <strong>ANALISIS</strong> MICROBIOLOGICO DE <strong>AGUA</strong><br />
Para realizar el análisis completo de nuestra muestra de agua,<br />
vamos a realizar el recuento de aerobios a 22ºC, aerobios a 37ºC,<br />
coliformes totales y fecales ( mediante filtración en membrana) y<br />
esporas de clostridios sulfito reductores (también por filtración de<br />
membrana).<br />
• Aerobios a 22ºC (inclusión):<br />
El medio que hemos utilizado es agar nutritivo.<br />
Hemos hecho 3 diluciones de la muestra de agua.:<br />
.<br />
Hemos depositado 1ml y 0,1 ml de la muestra de agua de cada una de las<br />
diluciones en una placa Petri vacía y hemos vertido el agar nutritivo por encima.<br />
Posteriormente, hemos homogenizado la placa y la hemos dejado solidificar.<br />
Las placas se incuban invertidas a 22ºC y 72h.<br />
Resultados:<br />
9,8*10^7 UFC/ml de muestra original.<br />
• Aerobios a 37ºC (inclusión)<br />
El medio que hemos utilizado es agar nutritivo.<br />
Hemos hecho 3 diluciones de la muestra de agua.:<br />
.<br />
Hemos depositado 1ml y 0,1 ml de la muestra de agua de cada una de las<br />
diluciones en una placa Petri vacía y hemos vertido el agar nutritivo por encima.<br />
Posteriormente, hemos homogenizado la placa y la hemos dejado solidificar.<br />
Las placas se incuban invertidas a 37ºC y 48h.<br />
Resultados:<br />
2,8*10^8 UFC/ml muestra original.<br />
• Reconto de coliformes totais e fecais (FM)
*Coliformes totales:<br />
Colonias rojas. Las placas se incuban invertidas a 37ºC 24h en un medio<br />
tipo ENDO.<br />
Preparamos medio sin autoclavar.<br />
Las colonias coliformes tendrán un tono verdoso.<br />
Filtramos 100 ml de agua de la muestra en un filtro de membrana y con<br />
unas pinzas se coloca el filtro sobre el agar endo.<br />
Hacemos el recuento de las colonias verdosas:<br />
No podemos dar un resultado ya que encontramos un número de UFC<br />
menor de 60. ( La cifra debe comprender una cantidad entre 60 y 80<br />
UFC).<br />
*Coliformes fecales:<br />
Preparamos AGAR FC y añadimos 10 ml de ácido rosólico al 1% en<br />
NaOH 0,2 N.<br />
Ajustamos el PH hasta 7,4.<br />
Calentar medio y repartir en placas/ no autoclavar.<br />
Filtramos 100 ml de agua en un filtro de membrana y con unas pinzas<br />
previamente flameadas, colocamos la membrana sobre la superficie del<br />
agar FC. Incubamos a 44,5ºC 24h.<br />
Realizamos el recuento de las colonias azules ( no de otro color) y<br />
expresar en UFC/100ml muestra.<br />
Hacemos recuento colonias azules:<br />
Resultado:<br />
Sólo podemos dar por válida una de las placas, en la cual aparecen 22<br />
coiformes fecales confirmados/100 ml muestra.<br />
• Reconto de enterococos fecais (FM)<br />
Utilizaremos medio KF Streptococcus. Las colonias serán de color rojo<br />
oscuro.
Al preparar el agar, añadir 10 ml de TTC 1% sin autoclavar.<br />
Filtramos 100 ml de agua sobre un filtro de membrana estéril. Con<br />
pinzas flameadas, colocamos la membrana sobre el agar e incubamos<br />
las placas invertidas a 37ºC 48h.<br />
Contamos colonias rosas o rojas y lo expresamos en UFC/100ml<br />
muestra.<br />
Los resultados obtenidos a han sido:<br />
10^-4 46 UFC/100ml muestra original<br />
10^-5 7UFC/100ml muestra (Descartado)<br />
10^-6 2 UFC/100 ml muestra (Descartado)<br />
(46UFC*10^4)/100ml = 4600 UFC en 100 ml muestra original<br />
• Esporas de clostridios Sulfito-Reductores (roll-tube)<br />
Hemos preparado diluciones<br />
Sembrar en cada tubo 20 ml del agua de muestra a una temperatura de<br />
60ºC, mientras el agar aún esté líquido.<br />
El resultado es negativo ya que no hemos obtenido crecimiento.<br />
Hemos utilizado AGAR SPS<br />
Incubación: 37ºC 48h.