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Vol. 14 núm. 1 - Sociedad Española de Microbiología

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Efectos <strong>de</strong> ¡a lus ultravioleta sobre las bacterias. I<br />

ii<br />

llevó a cabo una investigación para conocer las variaciones <strong>de</strong> sensibi^<br />

lidad <strong>de</strong> la E. coli a las radiaciones. Se ha encontrado que la fase <strong>de</strong><br />

adaptación está caracterizada por un aumento <strong>de</strong> resistencia a la radiación<br />

y la fase logarítmica coinci<strong>de</strong> con un lento pero regular <strong>de</strong>scenso<br />

<strong>de</strong> la resistencia, resultando las células más sensibles.<br />

Por este motivo obtenemos las curvas <strong>de</strong> crecimiento <strong>de</strong> la estirpe,<br />

con la doble finalidad <strong>de</strong> : a) conocer el momento <strong>de</strong>l ciclo <strong>de</strong> crecimiento<br />

en que irradiamos la bacteria, y b) compararla con la que más tar<strong>de</strong><br />

obtendremos con la estirpe <strong>de</strong>spués <strong>de</strong> irradiada (figwra i).<br />

Para la obtención <strong>de</strong> las curvas <strong>de</strong> crecimiento disponemos <strong>de</strong> un<br />

fotocolorimetro Klett-Summerson, mo<strong>de</strong>lo 800-3 y <strong>de</strong> los matraces <strong>de</strong><br />

cultivo diseñados para este fin (figura 2).<br />

Concentración ceUila/r<br />

Tomamos muestras <strong>de</strong>l cultivo en plena fase logarítmica <strong>de</strong> crecimiento<br />

(doce horas).<br />

Estos cultivos son diluidos a 10^ células/cm^ con caldo común fresco<br />

y entonces son irradiados.<br />

La concentración celular <strong>de</strong>. la supensión la <strong>de</strong>terminamos por el<br />

método <strong>de</strong> recuento en placa.<br />

Irradiación<br />

Disponemos <strong>de</strong> una cámara <strong>de</strong> luz ultravioleta con 4 lámparas <strong>de</strong><br />

mercurio Sylvania <strong>de</strong> 15 W que emi;t^n una longitud <strong>de</strong> onda <strong>de</strong> 2.537 A;<br />

las pare<strong>de</strong>s <strong>de</strong> la cámara están recubiertas con planchas <strong>de</strong> aluminio.<br />

La cámara está dispuesta sobre un agitador <strong>de</strong> vaivén <strong>de</strong> 113 r/m y<br />

está instalada <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong> una cámara oscura.<br />

En placas <strong>de</strong> Petri <strong>de</strong> 4,5 cm <strong>de</strong> diámetro ponemos 2 cnif <strong>de</strong> la<br />

suspensión bacteriana.<br />

Las placas se disponen en una ban<strong>de</strong>ja, a <strong>14</strong>,5 cm <strong>de</strong>l foco <strong>de</strong><br />

emisión.<br />

; Irradiamos durante diferentes períodos dç tiempo, que oscilan <strong>de</strong><br />

cinco a noventa minutos. ,.<br />

Como la suspensión bacteriana es lo suficientemente <strong>de</strong>nsa para que la<br />

intensidad xik^^ varíe <strong>de</strong> la superficie al fondo, por la absorción<br />

<strong>de</strong> la luz ultravioleta por las células en suspensión, utilizamos el método

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