del fungicida - Mercosoja 2011
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Resistencia de hongos a <strong>fungicida</strong>s.<br />
Amenaza para el Mercosur<br />
- Énfasis en soja -<br />
Erlei Melo Reis, Marta M. Casa, Aveline Avozane, Mateus<br />
Zanatta<br />
Universidad de Passo Fundo, Rs
1 Introducción<br />
Presentar los conceptos;<br />
Proponer un uso correcto de la terminología<br />
para entender el tema propuesto<br />
Ejemplicar con resultados obtenidos de la investigación<br />
Discutir amenazas y desafios
2 Quimioterapia<br />
Medida de control mas usada;<br />
- emergencial, rápida, práctica, eficiente y<br />
económicamente viable;<br />
-<strong>fungicida</strong>s.<br />
Su uso puede “fallar”;<br />
Surgimiento de cepas con reducción/pérdida de sensibilidad.<br />
Materia de la charla.
3 Fungicida<br />
Sustancia química que controla hongos;<br />
- matar o inhibir el crecimiento y/o esporulación;<br />
- reducir la intensidad o evitar la enfermedad;<br />
- reducir o evitar daños.<br />
Estramenópilas (Oomicetos) – Oomiceticidas
3 Fungicida<br />
– mecanismo de acción (modo de acción/ mecanismo<br />
bioquímico de acción)<br />
- IDM: inhibidores de la desmetilación; triazol; imidazol (pro);<br />
pirimidina (fe);<br />
- metilar = + CH 3 ;<br />
- desmetilar, remover el radical = - CH 3 ;<br />
- demetilación no existe en química;<br />
- IQe: inhibidores de la quinona externa; estrobilurina;<br />
- Benzimidazoles: síntesis de tubulina;
4 Fungitoxicidad (molécula)<br />
-tóxico= veneno;<br />
-atóxico= inocuo;<br />
- veneno a los hongos;<br />
“propiedad de una sustancia química de ser tóxica a hongos“<br />
- atributo de la molécula y de su concentración;
4 Fungitoxicidad (molécula)<br />
- Ej. Sal de mesa<br />
Phakopsora pachyrhizi :<br />
CI -1 50 < 0,1 mg.L altamente tóxica;<br />
Blum (2009).<br />
0,1 a 20 moderadamente;<br />
> 20 atóxico<br />
“Un <strong>fungicida</strong> no controla todos los hongos”.
5 Sensibilidad d (hongo)<br />
- Sensible – que siente!<br />
- Atributo determinante de la genética y fisiología <strong>del</strong> hongo;<br />
- Hongos sensibles: controlados económicamente;<br />
Ej. Fusarium x carbendazim;<br />
Drechslera x iprodiona;<br />
Puccinia x azoxistrobina e etc.<br />
Todos los hongos, dentro <strong>del</strong> espectro de acción son<br />
sensibles al <strong>fungicida</strong>.
6 Insensibilidad (<strong>del</strong> hongo)<br />
- No todos los hongos son sensibles a todos <strong>fungicida</strong>s;<br />
- Dependiente de la genética y fisiología <strong>del</strong> hongo;<br />
- Hongos insensibles: no controlados económicamente;<br />
Ex. Drechslera, Bipolaris, Alternaria x carbendazim;<br />
Fusarium, Septoria x iprodiona;<br />
Et Estramenópilas, óil Peronospora x IDMs, benzimidazóis…<br />
La insensibilidad bld d no se modifica. df
7 Medida de la fungitoxicidad/sensibilidad<br />
- expresa por la concentración <strong>del</strong> ingrediente activo (i.a.)<br />
<strong>del</strong> <strong>fungicida</strong>;<br />
- unidades: ppm; µg.mL -1 ; mg.L -1 ;<br />
Denominaciones:<br />
DE 50 – dosis efectiva;<br />
CE 50 – concentración efectiva;<br />
CMI – concentración mínima inhibitoria = CI 100<br />
CI 50 – concentración inhibitoria;<br />
50 – que controla 50%;<br />
50 qu contro a 5 ;<br />
90 – que controla 90%.<br />
100 – que controla 100%.
