ULTRASENSE EA - Hart Biologicals

ULTRASENSE EA
HB-2203-FG
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For in vitro diagnostic use
Pour usage diagnostique in-vitro
in-vitro diagnostikum
Para uso diagnóstico in-vitro
Per uso diagnostico in-vitro
Store at 2-8 o C
Conserver à 2-8 o C
Lagern bei 2-8 o C
Conservar a 2-8 o C
Conservare a 2-8 o C
Use By
A utiliser avant le
Verw. Bis:
Utilizar antes de
Usar entro
Lot
Lot
Ch.-B.:
Lote
Lotto
Hart Biologicals Ltd,
2 Rivergreen Business Centre
Queens Meadow
Hartlepool TS25 2DL UK
Tel: +44 (0) 1429-271100 Fax: +44 (0) 1429-277085
www.hartbio.com, e-mail: info@hartbio.com
(HB-0240-LIT Rev 2)
INTENDED USE
The ULTRASENSE EA is composed of liquid soy phosphatides with plasma activator for use in the determination of activated partial thromboplastin
time (APTT) in citrated plasma and related coagulation procedures.
SUMMARY
The main use for the APTT is for the screening of coagulation defects and the presence of inhibitors. The test is prolonged by the deficiencies of
factors VIII, IX, X, XI and XII and defects of the contact phase, e.g. prekallikrein, high molecular weight kininogen. It also may be prolonged by gross
defects of factor II, V and fibrinogen. With reliable APTT systems, specific and non-specific inhibitors of intrinsic clotting factors are detected. The
APTT is also the most widely used method for the laboratory monitoring of heparin administration (1,2) . The APTT is also used as in the ECAT study as
an overall assessment of the intrinsic clotting system, Accelerated APTT have been reported after operations, oral contraceptive administration and
withdrawal or oral anticoagulation (3) .
REAGENT
The ULTRASENSE EA is a preparation of soy phospholipids and ellagic acid activator with buffer, stabilizers and preservatives. The reagent is
provided ready to use. Mix reagent by gentle inversion (5 to 8 times) before use.
STORAGE AND STABILITY
The ULTRASENSE EA is stable according to the following specification. DO NOT FREEZE.
Unopened 2 – 8°C 36 months
Open vial 2 – 8°C 30 days
On-board CoaLAB 1000 18 - 26°C 24 Hours
SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION
Test plasma should be prepared from citrated whole blood without heparin, EDTA or oxalate. To obtain the plasma, carefully mix 1 part sodium citrate
solution (0.11 mol/L) with 9 parts venous blood, avoiding the formation of foam.
Immediately centrifuge for 10 minutes at approximately 3000 rpm (1500 x g), remove the supernatant plasma and keep at + 15 to + 25°C until use in
the test. In the US please refer to the NCCLS Document H21-A2, entitled “Collection, Transport and Processing of Blood Specimens for Coagulation
Testing and Performance of Coagulation Assays” (4) .
MATERIALS PROVIDED
ULTRASENSE EA
MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED
Hart Biologicals Calcium Chloride 0.025M (HB-2201-FG)
PROCEDURE
This procedure pertains to manual or semi-automated coagulation systems. Refer to your instrument manual for more detailed instrument specific
instructions.
Pre-incubate the Hart Biologicals Calcium Chloride (0.025M) to 37 o C for at least 10 minutes (water-bath).
Stepwise pipette scheme for manual systems
50µl Sample, control or standard plasma
50µl ULTRASENSE EA.
120s Incubation at 37°C (in the measuring block).
50µl Hart Biologicals Calcium Chloride (0.025M) as start reagent (pre-warmed at 37°C).
The clotting time in seconds will be recorded automatically by the analyzer. Refer to the instrument operator’s
manual for further information.
QUALITY CONTROL
Reliability of test results should be monitored by use of Vericon Control Plasma 1-2. A control range should be established by the laboratory to
determine the allowable variation in day to day performance for each level of control. Failure to meet quality control specifications should be
investigated and resolved.
Hart Biologicals Vericon 1 (HB-4416-FG) Normal Values
Hart Biologicals Vericon 2 (HB-4417-FG) Abnormal Values
In case the values of Control Plasma are out of the given ranges, check:
Calibration, reagent, stability of sample/controls or analyzer.
CALCULATION OF RESULTS
For best results, duplicate samples are recommended. APTT results should be reported as clotting time in seconds. Calculate the mean clotting time of
duplicate samples and controls. Differences between duplicate results should be less than 5%. Repeat the test if necessary.
LIMITATIONS
Stress, exercise, pregnancy, the post-partum state and surgical operations result in acceleration of the test. Prothrombic changes associated with
recent deep-vein thrombosis, thromboembolic disorders and oestrogen administration may result in accelerated clotting times (5) . Acquired pathological
states such as liver disease, disseminated intravascular coagulation (DIC), and drug toxicity cause prolongation. Certain drugs, including oral
anticoagulants, heparin and thrombolytic agents, prolong the APTT.
EXPECTED VALUES
Analyzer Method Normal Values (in seconds)
CoaDATA Manual 25 - 39
CoaLAB Automated 25 - 39
Therapeutic ranges for monitoring anticoagulation therapy will vary from laboratory to laboratory, therefore it is essential that each laboratory establish
relevant APTT ranges for its respective patient population.
