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Cultivo continuo II

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GUIA 4<br />

CULTIVO CONTINUO <strong>II</strong><br />

4.1.- En un laboratorio de bioprocesos se dispone de un sistema de cultivo <strong>continuo</strong> consistente en 2<br />

quimiostatos en serie de 80 litros de volumen de trabajo cada uno. Se requiere realizar un ensayo con una<br />

bacteria de µ M=0,57 h -1 , con un medio definido limitado por carbono, con Ks=0,09 g/L y un Y x/s=0,43. A la<br />

primera etapa se alimenta un flujo de 32 L/h con un S 0=35 g/L. Entre las dos etapas se incorpora una<br />

alimentación de 12 L/h con una concentración de nutriente limitante de 25 g/L.<br />

a) Determinar las condiciones de salida de cada etapa en operación régimen estacionario.<br />

b) Determinar la productividad volumétrica en células para cada etapa<br />

4.2.- Un quimiostato simple de 5 litros de volumen útil presenta algunos problemas de diseño que ocasionan<br />

una imperfecta agitación. El equipo se va a utilizar para cultivar una levadura de µ M=0,48 h -1 y Ks=0,072 g/L.<br />

La alimentación se hará a 1,1 L/h con una concentración de nutriente limitante S 0 = 65 g/L. En esa condición<br />

Y x/s=0,43 g/g. Para predecir los resultados de esa experiencia se plantea un modelo que supone que un 35%<br />

del flujo de alimentación no pasa por el fermentador, sino que se une a la corriente de salida y que el resto<br />

ingresa al quimiostato que se considera perfectamente agitado.<br />

a) Determine los valores estacionarios de µ, X , S y Q máx (Q X).<br />

b) Comparar los resultados anteriores con los valores generados considerando un fermentador<br />

perfectamente agitado.<br />

4.3.- Se desea producir un metabolito P mediante una fermentación continua con un microorganismo<br />

anaerobio facultativo en un sistema quimiostato de 2 etapas. La primera (200 litros de volumen útil) se opera a<br />

D= 0,4 h -1 , en condiciones aerobias en las cuales P no se produce. El segundo reactor (300 litros) se opera<br />

sin aireación y en él se produce un metabolito con Y p/s=0,44. Se utiliza un medio limitado por sacarosa con<br />

una concentración inicial de 15 g/L. En base a las condiciones de cultivo, en la primera etapa se tiene un<br />

µ M= 0,52 h -1 , un Y x/s= 0,5 g/g y K s=0,018 g/L. La segunda etapa posee una alimentación secundaria de 15 L/h<br />

de una solución de 100 g/L de sacarosa. Se sabe además que para la segunda etapa µ M=0,3 h -1 , Y x/s=0,25<br />

g/g y K s=0,018 g/L.<br />

a) Determinar la concentración final del producto.<br />

b) Discuta lo que sucedería en el sistema si el flujo de alimentación se aumenta en 5 L/h para compensar<br />

una filtración continua en el primer reactor que implica una pérdida de 5 litros por cada hora de operación.<br />

4.4.- Un fermentador de tanque agitado de 1500 litros de volumen de operación es utilizado en un proceso<br />

<strong>continuo</strong> con una levadura de µ M= 0,34 h -1 y un K s= 80 ppm. La levadura presenta auxotrofía de un metabolito<br />

intermedio que es usado como nutriente limitante con un Y x/s= 4,5 y una concentración en la alimentación de 5<br />

g/L para un flujo de 165 L/h. El efluente del fermentador pasa por una centrífuga continua que produce una<br />

corriente concentrada de células, que es bombeada a otra sección de la planta, y otra corriente clara que es<br />

recirculada parcialmente al fermentador, purgándose el resto. El factor de concentración es 3,3 y el factor de<br />

recirculación medido después de la purga es de 1,8. Si se desea que el flujo de la purga sea un 65% del flujo<br />

de la corriente concentrada de células, determine los valores de los flujos y la concentración de células y<br />

nutrientes limitantes de todas las corrientes, cuando se opera en estado estacionario. Además comparar los<br />

resultados con los que se obtendrían con un quimiostato simple de 1 etapa.<br />

4.5.- Un quimiostato de 12 m 3 de volumen con recirculación de células y sin purga, posee una alimentación<br />

fresca de 6240 L/h con una concentración de 1,2 g/L. Se pide determinar el factor de concentración en el<br />

separador, la concentración celular en el fermentador y la concentración de sustrato en el efluente.<br />

Datos: µ M = 0,62 h -1 µ = 0,35 h -1 K S = 0,2 g/L Y x/s = 0,5 g/g.