7 Medida de la fungitoxicidad o sensibilidad<br />
Método de determinación de la CI 50 (mg.L -1 );<br />
In vitro (Necrotróficos) e in vivo (Biotrófico);<br />
(i)<br />
Inhibición <strong>del</strong> crecimiento miceliano (IDM, benz.);<br />
(ii) Germinación de esporas (IQe);<br />
(iii) Masa miceliana en medio líquido;<br />
(iiii) Control de la enfermedad in vivo.<br />
Determinada para una especie de hongo y una molécula.
8 Potencia de un <strong>fungicida</strong><br />
Cuanto menor la CI 50 mayor la potencia;<br />
Ej. Para P. pachyrhizi los IQes presentan mayor<br />
potencia que los IDMs;<br />
Poco usada.
9 Alteración <strong>del</strong> valor de la CI 50<br />
- Puede alterarse con el tiempo repetido de uso de un<br />
<strong>fungicida</strong> en un mismo lugar, grande área;<br />
- Reducción/pérdida de la sensibilidad <strong>del</strong> hongo al <strong>fungicida</strong>;<br />
- Mecanismo genético de variabilidad <strong>del</strong> hongo;
10 Adaptación<br />
Habilidad <strong>del</strong> hongo de desenvolverse, reproducirse y sobrevivir<br />
frente a una condición adversa <strong>del</strong> ambiente; comparado con otra<br />
linaje de la misma especie;<br />
- El uso de <strong>fungicida</strong>s torna el ambiente adverso;<br />
- Amenaza eliminarlos;<br />
- Quién vencerá la batalla<br />
- Todos los individuos id de la población serán eliminados i por el <strong>fungicida</strong><br />
id -El mutante tolerante sobrevive y dominará la población (campañas).
11 Falla de control (Adaptación)<br />
Control comparado con campañas anteriores es inferior;<br />
Alteración de la eficiencia;<br />
Sin éxito;<br />
Control ineficiente;<br />
“Productores se quejan”<br />
Ej. campaña 2008 roya soja – Rondonópolis.<br />
campaña 2009, mancha-anillada anillada de soja;<br />
Oídio, trigo y cebada y etc.
12 Aislado, cepa salvaje o sensible<br />
Muestra de la población original en la ausencia <strong>del</strong> <strong>fungicida</strong>;<br />
Mayor sensibilidad registrada = < CI 50<br />
La CI 50 debe ser determinada en este momento;<br />
Para que hongos todavía aún no fue determinada<br />
Ej. Raza B34 de Puccinia triticina a los IDM e IQe.<br />
Raza – SMJ<br />
Aislameinto, estirpe, cepa, raza, mutante,
13 CI de referencia, Línea de bases,<br />
perfil de sensibilidad, (Base-line);<br />
- Valor de la CI de la linaje salvaje o sensible;<br />
- Determinada antes <strong>del</strong> uso de <strong>fungicida</strong> en el cultivo;<br />
- Media de 20 a 50 aislados de la población;<br />
- Valor para 1 hongo y 1 <strong>fungicida</strong>;<br />
- Indispensable para medir la reducción/pérdida futura;<br />
- Ej. Phakopsora pachyrhizi – valores de referencia:
Ej. con Phakopsora pachyrhizi
CI 50 – referencia para Phakopsora pachyrhizi<br />
hi i<br />
Germinación esporas in vitro<br />
Fungicida<br />
CI50<br />
(mg L-L<br />
1)<br />
Azoxistrobina 1 0,11*<br />
2 003 0,03<br />
Picoxistrobina 1 0,06<br />
2 002 0,02<br />
Piraclostrobina 1 0,01<br />
2 014 0,14<br />
Trifloxistrobina 1 0,01<br />
2 002 0,02
CI 50 – referencias para Phakopsora<br />
pachyrhizi<br />
Fungicida<br />
Ciproconazole 1 1,25*<br />
2 3,06<br />
Epoxiconazole 1 0,50<br />
2 1,23<br />
Flutriafol 1 16,43<br />
2 18,01<br />
Metconazole 1 2,50<br />
CI50<br />
(mg L-1)<br />
2<br />
-<br />
Miclobutanil 1 19,50<br />
2 15,87<br />
Tebuconazole 1 041 0,41<br />
2 0,81<br />
Tetraconazole 1 3,82<br />
2 317 3,17<br />
* Valores estimados pelo procedimento Probit
14 Factor de reducción de la sensibilidad - FRS<br />
Expresar la magnitud de la reducción;<br />
FRS = CI 50 de la linaje sospecha/CI 50 linaje sensible;<br />
Ej. P. pachyrhizi<br />
FRS = Aislado Paraguay/aislado sensible;<br />
FRS = 8,9/0,33 = 26,97<br />
Concentración 26,97 veces mayor para reducir (controlar)<br />
50% el número de urédias/cm 2 ;<br />
O FRS = 1(sensible) o >1 (reducción/pérdida).
