7.28 Primavera 2001 Boletín de problemas nº 3 + respuestas 1

7.28 Primavera ’01 Boletín de problemas nº 3 + respuestas
¿Qué explicación puede tener el fracaso de la eliminación de intrones en estas
cepas mutantes?
Las mutaciones en las cepas mutantes pueden romper los elementos de la estrucytura
secundaria necesarios para un plegamiento apropiado del intrón en una estructura
catalítica activa. La inspección de la secuencia anterior revela varias estructuras de
horquillas potenciales en las que se encuentran las mutaciones.
7b) Decidimos analizar más en profundidad estos intrones mutantes tratando con un
conjunto de ARN nucleasas algunos fragmentos que contienen esta región. Para ello,
empleamos, como sustrato, un fragmento de ARN marcado en su extremo 5’, que
corresponde a la secuencia del intrón mostrada anteriormente. Mediante una
autoradiografía, visualizamos los productos digeridos. El trozo más pequeño que se
puede distinguir en el gel tiene 5 bases de largo, según los estándares de control del
tamaño.
Averiguamos que los mutantes B y C dan patrones similares a los del mutante A,
mientras que los mutantes E y F presentan patrones similares a los del mutante D. A
partir de estos datos, dibujar lo siguiente:
i. La estructura secundaria del intrón de tipo salvaje.
ii. La estructura secundaria de los intrones mutantes similares al mutante A.
iii. La estructura secundaria de los intrones mutantes similares al mutante D.
Indicar en cada dibujo las regiones I-VIII. Indicar también en la estructura de tipo
salvaje dónde se localizan las mutaciones individuales A-F.
16