centro de investigación en sanidad animal memoria 2006 - Inia

MINISTERIO DE EDUCACIÓN Y CIENCIA
INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN Y TECNOLOGÍA AGRARIA Y
ALIMENTARIA
CENTRO DE INVESTIGACIÓN EN SANIDAD ANIMAL
CENTRO DE INVESTIGACIÓN EN SANIDAD ANIMAL
MEMORIA 2006
Directora Técnica:
Dra. Marisa Arias Neira
Dirección:
Carretera de Algete a El Casar
28130 VALDEOLMOS (MADRID)
Teléfono: + 34 91 620 23 00
Fax: + 34 620 22 47
Correo electrónico:
losada@inia.es / arias@inia.es
1

PERSONAL DEL CENTRO DE INVESTIGACIÓN EN SANIDAD ANIMAL
PERSONAL EN PLANTILLA
Arias Neira, Marisa Directora Técnica
Bárcena del Riego, Juan Investigador A2
Brun Torres, Alejandro Investigador A2
Gómez Castilla, Jordi Investigador A2
Jiménez Clavero, Migel
A. Investigador A2
Muñoz Reoyo, Mª Jesus Investigador A2
Real Soldevilla, Gustavo Investigador A2
Carballo Santaolalla,
Matilde
Investigados A3
Torres Trillo, Juan Mª Investigador A3
Blanco Lavilla, Esther Téc. Superior Especialista
Borrego Rivero, Belén Tec. Superior Especialista
Salguero Bodes, Fco. J. Téc. Superior Especialista
Martínez García,
Mercedes
Jefe de Servicio Gest.
Pascual Alvarez,
Gonzalo
Jefe Servicio Mant.
Paredes Tomás, Antonio Jefe Administración
Villa Díaz, Ana Téc. Esp. G. Medio
Gómez Perochena, Elena Aux Tecn. Investig
Llorente de Gracia,
Francisco
Ayudante de Investigación
Cuellar Cuellar, Mª
Luisa
Ayudante Técnico
González Guirado,
Antonia
Ayudante Tecnico
González Esguevillas,
Mónica
Ayudante Tecnico
Nuero García, Oscar Auxiliar Investigación
Mateos Cordero,
Francisco
Auxiliar Investigación
Pérez Taboada, Nazaret Jefe Biblioteca
Losada Carrasco,
Magdalena
Jefe de Negociado
Algaba Alvarez, Julia Aux. Oficina P3
González Sáez, Juan
carlos
Oficial Inv y lab.
Benavente Pintor,
Angela
Ayud. Mantenimiento
Gómez Gómez,
Concepción
Ayud. Mantenimiento
Sánchez Lobo, Iria, Ayud. Mantenimiento
Viva Alvarez, Fco. José Ayud. Mantenimiento
Viva Barroso, Emilio Ayud. Mantenimiento
PERSONAL CONTRATADO
Alejo Herberg, Alí
Ramón y Cajal
Mena Piñeiro, Ignacio
Ramón y Cajal
Ortego Alonso, Javier
Ramón y Cajal
Ruiz Argüello, Begoña Ramón y Cajal
Martín del Burgo, Mª Angeles Tec. Sup. Investigación
García Casado, Mª Ana Tec. Sup. Investigación
Fernández Pacheco, Paloma Téc. Sup. Investigación
Gallardo Frontaura, Mª del Téc. Sup. Investigación
Carmen
Fernández Pinero, Jovita Téc. Sup. Investigación
Belliere, Nina
Titulado Superior
Espinosa Martín, Juan Carlos Titulado Superior
Sánchez Martín, Miguel Angel Titulado Superior
Sánchez Ramírez, Victor Manuel Titulado Superior
Yuste Parra, María
Titulado Superior
Aguayo Araujo, Sonia
Titulado Superior
Benito, Alberto de
Titulado Superior
Cano Benito, Mª Jesús Titulado Superior
Chamorro Pérez, Sonia Titulado Superior
Esperón Fajardo, Fernando Titulado Superior
Llorente Herranz, Alicia Titulado Superior
Martín Pérez, José Hilario Titulado Superior
Tafalla Piñeiro, Carolina Titulado Superior
Vázquez Ruiz, Belén
Titulado Superior
Lorenzo Alguacil, Gema Titulado Superior
Gómez Casado, Eduardo Titulado Superior
Martín González, Sergio Titulado Superior.
Madueño Amor, Encarnación Tecnico Superior
Martín lluch, Mercedes Técnico Superior
Estévez Fernández, Rodolfo Técnico Superior
Sánchez-Arévalo Almena, Ana Téc. Grado Medio
Esquinas Muñoz, M· Angeles Téc. Grado Medio
Gutierrez Rivas, Monica Juan de la Cierva
Soler Ramos, Alejandro Técnico Laboratorio
Simón Delgado, Alicia Técnico Laboratorio
González Torres, Lucía Técnico Laboratorio
Cabrera Cantón, Raquel Técnico Laboratorio
Espinosa Serrano, Sara Técnico Laboratorio
Martín Martín, Elena
Técnico Laboratorio
Medina Ramos, Alejandra Técnico Laboratorio
Neves Martín, Elena
Técnico Laboratorio
Nieto Martínez, Raquel Técnico Laboratorio
Pérez Gómez, Covadonga Técnico Laboratorio
Relaño Gines, Aroa
Técnico Laboratorio
Robles Suárez, Ana Mª Técnico Laboratorio
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Becarios
Iglesias Martín, Irene
Sotelo Girón, Elena
Rodríguez Pulido, Miguel R.
Almanza Reyes, Horario
Cámara Pelliso, Susana
Cubillos Zapata, Carolina
Díaz Sansegundo, Fayna
Díaz Toledano, Rosa María
García Maceira, Patricia
Padilla de Beer, Danielle
Martín Folgar, Raquel
Alamillo Gordo, Elia
Becaria INIA
Becaria INIA
Becario INIA
Becario MEXICO
Becario MCYT
Becario MCYT
Becario INIA
Becario MCYT
Becario INIA
Becario INIA
Becario INIA
Becaria INIA
NOTA: SE ENTIENDE PERSONAL QUE HAYA ESTADO EN ALGÚN MOMENTO ENTRE 1-1-2006 Y EL 31-12-2006
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OBJETIVOS DEL CENTRO DE INVESTIGACIÓN EN SANIDAD ANIMAL
El Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA-INIA) está situado en
Valdeolmos, a 40 km de Madrid, ubicado en una finca de 34 hectáreas, con acceso
controlado y restringido. Está dotado de una instalación de “Alta Seguridad
Biológica", diseñada, construida y equipada para trabajar con enfermedades
infecciosas exóticas y de alto riesgo para la Sanidad Animal. En él se desarrollan
diferentes actividades de investigación y desarrollo tecnológico, formación
científico-técnica, y de cooperación internacional. El Centro, se inauguró el 3
de Febrero de 1993. El CISA es “Gran Instalación Científica española” desde
1995.
INSTALACIÓN DE ALTA SEGURIDAD BIOLÓGICA .: La zona de alta seguridad
biológica de 10.824 m 2 , posee unas características arquitectónicas y funcionales
reconocidas internacionalmente para la consecución de la bioseguridad. La
hermeticidad del edificio se consigue gracias a su estructura de hormigón armado,
sellado de sus juntas externas, aire acondicionado con diferentes niveles de
presiones negativas, filtración del aire a través de filtros HEPA, descontaminación
de efluentes e incineración de residuos. En el interior, todas las superficies se
encuentran revestidas de resinas especiales, que les proporciona aislamiento y
protección. Todas las conducciones que atraviesan las paredes, suelos y techos
están selladas de forma independiente. La comunicación con el exterior se realiza
a través de sistemas de descontaminación de doble puerta air-locks, autoclaves de
barrera y sistemas de barrera de descontaminación superficial.
Esta Instalación, con nivel de seguridad biológica 3 y 3+ , dispone de 26
Laboratorios y 14 salas comunes de nivel 3, y 2 Laboratorios de nivel de
contención 3+ habilitados para trabajar y almacenar agentes infecciosos animales
que eventualmente pudieran afectar al ser humano, de acceso restringido con
puerta neumática y equipado con ducha convencional y química. Los trabajos
realizados en los laboratorios de nivel 3+ se realizan utilizando equipos de
protección individualizada, homologados, para trabajar con zoonosis. En
determinadas situaciones es posible emplear trajes especiales con respiración
autónoma, que aseguran el aislamiento y seguridad del personal. La instalación
dispone de un Animalario constituido por 21 estancias individuales y polivalentes
de nivel 3 y 3+, diseñadas para albergar distintas especies animales, desde peces
hasta ganado mayor, con medidas de bioseguridad que garantizan el trabajo in vivo
incluso con patógenos transmisibles por aerosol. Sus características y el rigor en
el manejo, cuidado y la ética animal, lo ha hecho merecedor, desde mediados de
los 90´s de la nominación de Laboratorio de Referencia para el International
Council for Laboratory Animal Science, ICLAS.
El CISA coopera con el Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación como
laboratorio Nacional de Referencia para algunas enfermedades de la antigua Lista
A de la Oficina Internacional de Epizootías (OIE). Gracias a la labor desarrollada
desde su creación en investigación y desarrollo y en la lucha contra las enfermedades
de mayor impacto económico y sanitario, es Laboratorio Mundial de Referencia
de la OIE para la Peste porcina africana y Peste equina africana, y Laboratorio
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colaborador de la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la
Alimentación (FAO) en varias enfermedades de gran impacto económico como
Peste porcina clásica y Fiebre aftosa. Desde 2002 es Laboratorio Comunitario
de Referencia de Peste porcina africana. El CISA está internacionalmente
reconocido como Instalación de Alta Seguridad, participando en asesorías a otros
países a través de FAO y de TIAEX, Comisión Europea. Está reconocido como
Laboratorio Internacional de Referencia de la FAO en materia de
Bioseguridad.
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GRUPOS DE INVESTIGACIÓN
Epidemiología y Sanidad Ambiental
Enfermedades Emergentes y Transfronterizas
Zoonosis. Fiebre del Valle del Rift.
Influenza Animal.
Pestivirus
Biología Molecular de Pestivirus
Generación de Vectores Virales Vacunales.
Estrategias Vacunales Frente A Virus Animales
Estrategias Vacunales.Calicivirus.
Vacunas de Fiebre Aftosa Basadas En Acidos Nucleicos
Modulación del Sistema Inmune por Virus
Respuesta Inmune de Fiebre Aftosa
Respuesta Inmune de Peces.
Biología Molecular y Celular de Priones
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EPIDEMIOLOGÍA Y SANIDAD AMBIENTAL
Componentes
Aguayo Balsas, Sonia
Cabrera Cantón, Raquel
Cámara Pellisso, Susana
Carballo Santaolalla, Matilde
Esperón Fajardo, Fernando
Iglesias Martín, Irene
Neves Martín, Elena
Martínez Avilés, Marta
Muñoz Reoyo, Mª Jesús
Torre Reoyo, Ana de la
Vázquez, Ruiz Belén
Titulado superior.
Técnico de laboratorio
Becaria CICYT
Investigador A2
Titulado superior
Becaria INIA
Técnico de laboratorio
Titulado superior
Investigador principal
Investigador A2
Titulado superior
Correo electrónico: reoyo@inia.es (de contacto del grupo)
OBJETIVOS
1. Detección y aislamiento de virus en cetáceos varados en el archipiélago Canario e
implicaciones sanitarias.
2. Estudio de elementos traza y contaminantes persistentes en tejidos de los Zifios varados
en el archipiélago Canario.
3. Valoración de efectos (estrogénicos e inmunotoxicos) de contaminantes ambientales y
sus mezclas, mediante ensayos “in vitro” e “in vivo”.
4. Análisis de Riesgo de entrada y difusión de la Gripe Aviar en España.
5. Diagnóstico de procesos sanitario-ambientales en piscifactorías y explotaciones
ganaderas.
6. Valoración del impacto medioambiental de medicamentos veterinarios para su registro y
autorización.
7. Determinación de la prevalencia de los agentes infecto-contagiosos más frecuentes en
las poblaciones de gaviota de audouin y de gaviota patiamarilla de la R.N.C de Islas
Chafarinas.
8. Estudio de especies sinantrópicas como reservorios y portadores de enfermedades
zoonóticas y de interés ganadero.
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
• Detección y aislamiento de virus en cetáceos varados en el archipiélago Canario e
implicaciones sanitarias:
• Desarrollo y puesta a punto de técnicas de diagnóstico molecular y cultivos celulares
para la detección y aislamiento de los virus más frecuentes en tejidos de cetáceos,
compatibles con las lesiones descritas.
• Desarrollo y puesta a punto de PCRs “universales” para la detección de nuevos virus
en cetáceos (enfermedades emergentes).
• Establecer las relaciones moleculares de los productos amplificados con otras
secuencias de virus similares publicados previamente (epidemiología molecular).
7

• Estudio de elementos traza y contaminantes persistentes en tejidos de los Zifios
varados en el archipiélago Canario:
• Determinación de la bioacumulación de compuestos organoclorados y bromados en
muestras del banco de tejidos de zifios del Archipiélago Canario. Valoración
toxicológica.
• Relación entre contaminantes y lesiones detectadas.
• Valoración de efectos (estrogénicos e inmunotoxicos) de contaminantes ambientales y
sus mezclas, mediante ensayos “in vitro” e “in vivo”:
• Valoración del potencial estrogénico y androgénico de los contaminantes presentes
en tejidos de cetáceos, y sus mezclas, utilizando el ensayo in vitro de levadura
recombinante y el modelo in vivo del pez Medaka.
• Valoración de los efectos inmunotóxico de metales pesados y compuestos
organoclorados en linfocitos y células mononucleares de delfín mular..
• Análisis de Riesgo de entrada y difusión de la Gripe Aviar en España:
• Identificación de Peligro de la Gripe Aviar basada en las características del virus y
de la enfermedad.
• Análisis histórico-temporal de la situación geográfica mundial de la enfermedad y el
avance de los brotes H5N1 GAAP.
• Análisis y evaluación de las características y evolución del sector productivo avícola
en nuestro país.
• Recogida, tratamiento, análisis y evaluación de los datos existentes sobre los
parámetros de riesgo considerados en el Análisis de Riesgo.
• Desarrollo de un modelo epidemiológico de Análisis de Riesgo de la entrada de la
Gripe Aviar en España por aves silvestres.
• Diagnóstico de procesos sanitario-ambientales en piscifactorías y explotaciones
ganaderas:
• Diagnóstico de procesos de mortalidad en una piscifactoría de salmónidos.
Determinación del agente causal y su origen.
• Valoración del impacto medioambiental de medicamentos veterinarios para su registro
y autorización:
• Realización y/o revisión de estudios de Valoración del impacto medioambiental de
medicamentos veterinarios según los protocolos establecidos por la AEMPS.
• Modelización del comportamiento ambiental y/o de ecotoxicidad utilizando
softwares reconocidos.
• Valoración experimental in vivo y/o in vitro de los efectos de medicamentos
veterinarios: ensayos ecotoxicológicos en organismos de agua y suelo recomendados
por las guías de evaluación de la AEMPS.
• Estudios de seguimiento ambiental de medicamentos veterinarios. Repercusiones
ambientales a medio, largo plazo.
• Determinación de la prevalencia de los agentes infecto-contagiosos más frecuentes en
las poblaciones de gaviota de audouin y de gaviota patiamarilla de las Islas Chafarinas:
• Establecer un protocolo de trabajo basado en el reconocimiento “in situ” de las
poblaciones y sus hábitats dentro del R.N.C. Estudiar la viabilidad del protocolo de
captura, recogida y procesamiento de muestras y fundamentalmente el muestreo de
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las dos poblaciones de gaviotas en sus épocas reproductoras con la menor
intervención.
1. Selección de métodos (desarrollo y puesta a punto) para la detección de bacterias
(Salmonella spp y Chlamydophila), virus (Newcastle e Influenza aviar), hongos
(Aspergillus sp) y parásitos (parásitos intestinales) en muestras de sangre, exudados
y heces de gaviotas según procedimiento anterior.
2. Determinación de la prevalencia de los agentes infecto-contagiosos más frecuentes
en las poblaciones de gaviota de audouin y de gaviota patiamarilla de las Islas
Chafarinas.
• Estudio de especies sinantrópicas como reservorios y portadores de enfermedades
zoonóticas y de interés ganadero:
• Puesta a punto de protocolos de toma de muestras no invasivas en especies de
pequeño tamaño para la determinación de agentes infecciosos.
• Adaptación y puesta a punto de técnicas moleculares para la detección de agentes
infecciosos con potencial zoonótico en fauna sinantrópica de Madrid.
• Estudio de prevalencia de los principales agentes zoonóticos en las especies
sinantrópicas de los parques y jardines de Madrid.
• Valoración sanitario-ambiental de los resultados obtenidos.
PROYECTOS
Código y título: AGL 2005-07947/Gan. Valoración del estado sanitario de la familia
Ziphiidae en el Archipiélago Canario. INIA, ULPGC, UCM.
Entidad financiadora: CICYT Duración: 2005-2008
Investigador responsable: Fernández Rodríguez, A.
Código y título: RTA2006-00168-00-00. Valoración del potencial toxicológico de residuos
de contaminantes acumulados en tejidos de mamíferos marinos. INIA, ULPGC, CSIC.
Entidad financiadora: INIA Duración: 2006-
2008
Investigador responsable: Carballo Santaolalla, M.
Código y título: RTA2006-00167-C02-01. Desarrollo de nuevos métodos para la vigilancia
y control de la gripe aviar en España. INIA, UCM. Proyecto coordinado.
Entidad financiadora: INIA Duración: 2006-
2008
Investigador responsable: Arias Neira, ML y Muñoz Reoyo, MJ.
CONVENIOS
Código y título: OT01-002. Desarrollo de metodologías para diagnóstico de peste porcina
africana, diagnóstico de enfermedades exóticas y actuaciones ante emergencias sanitarias.
Entidad financiadora: MAPA Duración: 2006-
2007
Investigador responsable: Arias Neira, ML.
CONTRATOS
Código y título: Nº16060010. Estudio sanitario-ambiental de las gaviotas de Audouin
(Larus audouinii) y patiamarilla (L. michahellis) en el R.N.C. Islas Chafarinas: agentes
infecciosos (fase inicial):2006-2007.
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Entidad financiadora: PPNN-MIMAN Duración: 2006-2007
Investigador responsable: Zapata Salgado, J y Muñoz Reoyo, MJ.
Código y título: Nº 131/05/20637-P (MM/JP). Estudio y valoración del estado sanitario de
la fauna de parques y jardines públicos. (En colaboración con UCM).
Entidad financiadora: Soluciones para el Medio Ambiente Duración: 2006-
2007
Investigador responsable: Sánchez-Vizcaíno, JM y Muñoz Reoyo, MJ.
Principales resultados:
RTA2006-00167-C02-01. Desarrollo de nuevos métodos para la vigilancia y control de la
gripe aviar en España.
Se ha desarrollado un modelo epidemiológico probabilístico sobre de Análisis de Riesgo de
la entrada de la GA en España por aves silvestres. Para ello se han georeferenciado y
analizado, mediante el programa de análisis espacial ArcGis 9.1 y el programa estadístico
SPSS 14.0, los datos sobre los parámetros considerados en el análisis de riesgo:
movimientos de aves silvestres invernantes en España (registros de anillamientos de la
Oficina Española de Migraciones), humedales, temperaturas, brotes, stopovers (lugares de
parada durante migraciones) y vida media de las especies consideradas. El riesgo de
introducción fue estimado como una distribución probabilística binomial utilizando los
programas EXCEL (Microsoft Corp.) y @RISK 4.0 (Palisade Corp), que permite incorporar
simulaciones Monte Carlo para evaluar simultáneamente diferentes distribuciones
probabilísticas. Esto ha permitido elaborar un mapa temático de riesgo de entrada de GA en
España que incorpora los datos de producción avícola extensiva en el país, de forma que nos
indica el nivel de riesgo existente en cada provincia española y su incidencia en el sector
avícola.
OT01-002. Desarrollo de metodologías para diagnóstico de peste porcina africana,
diagnóstico de enfermedades exóticas y actuaciones ante emergencias sanitarias.
En relación al objetivo Análisis de Riesgo de entrada y difusión de la Gripe Aviar (GA) en
España: Se ha realizado: (1) una “serie” dinámica-temporal de mapas epidemiológicos que
muestran la situación geográfica mundial de la enfermedad y el avance de los brotes en
doméstico y silvestre desde finales de octubre del 2005 hasta la actualidad, (2) una
identificación del peligro sobre GA basada en las características del virus, su patogenia y
transmisión y, las características de la enfermedad y, (3) un análisis del sector avícola en
España. Además, (4) se ha colaborado a través del Scientific Panel Member-EFSA (Dr. JM
Sánchez-Vizcaíno) en la discusión de los documentos: Scientific Statement y Scientific
Opinion on “Migratory birds and their possible role in the spread of highly pathogenic
avian influenza” de EFSA.
En relación al objetivo Análisis de Riesgo de entrada de la Fiebre Aftosa (FA) en España:
Se ha realizado, en colaboración con el Dpto. de Sanidad Animal de la Facultad de
Veterinaria de la UCM, un análisis cuantitativo del riesgo de entrada de la FA en España,
analizando las siguientes vías de entrada: Importaciones, operación paso del estrecho,
viento, fomites, material ilegal, escape biológico y bioterrorismo. Se ha desarrollado un
modelo probabilístico de riesgo para el cálculo y análisis de probabilidades, empleando el
software @RISK 4.0 que nos ha permitido definir y ajustar distribuciones a nuestros datos
de origen y realizar una simulación final, empleando los métodos Monte Carlo y Latin
10