Abnormal results obtained with a plasma from a patient not on anticoagulant therapy may indicate a factor deficiency or the presence on an inhibitor.
The result may also be due to the effects of certain drugs and medications. Additional procedures such as the PT test and mixing studies using factor
deficient plasma are usually required.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Heparin Sensitivity: Numerous variables can affect the behavior of heparinized plasma, when evaluated by the APTT test. As a general guideline,
when increasing amounts of Heparin were added to normal plasma, the following results were obtained using the ULTRASENSE EA on a photooptical
instrument.
Heparin (NIBSC - unfractionated) Concentration
(units / mL)
APTT – Clotting Time
(in seconds)
0.0 33.2
0.1 36.3
0.2 42.1
0.3 52.1
0.4 61.4
0.5 74.9
0.6 85.1
0.8 105.0
1.0 131.5
REFERENCES
1. Thompson JM. The control of heparin therapy by the activated partial thromboplastin time: sensitivity of various thromboplastins to heparin,
Triplett DA. Ed. Standardisation of coagulation assays: an overview. Skokie IL: College of American Pathologists 1982; 195-206
2. Triplett DA. Heparin: Clinical use and monitoring. Triplett DA ed. Laboratory evaluation of coagulation. Chicago IL: American society of clinical
pathologists, 1982; 217-313
3. Poller L. Activated partial thromboplastin time (aPTT). Laboratory techniques in thrombosis a manual, 2nd edition, the Netherlands: Kluwer
academic Publishers, 1999; 37-43
4. NCCLS, Collection, transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays, 2nd edition
H21-A3 1991.
5. Thompson JM, Poller L. The activated partial thromboplastin time, Thompson JM ed. Blood coagulation and haemostasis: a practical guide.
Edinburgh: Churchill Livingstone, 1985; 301-9
6. Hathaway WE, Bonnar J., Physiology of coagulation in the fetus and newborn infant., Perinatal coagulation. New York: Grune& Stratton, 1978;
69
WARRANTY
This product is warranted to perform in accordance with its labelling and literature. Hart Biologicals disclaims any implied warranty of merchantability
or fitness for any other purpose. Purchaser must calibrate and determine the suitability of Hart Biologicals products for their specific applications. In
no event will Hart Biologicals be liable for any consequential damages arising out of aforesaid express warranty.
ANWENDUNGSBEREICH
Die ULTRASENSE EA ist eine Zusammensetzung aus Sojaphospholipiden mit Plasmaaktivator zur Bestimmung der aktivierten partiellen
Thromboplastinzeit (APTT) in Citratplasma und damit zusammenhängenden Gerinnungsvorgängen.
ZUSAMMENFASSUNG
Die aktivierte partielle Thromboplastinzeit (APTT) ist der Globaltest der Gerinnung und der Gegenwart von Inhibitoren. Verlängerungen der APTT
werden verursacht durch den Mangel der Faktoren VIII, IX, X, XI und XII und der Kontaktfaktoren, z. B. Prekallikrein und hochmolekulares Kininogen
(HMWK). Eine Verlängerung kann zudem durch einen erheblichen Mangel der Faktoren II, V und Fibrinogen verursacht werden. Mit zuverlässigen
APTT-Systemen werden spezifische und unspezifische Inhibitoren der intrinsischen Blutgerinnungsfaktoren erfasst. Die APTT ist zudem die am
weitesten verwendete Labormethode zur Überwachung der Heparin-Gabe (1,2) . Ferner wird die APTT in der ECAT-Studie zur Gesamtbewertung des
intrinsischen Gerinnungssystems verwendet. Eine Verlängerung der APTT wurde nach Operationen, nach der Gabe und dem Absetzen von oralen
Verhütungsmitteln und der oralen Antikoagulation berichtet (3) .
REAGENZ
Die ULTRASENSE EA ist eine Zusammensetzung aus Sojaphospholipiden und Ellagsäure-Aktivator mit Puffer, Stabilisatoren und
Konservierungsmitteln. Das Reagenz ist gebrauchsfertig. Reagenz vor Gebrauch durch vorsichtiges Überkopfdrehen (5 bis 8 Mal) mischen.
LAGERUNG UND STABILITÄT
Die ULTRASENSE EA ist entsprechend der nachfolgenden Spezifikation stabil. NICHT EINFRIEREN.
Ungeöffnet 2 – 8°C 36 Monate
Geöffnete Flasche 2 – 8°C 30 Tage
CoaLAB 1000 18 - 26°C 24 Stunden
PROBENABNAHME UND VORBEREITUNG
Das Testplasma sollte aus Citratblutohne Heparin, EDTA oder Oxalat hergestellt werden. Um das Plasma zu erhalten, mischen Sie sorgfältig 1 Teil
Natriumcitrat-Lösung (0.11 mol/L) mit 9 Teilen venösem Blut; vermeiden Sie dabei die Bildung von Schaum. Zentrifugieren Sie unmittelbar danach für
10 Minuten bei ca. 3000 U/Min (1500 x g), entnehmen Sie das überstehende Plasma und verwahren es bis zu seinem Gebrauch bei +15 bis +25°C.