Sensibilidad de poblaciones de Phakopsora pachyrhizi in vivo.<br />
Fungicida<br />
id CI50<br />
Intervalo (95%)<br />
Erro<br />
Populación 01/07 Passo Fundo, (mg L-<br />
RS, sensible<br />
1)<br />
C.I.= Concentración inhibitoria de 50%<br />
Ciproconazole 1 0,89* 0,05 - 1,91 0,43<br />
2 - - -<br />
Epoxiconazole 1 0,31 0,02 - 0,85 0,31<br />
2 0,61 0,17 - 1,18 0,29<br />
Flutriafol 1 15,35 8,28 - 19,99 2,35<br />
Fungicidas CI 50<br />
2 11,21 2,59 - 19,85 0,91<br />
Tebuconazol 0.33<br />
Metconazole 1 2,61 1,62 - 3,10 2,14<br />
2 - - -<br />
Ciproconazol 1.27<br />
Miclobutanil 1 18,28 7,94 - 25,52 1,96<br />
2 14,03 4,60 - 19,67 2,01<br />
Epoxiconazol 0.20<br />
Tebuconazole 1 0,32 0,09 - 0,64 0,25<br />
Metconazol 1.34<br />
2 0,77 0,26 - 1,48 0,36<br />
Tetraconazole 1 3,53 1,72 - 5,10 1,94<br />
Piraclostrobina 0.03<br />
2 3,96 3,05 - 29,37 2,17<br />
Proticonazol 0.11<br />
Piraclostrobina + epoxiconazol 0.06
Eficiencia de <strong>fungicida</strong>s en el control de Phakopsora pachyrhizi in vivo.<br />
Población 26/08 Paraguay<br />
C.I.= Concentración inhibitoria de 50%<br />
FRS= Factor de reducción de la sensibilidad<br />
Fungicidas id CI 50 FRS<br />
Tebuconazol 8.90 26.96<br />
Ciproconazol 5.91 4.65<br />
Epoxiconazol 4.49 22.45<br />
Metconazol 7.49 5.58<br />
Piraclostrobina 016 0.16 53 5.3<br />
Proticonazol 0.10 0.9<br />
Piraclostrobina + epoxiconazol 0.0009 0.01
Eficiencia i i de Fungicidas id en el control de Phakopsora pachyrhizi hi i in vivo.<br />
Población 24/08 Rondonópolis, MT<br />
C.I.= Concentración inhibitoria de 50%<br />
FRS= Factor de reducción de la sensibilidad<br />
Fungicidas CI 50 FRS<br />
Tebuconazol 12.47 37.78<br />
Ciproconazol 2.68 2.11<br />
Epoxiconazol 1.14 5.7<br />
Metconazol 0.16 0.11<br />
Piraclostrobina 0.11 3.6<br />
Proticonazol 0.27 2.4<br />
Piraclostrobina +<br />
008 0.08 13 1.3<br />
epoxiconazol
Eficiencia de Fungicidas en el control de Phakopsora pachyrhizi in vivo.<br />
Población 21/08 Chapadão do Sul, MS<br />
C.I.= Concentración inhibitoria de 50%<br />
FRS= Factor de reducción de la sensibilidad<br />
Fungicidas id CI 50 FRS<br />
Tebuconazol 4.65 14.09<br />
Ciproconazol 614 6.14 483 4.83<br />
Epoxiconazol 1.43 7.15<br />
Metconazol 589 5.89 4.39<br />
Piraclostrobina 0.20 6.66<br />
Proticonazol 0.18 1.63<br />
Piraclostrobina +<br />
epoxiconazol<br />
0.001 0.01
15 Importancia practica de la CI 50<br />
- Medir la reducción de la sensibilidad;<br />
d<br />
- Identificar por que de la falla de control;<br />
- Importante en dos momentos:<br />
cuando el hongo era sensible y en el futuro para saber<br />
si hubo reducción;<br />
- Prueba científica que ocurrió reducción/pérdida.