Hypercube. Además, se ha realizado una estimación económica de los costes directos e
indirectos que puede suponer para España la entrada de esta enfermedad.
Determinación de las patologías y causas de la muerte de cetáceos varados: Se han puesto a
punto PCRs “universales” para la detección de nuevos herpesvirus y morbilivirus,
adaptándose al estudio en tejidos de cetáceos. Se ha observado una prevalencia de
morbilivirus de 4/19 y se han descrito 2 nuevas secuencias de herpesvirus en delfines
mulares.
Puntos críticos sanitarios y ambientales en explotaciones ganaderas: Se han identificado los
grupos de antibióticos más habituales y más relevantes desde el punto de vista
medioambiental, para realizar un estudio de su comportamiento ambiental y ecotoxicidad.
Se han identificado los principales problemas y soluciones existentes en el evaluación
medioambiental con fines de su registro y comercialización.
AGL 2005-07947/Gan. Valoración del estado sanitario de la familia Ziphiidae.
Se ha abordado el estudio de contaminantes tóxicos, persistentes y con capacidad de
bioacumulación y biomagnificación por cadena trófica, en dos especies de zifios. Este grupo
de cetáceos odontocetos oceánicos raramente varan en las costas por lo que no existe mucha
información sobre ellos. A partir del análisis de muestras procedentes del banco de tejidos
de mamíferos marinos de la Facultad de Veterinaria de la ULPGC, se ha establecido el nivel
de bioacumulación en grasa hipodérmica de compuestos clorados y bromados y se ha
realizado su valoración toxicológica.
RTA2006-00168-00-00. Valoración toxicológica en mamíferos marinos.
Se ha desarrollar un ensayo in vitro que permite evaluar el potencial inmunotoxicológico de
contaminantes ambientales en células del sistema inmune de cetáceos. El ensayo de
blastogénesis linfoide de delfín mular se ha desarrollado a partir de células obtenidas de
sangre periférica de estos delfines. Se ha realizado la valoración inmunotóxicologica de
cinco metales pesados en este ensayo, estimándose las correspondientes NOEC y LOEC
para cuatro parámetros de expresión de efecto.
Nº16060010. Estudio sanitario-ambiental de las gaviotas de Audouin y patiamarilla.
Se ha realizado un estudio de viabilidad del protocolo de captura, recogida y procesamiento
de muestras representativas de gaviota de audouin y de gaviota patiamarilla en sus épocas
reproductoras en el R.N.C. de Islas Chafarinas. Comprende: (1) selección de la zona de
muestreo; (2) establecimiento del calendario de muestreo en cada especie; (3) condiciones
de muestreo; (4) establecimiento y adaptación de los protocolos de trabajo en campo, y (5)
establecimiento y adaptación de los protocolos de trabajo en laboratorio necesarios para el
estudio de detección de los agentes etiológicos.
Nº 131/05/20637-P (MM/JP). Estado sanitario de fauna de parques y jardines (zona 5).
Se han puesto a punto protocolos específicos de muestreo no invasivo en palomas para la
determinación de 6 enfermedades bacterianas y víricas y, de pruebas generales para
determinar su estado sanitario (hematología y bioquímica sanguínea). Se ha detectado
Salmonella spp. (PCR) en hisopos cloacales de 62 palomas domésticas con una prevalencia
del 4,8% y; Haemoproteus columbae en frotis sanguíneos con una prevalencia del 100%.
11

PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
Muñoz, M.J; Peris, S; Sanchez-Vizcaíno, J.M. 2006. Can High Pathogenic Avian Influenza
arrive to the Iberian Peninsula from Asia by means of migratory birds?. Spanish Journal of
Agricultural Research 4(2):140-145.
Martínez, M; Muñoz, M.J; de la Torre, A; Martínez, B; Iglesias, I; Sánchez-Vizcaíno, J.M.
2006. Risk assessment applied to Spain’s prevention strategy against highly pathogenic
avian influenza virus H5N1. Avian diseases, 50 (en prensa).
Otros artículos
Martínez-López, B; de la Torre, A; Sánchez-Vizcaíno, J.M., 2006. Risk assessment model
of FMD introduction into Spain. Libro de Abstract XI International Symposium on
Veterinary Epidemiology and Economics. 6-11 Agosto. Cairns, Australia.
Cámara, S; Esperón, F; de la Torre, A; Carballo, M; Aguayo, S; Muñoz, MJ; Sánchez-
Vizcaíno, JM. 2006. Inmunotoxicidad en cetáceos. Parte I: metales pesados. Revista Canaria
de las Ciencias Veterinarias, 3:26-40.
Cámara, S; Esperón, F; Carballo, M; de la Torre, A; Aguayo, S; Muñoz, MJ; Sánchez-
Vizcaíno, JM. 2006. Inmunotoxicidad en cetáceos. Parte II: contaminantes orgánicos
persistentes. Revista Canaria de las Ciencias Veterinarias, 3:41-68.
Libros y capítulos de libros
Martínez-López, B; de la Torre, A; Sánchez-Vizcaíno, J.M (Eds.), 2006. Análisis
probabilístico del riesgo de introducción de la fiebre aftosa en España. Ministerio de
Agricultura, Pesca y Alimentación-ENESA. ISBN 84-690-0186-8.
De la Torre A; Carballo M; Muñoz MJ., 2006. Evaluación medioambiental. Evaluación
ecotoxicológica. Repercusión ambiental. En: Toxicología Ambiental. Seguridad Química. E.
De la Peña & E. Gomez. Eds. Asociación Española de Toxicología. Madrid. CD-ROM.
ISBN: 84-609-4429-8.
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
Martínez-López, B; de la Torre, A; Sánchez-Vizcaíno, J.M., 2006. Risk assessment model
of FMD introduction into Spain. Poster. International Veterinary Vaccines and Diagnostics
Conference. 25-29 Junio. Oslo, Noruega.
Martínez-López, B; de la Torre, A; Sánchez-Vizcaíno, J.M., 2006. Risk assessment model
of FMD introduction into Spain. Comunicación oral. XI International Symposium on
Veterinary Epidemiology and Economics. 6-11 Agosto. Cairns, Australia.
Martínez, M; Martinez, B; Muñoz, M.J; Sánchez-Vizacíno, J.M. 2006. Spain´s prevention
strategy against notifiable avian influenza. 6th International Symposium on Avian Influenza.
24 Abril. Cambridge.
Martínez, M; Sánchez-Vizcaíno, J.M; Iglesias, I; de la Torre, A; Martínez, B; Muñoz, M.J.
2006. The role of wild birds in the risk assessment of avian influenza in Spain. 7 th
International Congress of Veterinary Virology. 24-27 September. Lisbon
Cámara, S; Muñoz, M.J; Carballo, M; Sánchez-Vizcaino, J.M. 2006. Adaptation of a nonradioactive
assay to determine the proliferation of lymphocytes of Bottlenose Dolphins and
12

Beluga Whale that permits other immunological analyses. 7 th International Congress of
Veterinary Virology. 24-27 September. Lisbon
Cámara, S. Evaluación inmunológica de contaminantes ambientales marinos utilizando el
ensayo de blastogénesis de linfocitos. Tutores: J.M. Sánchez-Vizcaíno y M.J. Muñoz.
Comunicación oral. Congreso de Estudiantes. 24 de abril de 2006. UCM Madrid. Premio a
la mejor comunicación científica.
Martínez, B. 2006. Análisis cuantitativo del riesgo de entrada de la Fiebre Aftosa en España.
Tutores: J.M. Sánchez-Vizcaíno y A. de la Torre. Congreso de Ciencias Veterinarias y
Biomédicas. 26 Abril. Madrid.
Martínez, M. 2006. Aplicaciones del análisis de riesgo y de la educación continua al Plan de
Contingencia de Gripe Aviar altamente patógena. Tutores: J.M. Sánchez-Vizcaíno y M.J.
Muñoz. Comunicación oral. Congreso de Estudiantes. 24 de abril. Madrid.
OTRAS ACTIVIDADES
PRESENTACIONES A CONVOCATORIAS
Presentación de la Colaboración en WP.7 Risk Assessment. Joint Research Program de de la
Red Epizone, Network of Excellence for Epizootic Disease Diagnosis and Control
(EPIZONE).
Presentación de Solicitud de ayuda del Programa CONSOLIDER-INGENIO 2010
CONVOCATORIA 2007: Etiología, epidemiología y control de las enfermedades
bacterianas. (EEPICOBA).
Proyecto coordinado: Colaboran 19 grupos de investigación.
Duración: 5 años.
Lidera: Prof. Lucas Domínguez. UCM.
Presentado en Enero 2006. En evaluación.
Presentación del Proyecto: Valoración de Fertibiomerc como abono orgánico compuesto y
como regenerador de suelos degradados y/o contaminados.
PET 2006-0155-00
Proyecto coordinado: CISA-INIA, UCM, ETSIA.
Proyectos de Investigación para la transferencia de los resultados de investigación
(Proyectos PETRI). MEC.
Financiación solicitada: 298.821 €
IP: Dra. Ana de la Torre
Presentado el 31 de marzo de 2006-10-16. En evaluación.
Presentación del Proyecto: Estudio y valoración del estado sanitario de la fauna de parques y
jardines del Ayuntamiento de Logroño.
Proyecto no coordinado. Entidades que colaboran: CISA-INIA y Equipamientos
medioambientales.
Ayuntamiento de Logroño
IP: Dr. Fernando Esperón.
Presentado: Agosto de 2006.
Presentación del Proyecto: Desarrollo de un modelo epidemiológico para Centros de
Recuperación de aves. FAU 2006-00009-00-00.
Proyecto no coordinado. Entidades que colaboran: CISA-INIA y UCM.
Programa Nacional de Recursos y Tecnologías Agroalimentarias. Acción movilizadora de
interacción sanitaria entre fauna silvestre y ganadería extensiva. MEC-INIA.
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Financiación solicitada: 62.131 E
IP: Dra. Mª Jesús Muñoz
Presentado el 21 de agosto de 2006.
Presentación del Proyecto: Evaluación epidemiológica de las principales enfermedades
transmisibles de las aves acuáticas. Análisis de Riesgo y Enfermedades víricas.
Proyecto Coordinado: CISA-INIA y UCM
MMA- Organismo Autónomo Parques Nacionales.
Financiación solicitada para CISA-INIA: 31.625 €
IP: Dra. Mª Jesús Muñoz
Presentado: Abril 2006. Valorado positivamente sin financiación: Octubre de 2006.
ESTANCIAS
Mancha, F.B. Estancia de 100 horas. Asignatura de estancias. F. Veterinaria. UCM. Tutora:
M. J. Muñoz.
INFORMES TÉCNICOS
Informe sobre las causas de la mortalidad de salmónidos ocurrida en la Piscifactoría del Río
Xestosa (Lugo). Solicitado por: Sociedad Marcultura S.A. 04/2006.
Informe sobre las causas de la mortalidad de salmónidos ocurrida en la Piscifactoría de
Marcultura S.A. en Octubre de 2.006. Solicitado por: VISAVET-UCM. 11/2006.
Estudio sanitario-ambiental de las gaviotas de Audouin (Larus audouinii) y patiamarilla
(Larus michahellis) en el RNC Islas Chafarinas. Fase inicial: Establecer un protocolo de
trabajo. Solicitado por: P.P.N.N.. MIMAN. 11/2006.
CURSOS
Coordinación:
Carballo, M. Coordinación del XV Curso Internacional sobre Enfermedades Exóticas
Animales. Organizado por: CISA-INIA. 3-30/11//2006.
Muñoz, MJ. Coordinación módulo: “Ensayos de evaluación de la ecotoxicidad”. Máster
Internacional “Experto Universitario en Toxicología”. Organizado por: U. Sevilla, Área de
Toxicología. 01-10/2006.
Participación:
Curso de doctorado: Bioseguridad integral. Dpto. Sanidad Animal. F.Veterinaria. UCM.
6/03/2006:
• Muñoz, MJ. Problemática ambiental de los residuos ganaderos.
• De la Torre, A. Puntos críticos sanitario-ambientales en explotaciones ganaderas.
Curso de doctorado: Química del medio ambiente y toxicopatología veterinaria. Sanidad en
Cetáceos. Facultad de Veterinaria. ULPGC. 03/2006:
• Cámara, S. Exposición a largo plazo a contaminantes: Inmunotoxicidad.
• Carballo, M. Exposición a largo plazo a contaminantes: Disrupción endocrina y
carcinogénesis.
• Carballo, M; Esperón, F. Residuos de contaminantes en tejidos de cetáceos de las
Islas Canarias.
• Esperón, F. Varamiento, necropsia y patología de cetáceos varados en Canarias:
virus.
14

• Muñoz, MJ. Valoración de los focos emisores de contaminación ambiental que
afectan a la salud de los cetáceos en las Islas Canarias.
• Muñoz, MJ. Puntos críticos en la Sanidad Ambiental. Problemas sanitariosambientales.
Especial atención a la actividad agropecuaria en las Islas Canarias.
Curso de doctorado: Edafología y Medio ambiente. Aguayo, A; de la Torre, A. Claves para
la correcta gestión ambiental de explotaciones ganaderas. Un caso práctico. Facultad de
Biología. UCM. 03/2006.
XV Curso Internacional sobre Enfermedades Exóticas Animales. CISA-INIA. 11/2006:
• Carballo, M. Sanidad Ambiental en las explotaciones ganaderas. Principales
problemas
• De la Torre, A. Evaluación del impacto ambiental de explotaciones ganaderas.
• Aguayo, S. Valoración ambiental de medicamentos veterinarios.
• Muñoz, MJ. Aves migratorias y transmisión del virus de IA.
• Martínez, M. Simulacro de Gripe Aviar.
• Vázquez, B. El diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Organización de un
servicio de diagnóstico.
Curso Nacional “Técnicas de diagnóstico de laboratorio de sanidad animal. Gestión práctica
de la calidad en un laboratorio de análisis” (2ª edición): Vázquez, B. Hemoaglutinación viral
y su inhibición. Seroneutralización. Laboratorio Regional de Sanidad Animal. León, 23-
26/10/2006.
Curso Nacional “Farmaforum 2006: El reto de la gripe aviar y las amenazas biológicas”.
Muñoz, MJ. El papel de las aves silvestres en la difusión de la gripe aviar. F. Farmacia. U.
Miguel de Unamuno. 14/12/2006.
Curso Nacional sobre Gripe aviar. Martínez, M. Simulacro sobre gripe aviar. Subdirección
General de Sanidad Animal. 11/2006. Colaboración: MAPA-UCM-CISA.
Jornadas Nacionales sobre Cría en Cautividad y Reintroducción de Especies Silvestres y
Amenazadas. Esperón, F. Control sanitario de especies en peligro de extinción. VEDEMA.
Torre Guil, Murcia. 9-12/11/2006.
CURSOS RECIBIDOS
Iglesias, I. Curso para formadores en materia de bioseguridad en explotaciones avícolas.
Madrid, 14/03/2006. 8 horas.
Cabrera, R. Jornadas técnicas sobre bioseguridad. Telstar Industrial. Madrid, 03/2006. 10
horas.
Iglesias, I. V Jornadas de Epidemiología y Medicina Preventiva Veterinaria. Madrid, 27-
28/04/2006. 8 horas.
Cabrera, R. Contaminación química. Impacto de las sustancias químicas sobre el medio
ambiente y la salud humana. Aula permanente de ciencias de la salud. Mojácar, 05/2006. 40
horas.
Cabrera, R; Neves, E. Prevención de riesgos laborales en laboratorio. Grupo TRAGSA.
Madrid, 05/2006. 10 horas.
Cabrera, R; Neves, E. Control de incendios. Organizado por CEDAF. Madrid, 06/2006. 5
horas.
15

Martínez, M. Internacional course in predictive modelling of epidemia diseases in the real
world with interspread plus. Organizado por SAFOSO (Safe Food Solutions Inc). Suiza, 19-
22/06/2006. 25 horas.
Iglesias, I. Curso sobre Sistemas de Información Geográfica: ARC/GIS. Organizado por la
Escuela Complutense de Verano. Madrid, 3 -28/07/2006. 100 horas.
Iglesias, I; Martínez, M. Curso sobre Gripe aviar: La emergencia de un virus posiblemente
pandémico. Organizado por la Universidad Internacional Menéndez Pelayo. Moncada
(Valencia), 20-21/10/2006. 30 horas.
OTROS
De la Torre, A; Muñoz, MJ. Colaboradores honoríficos del departamento de Sanidad
Animal de la Facultad de Veterinaria de la UCM. 10/2003-09/2006.
De la Torre, A. Presidencia del Subcomité Técnico de Normalización de Métodos de
Ensayo. AEN/CTN 77. Medioambiente y suelos. 2006.
De la Torre, A. Coordinación de la Sección de Toxicología Ambiental de la Asociación
Española de Toxicología. 2001-2006.
16

GRUPO DE DESARROLLO Y CONTROL DE ENFERMEDADES EMERGENTES
Y TRANSFRONTERIZAS.
Componentes
Aguilar Ana, Jefe de Sección
Arias Neira, Marisa, Dirección Técnica
Belliere Nina
Blanco Lavilla, Esther
Borrego, Belén
Brun Torres, Alejandro
Cuellar, Carlos
Espinosa, Sara
Estévez Rodolfo
Fernández Pacheco, Paloma, Jefe de Unidad
Fernández Pinero, Jovita , Jefe de Unidad
Gallardo Frontaura, Carmina, Jefe de Unidad
García Casado, María Ana
Gómez, Concepción
González Mónica
Iglesias Hidalgo, Javier
Jiménez-Clavero, Miguel Ángel, J.Servicio Coordinación
Llorente Francisco
Llorente, Alicia
Lorenzo, Gema
Martín Folgar, Raquel
Martín Martín, Elena
Mateos Francisco
Nieto Martínez, Raquel
Pelayo, Virginia
Pérez Gómez, Covadonga
Robles Suárez, Ana
Salguero Bodes, Javier, Jefe de Sección
Sánchez Martín, Miguel Ángel
Sánchez-Arévalo Almena, Ana
Simón, Alicia
Soler, Alejandro
Sotelo Girón, Elena
Yuste Parra, Maria
Correo electrónico: arias@inia.es
- Laboratorios de Referencia de Peste Porcina Africana: gallardo@inia.es
- Laboratorio de Referencia (OIE) de Peste Equina Africana: pacheco@inia.es
- Laboratorio Nacional de Referencia de Enfermedad Vesicular Porcina y
Estomatitis Vesicular: blanco@inia.es; pacheco@inia.es;
- Laboratorio Nacional de Referencia de Enfermedad Peste Porcina clásica, Lengua
Azul: pacheco@inia.es
- Laboratorio Nacional de Referencia de Fiebre del Valle del Rift.: brun@inia.es
- Unidad de Apoyo Cultivos y Ac. Monoclonales.: borrego@inia.es
17

OBJETIVOS
1. Actividades de investigación y desarrollo tecnológico, formación científico-técnica y de
cooperación internacional para el diagnóstico y control de enfermedades
transfronterizas, emergentes y de interés económico y sanitario. Especial atención a
enfermedades de la antigua lista A de la OIE, y las que suponen un mayor riesgo de
introducirse o extenderse en el territorio nacional.
2. Actuaciones como Laboratorio de Referencia Nacional, Comunitario (UE) y Mundial
para OIE de distintas enfermedades de la antigua Lista A.
3. Participación en Programas de la Red de Vigilancia Epidemiológica y Sanitaria del
Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación (MAPA).
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
• Desarrollo de nuevas metodologías diagnósticas y estrategias de control y erradicación
de enfermedades infecciosas de los animales de interés para el MAPA y el Ministerio de
Defensa.
• Profundizar en el conocimiento de las enfermedades infecciosas animales mencionadas:
caracterización clínica, patogenicidad, su patología y patogenia; y de los patógenos que
las producen (su caracterización inmunológica y molecular).
• Actividades científicas y técnicas como Laboratorio Mundial de Referencia de Peste
Porcina Africana para la Oficina Internacional de Epizootías (OIE), - WRL-PPA-.
• Actividades científicas y técnicas como Laboratorio Mundial de Referencia de Peste
Equina Africana. para la Oficina Internacional de Epizootías (OIE), - WRL-PEA-.
• Actividades científicas y técnicas como Laboratorio Comunitario de Referencia (UE)
de Peste Porcina Africana (CRL-PPA).
• Actividades de apoyo cientifico-técnico e investigación como Laboratorio Nacional de
Referencia (NRL) de Peste porcina Africana, Enfermedad Vesicular porcina,
Peste Porcina Clásica y Lengua Azul, Estomatitis Vesicular y Fiebre del Valle del
Rift.
PROYECTOS
Código y título: OT 01-002. Desarrollo de metodologías para diagnóstico de la Peste
Porcina Africana, diagnóstico de enfermedades exóticas y actuaciones ante emergencias
sanitarias.
Entidad financiadora: INIA Duración: 2001-2007
Coordinador: M. Arias
Investigadores principales: R. Nieto, C.Gallardo; J. Fernández; R.Nieto; P. Fernandez
Pacheco; E.Blanco; Reoyo,MJ; A. De la Torre, J.Salguero; G. Del Real; B. Borrego;
M.Carballo; MA Jiménez,
Código y título: RTA2006-00167-C02-01. Desarrollo de nuevos métodos para la vigilancia
y control de la gripe aviar en España. INIA, UCM. Proyecto coordinado.
Entidad financiadora: INIA Duración: 2006-
2008
Coordinadores: MJ. Muñoz y M.Arias
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Investigadores principales: J.Fernández, M.Yuste; M.A. Jiménez-Clavero.
Código y título: SSPE-CT2004-513645. New and emerging technologies: improved
laboratory and on-site detection of OIE List A viruses in animals and animal products. LAB-
ON-SITE.
Entidad financiadora: UE. Duración: 2004-2008. En colaboración científica desde 2005.
Coordinador: Sandor Belák.
Investigadores principales: J. Fernández; M.Arias.
Código y título: SSPE-CT2006-044211- Improved Vaccines for Bluetongue Disease.
BTVAC
Entidad financiadora: UE Duración: 2006-2010
Coordinador: Marisa Arias.
Investigadores principales: P.Fernández-Pacheco; J.Salguero, J.Férnández., R.Nieto; MA
Jiménez.
CONVENIOS
Código y título: Memorando de entendimiento entre el INIA y el ILRI - International
Livestock Research Institute- del CGIAR (Nairobi, Kenya) para el desarrollo de nuevos
ensayos de diagnóstico y control epidemiológico de patógenos víricos del ganado en África
Sub-Sahariana.
Entidad financiadora: CGIAR,Consultive Group for internacional Animal Research
Duración: 2004-2006
Coordinador: Marisa Arias.
Investigadores principales: E. Blanco; A.Brun; C. Gallardo;
Código y título: Convenio entre el INIA y la Facultad de Veterinaria de la Universidad
Complutense de Madrid, para la realización de prácticas
Entidad financiadora: INIA Duración: 2004-2008
Coordinador: M. Arias. Participantes: Investigadores CISA
CONTRATOS
Código y título: UE-LR PPA/03. Laboratorio Comunitario de Referencia de Peste Porcina
Africana
Entidad financiadora: UE. Duración: 2003-2007
Coordinador: M. Arias
Investigadores principales: C. Gallardo; R.Nieto; J. Fernández; J.Salguero.
Código y título: Contrato con el Parque Tecnológico de la Marañosa para la Asistencia
técnica en diagnóstico de patógenos de interés
Entidad financiadora: Parque Tecnológico de la Marañosa, MD. Duración: 2006-2007
Coordinador: M. Arias
Investigadores principales: A. Brun; J. Fernández; G.Lorenzo; MA Jiménez.
Código y título: Programa de Acceso a Instalaciones Singulares.
Entidad financiadota: INIA, MEC
Coordinador: M.Arias.
Investigadores participantes.: Personal investigador, Jefes de Proyectos y Jefes de Equipo
del CISA.
19