In den USA erhalten Sie weitere Informationen im NCCLS Dokument H21-A2 mit dem Titel “Collection, Transport and Processing of Blood
Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays”.
MITGELIEFERTE MATERIALIEN
ULTRASENSE EA
ZUSÄTZLICH BENÖTIGTE MATERIALIEN
Hart Biologicals Kalziumchlorid 0.025M (HB-2201-FG)
TESTDURCHFÜHRUNG
Dieses Verfahren bezieht sich auf manuelle oder halbautomatische Gerinnungssysteme. Lesen Sie bitte die Bedienungsanleitung für weitere
gerätespezifische Anweisungen.
Inkubieren Sie das Hart Biologicals Kalziumchlorid (0.025M) vorab für mindestens 10 Minuten bei 37°C
(Wasserbad).
Schrittweiser Pipettierablauf für manuelle Geräte
50µl Proben-, Kontroll- oder Standardplasma
50µl ULTRASENSE EA
120s Inkubation bei 37°C (im Messblock)
50µl Hart Biologicals Kalziumchlorid (0.025M) als Startreagenz (vorgewärmt bei 37°C)
Die Gerinnungszeit in Sekunden wird automatisch durch den Analyser aufgezeichnet. Lesen Sie die Bedienungsanleitung
für weitere gerätespezifische Informationen.
QUALITÄTSKONTROLLE
Die Zuverlässigkeit der Testergebnisse sollte in jedem Lauf mit Hart Biologicals Vericon 1 und 2 überwacht werden. Jedes Labor sollte hierfür einen
Qualitätskontrollbereich mit den zulässigen Tag-zu-Tag-Abweichungen für jedes Kontrollplasma festlegen. Werden Vorgaben der Qualitätskontrolle
nicht erfüllt, sind die Ursachen zu untersuchen und zu beheben.
Hart Biologicals Vericon 1 (HB-4416-FG) Normale Werte
Hart Biologicals Vericon 2 (HB-4417-FG) Abnormale Werte
Befinden sich Werte des Kontrollplasmas außerhalb des vorgegebenen Qualitätskontrollbereiches, überprüfen Sie: die Kalibration, das Reagenz, die
Stabilität der Proben/Kontrollen oder den Analyser.
KALKULATION DER ERGEBNISSE
Es wird die Messung von Proben in Doppelbestimmung empfohlen. APTT Ergebnisse sollten als Gerinnungszeit in Sekunden angegeben werden.
Berechnen Sie die mittlere Gerinnungszeit aus der Doppelbestimmung der Proben und Kontrollen. Die Abweichung zwischen den Doppelwerten
sollte dabei nicht größer als 5% sein. Wiederholen Sie die Messungen falls erforderlich.
LIMITIERUNGEN
Stress, körperliche Aktivität, Schwangerschaft, die Phase nach der Geburt und chirurgische Eingriffe führen zu einer Beschleunigung des Tests.
Prothrombin-Änderungen in Verbindung mit kürzlicher tiefer Venenthrombose, thromboembolischen Störungen und der Gabe von Östrogen können
zu einer Beschleunigung der Gerinnungszeiten führen (5) . Erworbene pathologische Zustände wie Lebererkrankung, disseminierte intravasale
Gerinnung (DIC) und Arzneimitteltoxizität verursachen eine Verlängerung. Bestimmte Arzneimittel, einschließlich orale Antikoagulationsmittel,
Heparin und Thrombolytica verlängern die APTT.
ERWARTETE ERGEBNISSE
Analyzer Methode Normalbereich (in Sekunden)
CoaDATA Manuell 25 - 39
CoaLAB Automatisch 25 - 39
Therapeutische Bereiche für die Überwachung der Antikoagulation können von Labor zu Labor unterschiedlich sein. Daher ist es wichtig, dass jedes
Labor relevante APTT Bereiche ermittelt, die den jeweiligen Patientenpopulationen entsprechen.
Abnormale Ergebnisse einer Probe eines Patienten, der sich nicht unter Antikoagulanztherapie befindet, weisen auf einen Faktormangel hin oder
zeigen das Vorhandensein eines Inhibitors an. Das Ergebnis kann auch durch bestimmte Medikamente oder Drogen beeinflusst werden. Weitere
Verfahren, z. B. die Messung einer PT oder die Anwendung von Faktor-Mangelplasmen sind dann in der Regel erforderlich.
DURCHFÜHRUNGSMERKMALE
Heparinempfindlichkeit: Das Verhalten von heparinisiertem Plasma kann von verschiedenen Faktoren beeinflusst werden, wenn es mittels APTT-
Test bewertet wird. Im allgemeinen wurden bei Erhöhung der Heparindosis mit dem Hart Biologicals APTT folgende Ergebnisse auf einem
fotooptischen Gerät erzielt:
Heparin (NIBSC – unfraktioniertes) - Konzentration
(Einheiten / mL)
APTT – Gerinnungszeit
(in Sekunden)
0.0 33.2
0.1 36.3
0.2 42.1
0.3 52.1
0.4 61.4
0.5 74.9
0.6 85.1
0.8 105.0
1.0 131.5
REFERENZEN
1. Thompson JM. The control of heparin therapy by the activated partial thromboplastin time: sensitivity of various thromboplastins to heparin,
Triplett DA. Ed. Standardisation of coagulation assays: an overview. Skokie IL: College of American Pathologists 1982; 195-206
2. Triplett DA. Heparin: Clinical use and monitoring. Triplett DA ed. Laboratory evaluation of coagulation. Chicago IL: American society of clinical
pathologists, 1982; 217-313
3. Poller L. Activated partial thromboplastin time (aPTT). Laboratory techniques in thrombosis a manual, 2nd edition, the Netherlands: Kluwer
academic Publishers, 1999; 37-43
4. NCCLS, Collection, transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays, 2nd edition
H21-A3 1991.