Ej. Con Corynespora cassiicola,<br />
aislados ild de soja
Introducción<br />
• Mancha-anillada causando epidemias en el<br />
Centro-Oeste<br />
• Se verificó en las últimas campañas<br />
falla<br />
de control químico
Medidas de Control<br />
• Aplicación de <strong>fungicida</strong>s en órganos<br />
aéreos;<br />
• Carbendazim principal <strong>fungicida</strong><br />
usado;
Identificación<br />
ió de las muestras:<br />
• 43 total;<br />
• Colección de aislamientos
SENSIBILIDAD MICELIANA DE<br />
Corynespora cassiicola, A TRIAZOLES<br />
Y BENZIMIDAZOL
Avaliação<br />
0 mg/L 0,01 mg/L 0,1 mg/L 1 mg/L<br />
10 mg/L 20 mg/L 40 mg/L
CI50 <strong>del</strong> crescimiento miceliano de <strong>fungicida</strong>s para<br />
Corynespora cassiicola<br />
Aislados (CI50( mg/L)<br />
Fungicida 01/MG 05/MS 19/MS 21/MS 35/RO Média<br />
Carbendazim B 0,20 c A >40 a A >40 a A >40 a B 0,26 c > 24,09<br />
Ciproconazol A 15,26 a A 16,65 b B 9,21 b B 12,23 b A 20,32 a 14,73<br />
Epoxiconazol A 2,91 b A 2,74 c A 2,2525 c A 2,64 c A 2,60 b 263 2,63<br />
Flutriafol A 1,89 b A 0,77 d A 1,26 c A 1,34 c A 2,18 b 1,49<br />
Tebuconazol A 2,21 b A 2,80 c A 2,22 c A 1,89 c A 2,07 c 2,35<br />
Promedia 4,49 > 12,59 > 10,99 > 11,62 5,48<br />
Promedio 2 experimentos
Factor de reducción de la sensibilidad (FRS) a<br />
<strong>fungicida</strong>s triazoles y benzimidazol<br />
Aislados (FRS)<br />
Fungicidas 01/MG 05/MS 19/MS 21/MS 35/RO<br />
Carbendazim 1,00 > 200,00 > 200,00 > 200,00 1,30<br />
Ciproconazol 1,65 1,80 1,00 1,33 2,21<br />
Epoxiconazol 1,29 1,22 1,00 1,17 1,16<br />
Flutriafol l 245 2,45 100 1,00 164 1,64 174 1,74 283 2,83<br />
Tebuconazol 1,17 1,48 1,17 1,00 1,10<br />
Promeida 2 experimentos
Resultados y conclusiones<br />
• 3 aislamientos/MS: pérdida de la<br />
sensibilidad d al carbendazim<br />
• Aislamientos sensibles = Alteración de la<br />
sensibilidad <br />
• Valores de la CI50 de referencia elevados<br />
• Epoxiconazol y tebuconazol – resultados<br />
semejantes
120<br />
100<br />
80<br />
60<br />
100<br />
Aislamiento 19/MS<br />
y = -0,76Ln(x) + 87,74<br />
R² = 0,82<br />
90,92 89,21 88,39 87,19 86,21 82,97<br />
Cresci imento micelian<br />
no (%)<br />
40<br />
20<br />
0<br />
120<br />
100<br />
80<br />
60<br />
40<br />
20<br />
0<br />
0 0,01 0,1 1 10 20 40<br />
100 100<br />
Concentração (mg/L)<br />
Aislamiento 35/RO<br />
52,23<br />
15,20<br />
y = -10,82Ln(x) + 35,32<br />
R² = 0,87<br />
7,34 7,34 7,34<br />
0 001 0,01 01 0,1 1 10 20 40<br />
Concentração (mg/L)<br />
Figura 1: Crescimento miceliano de dos isolados de C. cassiicola para el <strong>fungicida</strong> carbendazim
Carbendazim<br />
• 05/MS<br />
•19/MS<br />
• 21/MS<br />
• 01/MG<br />