REDES DE EXCELENCIA
Código y título: CT2006-016236-FOOD. Network of Excellence for Epizootic Diseases,
Diagnosis and Control –EPIZONE- ”
Entidad financiadora: UE.
Duración:2006-2011
Entidades participantes: 18 Instituciones de la UE.
Coordinador general: Piet van Rijn.
Miembro del Coordinating Forum.: M.Arias
Investigadores participantes : Investigadores y Jefes de Equipo del grupo, otros
investigadores del CISA y de INIA.
Código y título: CSD00C-06-02320. CONSOLIDER. Porcivir. Investigación en
enfermedades viricas porcinas
Entidad financiadora: MEC Duración: 2006- 2011
Investigador responsable: Mariano Domingo
Coordinador en INIA.: A. Brun
Código y título: Red de Laboratorios de Alerta Biológica (RELAB).
Entidad financiadora: INIA, MEC
Coordinador: Instituto de Salud Carlos III. Asesores.: Presidencia de Gobierno, Ministerio
de Defensa.
Coordinación en INIA: M.Arias.
Investigadores participantes.: A.Brun, J. Fernández, MA Jiménez, P.Fernández-Pacheco.
PRINCIPALES RESULTADOS:
A. Desarrollo de nuevas metodologías para el diagnóstico de enfermedades infecciosas y/o
exóticas de alto riesgo para España:
Peste Porcina Africana (PPA) .:
• Desarrollo y validación de Técnicas de ELISAs.y otros de métodos de diagnóstico
serológico basados en el uso de las proteínas recombinantes. Puesta a punto de técnicas
moleculares de Real-Time y validación de técnicas moleculares con aislados
procedentes de países del Este de África y Cerdeña. Estudios de epidemiología
molecular del VPPA, de cepas de los últimos brotes declarados en Cerdeña y Kenya.
Estudios de análisis filogenéticos de aislados del VPPA procedentes de Uganda, Kenya y
Cerdeña. Caracterización clínica y patológica de aislados africanos de PPA.
• Desarrollo y mantenimiento de una base de datos de secuencias del VPPA,
disponible en la direccion http://webainia.inia.es/cisa/asfv/index.asp
• Diseño, Construcción y Mantenimiento de una página web de Peste Porcina
Africana disponible en la dirección www.asf-referencelab.info/
Peste Equina Africana (PEA): Desarrollo de nuevos métodos de detección molecular del
virus de la Peste Equina Africana (VPEA) para su empleo en diagnóstico. Se han
desarrollado i) una RT-PCR convencional, ii) una RT-PCR a tiempo real empleando Sybr
Green y iii) una RT-PCR a tiempo real empleando una sonda Taqman.
Enfermedad Vesicular Porcina (EVP): Desarrollo de un nuevo ensayo de ELISA,
formato de competición, para realizar el diagnóstico serológico de EVP.
20

Peste Porcina Clasica (PPC): Estudios de caracterización clínica, patogenicidad,
patología, patogenia y de resp. inmune frente a la infección con VPPC España 2001.
Lengua Azul (LA): Participación en el desarrollo de un nuevo método de diagnóstico
diferencial para el virus de la Lengua Azul mediante RT--PCR.
West Nile Virus (WNV): Obtención de diferentes aislados y sueros de referencia del West
Nile (WNV); desarrollo y puesta a punto de sistemas de detección molecular de distintos
linajes de WNV.
Fiebre del Valle del Rift (RVF).: puesta a punto de un método para la detección en tiempo
real del virus de RVF mediante sondas Taqman.
Otros estudios de interés para el MAPA.: i) Investigación epidemiológica y estudios de
evaluación sanitaria en explotaciones porcinas. ii) Estudios in vitro e in vivo de
caracterización de enterovirus porcinos,Teschovirus ,en explotaciones.
B. Otras Actividades como Laboratorio de Referencia Nacional, Comunitario y7o Mundial:
- Investigación epidemiológica; análisis diagnósticos, alertas, análisis de importación y
exportación, confirmación diagnóstica, caracterización molecular de aislados.
- Asesoría técnica y Asistencia a Laboratorios de las CC.AA en enfermedades para las
cuales el CISA es Laboratorio Nacional de Referencia. Asistencia técnica a laboratorios
de la UE; y a distintos países a nivel mundial en materia de investigación diagnóstica de
PPA.
- Armonización y estandarización de metodologías de diagnóstico. Evaluación continuada
y control de calidad de reactivos biológicos y técnicas diagnosticas. Validación de Kits
comerciales.
- Organización de Ensayos Interlaboratoriales-ring tests- :
• EUCRL-OIEWRL–PPA: Organización del IV Ensayo colaborativo
interlaboratorial como Laboratorio Comunitario de Referencia de PPA para la
armonización de técnicas diagnósticas serológicas y virológicas. Preparación de un
panel de reactivos de PPA y envío a los laboratorios Nacionales de referencia de
distintos países: Austria, Bélgica, Chipre, Dinamarca, Finlandia, Francia (2),
Alemania, Grecia, Hungría, Irlanda, Italia (2), Latvia, Lituania, Holanda, Noruega,
Polonia, Rumania, Eslovaquia, Eslovenia, UK, Suiza, Senegal y EEUU.
• NRL-PPC.: Organización del Ensayo colaborativo interlaboratorial como
Centro Nacional de Referencia de PPC para la armonización de técnicas
diagnósticas serológicas. Preparación de un panel de sueros y envío de reactivos de
PPC a los laboratorios regionales participantes. Álava, Albacete, Algete, Badajoz,
Barcelona, Burgos, Cáceres, Ciudad Real, Colmenar Viejo, Córdoba, Cuenca,
Gerona, Gijón, Guipúzcoa, La Pobla de Segur, León, Lérida (2), Logroño, Lugo,
Murcia, Navarra, Palma de Mallorca, Reus, Santander, Segovia, Soria, Talavera de
la Reina, Tenerife, Tortosa, Valencia, Valladolid, VIC, Vizcaya, Zafra, Zamora y
Zaragoza.
• Participación en el Ensayo Colaborativo Interlaboratorial Comunitario de
PPC. Coordinado por el Lab.Comunitario de Referencia (Hannover, Germany).
- Estudios de experimentación “in vivo” con aislados de Peste Porcina Africana,
Peste Porcina Clásica y Enfermedad Vesicular para caracterización clínica,
patogenicidad, patología, patogenia y de respuesta inmune frente a la infección. y/o para
21

la producción de reactivos biológicos y controles de referencia y material para los “ring
test” de los laboratorios de referencia mencionados.
- Programas de Vigilancia epidemiológica.: Producción, y distribución de reactivos de
diagnóstico a las CC.AA, para los programas Nacionales de vigilancia epidemiológica
de PPA y EVP del Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación– antígenos y
reactivos biológicos y kits, para distintas técnicas de diagnóstico serológico . Existen
informes anuales de esta actividad detallados de los Informes correspondientes de
Laboratorios de Referencia.
- Asistencia a Laboratorios de otros paises: Producción, y distribución de reactivos de
diagnóstico , protocolos y procedimientos de Peste Porcina Africana a Francia, Italia ,
Rumanía, Benin, Ghana, Togo; y de Peste Equina Africana a Argentina, China, Kuwait,
India. Más detalles en informes anuales a la OIE, y EU.
- Patología Experimental.: Actividades de experimentación “in vivo” para la
reproducción de enfermedades, caracterización clínica, estudios de patogenicidad de
cepas y estudios de respuesta inmune frente a la infección de patógenos de declaración
obligatoria y de otros de interés económico y sanitario para España y UE.
C. Actividades de Apoyo a Los Laboratorios de Referencia y de Investigación del CISA.:
Creación y Mantenimiento de una Unidad Centralizada de Cultivos celulares y Anticuerpos
Monoclonales.: Mantenimiento de líneas celulares, hibridomas, y producción de anticuerpos
monoclonales (Ac.Mon).2006.: Apoyo específico en Ac.Mon. a las líneas de Calicivirus y
Fiebre del Valle del Rift
D. Programa de Acceso a Instalaciones Singulares.: 9 estancias – 1-2 meses de duración- de
predoctorales e investigadores, de otras Instituciones Nacionales ( CreSA, Fac. Vet. Un.
Córdoba, CNB, CSIC) realizando proyectos de I+D.
PUBLICACIONES
Revistas SCI
Gallardo,C; E. Blanco, JM.Rodriguez. A.L.Carrascosa and J.M. Sánchez-Vizcaíno.
“Antigenic properties and diagnostic potential of African swine fever virus protein pp62
expressed in insect cells” . Journal of Clinical Microbiology, Mar. 2006, p. 950–956
Gómez-villamandos, J.C.; I. García de Leaniz, A. Núñez, F.J. Salguero, J.L. Romero-
Trevejo, P.J. Sánchez-cordón. Neuropathological study of experimental Classical Swine
Fever. Veterinary pathology 43/530-540/2006
Nix RJ, C. Gallardo, Hutchings G, Blanco E, Dixon LK. “Molecular epidemiology of
African swine fever virus studied by analysis of four variable genome regions”. Arch Virol.
2006 Jul 3.
Fernández, J.; Agüero, M.; Romero, L.; Sánchez, C.; Belák, S.; Arias, M.; Sánchez-
Vizcaíno, J.M. (2006). “Rapid and differential diagnosis of Foot-and-Mouth Disease, Swine
Vesicular Disease and Vesicular Stomatitis by a new multiplex RT-PCR assay, analysing
clinical samples.” Veterinary Research, ( en prensa).
Pérez-Filgueira, D. M; F. González-Camacho, C. Gallardo, P. Resino, E. Blanco, E.Gómez-
Casado, C. Alonso and J. M. Escribano. “Optimization and validation of recombinant
22

serological tests for African swine fever diagnosis based on the p30 protein produced in
Trichoplusia ni “ Journal of Clinical Microbiology, 2006 Sep; 44(9):3114-21.
Jiménez-Clavero, M.A., Agüero, M, San Miguel, E., Mayoral, T, López, M.C.,Ruano, M.J.,
Romero, E, Monaco, F., Polci, A, Savini, G., Gómez-Tejedor, C. High throughput detection
of bluetongue virus by real-time fluorogenic reverse transcription-polymerase chain
reaction: Application in clinical samples from current Mediterranean outbreaks . Journal of
Veterinary Diagnostic Investigation, 18:6-16 (2006)
Jiménez-Clavero, M.A. Agüero, M., Rojo, G.,Gómez-Tejedor, C. A new fluorogenic realtime
RT-PCR assay for detection of lineage 1 and lineage 2 West Nile viruses. Journal of
Veterinary Diagnostic Investigation 18:459-462 (2006)
Otros artículos
Sánchez, A , Agüero, M., Jiménez-Clavero, M.A., Gómez-Tejedor, C. Influenza Aviar:
diagnóstico de laboratorio.Monografía XXI : Influenza aviar y gripe humana de origen
aviario, pp.77-103. B. Sanz Pérez (Ed.). Editorial: Real Academia Nacional de
Farmacia-Instituto de España. (2006).
Figuerola, J., Soriguer, R., Jiménez-Clavero, M.A.,Tenorio, A., Ruiz, S. Enfermedades
infecciosas emergentes: ¿una nueva amenaza para la conservación de la biodiversidad?
La Garcilla 127: 12-17. (2006).
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
• Arias, M.; Gallardo,C; “Report of the general activities of CISA as Reference
Laboratory for African swine fever (ASF), WRL and CRL. Annual Meeting of
National African Swine fever Laboratories. Bruselas. 15- 17 de mayo, 2006.
• Arias, M.; Gallardo,C; Presentación del “Annual meeting of African Swine fever
Laboratories-NRLs..: Informe, resultados conclusiones y recomendaciones Bruselas,
17 Mayo, 2006”. Reunión de Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de
las Comunidades Autónomas. CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Fernández-Pacheco, P; J.Fernández, Arias, M. Presentación del “Annual meeting of
Classical swine fever Laboratories-NRLs..: Informe, resultados conclusiones y
recomendaciones Bruselas, 15-16 Mayo, 2006”. Reunión de Laboratorios de Sanidad
Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas. CISA Valdeolmos
(Madrid). 22 junio 2006
• Fernández, J. Desarrollos de métodos de detección molecular por PCR individual y
múltiple para el diagnóstico de enfermedades víricas de declaración obligatoria que
cursan con síntomas hemorrágicos (PPA y PPC) y enfermedades vesiculares (F.Aftosa,
EVP, EV). Reunión de Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las
Comunidades Autónomas. CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Fernández, J; Gallardo, C; Sánchez-Arévalo, A; Arias, M. Presentation of the
Community Reference Laboratory for African Swine Fever web page. Annual Meeting
of National Swine Fever Laboratories. Bruselas, Bélgica, 15-17 mayo 2006.
• Fernández, J; Fernández-Pacheco, P; Rodríguez, B; Robles, A; Arias, M; Sánchez-
Vizcaíno, J.M. Development of a rapid TaqMan real-time RT–PCR assay for the
detection of African Horse Sickness Virus (AHSV). 7th International Congress of
Veterinary Virology. Lisboa, Portugal, 24-27 septiembre 2006.
23

• Fernández, J; Fernández-Pacheco, P; Rodríguez, B; Robles, A; Arias, M; Sánchez-
Vizcaíno, J.M. Development of a conventional and a rapid real-time RT–PCR assays
for the detection of African Horse Sickness Virus (AHSV). 4th International Veterinary
Vaccines and Diagnostics Conference. Oslo, Noruega, 25-29 junio 2006.
• Fernández, J; Gallardo, C; Sánchez-Arévalo, A; Arias, M. Presentation of the
Community Reference Laboratory for African Swine Fever web page. Reunión de
Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas.
CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Fernández-Pacheco, P; Gallardo, C; Fernández,J.; Arias, M. “Actividades y
Actuaciones del CISA como Laboratorio de Referencia”. Reunión de Laboratorios de
Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas. CISA
Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Fernández-Pacheco, P; Fernández, J. Arias, M.Informe de actividad del Annual
Meeting for Classical Swine Fever Laboratorios, 2006” Reunión de Laboratorios de
Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas. CISA
Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Gallardo C., Llorente A., Blanco E. “Diagnosis and epidemiology of African Swine
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• Gallardo, C.; R. Martin, R.Ademun, N. Nantima, R.Bishop and E. Blanco. “Molecular
characterisation of African swine fever virus (ASFV) isolates recovered from samples
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of Veterinary Virology. Lisboa. 24-27 septiembre, 2006.
• Gallardo, C.; E. Blanco, A.L.Reis, R.M.E Parkhouse, A Leitão.”Validation of 4
recombinant African Swine Fever Virus proteins providing reproducible targets for
serodiagnosis” Póster. 7th International Congress of Veterinary Virology. Lisboa. 24-
27 septiembre, 2006.
• Gallardo, C., Arias, M. “Report of activities of the EU Reference Laboratory for
African swine fever (ASF): Evaluation of Commercial kits”. Annual Meeting of
National African Swine fever Laboratories. Bruselas. 17 de mayo, 2006
• Gallardo, C. Arias, M." Evaluación del Kit Comercial Ingezim PPA K3 para la
detección de anticuerpos de Peste Porcina Africana”. Reunión de Laboratorios de
Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas. CISA
Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Gallardo, C.;"Resultados del Test Comparativo Interlaboratorial de Peste Porcina
Africana”. Reunión de Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las
Comunidades Autónomas. CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Gallardo, C.; “Nuevos desarrollos en el diagnóstico serológico de la Peste Porcina
Africana”. Reunión de Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las
Comunidades Autónomas. CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Gallardo, C., Salguero Francisco J, Martín Raquel, Ademun Rose, Nantima Noely,
Blanco Esther. “Pathological and molecular characterization of ASF isolate Uganda
2003.” Annual Meeting of National African Swine fever Laboratories. Bruselas. 17 de
mayo, 2006.
24

• Iglesias, J; Fernández-Pacheco, P; Blanco, E. "Resultados del Test Comparativo
Interlaboratorial de Enfermedad Vesicular Porcina”. Reunión de Laboratorios de
Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas. CISA
Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Jimenez-Clavero, MA; Presentación del “Annual meeting of Swine Vesicular Disease
Laboratories- NRLs..: Informe, resultados conclusiones y recomendaciones”. Reunión
de Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades
Autónomas. CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Jimenez-Clavero, MA; Consideraciones al diagnóstico serológico de EVP. Reunión de
Laboratorios de Sanidad Animal de PPC, PPA y EVP de las Comunidades Autónomas.
CISA Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006.
• Llorente, A; .C. Gallardo, R. Bishop, E. Blanco “Detection isolation and molecular
characterization of African Swine Fever Virus from ticks collected in Kenya, Uganda
and Tanzania” Poster. 7th International Congress of Veterinary Virology. : Lisboa.24-
27 septiembre 2006.
• Perez, E; .J.Arguilaget, C.Gallardo, J.Salguero, M.Perez-Filgueira, J.Pujols, M.
Nofrarias, E. Blanco, JM Escribano, N.Fernandez-Borges, F.Rodríguez. “Development
of new DNA vaccine strategies against African Swine Fever Virus”. Comunicación. 7th
International Congress of Veterinary Virology. Lisboa. 24-27 septiembre, 2006.
• Perez-Filgueira, M.; F. González-Camacho, C. Gallardo, P. Resino, E. Blanco, E.
Gómez-Casado, C. Alonso and J. M. Escribano. “Optimization and validation of
recombinant serological tests for African swine fever diagnosis based on the p30
protein produced in Trichoplusia ni larvae”. Póster. 7th International Congress of
Veterinary Virology. Lisboa.24-27 septiembre, 2006.
• Pérez-Martín, E; .J. Arguilaget, M. Pérez-Filgueira, C. Gallarrdo, J. Pujols, M.
Nofrarias, I. Díaz, N. Fernández-Borges, F.J. Salguero, E. Blanco, J.M. Escribano, F.
Rodríguez. Development of new DNA vaccine strategies against African swine fever
virus. 7 th International Congress of Veterinary Virology. Lisboa, Portugal, 2006.
• Ristoski, T; .M. Knezevic, L. Carrasco, F.J. Salguero, A. Núñez, J. Tosevski.
Immunohistochemical detection and distribution of the viral gp55 antigen in pigs
naturally infected with classical swine fever virus. 24 th Meeting of the European Society
of Veterinary Pathology. Edinburgh, Scotland. 2006
• Rodríguez, B; Fernández, J; Arias, M; Sánchez-Vizcaíno, JM. Detection of African
Horse Sickness Virus serotype 4 by quantitative RT-PCR. 7th International Congress of
Veterinary Virology. Lisboa, Portugal, 24-27 septiembre 2006.
• Rodríguez, B; Fernández, J; Arias, M; Sánchez-Vizcaíno, JM. Differential diagnostic of
Bluetongue Virus serotype 4 by RT-PCR. 7th International Congress of Veterinary
Virology. Lisboa, Portugal, 24-27 septiembre 2006.
• Salguero, F.J; . P. Fernández-Pacheco, J. Fernández, M.A. Sánchez-Martín, V. Sánchez,
M. Fernández de Marco, M. Arias. Experimental inoculation with Classical swine fever
virus (isolate Spain 1/2001) in pigs: a clinical pathological and laboratory diagnostic
study. 24 th Meeting of the European Society of Veterinary Pathology. Edinburgh,
Scotland. 2006
25

