UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA

MATERIALES Y MÉTODOS
II.4.2.6. Determinación del contenido de fósforo
El contenido de fósforo se determinó de acuerdo con el método colorimétrico de la
AOAC (1996b). La muestra se preparón de la misma manera que para la determinación del
contenido en calcio. A 10 ml de solución de muestra se añadieron 10 ml de reactivo de
molibdovanadato (60 g de molibdato de amonio tetrahidratado en 1 litro de agua + 1,5 g de
metavanadato de amonio disuelto en 700 ml de agua y 300 ml de HNO 3 ) y, después del
desarrollo del color, su absorbancia se leyó a 400 nm. El resultado se refirió a una recta patrón
previamente obtenida a partir de varias concentraciones de una solución patrón de H 3 PO 4 . Las
determinaciones se efectuaron por duplicado y los resultados se expresaron en porcentaje de
extracto seco.
II.4.2.7. Determinación del contenido de cloruros
El contenido de cloruros de las muestras líquidas se determinó mediante un método
colorimétrico, siguiendo el procedimiento nº 461 y empleando el kit comercializado por Sigma
diagnostics. Este método se basa en que los iones cloro desplazan cuantitativamente a los iones
tioacianato del tiocianato mercúrico. El tiocianato liberado forma un complejo de color rojo al
reaccionar con iones férricos, presentando una absorbancia máxima a 460 nm. La intensidad del
color es directamente proporcional a la concentración de cloruro en la muestra. Las reacciones
que se producen son las siguientes:
2 Cl - + Hg(SCN) 2 HgCl 2 + 2(SCN) -
3(SCN) - + Fe 3+ Fe(SCN) 3
El reactivo para la determinación se suministraba listo para su uso y se componía de
cloruro mercúrico (0,74 mmol/l), nitrato mercúrico (72,5 µmol/l), tiocianato mercúrico (1,7 mmol/l),
nitrato férrico (22 mmol/l), ácido sulfúrico (10 mmol/l), ácido nítrico (30 mmol/l) y estabilizantes.
Además se dispuso de una solución estándar que contenía 100 mEqu/l de cloruro, también
suministrada por Sigma.
Se preparó una serie de tubos identificados como blanco, estándar y muestras. En cada
tubo se colocó 1 ml del reactivo y se añadieron 10 µl de agua deionizada (blanco), de estándar o
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