• 35/RO
Flutriafol<br />
Epoxiconazol
Ciproconazol<br />
Tebuconazol
Discusión<br />
• Reducción de la sensibilidad d para<br />
estrobilurinas;<br />
• Pérdida de la sensibilidad para estrobilurinas<br />
no fue verificada<br />
• Azoxistrobina mayores valores de CI50<br />
• Picoxistrobina - Aislado 35/RO + sensible<br />
• Piraclostrobina – mejor resultados
Consideraciones finales…amenazas…<br />
Hechos:<br />
-La falla de control ha ocurrido y fue demostrada;<br />
- Necesidad de actualización de datos sobre falla de<br />
control; cuales son los casos (Cultivos x hongos);<br />
- Quién debería reunir, divulgar datos actualizados
• Consideraciones finales…amenazas…<br />
- Las recomendaciones de investigación son claras<br />
- Quién debe ser alertado<br />
- Ya fue realizada en tiempo oportuno la<br />
determinación de la CI 50 de referencia ;<br />
50<br />
- La investigación se encuentra atrasada<br />
Método bombero !
Consideraciones finales….<br />
- Cuando los IDMs IQes no fueren mas eficientes,<br />
que es lo que hay que hacer<br />
- Probabilidad de nuevos ingredientes activos a corto plazo<br />
- Quién debe monitorear la sensibilidad en Cono Sur<br />
- Cuales las prioridades de investigación en este tema<br />
- ya fueran elegidas/priorizadas<br />
- El soporte y apoyo financiero han sido suficientes<br />
- quién debería apoyar y financiar Cuál sería el rol de<br />
las empresas
Consideraciones finales….<br />
- Cuál es la realidad presente:<br />
- Entonces, cómo manejar correctamente el control :<br />
- roya hoja trigo;<br />
- manchas foliares trigo;<br />
- oídio y mancha en red cebada;<br />
-roya soja;
Consideraciones finales….<br />
- el futuro:<br />
- Reporte de casos sospechosos de falla de control<br />
- roya de la hoja de trigo <br />
- Mancha ojo de rana <br />
-antracnosis soja<br />
- mancha-amarilla trigo<br />
- oídio trigo<br />
- mancha-anillada soja
Agradecimientos:<br />
Colaboradores:<br />
- Bayer, Basf, Melenia, Nortox, Syngenta;<br />
- PPGAgro-FAMV-UPF<br />
- A uds aquí presentes.
Referencias<br />
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http://www.conab.gov.br/OlalaCMS/uploads/arquivos/11_01_06_08_41_5<br />
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DATE, H.; KATOAKA, E.; TANINA, K.; SASAKI, S.; INOUE, K.; NASU, H.;<br />
KASUAYAMA, S. Sensitivity of Corynespora cassiicola, causal agent of<br />
Corynespora target spot of tomato, to thiophanate-methyl and<br />
diethofencarb. Japan Journal of Phythopayhology. v. 70, p. 7-9, 2004a.
Reis, E.M.; Reis, A.C.; Carmona, M.A. Manual de <strong>fungicida</strong>s.<br />
UPF Ed., Passo Fundo, 6a. Ed..p.181-197.2010
Dudas …. preguntas… sugestiones…
Buen seminario a todos…