OTRAS ACTIVIDADES
1. Organización de Cursos Internacionales. :
1.1 Organización del "XV Curso Internacional sobre Enfermedades Exóticas". Centro de
Investigación en Sanidad Animal, CISA-INIA. Valdeolmos. Financia: AECI-INIA. Noviembre
de 2006, 120 horas lectivas. Con la colaboración especial de las Facultades de Veterinaria de la
UCM, Madrid, y de Córdoba. Este año se contó con la participación de profesionales de Chile,
Costa Rica, Argentina, Venezuela, Paraguay, Colombia, Brasil, Bolivia, Perú, España.
Como profesores participaron 25 ponentes de conferencias , 19 de ellos provenientes de las
Facultades de Veterinaria de Madrid, UCM, Zaragoza, Córdoba, León, CreSA, UAB,
MAPA, AGEMED, MSyC, Empresas del Sector, Centro de Referencia de Gripe,- Hospital
clínico Universitario de Valladolid, etc. Así como 12 investigadores y técnicos de
Laboratorio como personal docente en la impartición de conferencias y/o prácticas de
laboratorio. Directora del Curso: M.Arias; Coordinación:Carballo, M. 3-30 noviembre 2006.
1.2 Organización del International Workshop on African Swine Fever Diagnosis. Centro
de Investigación en Sanidad Animal, CISA-INIA, Valdeolmos. 11-15 Diciembre 2006.
Participación de Jefes de Equipo y técnicos de los Laboratorios de Referencia. Países
participantes: Eslovenia, Estonia, Rumanía, Kenya .
1.3 Coordinación y realización del curso “African Swine Fever Serodiagnostic
Techniques: ELISA and Immunoblotting Tests” . Conducido por : C.Gallardo. Nairobi
(Kenya), 5 al 9 de septiembre 2006. Para formación y transferencia de tecnología al personal
de los servicios veterinarios de Nairobi (Kenya) dentro del marco de colaboración
internacional entre el CISA-INIA y el ILRI (International Livestock Research Institute).
2. Organización de Reuniones Nacionales.:
Reunión de Laboratorios de Sanidad Animal de Peste Porcina Clásica, Peste Porcina
Africana y Enfermedad Vesicular Porcina de las Comunidades Autónomas. CISA
Valdeolmos (Madrid). 22 junio 2006. Con la participación de CC.AA; Laboratorio Nacional
de Referencia, CISA-INIA, MEC; Laboratorio central de Algete, LCV, MAPA;
Subdirección General de Sanidad Animal, SGSA, MAPA.
3. Transferencia de tecnología :
i) INIA-ILRI.: de técnicas de diagnóstico serológico y molecular de PPA a laboratorios de
países del Este de África, Uganda y Kenya. Estancia de C.Gallardo en la Facultad de
Veterinaria de Makerere (Kampala, Uganda) para transferencia tecnológica a los
responsables del diagnostico en los servicios veterinarios ugandeses de Kampala, Dra.Rose
Ademun y Dra.Noelina Nantima.
ii) de técnicas de diagnóstico serológico y molecular de la Peste porcina Africana, Peste
Equina Africana y Peste porcina Clásica a laboratorios e Instituciones de distintos paises
Iberoamericanos a través del "XIV Curso Internacional sobre Enfermedades Exóticas"
(CISA, 3-30 Noviembre 2006) y del Workshop on ASF diagnosis (CISA, 11-15 Diciembre
2006). realizado en el CISA-INIA para países miembros de la unión Europea y países
asociados dentro del marco de actividades del CISA cómo Laboratorio de Referencia de la
UE y Mundial de Referencia de PPA.
iii) Formación de expertos y asistencia técnica en el diagnóstico y control de la Peste
Porcina Africana. Julio 2006. Apoyo técnico para la realización de un Training de
26

formación científico-técnica “Molecular Epidemiology on African Swine Fever” celebrado
en el CISA-INIA dentro del marco de colaboración del CISA-INIA con el Istituto
Sperimentale dell´Umbria e delle Marche (Perugia-Italia).
4. Informes Cientifico-Técnicos.:
Informe Anual de Actividad del Laboratorio de Referencia Mundial de Peste Porcina
Africana. Organismo.: Oficina Internacional de Epizootías- OIE
Informe Anual de Actividad del Laboratorio de Referencia Mundial de Peste Equina
Africana. Organismo.: Oficina Internacional de Epizootías- OIE
Report of the Assesement of the Ingezim PPA K3 Commertial Kit for AASF antibody
detection ”. Instituciones: Laboratorios Nacionales de Referencia (NRL) de países
miembros de la UE y SANCO, UE.
“Report of the Annual Meeting 2006 of National African Swine Fever Laboratories”.
Instituciones: Laboratorios Nacionales de Referencia de países miembros de la UE y
SANCO, UE.
Informe Anual de Actividad del Laboratorio de Referencia Comunitario de Peste
Porcina Africana. Organismo.: SANCO, UE.
Informe de Resultados del Ensayo colaborativo Interlaboratorial de Peste Porcina
Africana, 2006. Instituciones.: Laboratorios de Sanidad Animal de las CC.AA y SGSA,
MAPA.
Informe de Resultados del Ensayo colaborativo Interlaboratorial de Enfermedad
Vesicular Porcina, 2006. Instituciones.: Laboratorios de Sanidad Animal de las CC.AA
y SGSA, MAPA.
- Informe Anual de Actividad para los Laboratorios Nacionales de Referencia de Peste
Porcina Africana, Enfermedad Vesicular Porcina, Peste Porcina Clásica. Institución.:
Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación.
- Informe Cientifico-Técnico de estudios sanitarios en explotaciones porcinas.
Institución.: Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación.
- Informe Anual de actividad como Laboratorio de Referencia del Internacional
Council for Laboratory Animal Science ICLAS, . Organismo.: ICLAS.
- Informe Anual del Programa de Acceso a Instalaciones Singulares,. Institución:
Ministerio de Educación y Ciencia.
5. Otros Cursos, Jornadas, Conferencias
- Cursos de Doctorado: Bioseguridad integral. Dpto. Sanidad Animal. F.Veterinaria.
UCM. Arias, M. marzo 2006:
- Asignatura genérica de libre elección. Actuación en crisis de bioseguridad y
defensa. .: F.Veterinaria, UCM, Madrid : ponente M.Arias, Noviembre, 2006.
- Tutorias.: J. Fernández: Tutora externa de la asignatura “Estancias” para 200 horas
de prácticas a alumnos de 2º ciclo de la Licenciatura en Veterinaria, UCM, Madrid;
- Tutorías de Becarios: Elena Sotelo, sobre Nuevos desarrollos en Diagnóstico de West
Nile Virus. Tutores: M.Arias, y J.Fernández..
27

ZOONOSIS. FIEBRE DEL VALLE DEL RIFT
Componentes
Brun Torres, Alejandro, investigador principal.
Martín Folgar, Raquel
Lorenzo Alguacil, Gema
Correo electrónico: brun@inia.es
OBJETIVOS
1. El objetivo general del grupo es la generación de conocimiento frente al virus de la
Fiebre del Valle del Rift, para su aplicación en diagnóstico y en el diseño de nuevas
vacunas más eficaces frente a la enfermedad empleando modelos murinos y/o
pequeños rumiantes. Asimismo, se pretende profundizar en la patogenia de la
infección, utilizando un modelos de ratónes transgénicos susceptible a la infección
por cepas atenuadas del virus. Para ello se persiguen los siguientes objetivos
específicos:
- Desarrollo de métodos para el diagnóstico serológico basados en la generación de
antígenos recombinantes y anticuerpos monoclonales específicos frente a las proteínas
estructurales del virus.
- Desarrollo de técnicas moleculares de detección basadas en la aplicación de PCR
cuantitativa en tiempo real (qPCR)
- Estudio de la respuesta inmunológica inducida por vacunas DNA en modelos murinos y
ovino.
- Estudio de la patogenia del virus y de la interacción virus–célula en modelos de ratones
transgénicos susceptibles (IFNAR-/-).
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
• Desarrollo de métodos para el diagnóstico de la Fiebre del Valle del Rift .
• Estudios de inmunidad y desarrollos vacunales frente a la FVR
• Estudios de patogenia viral e interacción virus-célula
PROYECTOS
Código y título: RTA05-00017: Estudios de patogenia inmunidad y control del virus de la
Fiebre del Valle de Rift.
Entidad financiadora: INIA Duración: 2006-
2008
Investigador responsable: Alejandro Brun Torres
Código y título: CSD00C-06-02320. CONSOLIDER. Porcivir. Investigación en
enfermedades viricas porcinas
Entidad financiadora: MEC Duración: 2006- 2011
Investigador responsable: Mariano Domingo
Coordinador en INIA.: A. Brun
28

REDES EUROPEAS DE EXCELENCIA.
Código y título: CT2006-016236-FOOD. Network of excellence in epizootics EPIZONE
Entidad financiadota: Unión europea.
Duración:2006-
2011
Investigador responsible: Piet van Rijn
Coordinador de Workpackage “Vaccine technologies”.: A. Brun
CONVENIOS
Código y título: ILRI-03-001. A collaborative project between ILRI and CISA
Entidad financiadora: INIA Duración: 2004-2007
Coordinador: Marisa Arias-Richard L. Bishop
Investigadores Principales: A.Brun, C.Gallardo, E.Blanco
Código y título: Convenio de colaboración CISA. University of Oxford
Duración: 2005-2008
Investigador responsable: Alejandro Brun-Sarah Gilbert
Código y título: NBQ20060321B. Asistencia técnica a Ministerio de Defensa-FNLM
Entidad financiadora: Ministerio de Defensa
Duración:
2006
Investigador responsable: Marisa Arias- Carmen Ybarra
Principales resultados:
Se han expresado las proteínas G1, G2 y N en sistemas de expresión bacteriana y
fusionadas a GST para su posterior purificación mediante columnas de afinidad a
glutatión. La antigenicidad de las proteínas expresadas mediante este sistema se
comprobó mediante su detección por sueros procedentes de ovejas experimentalmente
inoculadas con el VFVR
Se han generado sueros policlonales frente al virus y se ha analizado su especificidad frente
a las proteínas estructurales virales y su capacidad neutralizante de la infección in vitro.
Asimismo se ha analizado su capacidad para capturar virus procedente de cultivos celulares
infectados en fase sólida y su aplicación en un ensayo ELISA de captura. Este ensayo es
capaz de detectar anticuerpos específicos frente al virus en sueros de ovejas
experimentalmente infectadas con el RVFV.
Se han generado una serie de anticuerpos monoclonales específicos de la nucleoproteína N
del virus. Se han obtenido anticuerpos capaces de reconocer tanto el virus como epítopos
lineales de la misma. La capacidad de estos anticuerpos monoclonales para el diagnóstico
serológico está siendo evaluada mediante la puesta a punto de ensayos de competición.
Tanto la secuencia codificante de la poliproteína precursora de las glicoproteínas del VFVR
(NsmG1/G2) como la nucleoproteína (N) viral se han expresado en células eucariotas bajo
control del promotores de citomegalovirus (CMV/ie). La capacidad inmunogénica de dichas
construcciones genéticas se ha evaluado tanto en ratones Balb/c y en ovejas de raza
castellana mediante el análisis de la respuesta humoral y celular inducida. Tanto en ratones
como en ovejas la construcción pCMV-NP fue capaz de inducir una potente respuesta de
anticuerpos específicos capaz de reconocer la nucleoproteína viral. Sin embargo la
construcción NsmG2/G1 no indujo una respuesta de anticuerpos detectable. Para mejorar la
respuesta se ha generado una nueva construcción sin la región preglicoproteina Nsm
29

(G2/G1) comprobándose que la expresión en líneas celulares BHK es más eficiente. La
capacidad inmunogénica de esta nueva construcción se está evaluando en eel modelo
murino..
En combinación con el grupo de la Dra. Sarah Gilbert (University of Oxford, Wellcome
Trust Centre for Human Genetics), se han generado plásmidos de recombinación para la
construcción de vectores vaccinia MVA recombinantes que expresan las glicoproteínas G1 y
G2, así como su precursor G1/G2 y la nucleoproteína N.
Finalmente, con la participación del Dr. Dufton Mwaengo se ha comenzado la puesta a
punto de un método para la detección en tiempo real de los tres segmentos virales mediante
utilización de sondas Taqman.
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
Salguero, F.J., Díaz-San Segundo, F., Brun A., Cano MJ., J.M. Torres (2006)
Immunohistochemical diagnosis of bovine spongiform encephalopathy (BSE) in brain stem.
Comparison of three different monoclonal antibodies. J. Vet Diagnost. Investigation 18,
106-109
Fernandez-Borges, N., Brun, A., Whitton, JL., Parra B., Torres, JM., Rodriguez, F., (2006)
DNA immunization breaks tolerance to PrP and induces active immunity that delays and
attenuates prion disease in mice. J. Virol. 80, 9970-9976
Sergio F. Martín, Beatriz Parra, María E. Herva, Juan C. Espinosa, Joaquín Castilla,
Alejandro Brun and Juan M. Torres. (2006). Cell expression of a four extra octarepeat
mutated PrPC modifies cell structure and cell cycle regulation. FEBS letters. 580, 4097-
4104
Díaz-San Segundo F, Salguero FJ, de Ávila A, Espinosa, JC., Torres, JM , Brun A. (2006).
Distribution of the cellular prion protein (PrPC) in brains of livestock and domesticated
species
Acta Neuropathologica. 112, 587-595
Garcia de Viedma D, Marin M, Andres S, Lorenzo G, Ruiz-Serrano MJ, Bouza E . (2006)
Complex clonal features in an mycobacterium tuberculosis infection in a two-year-old child.
Pediatr Infect Dis J. May;25(5):457-9.
Garcia de Viedma D, Lorenzo G, Cardona PJ, Rodriguez NA, Gordillo S, Serrano MJ,
Bouza E (2006) Association between the infectivity of Mycobacterium tuberculosis strains
and their efficiency for extrarespiratory infection. J Infect Dis. 15;192:2059-65.
Libros y capítulos de libros
Esteban Domingo, Alejandro Brun, José Ignacio Núñez, and Cristina Escarmís (2006)
Virogenomics. For: Genome Analysis of Pathogenic Microbes Jörg Hacker (Editor), Ulrich
Dobrindt (Editor), Werner Göbel (Foreword by) ISBN: 3-527-31265-X
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
30

Antigenic And Immunogenic Properties Of Recombinant Rift Valley Fever Virus Structural
Proteins. Gema Lorenzo1, Raquel Martín1, Andrés García3, Belén Borrego1 Fernando
Rodríguez2 and Alejandro Brun1
Tesis Doctorales, Diplomas de Estudios Avanzados, Tesinas, Proyectos y Trabajos Fin de
Carrera
Fayna Díaz Sansegundo (2006) Título de la tesis doctoral: Estudio de la transmisibilidad de
la EEB al ganado porcino. Universidad: Complutense, Facultad de Veterinaria Director de
tesis: Alejandro Brun Torres y José Manuel Sánchez-Vizcaíno.
OTRAS ACTIVIDADES
Cursos
- Profesor en el "XV Curso Internacional sobre Enfermedades Exóticas". Centro de
Investigación en Sanidad Animal, CISA-INIA. Valdeolmos. Financia: AECI-INIA. 3-30
Noviembre de 2006, 120 horas lectivas. Director del curso M.Arias . Coordinador del
Curso: Matilde Carballo Santaolalla. Con la colaboración especial de la Facultad de
Veterinaria de la UCM y de Córdoba. Profesores del Curso: Investigadores del CISA, así
como Profesores, investigadores y profesionales de otras Instituciones y Universidades de
España.
Otros
- Coordinador de Workpackage “Vaccine technologies”. Red europea de Excelencia
EPIZONE. Coordinación y armonización de tareas de investigación llevadas a cabo por
diversos laboratorios europeos con el objeto de desarrollar futuras estrategias de
vacunación frente a enfermedades de interés veterinario en las que no existen vacunas o su
desarrollo puede ser mejorable.
- Miembro de la comisión directora del Proyecto CONSOLIDER-PORCIVIR en
representación del grupo de enfermedades víricas porcinas del CISA.
- Participación en reuniones de la Red Española de Alerta Biológica (RELAB) en calidad
de Experto Técnico y responsable de la coordinación de actividades en el laboratorio
P3+ del CISA
Tutor de prácticas de Irene G. Escudero, estudiante de 5º curso de Bioquímica Universidad
Complutense
31

INFLUENZA ANIMAL
Componentes
del Real Soldevilla, Gustavo. Investigador Principal
Martín del Burgo, M. Ángeles
Correo electrónico: real@inia.es
OBJETIVOS
1. Estudio de la Prevalencia de la gripe porcina en españa
2.caracterización de los virus de influenza porcina que circulan en la actualidad en españa.
3. Estudio de la patogenia de la infección por el virus influenza en el cerdo
4. Estudio de la inmunidad Heterosubtípica y de la eficacia de las vacunas actuales frente a
la gripe porcina.
PROYECTOS
Código y título: Plan Nacional I+D+i 2004-2007 (AGL 2004-2132). Epizootiología
molecular de la Influenza porcina en España.
Entidad financiadora: M. Educación y Ciencia Duración: 2004-2007
Investigador responsable: Gustavo del Real
Código y título: Epizootics Network of Excellence (EPIZONE); subproyecto: Vaccine
Technologies.
Entidad financiadora: Comunidad Europea Duración: 2006-
2010
Investigador responsable: Alejandro Brun (CISA)
Código y título: CONSOLIDER-INGENIO 2010. Patogenia de infecciones víricas del
cerdo (PORCIVIR)
Entidad financiadora: M. Educación y Ciencia Duración: 2006-2010
Investigador responsable: Mariano Domínguez (CRESA)
COLABORACIONES:
Laboratorios Hipra S.A., AMER, Gerona. Caracterización de los virus de la Influenza
porcina circulantes en España.
Depto. de Microbiología, Facultad de Medicina, Hospital Monte Sinaí de Nueva York,
EEUU. Desarrollo de virus atenuados y clones infecciosos de Influenza porcina por genética
inversa.
Depto. de Biología Molecular, Centro Nacional de Biotecnología, Madrid. Desarrollo de
vacunas frente a la gripe porcina y aviar basadas en VLPs.
Ingenasa S.A., Madrid. Estudio de la eficacia de nuevos kits de diagnóstico de Gripe.
Principales resultados:
- Estudio serológico de la prevalencia de la Influenza en la cabaña porcina española.
- Caracterización y secuenciación completa del genoma de varias cepas de virus de
Influenza porcina aisladas en España.
32

- Estudio de la inmunidad cruzada entre virus de los diferentes subtipos presentes en España
Los resultados de estos trabajos se describen en los artículos Epizootiology of swine
Influenza in Spain y Heterosubtypic immunity induced by current Swine Influenza viruses
isolated in Spain enviados a publicar.
PUBLICACIONES
Libros y capítulos de libros
J. Figuerola, A. García-Sastre, J. Ortín, P. Pérez-Breña, A. Portela, G. del Real, R.
Soriguer.Autor (2006). La Gripe Aviaria,. ¿Una nueva amenaza pandémica?. Editado por el
C.S.I.C. M-3470-2006.
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
• Conferencia inagural: Gripe Aviar. G. del Real. V Congreso de la Sociedad Espanola de
Medicina Tropical y Salud Internacional. Santa Cruz de Tenerife. 22 mayo 2006.
• Epizootiology of Swine Influenza A in Spain. MA. Martín del Burgo, J. Maldonado, E.
Martínez, A. Solórzano, A. García-Sastre and G. del Real. The seventh International
Congress of Veterinary Virology. Lisboa, Portugal, 24 sept. 2006.
• Antigenic and Molecular Epizootiology of Swine Influenza A in Spain. MA. Martín del
Burgo, J. Maldonado, E. Martínez, A. Solórzano, A. García-Sastre and G. del Real. In
Advances in Influenza Research: From birds to bench to bedside. Steamboats Springs,
Colorado, EEUU, 28 Marzo 2006.
OTRAS ACTIVIDADES
Cursos
Gripe aviar: la emergencia de un virus posiblemente pandémico, organizado por la
Universidad Internacional Menéndez Pelayo, Valencia, Octubre 2006.
Otros
Creación del Grupo de Trabajo sobre Gripe formado por los Laboratorios Nacionales de
Referencia de la Gripe humana (ISCIII), aviar (LVC) y el CISA.
33

PESTIVIRUS
Componentes
Mena Piñeiro, Ignacio
Tomé Amat, Jaime (estudiante en prácticas)
Correo electrónico: gmena@inia.es
OBJETIVOS
1. Estudio de los pestivirus de importancia en sanidad animal
2. desarrollo de vacunas basadas en vectores virales manipulados y capsides vacias (vlpS)
Principales líneas de I+D+I
• Obtención de un clon infeccioso a partir de un aislado procedente del último brote de
peste porcina clásica en España (2001-2002) para su posterior utilización en genética
reversa y en el desarrollo de vacunas experimentales.
• Desarrollo de nuevas vacunas frente al virus de la influenza porcina basadas en cápsides
(VLPs) quiméricas de calicivirus. Estudios sobre la biología y tropismo de los calicivirus
con el objetivo de optimizar su utilización como vectores vacunales. (en colaboración
con el grupo del Dr. J. Bárcena, CISA)
• Caracterización de la actividad antiviral de una ribozima que reconoce y corta el genoma
de los pestivirus y del virus de la hepatitis C. (en colaboración con el grupo del Dr. J.
Gómez, CSIC-Granada).
• Estudio de las proteínas inmunomoduladoras del virus swinepox para la obtención de
vectores vacunales mejorados.
PROYECTOS
Código y título: AGL2006-13809-C03-02/GAN: “Caracterización del potencial
inmunoestimulador de las VLPs de calicivirus: desarrollo de nuevas estrategias vacunales
frente al virus de la gripe porcina”.
Entidad financiadora: Ministerio de Educación y Ciencia Duración: 2006-
2009
Investigador responsable: Ignacio Mena Piñeiro
Código y título: CSD2006-07: “Patogenia de enfermedades víricas porcinas”.
Entidad financiadora: Ministerio de Educación y Ciencia (Programa CONSOLIDER-
INGENIO) Duración: 2006-2011
Investigador responsable: Mariano Domingo
Código y título: FAU2006-00019-C03-02: “Estudio de la implicación de factores
ambientales y de differentes especies de aves y mamíferos silvestres y de explotación
extensiva en la ecología de los virus de influenza aviar en humedales españoles”.
Entidad financiadora: INIA (Convocatoria: Interacción Sanitaria entre Fauna Silvestre y
Ganadería Extensiva)
Duración:
2007-2010
Investigador responsable: Ursula Höffle
34

