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identificación de los hongos fue realizada después de 15 d de
incubación, sobre la base de las características del crecimiento,
forma y tamaño de los conidos.
Inoculación. Para confirmar que los microorganismos
aislados fueron evidentemente los agentes causales del
manchado azul en cada madera, 10 pequeños bloques de 2,5 x
2,5 x 2,5 cm de madera sana recién tumbada procedente de las
mismas localidades, fueron inoculados con cada uno de los
hongos aislados después de una semana de crecimiento. Las
muestras de madera fueron previamente esterilizadas
mediante la aplicación de rayos gamma. La inoculación
consistió en colocar asépticamente un trozo de micelio (1 cm
diám) sobre cada bloque de madera. Las muestras inoculadas
y sus respectivos testigos fueron incubados durante una
semana en un cuarto de acondicionamiento con las mismas
condiciones de crecimiento de los aislamientos.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Aislamiento. En los dos medios de cultivo utilizados el
aislamiento proveniente de la madera de Pino Ocarpa comenzó
con un crecimiento micelial hialino llegando a ser marrón
oscuro. Después de dos semanas de crecimiento se observaron
perfectamente hifas ramificadas y septadas, picnidios inmersos
y superficiales, separados o agregados, globosos, uniloculares
y de color marrón oscuro. También se apreciaron conidios
marrón oscuro, de 28-43 x 10-16 μm, oblongas a clavadas,
rectas, de paredes gruesas, ornamentadas, ápice obtuso y base
truncada. Estas características corresponden a Sphaeropsis
sapinea (Fr.) Dyko & Sutton (syn = Diplodia pinea (Desm.)
Kickx, Petrak & Sydow) (24).
El aislamiento de la madera de Neem desarrolló micelio
superficial con hifas ramificadas, septadas de color marrón
oscuro. Conidiomata estromático superficial, agregados,
globosos, de paredes gruesas y de color marrón oscuro.
Conidios de 19 - 29 x 10 - 15 μm, formados después de 15 d,
hialinos de paredes delgadas cuando joven y marrón oscuro
de paredes gruesas al madurar, desarrollando un septo medio
y estriaciones longitudinales. Esta descripción corresponde
a Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griff. & Maubl. (syn =
Botryodiplodia theobromae Pat.), conocido como hongo
causante de manchado azul en maderas de coníferas y
latifoliadas (19,24,28).
Inoculación. En la prueba de inoculación de los bloques
de madera sana, a los 5 d de incubación los hongos produjeron
el mismo tipo de manchado azul, similar al observado en las
muestras de madera invadidas naturalmente (Fig. 1). Estos
resultados confirmaron que los hongos identificados causan
manchado azul en las maderas investigadas.
S. sapinea ha sido reportado en ca 25 países, entre 30°-50°
de latitud en los hemisferios Norte y Sur (25). Es responsable
de causar tizón en brotes, cáncer, pudrición de raíces y
manchado azul de la madera en muchas especies de pino
(26,27). Este hongo es considerado un patógeno primario de
raíces en Pinus elliottii, P. taeda y P. caribaea (28). S. sapinea
presenta una amplia distribución en Venezuela, siendo
comúnmente encontrado en los grandes viveros de Pino Caribe
ubicados en el Estado Monágas, pertenecientes a la Compañía
CVG Proforca. También ha sido reconocido como causante de
tizón en ramas de Pino Caribe en distintos sitios del país (15).
Sin embargo, este es el primer reporte de manchado azul en
madera de Pino Ocarpa causado por S. sapinea.
Fig. 1. Síntomas de manchado azul ocasionados por
Lasiodiplodia theobromae en madera de Neem (A) y Sphaeropsis
sapinea en madera de Pino Ocarpa (B).
L. theobromae ha sido reportado causando manchado azul
en madera de Pino Caribe en Venezuela y Trinidad (3,4,14) y
en maderas latifoliadas tropicales (2,12). Este hongo es
ampliamente conocido en el campo agrícola (20). Causa cáncer
en Platanus occidentalis, Dyera costulata y Quercus primus
(11,13,21), y muerte regresiva en Hevea brasiliensis (17), Pyrus
sp. (1) y Albizia falcatara (22). En Venezuela, se encontró
causando daño en ramitas de naranjos (2), pero esta es la
primera vez que es reportado causando manchado azul en
madera de Neem.
La ocurrencia de los hongos causantes del manchado azul,
tales como L. theobromae o S. sapinea en árboles recién
tumbados, se atribuye a la presencia de azúcares solubles y
almidones en la madera (7). Estos hongos asimilan y
metabolizan una gran variedad de mono- di-, oligo- y
polisacáridos (23). Sin embargo, no existe una clara correlación
entre la severidad del manchado y la concentración de
carbohidratos (18). L. theobromae tiene la capacidad de
degradar células parenquimáticas en especies latifoliadas o
tejidos con altos contenidos de celulosa, como por ejemplo las
capas gelatinosas encontradas en algunas especies Populus (6).
L. theobromae puede producir degradación de las paredes
celulares de la madera con consecuente pérdida de sus
propiedades mecánicas (5); por consiguiente, es probable que
pueda ocasionar este mismo daño en la madera de Neem, aun
cuando se reporta que esta especie presenta una defensa
natural contra algunos insectos, nematodos, hongos, bacterias
y virus (10). Aparentemente, la madera de Neem no ha
desarrollado una defensa contra el ataque del hongo del
manchado azul.
Fitopatol. Venez. 31