5. Thompson JM, Poller L. The activated partial thromboplastin time, Thompson JM ed. Blood coagulation and haemostasis: a practical guide.
Edinburgh: Churchill Livingstone, 1985; 301-9
6. Hathaway WE, Bonnar J., Physiology of coagulation in the fetus and newborn infant., Perinatal coagulation. New York: Grune& Stratton, 1978;
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GARANTIE
Dieses Produkt stimmt mit den Kennzeichnungen und seiner Literatur überein. Hart Biologicals schließt ausdrücklich alle konkludenten
Gewährleistungen der Marktgängigkeit oder der Eignung für einen anderen Zweck aus. Der Käufer ist verantwortlich für die Kalibration und
Eignungsbestimmung der Hart Biologicals Produkte entsprechend seiner spezifischen Anwendung. In keinem Fall übernimmt Hart Biologicals die
Haftung aus eventuellen Folgeschäden, die aus der vorgenannten ausdrücklichen Garantie entstehen.

USO PREVISTO
ULTRASENSE EA è una preparazione liquida a base di fosfatidi di soia con un attivatore del plasma destinata alla determinazione del tempo di
tromboplastina parziale attivata (APTT) nel sangue citratato e a procedure di coagulazione correlate.
SOMMARIO
L’APTT è utilizzato principalmente per lo screening dei difetti della coagulazione e per rilevare la presenza di inibitori. Il test è prolungato nelle
carenze dei fattori VIII, IX, X, XI e XII e in caso di difetti nella fase di contatto, ad esempio carenza di precallicreina e chininogeno ad alto peso
molecolare. Può essere prolungato anche da grossi difetti dei fattori II e V e del fibrinogeno. Con sistemi APTT affidabili vengono rilevati gli inibitori
specifici e non specifici dei fattori della via intrinseca della coagulazione. L’APTT è anche il metodo più diffuso per il monitoraggio di laboratorio della
somministrazione di eparina (1,2) . L’APTT è anche impiegato, ad esempio nello studio ECAT, per la valutazione globale del sistema di coagulazione
per via intrinseca. Sono stati riportati APTT accelerati in seguito ad interventi chirurgici, a somministrazione e sospensione di contraccettivi orali o
nella terapia con anticoagulanti orali (3) .
REAGENTE
ULTRASENSE EA è una preparazione di fosfolipidi di soia ed attivatore acido ellagico con tampone, stabilizzatori e conservanti. Il reagente è pronto
all’uso. Miscelare il reagente capovolgendo delicatamente (5-8 volte) prima dell’uso.
STABILITÀ E CONSERVAZIONE
APTT LABiTec è stabile in base alle seguenti specifiche. NON CONGELARE.
Chiusa 2 – 8°C 36 mesi
Provetta aperta 2 – 8°C 30 giorni
CoaLAB 1000 (a bordo) 18 - 26°C 24 ore
PRELIEVO E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI
Preparare il plasma per il test da sangue intero citratato senza eparina, EDTA od ossalato. Per ottenere il plasma, miscelare con attenzione 1 parte
di soluzione di sodio citrato (0.11 mol/L) con 9 parti di sangue venoso, evitando la formazione di schiuma.Centrifugare immediatamente per 10 minuti
a circa 3000 rpm (1500 x g), rimuovere il plasma surnatante e conservare da +15 a + 25° C fino al momento dell’uso nel test. Fare riferimento al
“NCCLS Document H21-A2”, intitolato “Collection, Transport and Processing of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of
Coagulation Assays”.
MATERIALI FORNITI
ULTRASENSE EA
MATERIALI RICHIESTI MA NON FORNITI
Cloruro di calcio Hart Biologicals 0.025M (HB-2201-FG)
PROCEDURA
Questa procedura si riferisce a sistemi di coagulazione manuali o semi-automatici. Fare riferimento al manuale dello strumento per istruzioni più
specifiche.
Pre-incubare il cloruro di calcio Hart Biologicals (0.025M) a 37°C per almeno 10 minuti (bagnomaria).
Pipettare:
50µl Campione, controllo o standard plasma.
50µl ULTRASENSE EA
120s Incubazione a 37°C (nel canale di misurazione)
50µl Cloruro di calcio Hart Biologicals (0.025M) come reagente di avvio (pre-riscaldato a 37°C).
Il tempo di coagulazione in secondi verrà memorizzato automaticamente dall’analizzatore. Fare riferimento al
manuale per l’operatore dello strumento per ulteriori informazioni.