Principales resultados:
Obtención de clones parciales que abarcan la totalidad del genoma del virus de la peste
porcina clásica.
Partiendo de RNA purificado a partir de células infectadas y de partículas virales, de un
aislado procedente del último brote de peste porcina clásica ocurrido en España (2001-2002)
se han obtenido, mediante RT-PCR, una colección de plásmidos que contienen cDNAs
correspondientes a la totalidad del genoma de este virus. Estos plásmidos se utilizarán para
determinar la secuencia completa del virus y para construir un clon infeccioso que permita
aplicar técnicas de genética reversa para la manipulación y estudio del virus. Además, estos
cDNAs parciales se están utilizando para construir minigenomas defectivos que permitirán
estudiar distintas funciones virales (traducción mediada por IRES, replicación, etc.) y
evaluar estrategias antivirales en ausencia de virus infeccioso.
Caracterización de la actividad antiviral de la ribozima de Synechocystis sp. sobre la
replicación del virus de la peste porcina clásica en células PK-15.
Como continuación del trabajo del grupo del Dr. Jordi Gómez (CSIC-Granada), que había
demostrado que esta ribozima reconoce y corta in vitro una estructura tipo tRNA en el
genoma del virus de la hepatitis C y de la diarrea viral bovina, hemos comprobado que el
genoma del virus de la peste porcina clásica también contiene esta estructura y es cortado in
vitro.
A continuación hemos comprobado que la ribozima también actúa in vivo, dado que la
transfección en células susceptibles (PK-15) reduce en más de 10 veces la producción de
virus medida mediante RT-PCR cuantitativa. En la actualidad se están culminando una serie
de controles para demostrar la especificidad del proceso.
Estudios sobre tropismo de los calicivirus.
En colaboración con el grupo del Dr. Juan Bárcena (CISA) estamos realizando una serie de
estudios para mejorar la utilización de las cápsides vacías (VLPs) de calicivirus como
vectores para la vacunación contra epítopos heterólogos. Entre estos estudios se incluyen la
caracterización de los factores que influyen en el tropismo (estudios sobre distintas variantes
del calicivirus felino), la optimización de los vectores utilizados para la producción de las
VLPs en células de insecto (con el virus de la fiebre hemorrágica del conejo)y la producción
y caracterización de nuevos anticuerpos monoclonales (frente al calicivirus felino y a
calicivirus porcino).
PUBLICACIONES
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
I. Mena: “Efecto antiviral de la ribozima de Synechocistis sp. sobre la replicación del virus
de la peste porcina clásica”Comunicación oral en la 2ª reunión de la red temática
RIBORED.Barcelona. Junio 2006.
H. Almanza; I. Angulo; C. Cubillos; M. Morales; I. Mena; J. Bárcena.: “Tissue-culture
adapted feline calicivirus variants with expanded cell tropism”.Poster en “7th International
Congress of Veterinary Virology”.Lisboa (Portugal). Septiembre 2006
OTRAS ACTIVIDADES
I. Mena se ocupa de la organización de los seminarios internos del CISA.
35

Además I. Mena participa en las siguientes redes temáticas:
- Red de Excelencia “EPIZONE”
- RIBORED
Y en las reuniones multidisciplinares del grupo de trabajo sobre la situación de la
mixomatosis en España, organizadas por el INIA y la organización Intercun
36

BIOLOGÍA MOLECULAR DE PESTIVIRUS
Componentes
Jordi Gomez Castilla Investigador principal
Rosa Diaz Toledano
Correo electrónico: jgomez@ipb.csic.es
Objetivos
1. Caracterizar las estructuras del RNA de la región 5´del virus de la Diarrea viral Bovina en
comparación con la del virus de la hepatitis C humana.
2. Desarrollar un Ribozoma contra el RNA del virus de la peste porcina clasica.
Principales líneas de I+D+I
Estructura del RNA vírico en la familia de los pestivirus animales y hepatitis C.
Desarrollo de un ribozima terapeutico derivado de la RNasa P de sinechocistis.
Proyectos
Código y título: BIO 2004-06114. Caracterización de las señales de ARN alrededor del
IRES del virus de la hepatitis C y los pestivirus animales relacionados para el diseño de un
ribozima modular derivado de la ARNasa P de la cianobacteria Synechocistis.
Entidad financiadora: MEC. Duración: 2004-
2007
Principales resultados:
- Caracterizacion de la señal RNAsa P (Piron et al. NAR 2005) y la señal RNasa III en el
virus de la hepatitis C (Beguristain et al. NAR 2005); Caracterización de la interacción
estructural entre los motivos derivados de la RNAsa P y RNasa III en el IRES de VHC:
en fase final de redacción para NAR); Búsqueda de señales RNasa P en los RNAs de
células hepáticas con el uso de microarrays de DNA (en fase experimental con
resultados ya comprobados y forma parte del trabajo experimental y futura Tesis
doctoral de la becaria asociada a proyecto Rosa Díaz Toledano. Determinación de la
accesibilidad de los genomas de los pestivirus relacionados con el virus de la hepatitis C
a la actividad del ribozima derivado de la RNasa P de sinechocistis sp., en el presente se
está evaluando la acitivdad del ribozima sobre el virus de la Peste porcina en cultivos
celulares. Por el momento podemos confirmar la actividad inhibitoria del ribozima pero
estamos a la espera de analizar la especificidad de esa inhibición.
PUBLICACIONES
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
REUNION RED NACIONAL de RNA 2006 Barcelona:
TITULO: Conformaciones alternativas del IRES de HCV. 2006 ORAL: Jordi Gomez
37

JORNADA VIROLOGIA CATALANA: Aproximación a las relaciones de mimetismo para
adquirir el significado biológico de elementos estructurales en el RNA vírico.
Barcelona 2006. Oral Jordi gomez
38

GENERACIÓN DE VECTORES VIRALES VACUNALES.
Componentes
Calvo Pinilla, Eva
Ortego Alonso, Francisco Javier, investigador principal
Correo electrónico: ortego@inia.es
OBJETIVOS
1. Generacion de vectores virales para el desarrollo de vacunas frente al virus de la lengua
azul
2. Generacion de vectores virales vacunales basados en genomas de coronavirus
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
• Desarrollo de vacunas recombinantes de nueva generación frente al virus de la
lengua azul.
• Generación de vectores virales vacunales
PROYECTOS
Código y título: RTA06-00169-CO2-01. Generación de vectores virales para el
desarrollo de vacunas frente al virus de la lengua azul.
Entidad financiadora: INIA Duración: 2006-2008
Investigador responsable: Francisco Javier Ortego Alonso
Principales resultados:
La lengua azul o fiebre catarral ovina es una enfermedad vírica infecciosa transmitida por
mosquitos del género Culicoides que afecta a rumiantes domésticos y salvajes. Las vacunas
juegan un papel importante en el control de esta enfermedad aunque hay cierta controversia
respecto a la seguridad de las vacunas vivas atenuadas utilizadas actualmente. Por ese
motivo se intentan desarrollar reactivos y estrategias de vacunación frente al virus de la
lengua azul usando una cepa del virus vaccinia que es considerada segura y cDNAs
desnudos. La eficacia en cuanto a protección de las vacunas que usan poxvirus como vector
es bien conocida para otras enfermedades, induciendo respuesta celular mediada por
linfocitos T citotóxicos y producción de anticuerpos neutralizantes frente al antígeno
recombinante. En este año se han generado virus vaccinia recombinantes de la cepa
atenuada Ankara (rMVA) que expresan genes del virus de la lengua azul (BTV). Los genes
VP2 y VP5 de BTV serotipo 4 han sido amplificados por RT-PCR a partir de RNA viral
purificado, secuenciados y clonados en el plásmido pSC11 bajo el promotor p7.5 del virus
vaccinia. Los virus rMVA se generaron por recombinación homóloga en el locus de la
timidina kinasa, lo que permitió su análisis usando el gen marcador LacZ. Los virus
recombinantes fueron plaqueados, clonados y purificados y la expresión de los genes VP2 y
VP5 de BTV confirmada por inmunofluorescencia o presencia de RNA mensajero por RT-
PCR.
Además, se han generado los cDNAs desnudos para ser utilizadas como vacunas DNA
clonándose los genes VP2 y VP5 del serotipo 4 en el vector de expresión de mamíferos
pcDNA3 bajo el control del promotor del citomegalovirus humano.
39

Respecto a la generación de vectores virales vacunales basados en genomas del
coronavirus TGEV se ha generado un vector basado en el genoma de TGEV con el gen
esencial E delecionado (rTGEV-∆E), eficiente en replicación y defectivo en propagación.
Para su generación se ha utilizado un sistema de células empaquetadoras que suministran en
trans la proteína E de TGEV. Los títulos virales alcanzados son próximos a los títulos
virales del virus silvestre al igual que la estabilidad del vector viral en cultivos celulares. Se
ha estudiado la bioseguridad del vector conteniendo una única deleción, la del gen E de
TGEV, y se ha confirmado que es defectivo en propagación debido a un bloqueo de la
morfogénesis del virus en el compartimento intermedio, impidiendo así su secreción al
medio extracelular. Esto confirma que el virus TGEV-∆E es un vector bioseguro debido a
su deficiencia en propagación Los estudios de infectividad, replicación viral y deficiencia en
propagación del vector TGEV-∆E en lechones están pendientes de realización
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
Almazán, F., DeDiego, M.L., Galán, C., Escors, D., Alvarez, E., Ortego, J., Sola, I., Zúñiga,
S., Alonso, S., Moreno, J.L., Nogales, A., Capiscol, C. y Enjuanes, L. (2006) Construction
of a SARS-CoV infectious cDNA clone and a replicon to study coronavirus RNA síntesis. J.
Virol. 21: 10900-10906.
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
Buesa, J., Ortego, J., Ribes, J.M., Montava, R., Ceriani, J. y Enjuanes, L. Expresión of
rotavirus antigens by coronavirus-based vectors with engineered murine tropism. 9th
dsRNA virus symposium, Cape Town, South Africa, 21-26 Octubre 2006
OTRAS ACTIVIDADES
Cursos
Participación docente en el curso de doctorado titulado ¨Terapia génica¨ del departamento de
Bioquímica y Biología Molecular de la facultad de Ciencias de la Universidad autónoma de
Madrid y dirigida por el Dr. Antonio Talavera el curso 2005-2006.
Participación docente en el curso ¨XV curso internacional sobre enfermedades exóticas
animales¨, del 3 al 30 de noviembre de 2006, impartido en el Centro de Investigación en
Sanidad Animal (CISA-INIA) de Madrid.
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ESTRATEGIAS VACUNALES FRENTE A VIRUS ANIMALES
Componentes
Bárcena Del Riego, Juán
Blanco Lavilla, Esther. Investigador principal.
Cubillos Zapata, Carolina
Gallardo Frontaura, Carmina
Llorente Herranz, Alicia
Correo electrónico: blanco@inia.es
OBJETIVOS
1. Desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico
2. Desarrollo de nuevas estrategias de vacunación frente al virus de la fiebre aftosa
3. Caracterización de mecanismos de respuesta inmune y diseño de vacunas frente al virus
de la peste porcina africana.
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
• Desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico viral
• Desarrollo y evaluación de vacunas frente a patógenos virales porcinos
• Caracterización molecular y biologica de aislados virales del VPPA
PROYECTOS
Código y título: UE SSP503603. “Improvement of Foot and Mouth disease control by
ethically acceptable methods based on scientifically validated assays and new knowledge on
FMD vaccines, including the impact of vaccination"
Entidad financiadora: UE Duración: 2004-2007
Investigador responsable: Blanco Lavilla, Esther
Código y título: AGL 2004-07857-C03-02. “Caracterización de nuevos inmunógenos del
virus de la Peste porcina africana: Estudio de la respuesta inmune inducida en cerdo"
Entidad financiadora: MeyC (Plan Nacional ) Duración: 2004-
2007
Investigador responsable: Blanco Lavilla, Esther
Código y título: “ Control of African Swine Fever Virus (ASFV) through improved
understanding of the epidemiology of the disease and construction and testing of
recombinant and attenuated virus vaccines "
Entidad financiadora: Wellcome Trust Duración: 2005-
2009
Investigador responsable: Martinez Escribano, Jose Angel
CONVENIOS
Código y título: “Development of new diagnostic assays and epidemiological surveillance
of viral pathogens of livestock in sub-saharan and north africa”
Entidad financiadora: CGIAR-INIA. Duración: 2003-2007
Coordinador: M.Arias
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Investigadores principales: Brun, Alejandro , Carmina Gallardo, Blanco, Esther
Principales resultados:
Optimización de un sistema de PCR para la deteción específica del virus de la peste porcina
africana en garrapatas africanas.
Aislamiento y caracterización fenotípica de aislados del VPPA obtenidos a partir de
garrapatas del genero Ornithodorus moubata.
Análisis de la seroprevalencia del VPPA en Uganda.
Desarrollo de una vacuna peptídica frente al virus de la fiebre aftosa que confiere protección
total en cerdo.
Desarrollo de un sistema de diagnóstico serológico basado en la utilización de biosensores,
que permite diferenciar animales infectados o vacunados con el VFA.
Caracterización de anticuerpos monoclonales frente a la proteína p30 del VPPA.
Desarrollo de una estrategia de genotipado de aislados del VPPA que permite establecer
relaciones filogeneticas entre aislados próximos.
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
C.Gallardo, Blanco E, A.L.Carrascosa, JM.Rodriguez y JM.Sanchez-Vizcaino.
(2006).“Antigenic Properties And Diagnostic Potential Of African Swine Fever Virus
Protein PP62 Expressed In Insect Cells.”. J Clin Microbiol. 2006 Mar;44(3):950-6.
R.J. Nix, C.Gallardo,G.Hutching, Blanco E y L.K.Dixon. (2006). “Identification of variable
regions of the African swine fever virus genome and use of these for studying field isolates”.
Arch Virol. 2006 Jul 3; [Epub ahead of print]
Perez-Filgueira DM, Gonzalez-Camacho F, Gallardo C, Resino-Talavan P, Blanco E, Gomez-
Casado E, Alonso C, Escribano JM. (2006). Optimization and validation of recombinant
serological tests for African Swine Fever diagnosis based on detection of the p30 protein
produced in Trichoplusia ni larvae. J Clin Microbiol. 2006 Sep;44(9):3114-21.
Otros artículos
Carolina Cubillos, Eva Borras, Beatriz. G. de la torre, Anna Jakab , Juan Bárcena, David
Andreu, Francisco Sobrino and Esther Blanco “Dendrimeric peptide containing Foot-andmouth
disease virus (FMDV) specific B- and T-cell epitopes, confer full protection to pigs
against challenge with FMDV”.
Report of the Research Group of the Standing Technical Committee of the European
Commision for the Control of Foot-And-Mouth Disease. Paphos, Chipre. 17-19 Octubre
2006. Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) (2006).
Disponible en Internet:
http://www.fao.org/ag/againfo/commissions/en/documents/reports/paphos/App42Blanco.pdf
Karl Johan Sørensen, Esther Blanco and K. de Stricker. 3D ELISAs as potential
confirmatory principle in DIVA and type-independent assay for FMDV antibodies.Report of
the Research Group of the Standing Technical Committee of the European Commision for
42

the Control of Foot-And-Mouth Disease. Paphos, Chipre. 17-19 Octubre 2006. Food and
Agriculture Organization of the United Nations (FAO) (2006).
Disponible en Internet:
http://www.fao.org/ag/againfo/commissions/en/documents/reports/paphos/App22Sorensen.p
df
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
- C. Gallardo, E. Blanco, A.L.Reis, R.M.E Parkhouse, A Leitão.Validation of 4 recombinant
African swine fever virus proteins providing reproducible targets for serodiagnosis. 7º
Congreso Internacional de la Sociedad Española de Virologia Veterinaria. Lisboa, 23-27
septiembre 2006.
- Carmina Gallardo, Raquel Martin, Ademun Rose Nantima Noely, Richard Bishop and
Esther Blanco. Molecular characterisation of African swine fever virus (ASFV) isolates
recovered from samples collected in uganda during 2003 reported outbreaks. 7º Congreso
Internacional de la Sociedad Española de Virologia Veterinaria. Lisboa, 23-27 septiembre
2006.
- A. Llorente, C. Gallardo, R. Bishop, E. Blanco. Detection, isolation and molecular
characterization of African swine fever virus from ticks collected in Kenya, Uganda and
Tanzania.. 7º Congreso Internacional de la Sociedad Española de Virologia Veterinaria.
Lisboa, 23-27 septiembre 2006.
-
- C. Cubillos, I. Avalos, E. - - Borras, B. G. De la Torre, A. Jakab, J. Bárcena, D. Andreu ,
F. Sobrino and E. Blanco. Dendrimeric peptide containing Foot-and-mouth disease virus
(FMDV) specific B- and T-cell epitopes, confer full protection to pigs against challenge
with fmdv. 7º Congreso Internacional de la Sociedad Española de Virologia Veterinaria.
Lisboa, 23-27 septiembre 2006.
- M. Perez-filgueira1, F. González-camacho, C. Gallardo, P. Resino, E. Blanco, E. Gómezcasado,
C. Alonso1 and J.M. Escribano.Optimization and validation of recombinant
serological tests for African swine fever diagnosis based on the p30 protein produced in
Trichoplusia ni larvae. 7º Congreso Internacional de la Sociedad Española de Virologia
Veterinaria. Lisboa, 23-27 septiembre 2006.
OTRAS ACTIVIDADES
Cursos
- “XV Curso Internacional de Enfermedades Exóticas Animales”. INIA
Seminario impartido:“ Diagnóstico de enfermedades vesiculares” (1 hora 30 minutos).
Lugar y fecha: Madrid 4-30 Noviembre 2006.
- “Diagnóstico de enfermedades ganaderas de interés”. Junta de Extremadura.
Seminarios impartido:“ Diagnóstico de las enfermedades vesiculares” (1 hora) y
“Diagnóstico de la Peste porcina africana” (1 hora ).
Práctica impartida: “Diagnóstico serológica del EVC mediante ELISA”
Lugar y fecha: Badajoz 27 Septiembre 2006.
43

Servicios
Análisis virológico de muestras procedentes de Laboratorios Syva, mediante técnicas
de RT-PCR y PCR, para descartar presencia de los siguientes virus: Fiebre aftosa,
Enfermedad vesicular del cerdo, Estomatitis vesicular y Peste porcina africana.
Otros:
- Patente:P527ES00 “Construcción peptídica dendrimérica para la prevención de la fiebre
aftosa en animales”. Depositada en la Oficina Española de Patentes el 2 de agosto de 2006.
Financiación de la extensión de la misma aprobada por la Fundación Genoma España.
- Nombramiento como revisora científica (Referee) de la revista SCI “Veterinary
Microbiology”.
44

ESTRATEGIAS VACUNALES.CALICIVIRUS.
Componentes
Almanza Reyes, Horacio
Bárcena del Riego, Juan. Investigador Principal
Blanco Lavilla, Esther
Cubillos Zapata, Carolina
Mena Piñeiro, Ignacio
Correo electrónico: _barcena@inia.es
OBJETIVOS
1. Desarrollo de nuevas estrategias vacunales basadas en péptidos sintéticos y VLPS
QUIMÉRICAS de calicivirus
2. Deteccion analisis estructural y biología molecular de Calcivirus
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
Desarrollo de nuevas estrategias vacunales basadas en péptidos sintéticos y cápsidas vacías
(VLPs) quiméricas frente al virus de la fiebre aftosa.
Desarrollo de nuevas estrategias vacunales basadas VLPs quiméricas frente al virus de la
gripe.
Desarrollo de herramientas y técnicas de detección de norovirus porcinos.
Análisis estructural y biología molecular de calicivirus.
PROYECTOS
Código y título: BIO2002-04091-C03-03. “Nuevas estrategias vacunales frente al virus de
la fiebre aftosa y estudio de los mecanismos implicados en la patogenicidad viral”.
Entidad financiadora: Plan Nacional, CICYT Duración: 2003-
2006
Investigador responsable: Juan Bárcena (Responsable Subproyecto 2, CISA-INIA).
Código y título: AGL2006-13809-C03-02/GAN. “Nuevas estrategias vacunales e
inmunomoduladoras basadas en la estimulación de las células dendríticas porcinas
empleando como modelo el virus de la gripe”.
Entidad financiadora: Plan Nacional, CICYT Duración: 2006-
2009
Investigador responsable: Ignacio Mena (Responsable Subproyecto 2, CISA-INIA).
Código y título: EPIZONE. “Network of Excellence for Epizootic Disease Diagnosis and
Control”.
Entidad financiadora: UE. VI Programa Marco Duración: 2006-2011.
Investigador responsable: P. A. van Rijn.
Código y título: PORCIVIR. “Patogenia de infecciones víricas del cerdo”.
Entidad financiadora: Plan Nacional, Programa Ingenio 2010. Duración: 2006-
2011.
45