Diseño de Bioreactores<br />

4.6.- En una planta piloto se dispone de un sistema de fermentación continua consistente en dos quimiostatos<br />

en serie de 50 litros de volumen de trabajo cada uno. Se desea cultivar una determinada bacteria (55% C;<br />

11% N; 1,2% S; 2,0% Mg; 1,3% P) cuya velocidad específica de crecimiento máxima es de 0,45 h -1 en las<br />

condiciones del ensayo y su constante de afinidad es de 28 mg/L para glicerol, que será utilizado como<br />

nutriente limitante. Considere un rendimiento en células constante de 0,45 g/g.<br />

La primera etapa se operará a D= 0,23 h -1 , con una concentración de glicerol en la alimentación de 18 g/L. La<br />

segunda etapa tiene una alimentación secundaria de 6 L/h con 100 g glicerol/L.<br />

a) Determinar los valores estacionarios de X, S y µ en cada etapa.<br />

b) Determinar las productividades volumétricas de células en la primera etapa, en la segunda etapa y la<br />

productividad global del sistema.<br />

c) ¿Cómo varían los resultados de (a) si la alimentación secundaria incluye además 5 g/L de células?<br />

4.7.- Un fermentador <strong>continuo</strong> de laboratorio de 2,5 litros está acondicionado para operar con retención de<br />

células, para lo cual tiene dos salidas: una con un filtro absoluto y la otra directa del caldo. A través de la<br />

salida con el filtro fluye un 30% de la alimentación al sistema.<br />

a) Establecer las ecuaciones que describan totalmente la operación del fermentador en estado transiente y<br />

en estado estacionario.<br />

b) Calcular la concentración celular y concentración de nutriente limitante en el fermentador en estado<br />

estacionario si µ= 0,83 h -1 , K S= 0,377 g/L e Y x/s= 0,33 g/g, con un medio conteniendo 4 g/L de nutrientes y<br />

un flujo de 8,5 mL/min.<br />

c) Calcule la máxima productividad celular.<br />

4.8.- Se tienen dos fermentadores en serie perfectamente agitados. El segundo posee recirculación parcial<br />

de células. Establecer las ecuaciones que caracterizan esta configuración. Escriba las suposiciones y la<br />

notación utilizada.<br />

4.9.- Se propone un sistema de fermentación continua en régimen permanente que consta de un fermentador<br />

con reciclo de células cuyo efluente alimenta un segundo fermentador. Sugiera una expresión que relacione la<br />

tasa específica de crecimiento en el segundo reactor con los parámetros D, µ 1, X 1 y X 2.<br />

Considere:<br />

• D=F/V es la tasa (velocidad) de dilución, igual en ambos fermentadores<br />

• La alimentación fresca es estéril<br />

• α es la razón de reciclo y C f es el factor de concentración<br />

4.10.- Si un reactor de flujo en pistón de 1 m 2 de sección se alimenta con un caudal de 0,1 m 3 /s, la velocidad<br />

específica de crecimiento es 1 h -1 y la concentración de biomasa es de 100 g/m 3 en un punto situado a 10 m<br />

del punto de alimentación. Calcular:<br />

a) La velocidad de formación de biomasa en ese punto.<br />

b) Si bajo esas mismas condiciones la velocidad específica de formación de producto es de 1 g de<br />

producto por gramo de biomasa y hora, ¿cuál sería la velocidad de formación de producto en el mismo<br />

punto?<br />

c) Si el rendimiento de producto en biomasa es de 0,1 g producto/g biomasa y la concentración de sustrato<br />

está cambiando a razón de 1200 g/m 3 m de reactor, ¿cuál sería el rendimiento de sustrato en biomasa<br />

observado?<br />

4.11.- Un microorganismo tiene una cinética de crecimiento que sigue el modelo de Monod con los siguientes<br />

parámetros: µ M = 0,5 h -1 ; K S = 2 g/L; Y X/S = 1 g/g. Si se utiliza un fermentador de tanque agitado con<br />

alimentación estéril (S 0 = 50 g/L) a una velocidad de dilución de 0,402 h -1 , ¿cuántos tanques en serie del<br />

mismo volumen, trabajando con la misma D, serían necesarios para transformar el 98% del sustrato?<br />

Departamento de Ingeniería Química<br />

2<br />

<strong>II</strong>Q-461<br />

Mayo, 2004<br />

Diseño de Bioreactores

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