CONTROLLO DI QUALITÀ
L’affidabilità dei risultati del test va monitorata in ogni processo utilizzando plasma di controllo normale o anomalo. Spetta al laboratorio il compito di
definire un intervallo di controllo allo scopo di determinare le variazioni accettabili nelle operazioni quotidiane per ciascun livello di controllo. I test che
non soddisfano le specifiche dei controlli di qualità vanno indagati e risolti.
Hart Biologicals Vericon 1 (HB-4416-FG) Valori normale
Hart Biologicals Vericon 2 (HB-4417-FG) Valori anomale
Nel caso in cui i valori del plasma di controllo sono fuori dai range forniti, controllare:
Calibrazione, reagente, stabilità del campione/controllo o analizzatore.
CALCOLO DEI RISULTATI
Per risultati ottimali, si raccomanda di duplicare i campioni. I risultati APTT vanno riportati come tempo di coagulazione in secondi. Calcolare il tempo
medio di coagulazione dei campioni in duplicato e dei controlli. Le differenze tra i risultati duplicati devono essere inferiori al 5%. Ripetere il test se
necessario.
LIMITAZIONI
Stress, sforzo fisico, gravidanza, puerperio e interventi chirurgiche possono causare l’accelerazione del test. Variazioni dell’attività protrombinica
associate a trombosi venosa profonda recente, a disturbi tromboembolici e alla somministrazione di estrogeni possono accelerare i tempi di
coagulazione (5) . Causano un prolungamento dell’APTT stati patologici acquisiti come malattie epatiche, coagulazione intravascolare disseminata
(DIC) e tossicità ai farmaci. Prolungano l’APTT anche alcuni farmaci, fra cui gli anticoagulanti orali, l’eparina e gli agenti trombolitici.
VALORI ATTESI
Analizzatore Metodo Range normale (in secondi)
CoaDATA Manuale 25 - 39
CoaLAB Automatico 25 - 39
I range terapeutici per monitorare la terapia anticoagulante variano da laboratorio a laboratorio, quindi è essenziale che ogni laboratorio stabilisca i
range di APTT rilevanti per la propria popolazione di pazienti.
Risultati anomali ottenuti con un plasma da un paziente non sotto terapia anticoagulante potrebbero indicare la carenza di un fattore o la presenza di
un inibitore. Il risultato potrebbe anche essere influenzato da alcuni farmaci o sostanze stupefacenti. Solitamente si richiedono procedure addizionali
come il test del PT e studi realizzati utilizzando plasma con deficienza di un fattore.
CARATTERISTICHE DI PERFORMANCE
Sensibilità all’eparina: il comportamento del plasma eparinizzato nella valutazione mediante il test APTT può essere influenzato da numerose
variabili. Come linea guida generale, in seguito ad aggiunta nel plasma normale di quantità crescenti di eparina si sono osservati i seguenti risultati
utilizzando il test ULTRASENSE EA su uno strumento foto-ottico.
Concentrazioni di eparina (NIBSC - non frazionata)
(unità / mL)
APTT – Tempo di coagulazione
(in secondi)
0.0 33.2
0.1 36.3
0.2 42.1
0.3 52.1
0.4 61.4
0.5 74.9
0.6 85.1
0.8 105.0
1.0 131.5
BIBLIOGRAFIA
1. Thompson JM. The control of heparin therapy by the activated partial thromboplastin time: sensitivity of various thromboplastins to heparin,
Triplett DA. Ed. Standardisation of coagulation assays: an overview. Skokie IL: College of American Pathologists 1982; 195-206
2. Triplett DA. Heparin: Clinical use and monitoring. Ed. Triplett DA. Laboratory evaluation of coagulation. Chicago IL: American society of
clinical pathologists, 1982; 217-313
3. Poller L. Activated partial thromboplastin time (aPTT). Laboratory techniques in thrombosis a manual, 2a edizione, the Netherlands: Kluwer
academic Publishers, 1999; 37-43
4. NCCLS, Collection, transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays, 2a edizione
H21-A3 1991.
5. Thompson JM, Poller L. The activated partial thromboplastin time, Thompson JM ed. Blood coagulation and haemostasis: a practical guide.
Edinburgh: Churchill Livingstone, 1985; 301-9
6. Hathaway WE, Bonnar J., Physiology of coagulation in the fetus and newborn infant., Perinatal coagulation. New York: Grune& Stratton,
1978; 69
GARANZIA
Questo prodotto è garantito per l’impiego in accordo alla sua etichettatura e alla letteratura. La Hart Biologicals rifiuta ogni garanzia implicita di
commerciabilità o idoneità per qualsiasi altro scopo. Gli acquirenti devono calibrare e determinare l’idoneità dei prodotti Hart Biologicals per le loro
applicazioni specifiche. In nessun caso la Hart Biologicals sarà responsabile di qualsiasi danno al di fuori della citata garanzia esplicita.
APLICACIÓN
El ULTRASENSE EA se compone de fosfátidos de soja líquidos con un activador de plasma para utilizarse en la determinación del tiempo de
tromboplastina parcial activado (APTT) en plasma critrado y en procedimientos de coagulación relacionados.