Investigador responsable: Mariano Domingo (CReSA).
Principales resultados:
1.- Desarrollo de nuevas estrategias vacunales basadas en péptidos sintéticos y VLPs
quiméricas frente al virus de la fiebre aftosa.
Se ha desarrollado una estrategia vacunal basada en un péptido dendrimérico que contiene
epítopos B y T del virus de la fiebre aftosa, que ha inducido protección total en cerdos frente
a un desafío con el virus de la fiebre aftosa. Este resultado ha dado lugar a la presentación de
una patente (veasé más abajo).
Se han desarrollado VLPs quiméricas del Calicivirus RHDV que contienen epítopos B y T
del virus de la fiebre aftosa. Se ha caracterizado la antigenicidad de las VLPs quiméricas, y
su inmunogenicidad en ratón. Las VLPs quiméricas son capaces de inducir una respuesta
humoral y celular significativa en ratón frente a los epítopos B y T del virus de la fiebre
aftosa empleados.
2.- Desarrollo de nuevas estrategias vacunales basadas VLPs quiméricas frente al virus de la
gripe.
Se ha obtenido un proyecto de I+D en la convocatoria del Plan Nacional de 2005 (Proyecto
AGL2006-13809-C03-02/GAN, veasé más arriba) para financiar esta línea de investigación.
Se trata de un proyecto coordinado entre grupos del CReSA y el CISA-INIA para el
desarrollo de nuevas estrategias vacunales basadas VLPs quiméricas frente al virus de la
gripe. El proyecto comenzó en Octubre de 2006, y ya está en marcha la construcción de
VLPs quiméricas del virus RHDV con epítopos inmunogénicos del virus de la gripe
derivados de la nucleoproteína y la proteína M2.
3.- Desarrollo de herramientas y técnicas de detección de norovirus porcinos.
A lo largo de 2006 se ha desarrollado un sistema de producción de VLPs de norovirus
porcinos en el sistema de expresión de baculovirus. Las VLPs se han empleado para
inocular ratones y obtener anticuerpos monoclonales que reconocen la proteína de la cápsida
de los norovirus. Se han obtenido 8 anticuerpos monoclonales. Dos de ellos reconocen tanto
a los norovirus porcinos como a cepas de norovirus humanos. Los otros 6 anticueros
monoclonales reconocen específicamente a los norovirus porcinos. Hasta la fecha no había
descritos en la literatura científica anticuerpos monoclonales específicos de norovirus
porcinos. Estos anticuerpos constituyen herramientas útiles para el desarrollo de sistemas de
detección de norovirus porcinos, lo que permitirá desarrollar estudios epidemiológicos sobre
la prevalencia de norovirus porcinos en España, uno de los objetivos del proyecto
PORCIVIR (veasé más arriba).
4.- Análisis estructural y biología molecular de calicivirus.
Se ha desarrollado un estudio estructural por criomicroscopía y análisis digital de imágenes
de las VLPs de RHDV (VLPs nativas y quiméricas), en colaboración con el grupo de José
Ruíz Castón (CNB-CSIC). Este estudio, todavía en marcha, permitirá refinar el modelo
estructural de la proteína de la cápsida de RHDV actualmente disponible, lo que a su vez
46

favorecerá el desarrollo de las estrategias vacunales basadas en VLPs quiméricas citadas
más arriba.
Por otro lado se trabaja en la caracterización de variantes del calicivirus felino obtenidos en
el laboratorio, capaces de propagarse en líneas celulares de mamífero no felinas. Este
estudio permitirá conocer las bases moleculares que determinan el tropismo de estos virus.
Los resultados obtenidos hasta la fecha indican que las proteinas VPg y VP58 (proteína de la
cápsida viral) están implicadas en la determinación del rango de hospedador del calicivirus
felino.
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI.
“Recombinant transmissible vaccine against myxomatosis and rabbit hemorrhagic disease
for wild rabbit populations”. J. Bárcena. J. Wildlife Research (En prensa).
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas.
B.G. de la Torre, J. Bárcena, C. Cubillos, E. Borràs, A. Jakab1, F. Sobrino, E. Blanco and D.
Andreu. “A dendrimeric peptide vaccine containing Foot-and-Mouth Disease Virus B and
T-cell epitopes confers full protection to pigs against viral infection”. 29th European Peptide
Symposium. Gdansk (Polonia). 3-8 Septiembre 2006
H. Almanza, I. Angulo, C. Cubillos, M. Morales, I. Mena and J. Bárcena. “Tissue-culture
adapted Feline Calicivirus variants with expanded cell tropism”. 7 th International Congress
of the European Society for Veterinary Virology. Lisboa. 24-27 Septiembre 2006.
I. Angulo, C. Cubillos, H. Almanza, M. Morales, J.R. Castón, F. Sobrino, E. Blanco and J.
Bárcena. “Chimeric Calicivirus-like particles displaying B-cell and T-cell epitopes from foot
and mouth disease virus”. 7 th International Congress of the European Society for Veterinary
Virology. Lisboa. 24-27 Septiembre 2006.
C. Cubillos, I. Avalos, E. Borras, B. G. De la Torre, A. Jakab, J. Bárcena, D. Andreu, F.
Sobrino and E. Blanco. “Dendrimeric peptide containing foot-and-mouth disease virus
(FMDV) specific B- and T-cell epitopes, confer full protection to pigs against challenge
with FMDV”. 7 th International Congress of the European Society for Veterinary Virology.
Lisboa. 24-27 Septiembre 2006.
M. Pérez-Filgueira, P. Resino, C. Cubillos, I. Angulo, M.G. Barderas, J. Bárcena and J.M.
Escribano. “Low-cost recombinant subunit vaccine against Rabbit Haemorrhagic Disease
Virus produced in insect larvae”. 7 th International Congress of the European Society for
Veterinary Virology. Lisboa. 24-27 Septiembre 2006.
OTRAS ACTIVIDADES
Patente
Título: “Construcción peptídica dendrimérica para la prevención de la fiebre aftosa en
animales”.
47

Autores: C. Cubillos, E. Borràs, B. G. de la Torre, A. Jakab, J. Bárcena, D. Andreu, F.
Sobrino and E. Blanco.
Solicitante: Universidad Pompeu Fabra, CBMSO-CSIC, CISA-INIA.
Organismo: Oficina Española de Patentes y Marcas.
Nº Solicitud: P200602142.
Fecha de presentación: 2 de Agosto 2006.
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VACUNAS FRENTE A VIRUS DE FIEBRE AFTOSA BASADAS EN ACIDOS
NUCLEICOS.
Componentes
Borrego Rivero, Belén. Investigador Principal
Rodríguez Pulido, Miguel Ramón
Colaboradores en CSIC.:
Saiz Zalabardo, Margarita (CSIC)
Sobrino Castelló, Francisco (CSIC)
Correo electrónico: borrego@inia.es
OBJETIVOS
1. Desarrollo de vacunas marcadoras basadas en ácidos nucleicos, empleando como
modelo el virus de la fiebre aftosa .
Caracterizar los parámetros de respuesta inmune inducida por plásmidos DNA que
expresan minigenes de VFA fusionados a distintos péptidos señal y su correlación con la
protección conferida, en un modelo de ratón y en cerdo.
2. Estudio de las bases moleculares de la patogenia de virus animales, empleando como
modelo el virus de la fiebre aftosa, con especial énfasis en la identificación de dianas y
estrategias antivirales
Generación de RNAs portadores de mutaciones en las NCRs del VFA. Análisis de su
capacidad replicativa en cultivos celulares, caracterización funcional , y estudio de
virulencia y respuesta inmune.
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
Respuesta inmune frente al virus de la fiebre aftosa en cerdo: desarrollo de nuevas vacunas.
Estudio de las bases moleculares de la patogenia del virus de la fiebre aftosa : uso vacunal
de mutantes defectivos.
PROYECTOS
Código y título CT2002 1304 QLK2 “Optimizing DNA based vaccination against FMDV in
sheep and pigs (FMDNAVACC)”
Entidad financiadora: UE Duración: 2002-2006
Investigador responsable: Francisco Sobrino
Código y título: BIO2005-07592-C02-01 “Desarrollo de nuevas vacunas sintéticas y estudio
de mecanismos implicados en la patogenicidad viral: el virus de la fiebre aftosa como
modelo”.
Entidad financiadora: Plan Nacional Duración: 2005-
2008
Investigador responsable: Francisco Sobrino
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Código y título: Patogenia de infecciones víricas del cerdo (PORCIVIR)
Entidad financiadora: Programa Consolíder-Ingenio 2010 Duración: 2006-
2011
Investigador responsable: Domingo Álvarez, Mariano (coordinador)
Principales resultados:
Desde que en los años 90 se describió por primera vez la posibilidad de inducir una
respuesta inmune inoculando con DNA desnudo, la vacunación con ácidos nucleicos se ha
convertido en una prometedora alternativa a la vacunación tradicional para todo tipo de
patógenos, puesto que estas vacunas presentan numerosas ventajas , entre ellas, la posibilidad
de manipular el DNA, lo que permite aplicar fácilmente distintas estrategias para modular la
respuesta inducida y optimizar las vacunas. Nosotros estamos interesados en emplear esta
metodología para desarrollar vacunas frente al virus de la fiebre aftosa (VFA) siguiendo dos
abordajes:
Por un lado, trabajamos en el desarrollo de vacunas DNA basadas en minigenes. En trabajos
anteriores hemos comprobado que plásmidos que expresan sitios antigénicos B y T de VFA
fusionados a un péptido señal, que introduce el antígeno en la vía secretora, son capaces de
inducir una respuesta inmune que protege a los animales (tanto animales de laboratorio
como huéspedes naturales de la enfermedad) frente a desafío con virus infectivo. Esta
estrategia parece favorecer, entre otras cosas, la producción de anticuerpos neutralizantes,
que constituyen un factor importante en protección frente a la enfermedad.
Por otro lado, en colaboración con el CBM, estudiamos el potencial de vacunas RNA
derivadas de clones infecciosos. Se ha demostrado la esencialidad para la recuperación de
virus infeccioso de la región 3´no codificante (3´NCR) del genoma del VFA. Mediante
experimentos de mutagénesis sobre clones infecciosos se ha generado un variante viral con
una deleción parcial en la 3´NCR con fenotipo de infectividad atenuado en cultivo celular,
inocuo en ratones lactantes, y capaz de inducir anticuerpos neutralizantes frente a VFA en
ratón adulto, lo que apoya su potencial como genotipo vacunal.
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
A.M. Barfoed, F. Rodriguez, D. Therrien, B. Borrego, F. Sobrino, and S. Kamstrup. “DNA
immunization with 2C FMDV non-structural protein reveals the presence of an
immunodominant CD8+, CTL epitope for Balb/c mice”. Antiviral Res. 2006 Dec;72(3):178-
89. Epub 2006 Jul 21.
B. Borrego, P. Fernandez-Pacheco, L.Ganges, N. Domenech, N. Fernandez-Borges, F.
Sobrino and F. Rodríguez. “DNA vaccines expressing B and T cell epitopes can protect
mice from FMDV infection in the absence of specific humoral responses”
Vaccine, 2006, May 1;24(18):3889-99. A
J. I. Núñez , P. Fussi, B. Borrego, E. Brocchi, M.L. Pacciarini and F. Sobrino. “Genomic
and antigenic characterization of viruses from the 1993 Italian foot-and-mouth disease
outbreak”. Arch Virol. 2006 Jan;151(1):127-42. A
50

Serrano P, Pulido MR, Saiz M, Martinez-Salas E. “The 3' end of the foot-and-mouth disease
virus genome establishes two distinct long-range RNA-RNA interactions with the 5' end
region.”. J Gen Virol. 2006 (87): 3013-22.
Otros artículos
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
“Nuevas vacunas de subunidades frente a virus animales”. F. Sobrino. E. Blanco, B.
Borrego, L. Ganges, E.Borras, C. Cubillo. J.I. Núñez, F. Rodríguez y D. Andreu. Mesa
sobre Genómica y Biotecnología. Congreso del Grupo Especializado de Microbiología
Industrial y Biotecnología Microbiana . La Coruña , 9-10 noviembre 2006.
“DNA vaccination in pigs with FMDV minigenes: from protection to disease exacerbation”
L. Ganges, B. Borrego, P. Fernández-Pacheco, C. Revilla, N. Fernández-Borges, J.
Domínguez, F. Sobrino & F. Rodríguez. PRESENTACIÓN ORAL. 7th International
Congress of the European Society for Veterinary Virology (ESVV), Lisboa, Portugal, 24th -
27th of September 2006.
“Immunological consequences of fusing different signal peptides to FMDV epitopes” B.
Borrego , M. Garcia-Briones, B. Álvarez , M. G. Esguevillas, E. Pérez, J. Marqués, F.
Sobrino , A. Ezquerra & F. Rodríguez. POSTER. 7th International Congress of the
European Society for Veterinary Virology (ESVV), Lisboa, Portugal, 24th - 27th of
September 2006.
“Inoculation with FMDV RNA as a model for genetic immunization studies in mice” M. R.
Rodríguez-Pulido, B. Borrego, F. Sobrino & M. Sáiz. POSTER. 7th International Congress
of the European Society for Veterinary Virology (ESVV), Lisboa, Portugal, 24th - 27th of
September 2006.
“PRV glycoprotein gB as a carrier of FMDV epitopes” D. Dory, V. Béven, M. Rémond, S.
Zientara, B. Borrego, F. Rodriguez and A. Jestin. POSTER. 7th International Congress of
the European Society for Veterinary Virology (ESVV), Lisboa, Portugal, 24th - 27th of
September 2006.
“The 3' end of FMDV genome established two distinct long-range RNA-RNA interactions
with the IRES and the 5' end region”. P. Serrano, M. Rodríguez Pulido, M. Sáiz & E.
Martínez-Salas. COMUNICACIÓN ORAL. Translational Control and non-coding RNA
meeting. Nove Hrady (República Checa), 8-12 Noviembre 2006.
Tesis Doctorales, Diplomas de Estudios Avanzados, Tesinas, Proyectos y Trabajos Fin de
Carrera
Diplomas de Estudios Avanzados, 2006, (Dpto. Biología molecular, UAM):
Miguel R. Rodríguez Pulido. "Caracterización funcional de las regiones no codificantes
(NCRs) del genoma de FMDV e implicaciones del 3`NCR en el ciclo viral".
51

OTRAS ACTIVIDADES
Asistencia a reuniones internacionales
(BB) Participación en la sesión abierta “La vaccination ADN, une nouvelle stratégie
vaccinale contre le virus de la fièvre aphteuse”
INRA, Jouy-en-Josas, Francia, 24 de febrero 2006
Charla: “The B and T epitopes «minigene» approach: from immune response
to challenge experiments in mice and pig”
Otros
(BB) Tutora externa de la asignatura Estancias de la Facultad de Veterinaria de la UCM
durante el verano 2006
(BB) Evaluadora de la ANEP para la convocatoria de proyectos de I+D - Plan Nacional A –
2006.
52

MODULACIÓN DEL SISTEMA INMUNE POR VIRUS
Componentes
Alejo Herberg, Alí
Ruiz Argüello, Mª Begoña
Colaboradores CSIC:
Alcamí, Antonio
Fernández, Mar
Viejo Abel
Correo electrónico:ruizarguello@inia.es
OBJETIVOS
1. caracterización de receptores solubles de citoquinas DE poxvirus
2.Estudio de mecanismos inmunomoduladores virales
3. Estudio de la patogenia del virus ectromelia
PROYECTOS
Código y título: Modulación de la actividad de las citoquinas por los poxvirus (proyecto
Ramón y Cajal RC04-0836)
Entidad financiadora: M. Educación y Ciencia Duración: 2004-
2007
Investigador responsable: Alí Alejo
Principales resultados:
Se han caracterizado, in vitro, las proteínas virales CrmB y CrmD. Ambas contienen cuatro
dominios ricos en cisteínas homólogos al dominio extracelular de los receptores de TNF y
una región C-terminal de función desconocida que no se parece a ninguna proteína celular.
Estudios previos del laboratorio del Dr. Alcamí demostraron, por primera vez, que estas
proteínas no sólo bloquean la actividad biológica del TNF sino que además unen
interleuquina-8. En colaboración con el Dr. A.Alcamí se ha realizado un screening completo
(mediante SPR, BIAcore X) para determinar los posibles ligandos de estas proteínas y se ha
demostrado que ambas unen e inhiben la actividad de algunas quimioquinas. Además,
ambas pueden unir TNF y quimioquinas simultáneamente y por sitios independientes. Estos
resultados identifican CrmB y CrmD como proteínas virales solubles de unión a
quimioquinas y describen un nuevo dominio de interacción con quimioquinas (el dominio
C-terminal). Se ha estudiado la contribución de estas proteínas a la patogénesis viral
utilizando el modelo de ectromelia. Se ha demostrado que la proteína CrmD es un factor
esedncial para la patogénesis de mousepox.
53

PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
- A. Alejo, M.B. Ruiz-Argüello, Y.Ho, V.P. Smith, M. Saraiva y A. Alcami . 2006. A
chemokine-binding domain in the tumor necrosis factor receptor from variola (smallpox)
virus. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 103: 5995-6000.
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
- A. Alejo, B. Ruiz-Argüello, V. P. Smith, M. Saraiva, Y. Ho and A. Alcami. The
”SECRET” function of the tumour necrosis factor receptor CrmB from variola (smallpox)
virus. FASEB summer research conferences Poxviruses. Indian Wells, California, EE.UU.
3-8 Junio 2006. (Comunicación oral).
- A. Alejo, B. Ruiz-Argüello, M. Saraiva, and A. Alcami. Study of the role of ectromelia
virus CD30 in mousepox pathogenesis. FASEB summer research conferences Poxviruses.
Indian Wells, California, EE.UU. 3-8 Junio 2006. (Póster).
- A. Alejo, B. Ruiz-Argüello, M. Saraiva, and A. Alcami. The poxviral TNF receptor
(CrmD) is a virulence factor with antiinflamatory activity in vivo. FASEB summer research
conferences Poxviruses. Indian Wells, California, EE.UU. 3-8 Junio 2006. (Póster).
54

RESPUESTA INMUNE DE FIEBRE AFTOSA
Componentes
Sevilla Hidalgo, Noemí. Investigador principal
Colaboración con CBM, CSIC.:
Ojosnegros Martos, Samuel
Sanz-Ramos Rojo, Marta
Correo electrónico: sevilla@inia.es
OBJETIVOS
1. Estudio de la respuesta inmune frente al virus de la fiebre aftosa (VFA)
2. Interacción de VFA con células dendríticas (DCs).
3. Estudio de la heterogeneidad de subpoblaciones virales en relación con sitios de
replicación in vivo.
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
Respuesta inmune al virus de la fiebre aftosa en infecciones naturales
Papel de las células presentadoras de antígeno en infecciones con el virus de la fiebre aftosa.
PROYECTOS
Código y título:AGL2004-00499. Estudio de la respuesta inmune innata en la infección con
el virus de la fiebre aftosa (VFA): papel de las células dendríticas y natural killer (NK).
Entidad financiadora: CSIC Duración: 2004-
2007
Investigador responsable: Sevilla Hidalgo, Noemí
Código y título: (EPIZONE) FP6-2004-Food-3-A. Host responses to infections: FMDV
immune response.
Entidad financiadora: Network of Excellence for Epizootic Disease Diagnosis and Control
Duración: 2006-2009
Investigador responsable: Noemí Sevilla
Investigadores participantes: 3
Principales resultados:
Las poblaciones de virus RNA existen como distribuciones heterogéneas y dinámicas de
genomas virales altamente relacionados entre sí pero no idénticos, denominadas
cuasiespecies (Domingo et al., 2006, Curr Top Microbiol Immunol 299, 51-82). Esta alta
variabilidad genética confiere a los virus RNA un enorme potencial de adaptación a nuevos
ambientes y presiones selectivas. La heterogeneidad genética es debida a la baja fidelidad de
copia de las RNA polimerasas virales durante la replicación de los virus, así como a la
ausencia de actividad reparadora de errores. Recientemente, nuestro grupo ha puesto a punto
un sistema para el estudio de infecciones por el VFA in vivo (Salguero et al., 2005, Virology
55

Through Replication In Mice. Oral. Congreso 2006 Europic. Finnish Lapland. 26 Nov- 1
Dic. 2006
Tesis Doctorales, Diplomas de Estudios Avanzados, Tesinas, Proyectos y Trabajos de
Fin de Carrera.
Diplomas de estudios avanzados (DEA).:
Nombre del doctorando: Marta Sanz-Ramos Rojo
Título del DEA: Caracterización biológica y molecular del vfa en infecciones en ratón.
Universidad: Universidad Autónoma de Madrid. Facultad de Ciencias.
57

RESPUESTA INMUNE DE PECES
Componentes
González Torres, Lucia
Sánchez Freire, Esther
Tafalla Piñeiro, Carolina Investigador principal
Correo electrónico: tafalla@inia.es
OBJETIVOS
1. Determinación de los factores inmunes que se desatan frente a rabdovirus en peces, y que
determinan la resistencia natural frente al virus.
2. Respuesta inmune frente a vacunas DNA en peces.
3. Uso de citoquinas como ayudantes en vacunas DNA
Principales líneas de I+D+I
Uso de quimioquinas de trucha como adyuvantes en vacunas DNA frente a rabdovirus
Estudio de los factores responsables de la protección natural, así como la conferida por la
vacunación en peces
PROYECTOS
Código y Título: AGL2004-07404-C02-02. Título del proyecto Mejora de las vacunas
DNA frente a virus en acuicultura. Análisis de la respuesta inmune protectiva no-específica
y específica en el modelo trucha / rabdovirus y modificación de las construcciones genéticas
utilizadas hasta el momento.
Entidad financiadora: Plan Nacional (MEC) Duración: 2004-
2007
Investigador responsable: Tafalla Piñeiro, Carolina
Código y título:. EPIZONE. Adyuvants
Entidad financiadora: UE (EPIZONE Network) Duración: 2006-2007
Coordinador: Piet Van Rijn
Investigador responsable: Tafalla Piñeiro, Carolina
CONVENIOS /CONTRATOS
Código y título:. Programa de Vigilancia epidemiológica en animales acuáticos en aguas
interiores de la Región de Murcia.
Entidad financiadora:Consejería de Agricultura, Agua y Medio Ambiente de la Comunidad
Autónoma de Murcia Duración: 2006-2007
Investigador responsable: Tafalla Piñeiro, Carolina
Principales resultados:
Se ha construido un plásmido de expresión eucariota que codifica para la
interleuquina 8 (IL-8) de trucha arcoiris (pIL8+). Este plásmido, cuando se inyecta
intramuscularmente, es capaz de hacer migrar mas células inmunes al sitio de inoculación y
transcribe IL-8 en el músculo y en la sangre. Cuando este plásmido se co-administra con una
58

vacuna DNA frente al virus de la septicemia hemorrágica viral (VHSV) provoca una
inmunomodulación, produciendo un aumento de la expresión de citoquinas proinflamatorias
en el bazo. También se ha comprobado que la IL-8 activa la expresión de otras
quimioquinas de tipo CC inducibles (CK5A, CK6, CK7A y CK7B), mientras que no tiene
un efecto directo sobre la CK5B. Estas quimioquinas de tipo CC se inducen frente a una
vacunación DNA, y el hecho de utilizar el plásmido pIL8+ como adyuvante hace que se
module su expresión.
Se ha estudiado la expresión diferencial de las distintas isoformas de la proteína Mx
inducida por interferón que hay descritas en trucha. Para ello, se han puesto a punto RT-
PCRs específicas para cada una de ellas. Se ha visto la expresión en la línea celular de
trucha RTG2, en leucocitos totales, así como in vivo en respuesta a distintos estímulos
(VHSV, Poly I:C, vacuna). Hemos comprobado que la expresión diferencial de las distintas
isoformas está ligada principalmente al tipo celular y no al estímulo que se utilice, así las
RTG2 o el músculo producen fundamentalmente Mx3 mientras que los leucocitos o los
órganos hematopoiéticos producen las tres isoformas por igual.
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
C. Tafalla, A. Estepa, J. Coll (2006) Fish transposons and its potential use in aquaculture.
Journal of Biotechnology 123(4):397-412.
C. Tafalla, S. Rodríguez Saint-Jean, S. Pérez-Prieto (2006) Immunological consequences of
the coinfection of brown trout (Salmo trutta) with infectious hematopoietic necrosis virus
(IHNV) and infectious pancreatic necrosis virus (IPNV). Aquaculture 256 (1-4): 15-22.
N. Jimenez, J. Coll, J. Salguero, C. Tafalla (2006) Coinjection of a viral haemorrhagic
septicemia virus (VHSV) DNA vaccine with interleukin 8 modulates the cytokine response
in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Vaccine 24 (27-28): 5615-5626.
C. Tafalla, V. Chico, L. Pérez, J. Coll , A. Estepa. In vitro and in vivo differential expression
of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) Mx isoforms in response to viral hemorrhagic
septicemia virus (VHSV) G gene, Poly I:C and VHSV. Fish & Shellfish Immunology. En
prensa.
E. Sánchez, J. Coll, C. Tafalla. Expression of inducible CC chemokines in rainbow trout
(Oncorhynchus mykiss) in response to a viral haemorrhagic septicemia virus (VHSV) DNA
vaccine and interleukin 8. Developmental and Comparative Immunology. En prensa
Otros artículos
Falco, A. Rocha, C. Tafalla, A. Estepa, J.M. Coll (2006) Posibles aplicaciones de los
transposones de peces a la Acuicultura . Revista AquaTIC 24, Enero-Junio 2006.
http://www.revistaaquatic.com/aquatic/art.asp?t=p&c=203]
59

Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
Coinjection of interleukin 8 with the glycoprotein gene from Viral Haemorrhagic
Septicemia Virus (VHSV) modulates the immune response in rainbow trout Oncorhynchus
mykiss. C. Tafalla, N. Jimenez, F.J. Salguero, J. Coll. 10 th International Congress of the
International Society of Developmental and Comparative Immunology. Charleston, SC,
USA. Julio, 2006.
Differential expression of mx isoforms in rainbow trout (oncorhynchus mykiss) in response
to VHSV or other non-viral stimulants. C. Tafalla, V. Chico, J.M: Coll, A. Estepa. 10 th
International Congress of the International Society of Developmental and Comparative
Immunology. Charleston, SC, USA. Julio, 2006.
Two distinct groups of type I interferons are present in fish with one resembling mammalian
interferon alpha. J. Zou, C. Tafalla, J. Truckle, C. Secombes. 10 th International Congress of
the International Society of Developmental and Comparative Immunology. Charleston, SC,
USA. Julio, 2006.
Otros: organización de congresos, etc.
Se ha presentado al INIA una patente: Uso de la interleuquina 8 de trucha arcoiris
como adyuvante o inmunoestimulante en peces.
60

BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE PRIONES
Componentes
Alamillo Gordo, Elia
Cano Benito, María Jesús
Espinosa, Juan Carlos
González Torres, Lucia
Herva Moyano, Maria Eugenia
Losa Román, Nuria de la
Lorenzo Balboa, Patricia
Padilla de Beer, Danielle
Pozas Castañares, Jennifer
Relaño Ginés, Aroa
Torres Trillo, Juan María. Investigador principal
Villa Diaz, Ana
Correo electrónico: jmtorres@inia.es
OBJETIVOS
1. El objetivo general del grupo es avanzar en el conocimiento de la biología de los
priones mediante el desarrollo de modelos basados en ratones transgénicos y cultivos
celulares que expresan diferentes secuencias de la PrP.
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
• Desarrollo de bioensayos de alta sensibilidad para la detección de priones y el
diagnostico de las enfermedades producidas por estos agentes infecciosos.
• Estudio de los elementos moleculares que determinan la barrera de transmisión de
las diferentes cepas de priones.
• Estudio de los elementos moleculares implicados en la replicación y en la
patogénesis de los priones.Discriminación de las diferentes cepas de priones en
especies ganaderas y su capacidad de transmisión a humanos. Diseño y evaluación
de nuevas estrategias terapéuticas contra los priones.
PROYECTOS
Código y título: QLRT-2001-01309 “European project to study BSE strain in sheep”.
Financiación: UE. Duración: 2003- 2007
Investigador principal: Juan María Torres
Código y título: EET2002-05140 “Estudio de la transmisibilidad de la EEB y del scrapie a
la especie porcina”.
Financiación: Plan Nacional de I+D+I Duración: 2003- 2006
Investigador principal: Juan María Torres
Código y título: EET2002-05168-C04-02 “Estudio neuropatológico de un modelo
experimental murino de encefalopatía espongiforme bovina”.
Financiación: Plan Nacional de I+D+I Duración: 2003- 2006
Investigador principal: Alejandro Brun
61

Código y título: CT2004-506579 FOOD PRO Network of Excellence of the Prion diseases
“Neuroprion”
Financiación: UE Duración: 2003- 2008
Investigador principal: Juan María Torres
Código y título: AGL2005-03066 “Desarrollo de nuevos bioensayos celulares susceptibles
a la replicacion de los priones”
Entidad Financiadora: Plan Nacional de I+D+I Duración: 2005 - 2008
Investigador principal: Juan María Torres
Código y título: FP6-2004-FOOD3-023183 ”Understanding prion strains and species
barriers and devising novel diagnostic approaches”
Entidad Financiadora: UE Duración: 2006 - 2009
Investigador principal: Juan María Torres
Código y título: RTA2006-00091 “Estudio de la infectividad de la EEB en humanos
después de ser pasada por otras especies de interés ganadero utilizando bioensayos basados
en ratones transgénicos. Implicaciones en seguridad alimentaria”.
Entidad Financiadora: Plan Nacional de I+D+I Duración: 2006 - 2008
Investigador principal: Juan María Torres
Código y título: FP6-2005-FOOD4B-036353 “Proposal for improvement of goat TSE
discriminative diagnosis and susceptibility based assessment of BSE infectivity in goat milk
and meat”.
Entidad Financiadora: UE Duración: 2006 - 2010
Investigador principal: Juan María Torres
CONVENIOS
Código y título: CC05-02 Preparación de un homegenado de cerebro de Hamster inoculado
con la cepa de prion 263K
Empresa/Administración financiadora: Instituto Grifols SA Duración: 2005 2007
Investigador responsable: Juan Maria Torres
Código y título: CC05-036 Development of a blood test to identify animals that are carriers
of the Q171 genotype in the bovine PrP gene based on the 2A11 monoclonal antibody
Empresa/Administración financiadora: Bio-Rad Duración: 2005-2007
Investigador Responsable: Juan Maria Torres
Principales resultados:
Durante este año nuestro grupo ha obtenido una importante cantidad de resultados
fruto del gran esfuerzo de sus componentes en el desarrollo de los múltiples proyectos
en curso. Aunque la enumeración de todos y cada de estos resultados seria imposible
en este espacio, a continuación se enumeran una pequeña muestra de estos:
• El hecho de que BSE infecte con gran eficiencia a ovejas y cabras y que la mayoría
de las especies ganaderas hayan sido alimentadas durante mucho tiempo con piensos
contaminados con el agente causal de la EEB hacen sospechar que estas especies
62

hayan podido ser infectadas por EEB de forma natural del modo semejante a como
parece haber ocurrido en cabra (Eloit et al., 2005). De hecho, recientemente se han
descrito “estirpes raras” de Scrapie que algunos investigadores sugerimos que
podría corresponder a EEB en oveja. En este contexto nuestro proyecto europeo
QLK3-2002-01309 tiene como objetivos estudiar la transmisibilidad de EEB a
ovejas en condiciones naturales y caracterizar el prion generado tras la infección
experimental de ovejas con EEB. Nuestros resultados demuestran que EEB infecta
de forma muy eficiente a ovejas, tanto por vía intracerebral como oral, y que el
nuevo prion generado mantiene ciertas características bioquímicas inherentes a EEB.
La inoculación de EEB pasada por oveja en nuestros modelos transgénicos bovinos
ha demostrado que este prion posee una mayor virulencia (mayor infectividad que la
de la EEB original) y que esta infectividad se mantiene a lo largo de los pases,
conservando propiedades características de EEB (ver articulo 11; Espinosa et al., J.
Virol 2007). Paralelamente, hemos observado que la inoculación de nuestro modelo
transgénico bovino con priones procedentes de la EEB en otras especies (como
cerdo, ratón y humano) se produce sin barrera de transmisión gracias a la
conservación de propiedades biológicas inherentes de la EEB. Así mismo, la PrP Sc
procedente de la EEB al pasar por diferentes especies (humano, ratón, cerdo, cabra)
mantiene sus propiedades bioquímicas e histopatologicas (artículo en preparación).
• También hemos podido demostrar que BSE es capaz de mantener en su memoria
ciertas caracteristicas después de pasar en oveja, pero aumentando su virulencia en
otras especies de interés ganadero (porcina, caprina, ovina y bovina). La sospecha de
que este nuevo prion “BSE de oveja” pueda estar presente en la cabaña ovina tiene
una gran implicación en Sanidad Animal y una importante repercusión en Salud
Publica. En el caso del cerdo, nuestro grupo ha demostrado que es la especie más
resístete a la infección con BSE de vaca y totalmente resistente al Scrapie clásico de
oveja. Sin embargo, BSE de oveja muestra una gran infectividad en transgénico de
cerdo (Articulo en preparación).
• Se considera que scrapie no se transmite a la especie humana, al menos de forma
natural. Sin embargo, la EEB se transmite a humanos produciendo la nueva variante
de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (vCJD). Una cuestión de gran importancia
socioeconómica y sanitaria surge inmediatamente: ¿Los priones generados por la
infección de EEB en otras especies, como la oveja, la cabra o el cerdo, son capaces
de infectar a humanos? o lo que es lo mismo ¿mantiene la EEB su capacidad de
transmisión a humanos después de pasar por otras especies al igual que conserva
características inherentes a EEB? ¿Puede aumentar la capacidad de la EEB de
infectar a humanos al pasar por otras especies? El dar respuesta a estas cuestiones es
el objetivo principal del presente proyecto. Para ello disponemos de los modelos
ideales para este tipo de análisis. Nuestro resultados preliminares indican que la BSE
de oveja parece tener una mayor infectividad en ratones transgénicos humanos que
la BSE de vaca, lo que de confirmarse tendría una gran repercusión en Salud Pública.
Otros resultados de interés:
Hemos demostrado que la PrPC puede tener un papel importante en la regulación del ciclo
celular (ver articulo 6).
63

Hemos publicado varios artículos que aportan importante información sobre el mecanismo
patho-biologico de los priones utilizando nuestros modelos de ratones transgenicos (ver
articulos 5, 8, 9 y 10).
Hemos avanzado en el conocimiento de la progresión de la infectividad en tejidos de vacas
asintomáticas infectadas con BSE, demostrando que esta infectividad está básicamente
restringida al sistema nervioso y por tanto mucho menos dispersa que scrapie en oveja. Este
resultado es de gran importacia a la hora de valorar los tejidos de riesgo en vacas (ver
articulo 12).
Hemos desarrollado un test ELISA en sangre capaz de identificar ovejas portadoras del
genotipo Q171 resistentes a scrapie (Articulo enviado a publicar). Este test ha sido
patentando (Ver sección de patentes) y pronto será comercializado por Bio-Rad.
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
E Pericuesta, MA Ramirez, A Villa-Diaz, A Relano-Gines, JM Torres, M Nieto, B Pintado,
A Gutierrez-Adan. The proximal promoter region of mTert is sufficient to regulate
telomerase activity in ES cells and transgenic animals. Reproductive Biology and
Endocrinology 4:5-17 (2006).
Francisco J. Salguero, Fayna Dıaz-San Segundo, Alejandro Brun, Maria J. Cano, JM.
Torres. Comparison of three monoclonal antibodies for use in immunohistochemical
detection of bovine spongiform encephalopathy protease-resistant prion protein. J Vet
Diagn Invest 18:105–108 (2006)
O Andreoletti; N Morel; C Lacroux; V Rouillon; C Barc, G Tabouret, P Sarradin, P Berthon,
P Bernardet, J Mathey, S Lugan, P Costes, F Corbiere, JC Espinosa, JM Torres, J Grassi, F
Schelcher and F Lantier. Bovine spongiform encephalopathy agent in spleen from an
ARR/ARR orally exposed sheep. J General Virology 87:1043-1046 (2006).
JC Espinosa; M. Morales; ME Herva; JM Torres. Transmission of bovine spongiform
encephalopathy (review). Future Virology 1(3): 393-402 (2006).
Rodriguez A, Perez-Gracia E, Espinosa JC, Pumarola M, Torres JM, Ferrer I: Increased
expression of water channel aquaporin 1 and aquaporin 4 in Creutzfeldt-Jakob disease and
in bovine spongiform encephalopathy-infected bovine-PrP transgenic mice. Acta
Neuropathol 112(5):573-85 (2006).
6.- SF. Martín, María E. Herva, Juan C. Espinosa, B Parra, J Castilla, A Brun and JM.
Torres. Cell expression of a four extra octarepeat mutated PrPC modifies cell structure and
cell cycle regulation. FEBS Letters 580 (17): 4097–4104 (2006).
Fernandez-Borges N, Brun A, Whitton JL, Parra B, Diaz-San Segundo F, Salguero FJ,
Torres JM, Rodriguez F. DNA vaccination can break immunological tolerance to PrP in
wild-type mice and attenuates prion disease after intracerebral challenge. J Virol.
80(20):9970-9976 (2006).
A. Rodriguez; M. Martin; JL Albasanz; M. Barrachina; JM. Torres; JC. Espinosa; I Ferrer.
Adenosine A1 receptor expression and activity is increased in the cerebral cortex in
64

Creutzfeldt-Jakob disease and in bovine spongiform encephalopathy-infected bovine-PrP
mice. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology 65(10):964-975 (2006).
Diaz-San Segundo F, Salguero FJ, de Avila A, Espinosa JC, Torres JM, Brun A.
Distribution of the cellular prion protein (PrP(C) in brains of livestock and domesticated
species. Acta Neuropathol (Berl). 112(5):587-95 (2006).
Agustin Rodríguez; Mairena Martin; Jose Luis Albasanz; Marta Barrachina; Juan Carlos
Espinosa; Juan Maria Torres; Isidre Ferrer. Group I mGluR signaling in BSE-infected
bovine-PrP transgenic mice. Neuroscience Letters 410 : 115–120 (2006).
JC. Espinosa, O. Andréoletti, J. Castilla, ME. Herva, M. Morales, E. Alamillo, F. Díaz San-
Segundo, C. Lacroux, S. Lugan, FJ. Salguero, J. Langeveld and JM. Torres. Sheeppassaged
BSE agent exhibits altered patho-biological properties in bovine-PrP transgenic
mice. J. Virol 81(2):835–843 (2007).
Juan Carlos Espinosa, Mónica Morales, Joaquín Castilla, Mark Rogers and Juan María
Torres. Progression of prion infectivity in asymptomatic cattle after oral BSE challenge.
J.Gen. Virol. (In Press).
Inventores (p.o. de firma): J.M. Torres, J. Grassi, J.M. Bilheude, A. Brun, N. Morel
Titulo: Procédé d'identification du genotipe en position171 de la protéine prion d'ovin ainsi
que trousses de mise en oeuvre de ce procédé.
Nº de Solicitud: 05 11937 País de Prioridad: Francia Fecha de Prioridad: 25/11/2005
Entidad titular: INIA, Bio-Rad, CEA
Países a los que se ha extendido: Europa (25/11/2006)
Empresa/s que la están explotando: BIO-RAD
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
Autores: J.M. Torres, J.C. Espinosa, O. Andréoletti, M.E. Herva, E. Alamillo, C. Lacroux
Título: BSE Agent shows an enhanced virulence after passage in sheep
Tipo de Participación: Conferencia
Congreso: PRION2006 Lugar de Celebración: Turin (Italia) Fecha: Oct 2006
Autores: M.E. Herva, J.C. Espinosa, E. Alamillo, O. Andréoletti and J.M. Torres
Título: Discrimination between Scrapie and BSE in sheep using porcine
PRP-transgenic mice
Tipo de Participación: Comunicación
Congreso: Prion 2006 Lugar de Celebración: Turin (Italia) Fecha: Oct 2006
Autores: J.C. Espinosa, O. Andréoletti, J. Castilla, M.E. Herva, M. Morales, E. Alamillo, C.
Lacroux, S.
Lugan, J. Langeveld and J.M. Torres1
Título: sheep-passaged bse analysed in BOPRP-TG110 mice exhibits bse strain features and
accelerated disease course allowing their discrimination from scrapie
Tipo de Participación: Comunicación
Congreso: Prion 2006 Lugar de Celebración: Turin (Italia) Fecha: Oct 2006
65

Autores: J.M. Bilheude, A.Brun, N.Morel, S.Henaux , O.Andreoletti, J.Grassi and
J.M.Torres
Título: Characterization of the PRP Polymorphism in position 171 by an elisa test,
Tipo de Participación: Comunicación
Congreso: Prion 2006 Lugar de Celebración: Turin (Italia) Fecha: Oct 2006
Tesis Doctorales, Diplomas de Estudios Avanzados, Tesinas, Proyectos y Trabajos Fin de
Carrera
-Diploma de Estudios Avanzados:
Aroa Relaño Ginés. “Utilización de células madre del Sistema Nervioso Central como
terapia en enfermedades ocasionadas por priones”. Universidad Autónoma de Madrid
(U.A.M), Facultad de Ciencias.
Director de Tesis: Juan María Torres Trillo.
-Diploma de Estudios Avanzados:
María Eugenia Herva. “Desarrollo de bioensayos altamente sensibles para la detección
de priones”. Universidad Autónoma de Madrid (U.A.M), Facultad de Ciencias.
Director de Tesis: Juan María Torres Trillo.
OTRAS ACTIVIDADES
Cursos
-Juan María Torres: Profesor en el "XV Curso Internacional sobre Enfermedades Exóticas".
Centro de Investigación en Sanidad Animal, CISA-INIA. Valdeolmos.
-Juan María Torres :Profesor del:”Master de Salud Pública” Escuela Nacional de Sanidad.
-Juan María Torres: Tutor Externo de la asignatura de “Estancias” tutelando 200 horas de
practicas a alumnos de 2º ciclo de la Fac . Veterinaria de la Univ. Complutense.
-Juan María Torres: Tutor Beca FINNOVA (Lucia González Torres)
Informes
-Juan María Torres. Evaluación de proyectos de investigación:
-Varias convocatorias del Plan Nacional de I+D+I
-Varias convocatorias de NoE neuroprion
-Convocatoria “TSE Research requirements” DEFRA (UK)
- ASSOCIATION FRANCAISE CONTRE LES MYOPATHIES (Francia).
APPLICATION FOR RESEARCH GRANT
-Juan Maria Torres. Referee de varias revistas científicas:
• J. Neurochemestry
• J. Gen. Virol.
• FEBS letter
66

• FASEB
• J. Neuroscience
Servicios
-Juan Maria Torres. Seguimiento y participación en el desarrollo del convenio CC03-
034 (INIA-FEDENCA-FUNDACIÓN BIODIVERSIDAD-SYVA)
Otros: organización de congresos, etc.
-Juan Maria Torres. Member of the executive committee of NoE neuroprion
-Juan Maria Torres. Member of the scientific committee of the International Congress
“Prion 2006” and “Prion 2007”
ESTANCIAS EN EL GRUPO DE PERSONAL DE OTRAS ENTIDADES:
1. -Dr. Olivier Andréoletti y Dra. Caroline Lacroux UMR959 INRA-ENVT Institut de
la Recherche Agronomique Toulouse-France. Dos estancias de una semana en Julio
2006 y en Septiembre 2006.
2. -Carlos Maluquer de Motes Porta. Dep. Microbiology, Faculty of Biology.
University of Barcelona. Varias estancias cortas.
3. -Mónica Morales Camarzana. SYVA (Enero-Abril 2006).
4. -Juan Ignacio Imbaud. SYVA (Mayo-Julio 2006).
5. -Jorge Barrios. SYVA (Agosto-Noviembre 2006)
67

