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TRABAJO PRACTICO - Universidad Nacional de Quilmes

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE QUILMES<br />

Departamento <strong>de</strong> Ciencia y Tecnología<br />

Bioprocesos II 2005<br />

Segundo semestre<br />

Esterilización en batch.<br />

Este es el método más común para esterilización <strong>de</strong> medios <strong>de</strong> cultivo. Un<br />

reactor con su medio <strong>de</strong> cultivo se pue<strong>de</strong> calentar <strong>de</strong> dos formas distintas, por la<br />

inyección directa <strong>de</strong> vapor o por calentamiento indirecto a través <strong>de</strong> camisa o<br />

serpentín. En todos los casos <strong>de</strong>be calcularse apropiadamente el tiempo <strong>de</strong> retención<br />

a la temperatura <strong>de</strong> trabajo.<br />

Para calcular ese valor hay que tener en cuenta el volumen a esterilizar, la carga<br />

microbiana inicial y el valor final <strong>de</strong> la concentración <strong>de</strong> microorganismos <strong>de</strong>seado.<br />

La inactivación térmica <strong>de</strong> los microorganismos sigue una cinética <strong>de</strong>l tipo<br />

No<br />

ln = kt en la que N 0 y N f son respectivamente el número total <strong>de</strong><br />

X<br />

f<br />

microorganismos al comienzo y al final <strong>de</strong>l ciclo <strong>de</strong> esterilización. N f solo pue<strong>de</strong><br />

alcanzar el valor <strong>de</strong> cero a tiempo infinito por lo que no pue<strong>de</strong> asegurarse nunca la<br />

completa esterilidad <strong>de</strong>l medio <strong>de</strong> cultivo. Mientras el valor <strong>de</strong> N se mantiene por<br />

encima <strong>de</strong> la unidad, el mismo posee significado real, cuando el mismo disminuyo y<br />

toma valores <strong>de</strong>cimales, su significado es estadístico. Un valor <strong>de</strong> N f <strong>de</strong> 0,01 implica<br />

que es esperable que 1 <strong>de</strong> cada 100 ciclos <strong>de</strong> esterilización fallen.<br />

El valor <strong>de</strong>l tiempo <strong>de</strong> calentamiento se calcula <strong>de</strong>spejando el valor <strong>de</strong> t <strong>de</strong> la<br />

ecuación anterior.<br />

El valor <strong>de</strong> k <strong>de</strong>pen<strong>de</strong> <strong>de</strong>l medio y, por supuesto, <strong>de</strong>l microorganismo. Su<br />

comportamiento en relaciona con la temperatura, al igual que otras constantes<br />

cinéticas, es a través <strong>de</strong> la ecuación <strong>de</strong> Arrhenius<br />

k = A.<br />

e<br />

don<strong>de</strong> A es una constante <strong>de</strong> proporcionalidad y no cambia en forma notoria con la<br />

temperatura; R, la ecuación general <strong>de</strong> los gases, T la temperatura absoluta y ε es la<br />

energía <strong>de</strong> activación aparente para la <strong>de</strong>strucción <strong>de</strong> los esporos. Si se escribe la<br />

− ε RT

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