RESUMEN
El tiempo de tromboplastina parcial activado (APTT) se usa principalmente para la detección de anormalidades de coagulación y la presencia de
inhibidores. La prueba es sensible a deficiencias de los factores VIII, IX, X, XI y XII y a anormalidades de la fase de contacto, p. ej. la precalicreína, del
quininógeno de alto peso molecular. También puede ser sensible a causa de anormalidades graves del factor II, V y fibrinógeno. Con sistemas de
APTT confiables se detectan inhibidores específicos y no específicos de factores de coagulación intrínseca. El APTT también es el método que más
se usa para el control de la administración de heparina en el laboratorio (1, 2) . El APTT también se usa como en el estudio ECAT como una valoración
general del sistema de coagulación intrínseca. Un APTT acelerado ha sido informado después de operaciones, administración de contraceptivo oral y
retirada o anticoagulación oral ( 3) .
REACTIVO
El ULTRASENSE EA es un preparado de fosfolípidos de soja y ácido elágico como activador con tampón, estabilizadores y conservantes. El reactivo
se proporciona listo para su uso. Mezcle el reactivo invirtiéndolo suavemente (de 5 a 8 veces) antes de usarlo.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
El ULTRASENSE EA es estable conforme a las siguientes especificaciones. NO CONGELAR.
Cerrado 2 – 8°C 36 meses
Vial abierto 2 – 8°C 30 días
Dentro del CoaLAB 1000 18 - 26°C 24 horas
RECOLECCIÓN DE MUESTRAS Y PREPARACIÓN
El plasma para la prueba debe prepararse a partir de sangre total citratada sin heparina, EDTA (ácido etilendiaminotetraacético, por sus siglas en
inglés) ni oxalato. Para obtener el plasma, mezcle cuidadosamente 1 parte de solución de citrato de sodio (0.11 mol/L) con 9 partes de sangre
venosa, evitando la formación de espuma.
Centrifugue la mezcla inmediatamente durante 10 minutos a aproximadamente 3000 rpm (1500 x g), retire el plasma sobrenadante y manténgala
entre + 15°C y + 25°C hasta que se use en la prueba. En los Estados Unidos consulte el documento del NCCLS H21-A2, titulado "Recolección,
transporte y procesamiento de muestras de sangre para pruebas de coagulación y conducción de ensayos de coagulación" (4) .
MATERIALES PROPORCIONADOS
ULTRASENSE EA
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO PROPORCIONADOS
Cloruro de calcio de Hart Biologicals 0.025M (HB-2201-FG)
PROCEDIMIENTO
Este procedimiento es concerniente a los sistemas de coagulación manuales o semiautomatizados. Consulte el manual del instrumento para
instrucciones más específicas del mismo.
Preincubar el cloruro de calcio Hart Biologicals (0.025M) a 37 o C durante al menos 10 minutos (baño María).
Esquema de pipeteado escalonado para sistemas manuales
50µl Plasma de muestra, control o estándar
50µl ULTRASENSE EA
120s Incubación a 37°C (en el bloque de medición)
50µl Cloruro de calcio Hart Biologicals (0.025M) como reactivo inicial (precalentado a 37°C)
El tiempo de coagulación en segundos será registrado automáticamente por el instrumento de análisis. Consulte
el manual de operación del instrumento para más información.
CONTROL DE CALIDAD
La fiabilidad de los resultados de la prueba debe ser controlada usando plasma de control Hart Biologicals. El laboratorio debe establecer un rango de
control para determinar la variación permitida en el rendimiento diario de cada plasma de control. Si no se satisfacen las especificaciones de control
de calidad deberán ser investigadas y resueltas.
Hart Biologicals Vericon 1 (HB-4416-FG) Valores normales
Hart Biologicals Vericon 2 (HB-4417-FG) Valores anormales
En el caso de que los valores del plasma de control estén fuera de los rangos establecidos, revise:
la calibración, el reactivo, la estabilidad de la muestra/controles o el instrumento de análisis.
CÁLCULO DE LOS RESULTADOS
Para obtener los mejores resultados, se recomienda duplicar las muestras. Los resultados del APTT se deben presentar como tiempo de coagulación
en segundos. Calcule la media del tiempo de coagulación de las muestras y controles duplicados. Las diferencias entre los resultados de los
duplicados deben ser inferiores al 5%. Repita la prueba si es necesario.
LIMITACIONES
El estrés, ejercicio físico, embarazo, estado posterior al parto y operaciones quirúrgicas pueden acelerar la prueba. Los cambios protrombóticos
relacionados con reciente trombosis venosa, trastornos tromboembólicos y administración de estrógeno pueden dar lugar a tiempos de coagulación
acelerados (5) . Los estados patológicos adquiridos tales como enfermedad hepática, coagulación intravascular diseminada (CID) y toxicidad de
medicamentos causan prolongación. Ciertos medicamentos, incluidos los anticoagulantes orales, heparina y agentes trombolíticos, prolongan el
APTT.
VALORES ESPERADOS
Instrumento analizador Método Valores normales (en segundos)
CoaDATA Manual 25 - 39
CoaLAB Automatizado 25 - 39
Los rangos terapéuticos para el control de la terapia de anticoagulación varían dependiendo del laboratorio, por lo tanto es esencial que cada
laboratorio establezca rangos relevantes del APTT para su respectiva población de pacientes.