ANIMALARIO. PATOLOGÍA EXPERIMENTAL.
Animalario
Benavente Pintor, Ángela.
Díaz Gismera, Noemí.
Montón Redondo Rosa María.
Salguero Bodes, Francisco Javier. Jefe de Sección
Sánchez Lobo, Iria. Auxiliar animalario
Sánchez Martín, Miguel Ángel. Veterinario
Sánchez Ramírez, Víctor Manuel. Veterinario
Viva Álvarez, Francisco José. Auxiliar animalario
Viva Barroso, Emilio. Auxiliar animalario
Correo electrónico: animalario@inia.es
Patología experimental
Benito Peña, Alberto. Veterinario
González Guirado, Antonia María.
Medina Ramos, Alejandra. Técnico laboratorio )
Salguero Bodes, Francisco Javier. Investigador Principal
Correo electrónico: salguero@inia.es
OBJETIVOS
1. Mantenimieto del bienestar y de la salud de los animales estabulados en el animalario
NCB3 del CISA
2. Estidio de la patogenia y patología de enfermedades de importancia en ganadería.
3. Colaboración Cientifica y Científico Técnica en Patología animal en experimentaciones
IN VIVO de proyectos en ejecución o colaboración en el CISA.
PRINCIPALES LÍNEAS DE I+D+I
1.Estudio de la patogenia de la respuesta inmune en enfermedades víricas porcinas: Peste
Porcina Africana, Peste Porcina Clásica, SRRP y enfermedades priónicas
2.Estudio de patogenicidad de cepas de Peste Porcina Clásica y aislados de Peste Porcina
Africana.
3.Apoyo a grupos de investigación que precisen del reactivo biológico animal de
experimentación para sus fines científicos.
PROYECTOS
Código y título: PORCIVIR. Estudio de enfemedades víricas porcinas. Consolider Ingenio
2010
Entidad financiadora: MCyT Duración: 2006-2011
Investigador responsable: Mariano Domingo Álvarez
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Código y título: Estudios de patogenia, inmunidad y control del virus de la fiebre del Valle
del Rift
Entidad financiadora: MCyT Duración: 2005-2008
Investigador responsable: Alejandro Brun Torres
Código y título: Carazterización de nuevos inmunógenos del virus de la peste porcina
africana. Estudio de la respuesta inmune inducida en el cerdo.
Entidad financiadora: MCyT Duración: 2004-2007
Investigador responsable: Esther Blanco Lavilla
Código y título: Encefalopatía espongiforme bovina. Rutas de programación orgánica de
priones patogénicos (PRPRES) y respuesta inmune.
Entidad financiadora: MCyT Duración: 2003-2006
Investigador responsable: José Carlos Gómez-Villamandos
Código y título: OT01-002. Desarrollo de metodologías para diagnóstico de la Peste
Porcina Africana, diagnóstico de enfermedades exóticas y actuaciones ante emergencias
sanitarias
Entidad financiadora: INIA Duración: 2001-2006
Investigador responsable: Marisa Arias Neira
Principales resultados:
En el animalario NCB3 del CISA-INIA, durante el año 2006 se han llevado a cabo más de
30 ensayos de experimentación “in vivo”, procedentes de proyectos en ejecución en el CISA
y/o colaboraciones con otras instituciones realizando la gestión necesaria para la realización
de los mismos y realizando apoyo clínico y veterinario. Durante el 2006 se han realizado
experimentos en un total de más de 4.000 ratones, 80 cerdos, 24 conejos, 8 ovinos, y
aproximadamente 200 truchas arco iris, inoculados o inmunizados frente a diferentes
enfermedades, siendo la Sección del Animalario del CISA, la encargada del mantenimiento
y dela vigilancia de la salud y el bienestar animal así como las inoculaciones
experimentales, tomas de muestras, etc.
En estos experimentos se han utilizado diferentes agentes etiológicos como los productores
de la Peste Porcina Africana, Peste Porcina Clásica, Síndrome Respiratorio y Reproductivo
Porcino, Fiebre del Valle del Rift, Influenza Porcina, Fiebre aftosa, Enfermedad vesicular
porcina, Teschovirus porcinos, Virus de la septicemia hemorrágica en peces y
Encefalopatías Espongiformes Transmisibles. Estos experimentos en animalario se han
realizado dentro de proyectos en ejecuci´n en el CISA, el Departamento de Biotecnología
del INIA, colaboracones científicas con el Cresa (Universidad Autónoma de Barcelona), el
CMB-SO (CSIC-UAM), y el Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación
Asimismo es una parte de los proyectos y colaboraciones se han realizado estudios de
colaboración científica y científico-técnica en patología animal. Se han realizado estudios
histopatológicos de 468 animales inoculados con diferentes agentes, en colaboración con
numerosos investigadores del CISA-INIA, de la Universidad de Córdoba, del CBM-SO
(CSIC-UAM), de la Universidad de Skopje (F.Y.R.O.M.). Estos resultados han dado lugar a
distintas publicaciones y se han presentado en diferentes reuniones y congresos de la
especialidad.
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Entre los resultados más relevantes:
• Se ha realizado un estudio de la presencia de la proteína prion celular (PrPc) en
diferentes especies de mamíferos, observándose una distribución similar en casi
todas las especies que sufren y que no sufren encefalopatías espongiformes
transmisibles. Igualmente, se ha puesto a punto una técnica de detección de la PrPsc
en bovinos afectados por la encefalopatía espongiforme bovina mediante la
utilización del anticuerpo monoclonal 2A11 desarrollado en el CISA-INIA. Por
último, en colaboración con la Universidad de Córdoba se ha estudiado la
hiperfosforliación de la proteína tau en un modelo de Encefalopatía Espongiforme
Bovina basado en ratones transgénicos que expresan la PrP bovina
• Se han realizado estudios de patogenia de la peste porcina clásica, en concreto en lo
referente a los cambios neuropatológicos y la respuesta inmunitaria, estudiando
igualmente la patogenicidad de las cepas presentes en las últimas epizootías de esta
enfermedad en nuestro país (1997 y 2001). También, en colaboración con el
Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación, se han realizado inoculaciones con
cepas aisladas de Teschovirus porcinos para estudiar la patogenicidad y las
interferencias en el diagnóstico de otras enfermedades porcinas.
• Se han realizado varios experimentos para valorara vacunas de nueva generación
frente a la peste porcina africana, dentro del proyecto coordinado en el que participa
el CISA, el INIA-Biotecnología y el Cresa, observándose un retraso en la aparición
de síntomas y lesiones típicas de la peste porcina africana en cerdos inmunizados
experimentalmente; se han estudiado los cambios en las subpoblaciones linfocitarias
en la infección por el virus de la fiebre aftosa, que sufren una depleción transitoria
asociada a la infección; se ha realizado un estudio histopatológico y de secunciación
de circovirus porcinos aislados en la antigua república yugoslava de Macedonia,
siendo la primera descripción de esta enfermedad en este país.
• Se han realizado inmunizaciones experimentales con ADN frente a la fiebre del valle
del Rift en ovejas y se ha dado apoyo científico técnico en anatomía patológica de
este y otros proyectos como las inoculaciones con virus salvajes de influenza porcina
en cerdos para el estudio de la patogenia de la enfermedad; la valoración de la
eficacia de inmunización con ADN en encefalopatías espongiformes transmisibles
para romper la inmunotolerancia, en colaboración con el Cresa (UAB).
• Se han realizado numerosas inmunizaciones en conejos para obtención de sueros
policlonales frente a proteínas de los virus de la peste porcina africana, enfermedad
vesicular porcina y fiebre del valle del Rift, para la obtención de reactivos biológicos
necesarios para los Centros de Referencia de enfermedades del CISA-INIA
PUBLICACIONES
Artículos en revistas SCI
F. Díaz-San Segundo, F.J. Salguero, A. De Ávila, J.C. Espinosa, J.M. Torres, A. Brun.
(2006). Distruibution of the celular prion protein (PRPC) in brains of Livestock ando
domesticated species anta neurolathologia (BERL.), 112, 587-595.
70

N. Fernandez-Borges, A. Brun, J.L. Whitton. B- Parra, F. Díaz-San Segundo, F.J. Salguero,
J.M. Torres, F. Rodríguez. (2006). DNA Vaccination can break Immunological Tolerance
To PRP in Wild-Type Mice and atenuantes prion disiases after intracerebral challenge
journal of Virology, 80, 9970-9976.
J.C. Gómez-Villamandos, I. García de Leaniz, A. Núñez, F.J. Salguero, J.L. Romero-
Trevejo, P.J. Sánchez-Cordón. (2006). Neuropathological study of experimental classical
swine fever. Veterinary Pathology, 43, 530-540.
N. Jimenez, J. Coll, F.J. Salguero, C. Tafalla (2006). CO-INJECTION OF INTERLEUKIN 8
With the glycoprotein gene from viral haemorrhagic septicemia virus (VHSV) modulates
the cytokine response in rainbow trout (oncorhynchus mykiss). vaccine, 24, 5615-5626.
M.J. Bautista, J. Gutiérez, F.J. Salguero, M. Fernández de Marco, J.L. Romero-Trevejo,
J.C. Gómez-Villamandos (2006). Hyperphosphorilated TAU protein in experimental BSE:
immunohistochemical and Subcellular changes. veterinary Microbiology, 115, 293-301.
F.J. Salguero, F. Díaz-San Segundo, A. Brun, M.J. Cano, J.M. Torres. (2006). Comparison
of Three Monoclonal Antibodies for use in immunohistochemical detection of bovine
spongiform encephalopathy protease resistant prion protein journal of Veterinary diagnostic
investigation, 18, 106-109
F. Díaz-San Segundo*, F.J. Salguero*, A. de Ávila, M. Fernández de Marco, M.A.
Sánchez-Martín , N. Sevilla (2006). Selective Lymphocyte depletion by Viral infection
during the early stage of immune response to Foot-and-Mouth Disease Virus (FMDV)
infection in Swine journal of virology, 80, 2369-2379.
Ponencias, comunicaciones y póster presentados/as y publicados en las actas
F.J. Salguero, P. Fernández-Pacheco, J. Fernández, M.A. Sánchez-Martín, V. Sánchez,
M. Fernández de Marco, M. Arias. Experimental Inoculation with Clasical Swine Fever
Virus (ISOLATE SPAIN 2001) in pigs: a clinical, pathological and laboratory diagnostics
study. 24 TH Meeting of the European Society of Veterinary Pathology. Edinburgh, Scotland,
2006
T. Ristoski, M. Knezevic, L. Carrasco, F.J. Salguero, A. Nuñez, J. Tosevski.
Immunohistochemical detection and distribution of the viral GP55 antigen in pigs naturally
infected with classical swine fever virus. 24 TH meeting of the european society of veterinary
pathology. Edinburgh, Scotland, 2006
E. Pérez-Martín, J. Arguilaget, M. Pérez-Filgueira, C. Gallardo, J. Pujols, M. Nofrarias, I.
Díaz, N- Fernández-Borges, F.J. Salguero, E. Blanco, J.M. Escribano, F. Rodríguez.
Development of new DNA Vaccine Strategies Against African Swine Fever Virus. 7 TH
Internacional Congress of Veterinary Virology. Lisboa, Portugal, 2006.
OTRAS ACTIVIDADES
F.J. Salguero:
• Realización de informes anuales de uso de animales de experimentación ara el
Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación y el ICLAS (International Council
for Laboratory Animal Sciences)
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• Profesor del XV Curso Internacional de Enfermedades Exóticas Animales.
Noviembre 2006. CISA-INIA
• Tutor externo de alumnos de la Facultad de Veterinaria de la Universidad
Complutense de Madrid (200 horas/alumno). Asignatura Estancias
• Profesor asociado de Enfermedades Infecciosas, Zoonosis y Salud Pública de la
Facultad de Veterinaria de la Universidad Alfonso X el Sabio
• Miembro de la Comisión de Bioética del INIA
M.A. Sánchez-Martín:
• Profesor del XV Curso Internacional de Enfermedades Exóticas Animales.
Noviembre 2006. CISA-INIA
• Miembro de la Junta Directiva de la Sociedad Española de Ciencias del Animal de
Laboratorio
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SERVICIO DE SECUENCIACIÓN
Componentes
Madueño Amor Encarnación
Nuero Oscar
Correo electrónico: amor@inia.es
OBJETIVOS
1. El Servicio de Secuenciación del CISA ofrece sus servicios a investigadores del
Centro, a los de todo el Instituto, OPIs y empresas privadas.
2. Durante el año 2006 se han realizado 188 registros que comprenden 5352 trabajos
(reacciones de secuenciación de ADN, determinación de la concentración y pureza
del ADN, purificación de productos de PCR y análisis de fragmentos).
PRINCIPALES LINEAS DE I+D+I
• El servicio de secuenciación del CISA presenta dos tipos de actividades
principalmente: Secuenciación automática de DNA y Análisis de fragmentos de
DNA. Incluidas en ambas técnicas está la obtención de DNA, purificación y
cuantificación para su posterior análisis.
• Para la secuenciación se pueden utilizar cebadores universales, aportados por el
servicio o cebadores específicos aportados por el usuario. Los reactivos y kits para la
secuenciación son aportados por el servicio.
• Se ofrece asistencia técnica para que el usuario pueda consultar cualquier duda sobre
los procedimientos de secuenciación.
• El análisis de fragmentos se aplica entre otros en el descubrimiento y validación de
SNPs, detección de mutaciones, detección de heterocigotos, identificación de allelos,
etc.
• En todas estas actividades se aplican programas bioinformáticos para su análisis.
• El servicio de secuenciación del CISA permite potenciar los estudios moleculares
dirigidos a la diagnosis y prevención de patógenos animales de alto riesgo, exóticos
y con gran impacto económico; así como también los estudios moleculares derivados
de la investigación básica llevada a cabo por todo el personal investigador del INIA.
• También presta su apoyo a laboratorios de Universidades, Organismos Públicos de
Investigación, Hospitales y Empresas.
• Pretende facilitar las actividades del CISA en el campo de la biología molecular en
todos sus aspectos: identificación de aislados y nuevas cepas virales en caso de
nuevos brotes epidémicos, estudios de filogenia viral, estudios de mutaciones virales,
etc.
• Así mismo, participa en el desarrollo diagnóstico en sanidad animal, publicaciones y
establecimiento de nuevas colaboraciones con otros centros de investigación.
• Interviene directamente en los estudios de mejora genética de especies domésticas y
la conservación de recursos genéticos animales ayudando a seleccionar los caracteres
relacionados con la calidad de los productos, funcionalidad y resistencia a
enfermedades.
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• Finalmente, está participando en estudios de detección e identificación de virus,
viroides y fitoplasmas de especies vegetales de interés económico.
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PROYECTOS
Estos son alguno de los proyectos en los que ha intervenido el servicio de
Secuenciación:
- QLK2-2002-01719 "Foot-and-Mouth Disease Virus: The molecular basis of tissue
tropism and persistence".
- Investigador responsable: Dra. Margarita Sáiz
- CAL01-018 “Determinación de la infectividad de diferentes tejidos de interés
alimentario procedentes de animales infectados con BSE utilizando un modelo
basado en ratones transgénicos. Investigador responsable: Dr. Juan María Torres
- CT04-506579. Investigador responsable: Dr. Juan María Torres
- CICYT-AGL2000-1229. Detección de QTLs y genes candidatos que afectan a
caracteres reproductivos de interés económico en el porcino. Investigador
responsable: Carmen Rodríguez
- CC01-0045 Creación de nuevas estirpes de ganado porcino. Investigador
responsable: Carmen Rodriguez
- Diseño óptimo de programas de conservación mediante el uso conjunto de
estratégias clásicas y nuevas tecnologías: estudios teóricos y prácticos. Investigador
responsable: José Luis Campo Chavarri*
- RTA 02-35: “Deteccion de enterovirus en muestras ambientales” Investigador
responsable: Dr. Juan Carlos Sáiz
- 07M/0023/2002 (CAM): “Contaminacion ambiental por virus entericos animales,
derivada de residuos de explotaciones ganaderas de la comunidad de Madrid”
Investigador responsable: Dr. Juan Carlos Sáiz
- AGL04-7404 SE : “Vacunas DNA en acuicultura: estudio de la respuesta inmune
celular en el modelo de trucha arco iris/ rebdovirus. Investigador responsable: Dra.
Carolina Tafalla.
- AGL04-2132 SE: Epizootiología molecular de la Influenza. Investigador
responsable: Dr. Gustavo del Real
- CC03-017 SE Investigador responsable: Dr. Gustavo del Real
- B1002-4091 SE: Caracterización de la respuesta inmune. Investigador responsable:
Dr. J. Barcena.
- B1004-6114 SE : Caracterización de las señales de RNA. Investigador responsable:
J. Gomez
- CT02-1309 SE: European project to study BSE strain .. Investigador responsable:
Dr. J.M.Torres
- OTO1-002 SE : Desarrollo de metodologías para el diagnóstico de la peste porcina
africana, diagnóstico de enfermedades exóticas y actuaciones ante emergencias
sanitarias. Investigador responsable: Dra. Mª Luisa Arias.
- UE-LR-PPA03 SE : Laboratorio de referencia de la Unión Europea para la peste
porcina africana. Investigador responsable: Dra. Mª Luisa Arias
- CTO2-1719 SE: FMD tropism. Foot and mouth disease virus... Investigador
responsable: Dra. M. Saiz
- RTAO3-201 SE: Estudios de patogenia,inmunidad y control. Investigador
responsable: Dra. M. Saiz
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SERVICIO DE SEGURIDAD BIOLÓGICA Y MANTENIMIENTO
Componentes
Gómez Perochera, Elena
Pascual Álvarez Gonzalo. Jefe del Servicio
Subcontratas:
Dalkia
Indulisa
Serygur
Flor de la Torre
Correo electronico: gpascual@inia.es
INGENIERÍA Y MANTENIMIENTO TÉCNICO
Diseño y mejora de instalaciones, Control de la presión negativa y de cajas de filtración de
aire, Control del sistema de descontaminación de efluentes, sistemas de doble frontera e
incineración, Asesoramiento nacional e internacional en bioseguridad y biocontención,
Chequeos sobre Cabinas de Seguridad Biológica, Campanas de Extracción de Gases e
Incubadores, Chequeos de Grupos Electrógenos, Transformadores, UPS´s, líneas de fluidos,
calderas de vapor, agua caliente sanitaria, compresores de aire, desagües, líneas de CO2,
propano, Red de agua desionizada, aire comprimido, vacío, nitrógeno, gasoil, etc., Control
de equipos MiliQ y MiliRo, Control del funcionamiento de duchas de descontaminación,
etc
MANTENIMIENTO MEDIOAMBIENTAL Y GESTIÓN TÉCNICA
Chequeos de emisiones en calderas, vertidos de efluentes y torres de refrigeración,
Recogida, almacenamiento y gestión de residuos biosanitarios, tóxicos, peligrosos y
radiactivos, Incineración y tratamiento químico, Supervisón de la Instalación radiactiva,
Validación técnica de autoclaves de vapor y OxEt, etc.
PREVENCIÓN DE RIESGOS
Gestión de equipos de protección individual, Control y supervisión de riesgos en calderas,
recipientes a presión, incinerador, elevadores, electricidad, gases y fluidos e incendios,
Seguimiento y control de riesgos en tareas biopeligrosas, Investigación de incidentes y
accidentes, Elaboración e Implantación de evaluaciones de riesgos, manuales,
procedimientos y fichas de seguridad, Formación e información sobre riesgos y medidas
preventivas, etc.
EQUIPO DE SEGURIDAD BIOLÓGICA
Recepción y envío nacional e internacional de muestras biológicas, Empaquetado y
etiquetado de muestras, Controles biológicos en autoclaves de vapor y OxEt,
Descontaminaciones químicas, Test de integridad de filtros absolutos, Cambios de prefiltros
y filtros HEPA, Controles de estanqueidad de sistemas electro-neumáticos,
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Descontaminaciones de vehículos de riesgo, Desinsectaciones y desratizaciones, Controles
de entradas y salidas, Formación en Seguridad Biológica, Elaboración de protocolos de
Seguridad Biológica, etc..
ACTUACIONES TÉCNICAS ESPECIFICAS (2006)
AREA DE ALTA CONTENCIÓN BIOLÓGICA
Instalación de nuevos filtros HEPA H14 en salida de aire, Elaboración del nuevo
Reglamento de la Instalación Radiactiva y de protocolos de trabajo y seguridad para trabajos
con Clamidea, Salmonella y New Castle, Revisión de la instalación contraincendios,
Validaciones físicas y microbiológicas, Notificación a la autoridad laboral vigente de nuevos
agentes biológicos, Construcción de tomas para inyección de peróxido de hidrógeno en
boxes y Air Locks, Adquisición de un sistema de descontaminación por peróxido de
hidrógeno, Adecuación de caldera de vapor a legislación vigente, Adquisición y montaje de
una ultracentrífuga, y de tres cabinas de seguridad biológica, Diseño y adquisición de un
sistema de esterilización de efluentes biocontaminados NCB3, Instalación de líneas de CO2
para laboratorios.
AREA DE LABORATORIOS DE NIVEL 2
Proyecto de climatización de área NCB2, Sistema de aspiración para equipo gases-masa,
Nueva línea de suministro de argón y acetileno, Suministro e instalación de una campana de
aspiración de gases, Remodelación eléctrica de gases y fontanería de laboratorios NCB2
PUBLICACIONES
1.- Pascual,G (2006) Manipulación segura de ántrax. Un caso real. 4º International
conference about occupational risk prevention (ISBN 84-933328-9-5).
2.- Pascual, G (2006). Agentes biológicos patógenos de nivel 3. Revista Biólogos
(Noviembre 2006). Colegio de Biólogos de la Comunidad de Madrid.
CONGRESOS Y FOROS
1.- 4º Congreso Internacional de Prevención de Riesgos Laborales ORP´2006 (SEVILLA
Mayo 2006).
2.- 11th INTERNATIONAL VETERINARY BIOSAFETY WORKSHOP (SINGAPUR
Noviembre 2006).
CURSOS IMPARTIDOS
1.- PREVENCIÓN DE RIESGOS EN LABORATORIOS (22-26 MAYO 2006)
(Escuela central de capacitación agraria Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación)
2.- XV CURSO INTERNACIONAL SOBRE ENFERMEDADES EXÓTICAS ANIMALES
(1-30 NOVIEMBRE 2006) (Centro de Investigación en Sanidad Animal)
3.- IV CURSO DE ESPECIALIZACIÓN EN INCIDENTES N.B.Q. Dirección General de
la Policía. División de formación y perfeccionamiento.
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4.- CURSO DE PREVENCIÓN DE RIESGOS LABORALES EN EL SECTOR
AGROPECUARIO. Finca “El Encín”. IMIA .CAM (9 de Mayo 2006).
5.- CURSO DE ESPECILISTAS – EUROPEAN COMMISION –TAIEX ref nº IND/EXP
20999- EXPERT MOBILISATION ON LABORATORY BIOSAFETY (Enero 2006)
Institute of Microbiology and Parasitology. Veterinary faculty of Ljubljana; Slovenia.
6.- INFLUENZA AVIAR. BIOSEGURIDAD Y BIOCONTENCION. Facultad de Ciencias
Biológicas UCM. (17 Febrero 2006)
7.- ACTUALIZACIÓN EN HIGIENE INDUSTRIAL (Mayo 2006) Centro de Seguridad y
Salud Laboral de León. Dirección General de Trabajo y Prevención de Riesgos Laborales.
Consejería de Economía y Empleo. Junta de Castilla y León.
8.- CURSO RIESGO BIOLÓGICO EN ACTIVIDADES VETERINARIAS. Servcio de
Prevención de Zaragoza. Departamento de Economía, Hacienda y Empleo. Gobierno de
Aragón (Junio 2006).
9.- CURSO BASICO DE PREVENCIÓN DE RIESGOS LABORALES EN
AGRICULTURA. Finca “El Encín”. IMIA .CAM (13 de Noviembre 2006).
10.- 4º CURSO BASICO DE INCENDIOS. Centro de Investigación en Sanidad Animal. (6
Junio 2006)
11.- V CURSO DE ESPECIALIZACIÓN EN INCIDENTES N.B.Q. Dirección General de
la Policía. División de formación y perfeccionamiento.
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