Los resultados anormales obtenidos con una muestra de plasma de un paciente que no está bajo tratamiento con anticoagulantes pueden indicar una
deficiencia en los factores de coagulación o la presencia de un inhibidor. El resultado también puede ser debido a los efectos de ciertas drogas o
medicamentos. Generalmente se requiere la realización de procedimientos adicionales, como la prueba TP (tiempo de protrombina) y estudios de
mezclado mediante el uso de plasma de factor deficiente.
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO
Sensibilidad a la heparina: El comportamiento del plasma heparinizado depende de muchos factores cuando se evalúa mediante la prueba APTT.
Como directriz general, cuando se incrementaron las cantidades de heparina en el plasma normal se obtuvieron los siguientes resultados usando
ULTRASENSE EA en un instrumento foto-óptico.
Concentración de heparina (NIBSC – no fraccionada)
(unidades / mL)
APTT – Tiempo de coagulación
(en segundos)
0.0 33.2
0.1 36.3
0.2 42.1
0.3 52.1
0.4 61.4
0.5 74.9
0.6 85.1
0.8 105.0
1.0 131.5
REFERENCIAS
1. Thompson JM. The control of heparin therapy by the activated partial thromboplastin time: sensitivity of various thromboplastins to heparin,
Triplett DA. Ed. Standardisation of coagulation assays: an overview. Skokie IL: College of American Pathologists 1982; 195-206
2. Triplett DA. Heparin: Clinical use and monitoring. Triplett DA ed. Laboratory evaluation of coagulation. Chicago IL: American society of clinical
pathologists, 1982; 217-313
3. Poller L. Activated partial thromboplastin time (aPTT). Laboratory techniques in thrombosis a manual, 2nd edition, the Netherlands: Kluwer
academic Publishers, 1999; 37-43
4. NCCLS, Collection, transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays, 2nd edition
H21-A3 1991.
5. Thompson JM, Poller L. The activated partial thromboplastin time, Thompson JM ed. Blood coagulation and haemostasis: a practical guide.
Edinburgh: Churchill Livingstone, 1985; 301-9
6. Hathaway WE, Bonnar J., Physiology of coagulation in the fetus and newborn infant., Perinatal coagulation. New York: Grune & Stratton, 1978;
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GARANTÍA
Se garantiza el rendimiento de este producto de acuerdo con su etiqueta e información. Hart Biologicals niega cualquier garantía implícita de
comerciabilidad o adecuación para cualquier otro propósito. El comprador debe calibrar y determinar la idoneidad de los productos de Hart
Biologicals para sus usos específicos. En ningún caso Hart Biologicals será responsable por ningún daño resultante que surja fuera de la garantía
expresa antes mencionada.
DOMAINE D'APPLICATION
Le ULTRASENSE EA est composé de phosphatides de soja liquide avec activateur de plasma pour une utilisation en vue de la détermination du
temps de céphaline activée (APTT en anglais) dans le plasma citraté et dans les procédures de coagulation liées.
RÉSUMÉ
La principale utilisation de l’APTT est le dépistage de défauts de coagulation et de la présence d’inhibiteurs. Le test est allongé par les déficiences
des facteurs VIII, IX, X, XI et XII et les défauts de la phase de contact, par ex. prékallicréine, kininogène de haut poids moléculaire. Il peut également
être allongé en raison de défauts importants des facteurs II, V et du fibrinogène. Les systèmes APTT fiables permettent de détecter les inhibiteurs
spécifiques et non spécifiques des facteurs de coagulation intrinsèque. L’APTT est également la méthode la plus largement utilisée pour la
surveillance de l’administration d’héparine (1,2) par analyse en laboratoire. L’APTT est également utilisé, comme dans l’étude ECAT, en tant
qu’évaluation générale du système de coagulation intrinsèque. On a reporté un APTT accéléré à la suite d’opérations, d’administration et d’arrêt de
contraceptif oral ou anticoagulant oral (3) .
RÉACTIF
Le ULTRASENSE EA est une préparation de phospholipides de soja et activateur acide ellagique avec tampon, stabilisants et conservateurs. Le
réactif est livré prêt à l’emploi. Mélanger le réactif en le retournant doucement (5 à 8 fois) avant utilisation.
STOCKAGE ET STABILITÉ
Le ULTRASENSE EA est stable selon la spécification suivante. NE PAS CONGELER.
Non ouvert 2 – 8°C 36 mois
Fiole ouverte 2 – 8°C 30 jours
Chargé sur CoaLAB 1000 18 - 26°C 24 heures
Pour instruments CoaDATA 18 - 26°C 24 heures
PRÉLÈVEMENT D'ÉCHANTILLON ET PRÉPARATION
Le plasma testé doit être préparé à partir de sang total citraté sans héparine, EDTA ni oxalate. Pour obtenir le plasma, mélanger
précautionneusement 1 volume de solution de citrate de sodium (0,11 mol/L) avec 9 volumes de sang veineux, en évitant la formation de mousse.
Centrifuger immédiatement pendant 10 minutes à environ 3000 tr/min (1500 x g), enlever le plasma surnageant et conserver à + 15 to + 25 °C
jusqu’à l’utilisation pour le test. Aux USA, se référer au document NCCLS H21-A2 portant le titre « Collection, Transport and Processing of Blood
Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays » (4) .
MATÉRIEL FOURNI
ULTRASENSE EA
MATÉRIEL REQUIS MAIS NON FOURNI
Chlorure de calcium Hart Biologicals 0,025M (HB-2201-FG)
PROCÉDURE
Cette procédure s’applique aux systèmes de coagulation manuels ou semi-automatiques. Veuillez vous référer au manuel de votre instrument pour
des instructions spécifiques à l’instrument plus détaillées.
Pré-incuber le chlorure de calcium Hart Biologicals (0,025M) à 37 °C pendant au moins 10 minutes (bainmarie).
Plan des étapes de pipetage pour les systèmes manuels
50µl Plasma de l’échantillon, témoin ou standard
50µl ULTRASENSE EA
120s Incubation à 37 °C (dans le bloc de mesure).
50µl Chlorure de calcium Hart Biologicals (0,025M) comme réactif initiateur (préchauffé à 37 °C).
Le temps de coagulation en secondes sera enregistré automatiquement par l’analyseur. Référez-vous au manuel
d’utilisation de l’instrument pour plus d’informations.
CONTRÔLE DE QUALITÉ
La fiabilité des résultats de test doit être surveillée par l’utilisation du plasma de contrôle Vericon 1-2. Une plage de contrôle doit être établie par le
laboratoire afin de déterminer la variation admissible sur une base quotidienne pour chaque niveau de contrôle. Si les spécifications de contrôle de
qualité ne sont pas atteintes, rechercher et résoudre le problème.
Hart Biologicals Vericon 1 (HB-4416-FG) Valeurs normales
Hart Biologicals Vericon 2 (HB-4417-FG) Valeurs anormales
Si les valeurs du plasma de contrôle sont en-dehors des plages indiquées, contrôler les points suivants :
étalonnage, réactif, stabilité de l’échantillon/des témoins ou analyseur.
CALCUL DES RÉSULTATS
Pour de meilleurs résultats, il est recommandé de prendre des doubles échantillons. Les résultats d’APTT doivent être enregistrés sous forme de
temps de coagulation en secondes. Calculer le temps de coagulation moyen des échantillons doubles et témoins. La différence entre les résultats
doubles doit être inférieure à 5%. Répéter le test si nécessaire.
RESTRICTIONS
Le test est accéléré par les facteurs suivants : stress, activité physique, grossesse, état post-partum et opérations chirurgicales. Les changements
prothrombiques associés avec une thrombose veineuse profonde récente, des anomalies thromboemboliques et l’administration d’œstrogène
peuvent entraîner une accélération du temps de coagulation (5) . Les états pathologiques acquis tels qu'une maladie hépatique, une coagulation intravasculaire
disséminée (CIVD) et la toxicité médicamenteuse entraînent un allongement. Certains médicaments, y compris les anticoagulants oraux,
l’héparine et les agents thrombolytiques, allongent l’APTT.
VALEURS ATTENDUES
Analyseur Méthode Valeurs normales (en secondes)
CoaDATA Manuelle 25 - 39
CoaLAB Automatique 25 - 39
Les plages thérapeutiques pour la surveillance de traitement anticoagulant varient d’un laboratoire à l’autre. Il est donc essentiel que chaque
laboratoire établisse les plages d’APTT pertinentes pour ses patients respectifs.
Des résultats anormaux obtenus avec du plasma appartenant à un patient non traité par des anticoagulants sont susceptibles d’indiquer un
dysfonctionnement de facteur ou la présence d’un inhibiteur. Le résultat peut également être dû aux effets de certains médicaments et traitements.
En règle générale, des procédures supplémentaires telles que le test PT (temps de prothrombine) et une étude de l’effet de mélange sur du plasma
présentant une anomalie de facteur sont requises.
CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCE
Sensibilité à l’héparine : De nombreuses variables peuvent affecter le comportement du plasma hépariné lorsqu’il est évalué avec le test APTT. En
guise de fil directeur général, les résultats suivants ont été obtenus avec le ULTRASENSE EAsur un instrument photo-optique lorsque des quantités
de plus en plus grandes d’héparine ont été ajoutées au plasma normal.
Héparine (NIBSC – concentration non fractionnée)
(unités / mL)
APTT – temps de coagulation
(en secondes)
0.0 33.2
0.1 36.3
0.2 42.1
0.3 52.1
0.4 61.4
0.5 74.9
0.6 85.1
0.8 105.0
1.0 131.5
BIBLIOGRAPHIE
1. Thompson JM. The control of heparin therapy by the activated partial thromboplastin time: sensitivity of various thromboplastins to heparin,
Triplett DA. Ed. Standardisation of coagulation assays: an overview. Skokie IL: College of American Pathologists 1982; 195-206
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pathologists, 1982; 217-313
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academic Publishers, 1999; 37-43
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H21-A3 1991.
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6. Hathaway WE, Bonnar J., Physiology of coagulation in the fetus and newborn infant., Perinatal coagulation. New York: Grune& Stratton, 1978;
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